全 文 ：物碱的碱性基团 ,使之不会与固定相表面的硅醇基
作用 ,可使不同结构 、不同碱性的生物碱类成分均能
在较短的保留时间内得到很好的分离 ,色谱有重现
性 ,也不拖尾。
经加样回收试验及精密度试验 , 认为该 HPLC
法不经分离 ,直接测定伪麻黄碱 、麻黄碱的溶出率 ,
方法简单 ,结果可靠 。
本实验在预试时 ,参考文献[ 4] 用流动相提取 ,
测得麻黄药材中伪麻黄碱含量为 0.17%、麻黄碱含
量为0.55%;后改用50%的甲醇水提取[ 5] ,测得麻黄
药材中伪麻黄碱含量为 0.31%、麻黄碱含量为
0.79%。说明本实验中采用的提取溶剂效果较理
想。同时提醒我们在测定药材和复方中麻黄碱和伪
麻黄碱的含量时应充分注意提取溶剂对两者提取率
的影响 。
参考文献:
[ 1] 　赖天松.临床方剂册[ M] .北京:人民卫生出版社 ,
1992.28.
[ 2] 　邹莉波 ,崔亮 , 邱峰 , 等.五虎汤止咳平喘作用的实验研
究[ J] .中国实验方剂学杂志 , 2002 , 8(5):38.
[ 3] 　崔亮 , 邱峰 , 鹿野美弘 , 等.大鼠灌胃“五虎汤”后尿中挥
发性成分的分析[ J] .中国中药杂志 , 2003 , 28(2):147-
149.
[ 4] 　中国医学科学院 , 中国协和医科大学药物研究所 , 日本
大正制药株式会社.常用中草药高效液相色谱分析
[ M] .北京:科学出版社 , 1999.79-83.
[ 5] 　陈发奎.常用中草药有效成分含量测定[ M] .北京:人民
卫生出版社 , 1997.151-156.
收稿日期:2004-09-21
通讯作者:钟兆健 , Tel:13922137865 , E-mai l:fuhaiwu@163.com
五指毛桃质量标准的研究
钟兆健 ,宋粉云 ,李书渊 ,毋福海 ,陈翠玲
(广东药学院 ,广东 广州　510224)
　　摘要:目的:研究五指毛桃的质量控制方法。方法:采用薄层色谱法对五指毛桃中的补骨脂素进行定性鉴别 , 并用反相高
效液相色谱法测定补骨脂素含量。结果:补骨脂素在(0.0772 ～ 0.386)μg·mL-1之间与峰面积线性关系良好(r=0.99997), 平均
回收率为99.2%, RSD=2.15%。方法精密度(RSD)为2.50%(n=6)。结论:所用方法简便 、准确 、可靠 , 能有效地控制五指毛桃
的质量。
关键词:五指毛桃;补骨脂素;薄层色谱法;反相高效液相色谱法
中图分类号:R284.1　　文献标识码:B　　文章编号:1005-9903(2005)05-0012-03
Study on Quality Standard of Radix Fici Simplicissimatis
ZHONG Zhao-jian , SONGFen-Yun , LI Shu-yuan ,WU Fu-Hai , CHEN Cui-ling
(Guangdong College of Pharmacy , Guangdong ,Guangzhou 510224 , China)
Abstract:Objective:To study the quality standsard of Radix Fici simplicissimatis.Methods:Psoralen in Radix Fici
simplicissimatis was identified by TLC.A RP-HPLC method was established to determine the content of psoralen in Radix
Fici simplicissimatis.Results:The concentration of psoralen is linearly related to its peak area in the range of 7.44 ～
38.60μg·mL-1(r=0.99997), and the average recovery was 99.2%with RSD=2.15%.Precision of the method was
2.50%(RSD , n=6).Conclusion:The method is simple , accurate and reliable for quality control of this crude drug.
Key words:Radix Fici simplicissimatis;psoralen;TLC;A RP-HPLC
　　五指毛桃[ 1] 为桑科植物粗叶榕 Ficus hirta Vahl.
