全 文 ：收稿日期:2016 － 05 － 27
基金项目:广东省中医药管理局 －五指毛桃质量标准规范化的研究 (20152144)。
作者简介:叶碧颜，女，汉族，主管中药师。
正交试验优选五指毛桃中补骨脂素的提取工艺
叶碧颜1 彭小敏2 邓广海2
1. 广州市天河区中医医院，广东 广州 510665;2. 广东省中医院，广东 广州 518021
【摘 要】 目的:考察五指毛桃中补骨脂素的最佳提取方式。方法:采用正交试验优选提取条件，应用 Kromasil 100 －5 －
C18 色谱柱 (250 mm ×4. 6mm，5μm)，流动相为甲醇 －水 (55∶45)，流速为 1. 0mL/min，检测波长为 246nm，柱温为 30℃。结果:
采用 50%甲醇的超声处理 40min，补骨脂素的溶出度最大;补骨脂素的线性范围为 83. 39 ～1334. 18μg (r =0. 9997)，样品的加样回
收率为 103. 36%，ＲSD为 2. 17%。结论:本方法简便快速，回收率、重复性良好，可用于五指毛桃中补骨脂素的提取与检测。
【关键词】 五指毛桃;补骨脂素;正交试验;高效液相色谱法
【中图分类号】Ｒ284 【文献标志码】A 【文章编号】1007 － 8517 (2016)16 － 0027 － 02
In the Different Extracuion Methods on Five Fingers Wild Peach Scurfpea Fruit Contains Test Ｒesearch
YE Biyan1 PENG Xiaomin2 DENG Guanghai2
1． Guangzhou Tianhe District Hospital of Traditiond Chinese Medicine，Guangzhou 510665，China;
2． Thadituonal Chinese Medicine Hospital of Guangdong Province，Guangzhou 518021，China
Abstract:Objective To investigate the best extraction method s of Psoralen in Ｒadix Fici simplicissimae. MethodsThe Ｒadix Fici Hir-
tae by Soxhlet extraction and heat reflux extraction and ultrasonic treatment in three ways to carry on the inspection，at the same time，the
effects of the optimal extraction time，the best extraction solvent. Using 100 －5 －C18 Kromasil(250 mm x 4. 6mm，5 m)chromatography col-
umn，the mobile phase was methanol water (55∶45)，the flow rate was 1 mL/min，the detection wavelength was 246nm，the column tempera-
ture was 30. Ｒesultusing 50% methanol ultrasonic treatment for 40 minutes，the maximum dissolution of psoralen. The calibration range of
psoralen was 83. 39 ～1334. 18μg(r =0. 9997)，the recovery rate of sample was 103. 36%，ＲSD was 2. 17%。Conclusion This method is sim-
ple and rapid recovery，good reproducibility，can be used to analyze the content of Psoralen in Ｒadix Fici simplicissimae.
Key words:Ｒadix Fici Hirtae;Psoralen;Extraction;HPLC
五指毛桃又名土北芪、五指牛奶、南芪，为
桑科植物粗叶榕 (Ficus hirta Vahl. )的干燥根。
广泛分布于广东、广西、云南等地，具有舒筋通
络、益肺止咳、健脾利湿的功效［1］，是岭南常用
药之一。长期以来，学者对五指毛桃的药用历史
沿革、物种演化、生态环境、药理活性、化学成
分及质量标准的制定等都进行过研究，但研究不
够深入细致［2 － 4］，《广东省中药材标准》对五指毛
桃的质量控制仅限于性状鉴别和 TLC 鉴别。为进
一步完善五指毛桃的基础研究，实验对五指毛桃
中补骨素的提取方式进行优化，采用正交试验优
选出最佳的提取条件，为五指毛桃的开发利用提
供了一定的实验依据。
1 仪器和材料
1. 1 仪器 Agilent1260 高效液相色谱 (配备自动
进样仪);BS110S 万分之一天平 (赛多利斯);
