全 文 ：科揽朦息
微波辅助法提取铁负菜巾的总黄酮
吉林化工学院化学与制药工程学院 杨艳俊 吉慧杰 祝 波
【摘 要」以铁觅菜为原料 ,优化其总黄酮 的微波辅助 法提取工 艺 。 在单因素试验的基拙上 , 采用正交试验法 ,考察料液 比 、微波时
间 、微波温度 、微波功率对提取效果的影响 。 实验结果表明 ,铁觅菜总黄酮的最佳微波提取工艺条件为料液比 1 : 40 、 乙醇浓度劝% 、 微
波时间 1 0 m m 、 温度劝℃ 。 在此条件下铁觅菜总黄酮的提取率为 1 . 2% % 。 该提取方法具有操作简单 、 提取时间短等优点 , 适用 于铁觅
菜总黄酮的提取 。
[关键词 ]铁觅菜 总黄酮 微波辅助提取
铁觅菜 (cA al y pha ) , 为大戟科铁觅菜属植物 , 又名海蚌含珠 、血见
愁 。 广泛分布于长江和黄河中下游以及东北 、华北 、华南等地 。 全草人
药 , 有清热解毒 、利湿 、收敛 、止血的作用 ’` 剧 。 研究表明对治疗溃疡性结
肠炎有疗效 {3 一5 1 ,并具有抗氧化活性 l6] 。 铁觅菜不仅含有生物碱 、糖昔 、 酞
胺 、 苗醇等 , 还含有黄酮类化合物如芦丁例 ,有较强的抗氧化作用 , 能清
除人体 内的超氧阴离子 自由基 , 具有抗衰老 、增强机体免疫力等功
能 9`] 。 目前未见关于微波辅助提取铁觅菜总黄酮的相关报道 , 为此本实
验对微波辅助提取铁觅菜总黄酮的工艺进行了研究 , 旨在为铁觅菜资
源的进一步开发利用提供理论依据 。
1
.材料与方法
1
.
1试剂与仪器
1
.
1
.
1原料
试验材料铁觅菜购于药材市场 ,为干燥全草 。 用粉碎机粉碎后 ,过
4 0 目孔径筛 ,保存备用 。
1
.
1
.
2试剂
芦丁对照品 (购自中国药品生物制品检定所 , 批号 : 0 0 80 一 9 7 0 5 ) 。
亚硝酸钠 、硝酸铝 、氢氧化钠 、无水乙醇等试剂均为国产分析纯 。
1
.
1
.
3主要仪器与设备
F A 20 04 电子分析天平 (上海精密科学仪器有限公司 ) 、 R T一 08 粉碎
机 (荣聪精密科技有限公司 ) 、 75 2 N 紫外分光光度计 (上海精密科学仪器
有限公司 ) 、 M A S一 1微波辐身」萃取仪(上海新仪微波化学利技有限公司 ) 。
1
.
2试验方法
1
.
2
.
1对照品溶液的制备
精确称取芦丁精品 1 o m g ,加人 6%的乙醇适量 ,超声处理使之溶解 ,
以 6 0 % 的乙醇定容至 10 o m L ,配制成浓度为 o . l m g m/ L的芦丁对照品溶液 。
1
.
2 2 供试品溶液的制备
准确称取铁觅菜粉末 1 .飞 ,加人 60 % 乙醇 s o m L , 置于温度为 50 ℃ ,
微波功率为 4 0 w 的微波萃取仪中提取 l o m in 。 趁热过滤 , 加人 s o m L
的容量瓶中 ,加 60 % 的乙醇加至刻度线 ,得供试品溶液 。
1
.
2 3 检测波长的确定
取芦丁对照品溶液 l m L 、供试品溶液 l m L 于 50 m L容量瓶 中 ,加人
5 % N
a
N 。 溶液 住 s m L , 摇匀 ,放置 6 m in , 加人 10 % lA (N O 3) 3溶液 住 s m L ,放
置 6 m in 后再加人 4 % N a O H溶液 4 m L , 5 0% 乙醇溶液定容 , 摇匀 , 放置
巧 m in 。 以相应溶剂作空白 , 在 4 0 0 一 6 o on m 之间进行紫外光谱扫描 ,结
果显示芦丁对照品溶液和供试品溶液均在 s lo n m 处出现最大吸收 ,所
以选 5 10n m为检测波长 ` ’0] 。
1
.