的干燥根 。本品为常用中药 , 具健脾补肺 ,行气利
湿 ,舒筋活络之功效 。主治脾虚浮肿 ,食少无力 ,肺
痨咳嗽 ,盗汗 ,带下 ,产后无乳 ,风湿痹痛 ,水肿 ,肝硬
化腹水 ,肝炎 ,跌打损伤 。由于五指毛桃经济价值较
高 ,目前广东河源等地已有大面积人工栽培 。为评
价五指毛桃的内在质量 ,本文建立了五指毛桃中补
骨脂素的薄层色谱法鉴别和高效液相色谱含量测定
方法 ,为五指毛桃的质量控制提供了实验方法 。
·12·
第 11卷第 5 期
2005年 10 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol.11 , No.5
Oct., 2005
DOI :10.13422/j.cnki.syf jx.2005.05.006
1　仪器和药品
1.1　仪器　LC-10AT 型高效液相色谱仪(日本岛
津),SPD-10AT型紫外 —可见检测器(日本岛津),大
连依利特色谱工作站(大连物理化学研究所)。
1.2　药材来源及处理　五指毛桃(批号 1 ,广州中医
药大学;批号 2 ,购自广州清平药材市场(新鲜):批
号3 ,购自广州市本草药业),经广东药学院生药教
研室房志坚副教授鉴定为真品 。将其粉碎 ,于 60℃
下干燥4h ,置干燥器内备用。定量方法学考察采用
广州中医药大学的样品。
1.3　药品与试剂　补骨脂素对照品(中国药品生物
制品检定所 ,110739-200309),甲醇为色谱纯 ,水为双
蒸水 。其余所用试剂均为分析纯。
2　定性鉴别
2.1　溶液的制备 　取本品粉末 5g , 加醋酸乙酯
50mL ,超声 25min ,滤过 ,滤液浓缩至干 ,加醋酸乙酯
2mL使溶解 ,作为供试品溶液 。另取五指毛桃对照
药材 5g ,同法制成对照药材溶液 。另取补骨脂素对
照品 ,加醋酸乙酯溶解 ,制成每 1mL 含 2mg 的溶液 ,
作为对照品溶液 。
2.2　薄层层析　照薄层色谱法(中国药典 2000 年
版一部附录Ⅵ B)试验 ,吸取上述三种溶液各 3μL ,分
别点于同一硅胶 G薄层板上 ,以正己烷-醋酸乙酯(8
∶2)为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,置紫外光灯(365nm)
下检视。供试品色谱中 ,在与对照品色谱相应的位
置上 ,显相同颜色的荧光斑点。在与对照药材色谱
相应的位置上 ,显相同颜色的荧光主斑点。
3　含量测定
3.1　色谱条件　色谱柱为 DramonsidTM-C18柱(250mm
×4.6mm ,5μm ,迪马公司),流动相为甲醇-1%乙酸
(60:40),流速:0.8mL·min-1 ;检测波长:245nm;柱
温:室温。
3.2　样品液制备
3.2.1　对照品溶液的制备　精密称取补骨脂素对
照品 19.3mg ,置 50 mL量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至
刻度 ,作为对照品贮备液(浓度为 386μg·mL-1)。分
别吸取一定量的补骨脂素对照品贮备液 ,加甲醇稀
释成浓度为 7.72 、11.58 、15.44 、23.16 、30.88 、38.60
μg·mL-1的溶液。
3.2.2　供试品溶液的制备　取本品粗粉约 0.25g ,
精密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,精密加甲醇 50mL ,精密
称定重量 ,浸泡过夜 ,超声提取 40 min ,放冷 ,再称定
重量 ,用甲醇补足减失的重量 ,滤过 ,弃去初滤液 ,取
续滤液 ,0.45μm滤膜过滤 ,作为供试品溶液。
3.3　色谱系统适应性试验　分别取对照品溶液(补
骨脂素浓度为 23.16μg·mL-1)、供试品溶液 10μL 注
入色谱仪 ,按上述色谱条件 ,记录色谱图(图 1)。理
论板数以补骨脂素峰计算 ,应不低于 9000;补骨脂素
的拖尾因子约为 1.09 ,保留时间约为 8.6min ,补骨脂
素与样品中其他组分的分离度大于 1.5。
图 1　五指毛桃色谱图
A.对照品:B.供试品:1.补骨脂素
3.4　方法学考察
3.4.1　标准曲线制备　吸取不同浓度的对照品溶
液各10μL ,依次进样 ,每个浓度测定 3次以上 。以峰
面积(A)对对照品溶液系列浓度(C)进行同归 ,得回
归方程 A =20372.5C +324.9 , 相关系 数 r =
0.99997。表明补骨脂素在 0.072 ～ 0.386 μg 之间与
峰面积线性关系良好 。
3.4.2　精密度试验　取浓度为 23.16μg·mL-1的补
骨脂素对照品溶液10μL ,连续测定5次 ,记录峰面积
并计算 RSD为 0.32%,表明仪器精密度良好。
3.4.3　重复性试验 　取同一批号(批号 1)样品 6
份 ,按样品提取法提取 、测定 ,结果补骨脂素平均含
量为 3.23 mg·g-1 ,RSD为 2.50%。表明分析方法重
复性良好。
3.4.4　稳定性试验　取供试品溶液(批号1)在 0 ,1 ,
2 ,4 ,6 ,8 h分别进样 10μL ,记录峰面积 ,结果补骨脂
素峰面积的 RSD=1.55%,表明供试品溶液在 8 h 内
稳定。
3.4.5　加样回收试验 　精密称取样品 6 份(批号
