全 文 ：收稿日期: 2006 - 04 - 17
作者简介:杜宇琼 ( 1971 - ) ,女,江苏江都人,讲师,硕士研究生,从事温
病学的教学科研工作。
3. 3 对乳腺组织病理组织学的影响 光镜下观察,
正常对照组腺细胞无增生性病变, 腺泡少, 导管无分
泌,管腔无扩张; 模型对照组小叶明显增多、增大,腺泡
数增多,细胞增生,层数增多,腺泡腔和腺导管腔扩张,
脂肪组织增生;西黄丸组小叶缩小,腺泡数减少, 腺泡
腔和腺导管腔扩张不明显, 分泌物减少, 脂肪组织增
生;他莫昔芬组腺泡少、导管无分泌, 管腔无明显扩张。
结果表明,西黄丸对乳腺组织增生病理改变有明显的
改善作用。结果见表 3。
表 3 西黄丸对乳腺增生大鼠乳腺小叶 腺泡
细胞增生层数和导管扩张的影响 ( n = 10, €x ? s )
组 别 剂量
( /kg)
小叶数
(个 /切面 )
腺泡数
(个 /切面 )
细胞增生层数
(层 /切面 )
乳腺导管
扩张情况
正常对照组 10mL 8. 4 ? 2. 4* 49. 5 ? 18. 9* * 2. 62? 1. 35* 无
模型对照组 10mL 13. 7 ? 2. 83 14. 2 ? 98. 9 4. 04? 2. 43 中度
西黄丸 组 2g 10. 3 ? 3. 1* 254. 1 ? 28. 4* 3. 17? 2. 33* 轻度
他莫昔芬组 12mg 7. 9 ? 1. 8* 54. 8 ? 19. 4* * 2. 46? 1. 38* 无
由表 3可见, 乳腺增生模型动物乳腺小叶数、腺泡
数、细胞增生层数和乳腺导管扩张程度均明显高于正
常对照组,西黄丸能使上述各项指标有不同程度的降
低。
4 讨 论
乳腺增生病为一种妇女常见疾病, 其中 2% - 4%
可发生囊性增生引发癌变 [6], 病因仍不很清楚, 现代医
学研究表明,乳腺增生主要是与性激素失调有关,可能
是孕酮与雌激素的比例失衡;孕酮分泌减少,雌激素相
对增多,长期雌激素刺激引起乳腺增生肿大。本文以
苯甲酸雌二醇制造动物模型, 观察了西黄丸对大鼠乳
腺增生病的防治作用,结果表明:西黄丸能抑制雌激素
引起的乳房肿大;能降低乳腺增生大鼠血清雌二醇含
量,升高孕酮含量,调节血液中雌孕激素的相对平衡;
能降低乳腺增生大鼠乳腺小叶数、腺泡数、细胞增生层
数和乳腺导管扩张程度,其研究结果表明,西黄丸对实
验性大鼠乳腺增生具有较好的防治作用,为阐明西黄
丸治疗乳腺增生症作用提供了实验依据,其治疗乳腺
增生症的作用机制正在进一步研究。
参考文献
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版社, 1979: 900 - 901
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水红花子对免疫性肝损伤小鼠肝功能的影响
杜宇琼,赵 晖,高连印,黄静娟,刘树军
(首都医科大学中医药学院,北京 100069)
摘 要: 目的:观察人用口服剂量 40倍的水红花子 20g /( kg# d)对免疫性肝损伤小鼠的影响。方法:观察水红花子
20g /( kg# d)对 BCG /LPS致免疫性肝损伤模型小鼠血清丙氨酸氨基转移酶 ( ALT )、天门冬氨酸氨基转移酶 ( AST )活性,
肝组织超氧化物歧化酶 ( SOD )、丙二醛 (MDA )含量的影响。结果: 水红花子 20g /( kg# d)肝脏病理损伤明显, 血清 ALT、
AST均显著升高 ( P < 0. 01), 肝组织 SOD值明显下降 ( P < 0. 05) , MDA明显升高 ( P < 0. 05)。结论: 人用口服剂量 40
倍的水红花子 20g /( kg# d)可提高免疫性肝损伤小鼠的肝脏损伤程度, 具有肝毒性。其肝损伤的作用环节可能与诱导
肝脏自由基的生成, 降低自由基清除酶的功能, 破坏自由基代谢的动态平衡有关。
关键词: 水红花子;免疫性肝损伤;实验研究
中图分类号: R285. 5 文献标识码: B 文章编号: 1000 - 1719( 2007) 01 -0116 - 02
Expermi enta l Study on the E ffects of Fructus P olygoniO rentalis
on BCG /LPS - inducedM ice L iver Injury
DU Yu - q iong, ZHAO Hui, GAO Lian - y in, HUANG J ing - juan, LIU Shu - jun
(TCM Co llege o f Cap ita lMed ical University, Beijing 100069, China)