2井标准曲线的绘制` , ’ l
精确称取 o . l m翻m L 芦丁标液 住。 , 2刀 , 4刀 , 6刀 , 8刀 , 10 刀 , 12 m L 于
2 5 m L容量瓶 中 ,加人 5% N a N O 溶液 住 s m L ,摇匀 ,放置 6 m in ,加人 10 %
A I (N O
3
)
3溶液 。名 m L , 放置 6 m i n 后再加人 4 % N a O H溶液 l om L , 5 0 % 乙醇
定容 ,摇匀 ,放置 巧 m in 。 以零浓度为空 白 , 在 s lo n m处测定系列吸光
度 。 以芦丁浓度为横坐标 , 吸光度值为纵坐标 ,绘制标准曲线 ,进行线
性 回归 , 得 回归方程 : y = H . o 4 6 x 一住 0 2 91 , r = 住9 9 92 。 结果表明芦丁在
住 0 8一住04 8 m gm/ L范围内与吸光度呈良好的线性关系 。
0
.
6 厂
1
.
2
.
5铁觅菜提取液中总黄酮的含量测定
取铁觅菜提取液 2 . Om L于 10 m L 容量瓶中 , 以相应溶剂为空白 , 在
5 10n m波长处测定样品溶液的吸光度 ,并 由回归方程得出浓度 , 经过计
算得出铁觅菜总黄酮提取率 ,计算公式` ’沙口下 :
总黄酮提取率(%卜( C x v 定 x v 提)(/ v 取 x 铁觅菜药粉的质量 )
其中 : C表示所测定铁觅菜提取液总黄酮的浓度 (m gm/ )L ;
v 定表示制备供试品溶液时定容的体积(m )L ;
V 提表示所得提取液的总体积 (m )L ;
V 取表示从提取液中量取的用于制备供试 品溶液的提取液体积
(m L )
。
2
.结果与讨论
2
.
1单因素试验
2
.
1
.
1微波温度料液比对总黄酮提取率的影响
称取 5 份 19 粉碎完的铁觅菜粉末 ,置于圆底烧瓶中 ,按料液比 卜30
加人 5 0 % 的乙醇 , 置于微波炉中 ,在 4 0 W功率条件下 , 分别 以 30 ℃ 、
4 0℃ 、 50 ℃ 、 6 0℃ 、 7 0℃进行加热 I O m in , 趁热过滤 。 滤液定容到 10 m L
容量瓶中 , 取 Z m L滤液测定黄酮类物质含量 ,并通过铁觅菜中总黄酮的
提取率确定微波温度对总黄酮提取的影响 。 由图 2 可知 , 随着微波温
度 的升高 , 总黄酮提取率增加 , 当达到 50 ℃后 , 总黄酮提取率反而下
降 。 综合考虑选择微波温度分别为 40 ℃ 、 50 ℃ 、 60 ℃进行正交试验 。
1 3
es
丫丫\ \ \ .人
ǎ丫团·巴à哥澎骥暖斌均
30 40 50 60 70
微波温度 (℃ )
图 2 微波温度对黄酮提取率的影响
引 ./’ 丫县 。 l / \婴 , 」 / \曝 } / \抵 1 / \侧 。」 / 、
0 0
.
0 1 0
.
0 2 0
.
0 3 0
.
0 4 0
.
0 5 0
.
06
浓度 (m g /毗 )
图 1 芦丁标准曲线
7 川一一一一一一一一一一一一曰40 50 60 70 8 0乙醇浓度 %( )
图 3 乙醇浓度对黄酮提取率的影响
2
.
1
.
2 乙醇浓度对总黄酮提取率的影响
称取 5 份 1 9粉碎完的铁觅菜粉末 ,置于圆底烧瓶中 ,按料液比 卜30
分别加人 40 % 、 5 0 % 、 60 % 、 70 % 、 80 % 的乙醇溶液 , 置于微波炉中 , 在
4 0 0W率条件下加热 10 m in ,趁热过滤 。 滤液定容到 10 Om L容量瓶中 , 取
Z m L滤液测定黄酮类物质含量 ,并通过铁觅菜 中总黄酮的提取率确定
乙醇浓度对总黄酮提取的影响 。 由图 3 可知 , 乙醇浓度为 5 0%时黄酮
y
543210
铡来彭
12 9
科飞炭气琶急
提取率最高。 所以选择 50 %、 60 %、 0 7 %进行正交试验 。
2
.
1
.