1),加入补骨脂素对照品贮备液 1.2 mL ,按供试品溶
液的制备方法处理并测定 ,计算回收率 ,结果见表
1。补骨脂素平均回收率为 99.2%, RSD=2.15%。
结果表明本方法准确可靠 。
3.5　样品测定　取五指毛桃样品 3批 ,照 3.2.2 方
法制备供试液 ,另取 23.16μg·mL-1的对照品溶液与
供试品溶液各 10μL ,注入液相色谱仪 ,测定 ,计算补
·13·
第 11卷第 5 期
2005年 10 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol.11 , No.5
Oct., 2005
骨脂素的含量 ,结果见表 2。
表 1　回收试验结果(n=6)
编号 样品重(g)
补骨脂素量
(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
1 0.1254 0.4050 0.4632 0.8732 101.1
2 0.1248 0.4031 0.4632 0.8702 100.8
3 0.1226 0.3960 0.4632 0.8511 98.3
4 0.1258 0.4063 0.4632 0.8678 99.6
5 0.1249 0.4034 0.4632 0.8452 95.4
6 0.1260 0.4070 0.4632 0.8715 100.3
平均回收率:99.2% RSD=2.15%
表 2　样品测定结果(n=3)
批号 补骨脂素含量(mg·g -1) RSD(%)
1 3.23 2.50
2 8.68 2.48
3 1.25 2.01
4　讨论
五指毛桃的薄层色谱鉴别采用补骨脂素对照品
及五指毛桃对照药材双对照。我们尝试了多个展开
系统 ,本文采用正己烷-醋酸乙酯(8∶2)系统 ,效果理
想。
有文献报导[ 2] 薄层色谱法测定五指毛桃中补骨
脂素的含量 ,但薄层色谱法准确度和重复性都较差 ,
所以本文建立了高效液相色谱法 ,方法简便 、准确 、
可靠 ,可用于五指毛桃的质量控制 。
本实验中流动相曾选用甲醇-水[ 3] ,但达不到基
线分离 。参照文献[ 4] 选用甲醇-冰醋酸 ,经反复实
验探索 ,采用甲醇-1%乙酸(60:40)为流动相后 , 方
得满意结果 。
本文分别以乙醇 、甲醇为溶剂 ,进行索氏提取和
超声提取的对比研究 ,结果表明甲醇提取比乙醇提
取效率高 ,超声提取比索氏提取效率高 。并以甲醇
为溶剂提取 ,考察了超声提取 20 、30 、40 、50 、60min 对
提取率的影响 ,结果表明 ,超声提取 40min含量达稳
定 ,时间增加 ,含量不会增加 。表明 40min已提取完
全 ,因此选择甲醇为溶剂 ,超声提取 40min 。
实验中发现 ,药材越新鲜 ,补骨脂素含量越高 ,
可能因为补骨脂素为挥发性成分[ 5] ,放置过程中含
量会下降。
参考文献:
[ 1] 　国家药典委员会.中华人民共和国药典[ S] .一部.北
京:人民卫生出版社 , 1978.90～ 91.
[ 2] 　陈勇 , 甄汉荣 , 陈美燕.五指毛桃中补骨脂素的含量测
定[ J] .中药材 , 2002 , 25(4):265～ 266.
[ 3] 　谢琴 , 王菊美 ,黄礼杰 , 等.仙灵骨葆胶囊多指标成分的
定量研究[ J] .中成药 , 2001 , 23(6):411-414.
[ 4] 　田晓东 , 俞桂心.高效液相色谱法测定复方补骨脂酊中
补骨脂素和异补骨脂素的含量[ J] .海峡药学 , 2002 , 14
(1):20-22.
[ 5] 　林励 , 钟小清 , 魏刚.五指毛桃挥发性成分的 GC-MS 分
析.中药材 , 2000 , 23(4):206-207.
收稿日期:2004-10-11
通讯作者:李志万 , Tel:(010)68585566-539, E-mail:lizhiwan@qianlong.com
HPLC-ELSD法对猪胆粉中猪去氧胆酸的含量测定研究
李志万1 ,马　强2 ,袁永生3 ,周玉新3
(1.国家药品审评中心 ,北京　100038;
2.大连理工大学环境与生命学院生物科学与工程系 ,辽宁 大连　116024;
3.北京美德森医药技术开发有限公司 ,北京　100083)
　　摘要:目的:建立猪胆粉及其制品中猪去氧胆酸的含量测定方法。方法:以Kromasil C18(4.6 mm×250 mm , 5μm)色谱柱为固
定相 ,柱温 25℃,以乙腈-0.1%乙酸水溶液(50∶50)为流动相 ,流速 1.0mL·min -1 ;蒸发光散射检测器检测 , 漂移管温度 40℃, 以
氮气为载气 ,压力 2.0 bar。结果:猪去氧胆酸在 5.4μg ～ 27.0μg 范围内线性关系良好 , r=0.9994 ,加样回收率为 97.0%, RSD=
2.7%(n=5)。结论:该方法简便 、准确 、重复性好。
关键词:HPLC-ELSD;猪胆粉;猪去氧胆酸
中图分类号:R284.1　　文献标识码:B　　文章编号:1005-9903(2005)05-0014-03
·14·
第 11卷第 5 期
2005年 10 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol.11 , No.5
Oct., 2005