BS200S － WEI 千分之一天平 (赛多利斯);XP26
百万分之一天平 (METTlEＲ TOlEDO);HWS28 型
恒温水浴锅 (上海一恒科技有限公司)。
1. 2 材料 补骨脂素对照品 (批号:110739 －
200511，中国药品生物制品检定所 )。五指毛桃由
广东河源金源绿色生命有限公司提供。甲醇为色
谱纯，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 检测波长的选择 取对照品溶液经过 Agilent
1260 DAD 检测器紫外全波长扫描，补骨脂素在
246nm吸收比较强，作为检测波长。
2. 2 色谱条件 色谱柱:Kromasil 100 － 5 － C18
(250mm ×4. 6mm，5μm);流动相:甲醇 －水 (55
∶45);流速:1. 0 mL /min;检测波长:246nm;柱
温:30℃，进样量:10μL。在此色谱条件下补骨
脂素及五指毛桃样品的色谱图见图 1 ～ 2 。
·72·中国民族民间医药 2016年 8月第 25卷第 16期 Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy，2016，Vol. 25，No. 16
2. 3 对照品溶液的制备 取补骨脂素对照品适量，
精密称定，分别加甲醇制成 250μg /mL的溶液，即得。
2. 4 线性关系考察分别吸取补骨脂素对照品溶液
0. 5、1、2、4、8、12、165 脂，按上述色谱条件进
行测定，进样，记录对照品峰面积，X 为横坐标，
色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得补骨脂素
标准曲线:A =0. 6867x + 1. 181，r =0. 9997。
2. 5 精密度实验 精密吸取同一样品溶液，按上
述色谱条件，连续进样 6 次，以补骨脂素峰面积积
分值计算，峰面积的 ＲSD 依次为 0. 84%，表明该
方法精密度良好。
2. 6 重复性实验 取同一批样品 6 份，分别按供
试品制备方法制备 6 份样品溶液，以峰面积积分值
计算，补骨脂素峰面积的 ＲSD 依次为 2. 28%，表
明该方法重复性良好。
2. 7 稳定性实验 精密吸取同一样品溶液，按上
述色谱条件，在 12h 内，分别于 1、2、4、8、12h
测定，测得补骨脂素峰面积的 ＲSD分别为 2. 34%，
表明样品溶液在 12h内稳定。
2. 8 回收率实验 精密称取样品 6 份，每份约
0. 25g，依次精密加入补骨脂素对照品溶液
(121ug /mL)1mL 按样品制备方法制备样品溶液，
按上述色谱条件进行测定，计算回收率。补骨脂
素平均加样回收率分别为 103. 36% (ＲSD =
2. 17%)，表明本方法准确可靠。
3 正交试验优化提取工艺条件
在单因素试验的基础上，为了获得最佳工艺条
件，利用正交试验法，以提取方式 (A)、提取时间
(B)及提取溶剂 (C)作为 3个考察因素，选取 3个
水平进行试验。采用 L9 (3
4)正交表进行正交试验设
计，来确定超声提取的最佳提取条件。见表 1、2。
表 1 五指毛桃提取方式考察正交试验因素水平表
水平
因素
A提取方式 B提取时间 C提取溶剂
1 加热回流 30 50%甲醇
2 超声处理 40 75%甲醇
3 索氏提取 60 甲醇
表 2 L9(3
4)正交试验设计及结果
试验号 A B C D空白 补骨脂素的
含量 /mg /g
1 1 1 1 － 0. 9968
2 1 2 2 － 0. 8115
3 1 3 3 － 0. 6357
4 2 1 2 － 0. 7574
5 2 2 3 － 0. 7171
6 2 3 1 － 1. 1980
7 3 1 3 － 0. 3329
8 3 2 1 － 1. 0728
9 3 3 2 － 0. 5953
k1 2. 4440 2. 0871 3. 2676
k2 2. 6725 2. 6014 2. 1642
k3 2. 0010 2. 4290 1. 6857
K1 0. 8147 0. 6957 1. 0892
K2 0. 8908 0. 8671 0. 7214
K3 0. 6670 0. 8097 0. 5619
Ｒ 0. 2238 0. 1714 0. 5273
由表 2 的极差分析结果可以看出，ＲC ＞ ＲA ＞
ＲB，3 个因素对五指毛桃中的补骨脂素的影响大小
依次为:提取溶剂 ＞提取方式 ＞提取时间。在试
验设计范围内，优化得到五指毛桃的最佳提取工
艺为 A2B2C1，即 50%甲醇，超声处理 40min，五
指毛桃中补骨脂素溶出度最大。
4 讨论
归纳前期化学成分所采用的提取方法［5］，采
用正交试验对五指毛桃中补骨脂素的提取方式进
行研究，并采用 HPLC法测定其含量，为完善五指
毛桃提的质量标准提供实验依据。本方法简便快
速，回收率、重复性良好，可用于五指毛桃中补
骨脂素的提取与检测。
参考文献
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(编辑:陶希睿)
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