3微波时间对总黄酮提取率的影响
称取 5 份 1 9粉碎完的铁觅菜粉末 ,置于圆底烧瓶中 ,按料液 比 1 : 30
加人 5 0% 的乙醇溶液 , 置于微波炉 中 , 在 4 0 w 功率条件下分别加热
4 m i n
、
7 m i n
、
l o m i n
、
1 3 m i n
、
1 6 m i n
,趁热过滤 。 滤液定容到 l o om L容量瓶
中 , 取 Z m L滤液测定黄酮类物质含量 ,并通过铁觅菜中总黄酮的提取率
确定微波加热时间对总黄酮提取的影 响 。 由图 4 可知 ,提取时间在
10 m in 时总黄酮的提取率最高 ,所以选择 7 、 10 、 13 m in 进行正交试验 。
表 2正交实验结果
洲一\县 」 / \翟: { / 火籍
;卜一一一三
编号 A B C D J急黄酮提取率 (% )
l l l l l O
一
96
2 l 2 2 2 1
.
02
3 l 3 3 3 1
.
0 1
4 2 l 2 3 1
.
1 1
5 2 2 3 l 1
.
04
6 2 3 l 2 1
.
0 1
7 3 l 3 2 1
.
22
8 3 2 l 3 1
.
07
9 3 3 2 l O
一
87
K lj 2
一
9 9 3
.
2 9 3
一
0 4 2
一
87
K 3
.
16 3
.
1 3 3
一
O 3
.
25
K
3 )
3
.
16 2
一
9 2 3
一
2 7 3
.
19
R 0
.
17 O
一
3 7 O
一
2 7 O
一
3 8
优先水平 A 3 B 1 C 3 D
1 0 , 3 1 6
微波时间 (m i n )
图 4 微波温度对黄酮提取率的影响
由表 2可知 : 影响实验因素的主次顺序是 D > B > C> A , 即微波温度 >
乙醇浓度 > 微波时间> 料液比 ,根据直观分析结果得出铁觅菜总黄酮的
最佳提取工艺为 A 3B I C 3 D , 即料液 比为 1 : 40 、 乙醇浓度为 5 0 % 、微波时间
为 13 m in 、微波温度为 50 ℃ 。
2 3 工艺验证性试验
为了考察上述优选工艺的稳定性 ,按该工艺条件重复提取铁觅菜
总黄酮 3 次 , 得出总黄酮提取率分别为 1 . 297 % 、 1 . 3 02 % 、 1 . 29 1% , 平均为
1
.
2 97 %
,表明该最佳工艺稳定可行 。
3
.结论
本文 以铁觅菜总黄酮的提取率为考察指标 ,通过一系列单因素实
验及正交实验 , 确定了微波辅助提取铁觅菜总黄酮的最佳工艺料液比
为 1 : 4 0 、 乙醇浓度为 5 0 % 、微波时间为 13 m in 、微波温度为 50 ℃ , 为进一
步开发和利用铁觅菜提供了理论依据 。
ǎ丫叨。比通铃爵骥应缸抓睡
料液比 (g /。口
图 5 乙醇浓度对黄酮提取率的影响
2
.
1
.
4 料液比对总黄酮提取率的影响
称取 4份 19粉碎完的铁觅菜粉末 ,置于圆底烧瓶中 , 分别按 1 : 20 、 1 :
3 0
、
1
:
4 0
、
1
:
5 0 的料液比加人 50 % 的乙醇溶液 ,置于微波炉中 , 在 40 0w 功
率条件下加热 10 m in , 趁热过滤 。 滤液定容到 10 o m L容量瓶中 ,取 Z m L
滤液测定黄酮类物质含量 ,并通过铁觅菜中总黄酮的提取率确定料液
比对总黄酮提取的影响 。 由图 5 可知 , 随着料液比溶液的增加 ,总黄酮
提取率增加 , 当达到 1 : 30 后再增加料液比 ,总黄酮提取率反而下降 。 综
合考虑选择以料液比分别为 1 : 20 、 1 : 30 、 1 : 40 进行正交试验 。
2
.
2正交试验
2
.
2
.
1正交试验设计
在单因素试验基础上 , 以总黄酮提取率为考察指标 ,料液比 、 微波
时间 、微波温度和微波功率进行正 交试验设计味 l) ,正交试验结果见表 1 。
表 1正交因素水平表
水平 A B C D
料液比 (g : m l) 乙醇浓度 微波时间 (m i n ) 微波温度 (℃ )
l 卜2 0 5 O 7 4 O
2 卜3 0 6 O l O 5 O
3 卜4 0 7 O l 3 6 O
2
.
2
.
2正交试验结果
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(上接第 1 2 8页 )
最佳切割速度 。
4
.结语
不变 , 令 件先 一 O
d V
,便可求出在所给试验条件下的
大理石是脆性材料 , 其组织颗粒较粗大 ,硬质相和弱界面间杂于基
体组织之中 ,传统加工方法对其加工难以得到令人满意的结果 。 而磨
料射流只要参数选择合适 ,便可用于石材切割 ,具有切割质量好 、尺寸
精度高的优点 。
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