Abstrac t: Ob jective : To explore the effec t of F ructus Po lygoni O renta lis on immune live r injury in m ice induced by BCG /
LPS. M ethod s: F ructus Po lygoni O ren ta lis w as g iven to the m ice model o f immune liver in jury. The sam ples of liver and b lood
w erem easured. The dam age o f live r tissues w as obse rved by lightm icro scope. Results: Compared w ith them ode l g roup, the F ruc-
tus Po lygoniO renta lis could obv iously increase the se rum ALT and AST ac tiv ity and dec rease the SOD ac tivity. Conc lus ion: L iver
dam agew as exace rbated at F ruc tus Po lygoni O ren ta lis treated group at 20g /( kg# d) dose. Them echan ism m ay be assoc iated w ith
its ab ility of decrea sing the ac tiv ity of c learance enzyme o f free radica.l
K eywords: fructus po lygoni o renta lis; immune live r in jury; expe rim ental study
#116# 辽宁中医杂志 2007年第 34卷第 1期
DOI：10.13192/j.ljtcm.2007.01.120.duyq.080
水红花子为蓼科 ( Po lygonaceae)蓼属 ( Po lygonu-
murn)桃叶蓼组植物红蓼 Po lygonumorientale L的干燥
成熟果实。具有散血消癥、消积止痛的功能 [1 ]。现代
常用于肝硬化 [2 - 3]、乙型肝炎 [ 4]、丙型肝炎 [5]的治疗。
由于水红花子在本草著作中均认为是无毒之品, 加之
目前对水红花子的药理作用及安全性尚末进行系统研
究,因此临床上对药物用量没有严格要求,特别是近年
来一些自拟方中的水红花子用量逐渐加大,用药时间
也较长。所以对使用大剂量水红花子的安全性特别对
肝脏的影响进行研究具有重要意义。本次实验利用免
疫性肝损伤小鼠模型,观察人用口服剂量 40倍的水红
花子对肝脏功能的影响,为临床安全用药提供参考。
1 材料与方法
1. 1 动物
ICR雄性小鼠,清洁级, 体重 18~ 22g,由首都医科
大学动物中心提供。合格证号: SCXkc (京 ) 72000 -
0012。
1. 2 药品与试剂
水红花子为蓼科 ( Po lygonaceae)的干燥成熟果实,
购于同仁堂药业公司,实验前制备成 100%水煎液; 卡
介苗 ( BCG )冻干粉,购自北京生物制品研究所 (批号:
20050513) ;细菌脂多糖 ( LPS ), S igma公司产品; 超氧
化物歧化酶 ( SOD )、丙二醛 (MDA )蛋白质测定试剂盒
(考马斯亮兰法 )测定试剂盒购自南京建成生物工程
研究所;丙氨酸氨基转移酶 ( ALT)测定试剂盒、天门冬
氨酸氨基转移酶 ( AST)测定试剂盒,购自中生北控生
物科技股份有限公司。
1. 3 仪器和设备
752N型分光光度计,上海精密科学仪器有限公司
生产; TCL - 16G型高速台式离心机, 上海医用分析仪
器厂生产; AEG - 220电子分析天平, 日本 Shimadzu公
司; DY89 - 1型电动玻璃匀浆机, 宁波新芝生物科技
股份有限公司; AT - 738半自动生化检测仪, 上海安泰
分析仪器有限公司。
1. 4 方法
1. 4. 1 动物模型制备 参照文献方法 [6 ],根据预实验
的结果,每只小鼠尾静脉注射 BCG 2. 96@ 107个活菌,
10天后再尾静脉注射 LPS 7Lg /只攻击, 制作免疫性肝
损伤模型。
1. 4. 2 分组及给药方法 动物分为 3组: 正常对照
组、模型对照组、水红花子组。正常对照组及模型组各
15只, 每日灌服等容量的蒸馏水。水红花子组
20g /( kg# d) ,相当于人用口服剂量 40倍, 于注射
BCG后第 2天灌胃给药。
1. 4. 3 取材及检测方法 模型组及水红花子组小鼠
于尾静脉注射 BCG 1O天后再尾静脉注射 LPS, 4h后 3
组小鼠摘眼球取血, 血样放置 4e 冰箱中 2h, 离心
10m in( 4000r /m in) ,分离血清严格按照试剂说明书的
要求检测 AST、ALT活性。
左叶肝组织制备 10%肝匀浆,严格按照试剂说明
书的要求检测肝组织 SOD、MDA及蛋白质的含量。
1. 4. 4 统计方法 采用 SPSS12. 0统计软件, 对所有
实验数据进行方差分析。
2 实验结果
2. 1 水红花子对免疫性肝损伤小鼠血清 ALT AST的
影响
表 1 水红花子对免疫肝损伤小鼠血清
ALT AST的影响 ( €x ? s )
组别 动物数
(只 )
ALT
( u /L)
AST
( u /L)
正常组 9 36. 11 ? 5. 71 69. 25 ? 16. 75
模型组 8 596. 38 ? 83. 09$ 707. 13 ? 26. 88$
给药组 8 656. 13 ? 72. 11$ 788. 25 ? 86. 15$*
注:与正常组比较, $P < 0. 05;与模型组比较, * P < 0. 05。
结果见表 ,l研究结果表明模型组和水红花子组小
鼠血清 ALT、AST均显著升高,与正常对照组比较有非
常显著的差异 ( P < 0. 01) ; 水红花子组 20g /( kg# d)
和模型组相比 ALT有升高趋势, AST明显升高 ( P <
0. 05)。
2. 2 水红花子对免疫性肝损伤小鼠肝组织
MDA SOD的影响
结果见表 2, 结果显示与正常组相比模型组小鼠
肝组织 SOD值明显下降 ( P < 0. 05 ), MDA有升高趋
势;水红花子组小鼠肝组织 SOD值明显下降 ( P < 0.
05) , MDA明显升高 ( P < 0. 05); 水红花子组和模型
组小鼠肝组织 SOD、MDA没有显著性差异。
表 2 水红花子对免疫肝损伤小鼠血浆 MDA SOD的影响 ( €x ? s )
组别 动物数
(只 )
MDA
( Lmo l /g)
SOD
(Lm ol /g)
正常组 8 8. 39 ? 1. 29 982. 32 ? 65. 56
模型组 8 9. 41 ? 1. 19$ 894. 27 ? 22. 91$
给药组 8 9. 60 ? 0. 46$ 935. 07 ? 31. 54$*
注:与正常组比较, $P < 0. 05。
3 讨 论
水红花子是我国传统药物之一, 1977年版5中国
药典6开始收录 [7]。因其在本草著作中认为无毒, 故在
临床上对水红花子的使用剂量问题没有引起重视, 特
别是在一些自拟方中其用量远远超过5中国药典6的
剂量范围,由于肝脏疾患病人用药时间长,对其用药安
全性进行研究具有非常重要的意义。因受试药物的浓
度限制, 一次给药无法测出 LD50, 本次实验利用
BCG + LPS联合诱导免疫性肝损伤的动物模型, 观察人
用口服剂量 40倍的水红花子 20g /( kg# d)对免疫性
肝损伤小鼠肝脏的影响, 为临床安全用药提供参考。
实验结果显示水红花子 20g /( kg# d)明显提高模型小
鼠血清 AST( P < 0. 05), ALT有升高趋势, 提示人用
口服剂量 40倍的水红花子具有肝毒性,在临床上使用
中应引起重视。
自由基有极强的氧化能力, 通过氧化反应来攻击
细胞膜、线粒体膜,与膜中不饱和脂肪酸反应造成脂质
过氧化引起组织线粒体、蛋白质、DNA、RNA等广泛损
伤。MDA作为氧自由基与生物膜不饱和脂肪酸发生
脂质过氧化的代谢产物,其含量的变化间接反映了组
织中氧自由基含量变化, 因此可通过测定 MDA含量
来评价组织中氧自由基的水平和脂质过氧化的强弱。
SOD为机体主要的抗氧化酶之一, 可催化超氧自由基
发生歧化反应, 生成过氧化氢和氧。水红花子组
20g /( kg# d)小鼠肝组织 SOD值明显下降 ( P < 0.
05) , MDA明显升高 ( P < 0. 05)。表明人用口服剂量
40倍的水红花子对肝脏的毒性影响作用环节之一为
诱导肝脏自由基的生成,同时降低自由基清除酶的功
能,破坏自由基代谢的动态平衡, 启动自由基连锁反
应,使肝脏损伤程度加重。
参考文献
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#117# 辽宁中医杂志 2007年第 34卷第 1期