全 文 ：铁苋菜提取物对大鼠溃疡性结肠炎结肠组织的实验研究
贺方兴 ,李洪亮
(赣南医学院 , 江西　赣州　341000)
摘　要:目的:观察铁苋菜提取物对大鼠结肠炎模型的疗效。方法:用健康 SD大鼠建立大鼠结肠炎模型 ,灌胃用
药 2周后 ,评价大鼠结肠黏膜损伤指数(CMDI), 检测结肠组织髓过氧化物酶(MPO)及超氧化物歧化酶(SOD)活
性 、丙二醛(MDA)含量和细胞肿瘤因子(TNF)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)水平。结果:不同剂
量铁苋菜提取物(100, 300, 600mg/kg)灌胃均能不同程度降低模型大鼠 CMDI、MPO活性 , 减少 MDA含量 , 提高
SOD活性 , 降低 TNF、IL-8、IL-10水平 ,且与用药剂量呈一定量效关系。结论:铁苋菜提取物通过拮抗氧化 、免疫
调节 、损伤修复作用缓解结肠炎大鼠炎症反应 ,减轻结肠损伤 , 有一定的疗效。
关键词:铁苋菜提取物;抗氧化作用;调节免疫;结肠炎;大鼠
中图分类号:R965　　文献标志码:A　　文章编号:1001-5779(2010)03-0342-02
EffectsofAcalyphaaustralisextractprescriptiononulcerativecolitisinrats
HEFang-xing, LIHong-liang
(GannanMedicalUniversity, GanzhouJiangxi341000)
Abstract:Objective:ToobservetheefectsofAcalyphaaustraliswaterextractprescriptiononulcerativecolitis(UC)in
rats.Methods:RatmodelofulcerativecolonitiswasestablishedbyclysterofTNBS.AftertreatmentwithAcalyphaaustra-
lisextractfor2 weeks, thecolonmucosaldamageindex(CMDI)wasevaluated.Theactivityofmyeloperoxidase(MPO),
superoxidedismutase(SOD), thecontentofmalondialdehyde(MDA)incolontissues, andthelevelsoftumornecrosis
factor(TNF), interleukin-8(IL-8)andinterleukin-10(IL-10)inserumwereexamined.Results:Acalyphaaustralisex-
tract(100, 300, 600 mg/kg)decreasedthevaluesofCMDI, theactivityofMPO, thecontentsofMDA, andthelevelsof
TNF, IL-8andIL-10 , butincreasedtheactivityofSODinadose-dependedm-anner.Conclusion:Acalyphaaustralis
extractcanefectivelyrelievetheinflammatoryreactionandcolonicinjuryincolitisratsbyimmunoregulation, anti-oxida-
tionandwoundrepair.
Keywords:Acalyphaaustralisextract;anti-oxidation;immunoregulation;colitis;rat
　　铁苋菜(Acalyphaaustralis.L), 又称海蚌含珠 ,大戟科植
物 , 一年生草本 , 全草均可入药 , 具清热解毒 、止痢 、止血等功
效 , 民间常用于治疗肠炎 、痢疾 、尿血 、便血等症。体外实验
发现铁苋菜水提液对多种细菌具有杀伤作用 , 并对番泻叶引
起的腹泻具有拮抗作用 [ 1] 。铁苋菜的抗结肠炎作用虽有记
载 , 但国内相关报道极少。为了探讨铁苋菜对炎症性肠炎是
否有抗损伤保护作用 , 我们通过建立大鼠结肠炎模型 , 用不
同剂量铁苋菜灌胃给药 , 进行了相关实验研究 , 观察铁苋菜
对炎症性肠炎的保护作用及其机制如下。
1　材料和方法
1.1　材料　铁苋菜 500 g购于赣州市三九药店。将药材粉
碎后过 40目筛。取细粉加水浸润 3 h, 然后分别加水 12倍 、
10倍加水煎煮 2次 , 第一次 2 h,第二次 1.5 h, 抽滤 , 合并滤
液。浓缩到 100mL相当于原药材 5g/mL。即为铁苋菜水提
取物(以下简称提取物)。 2, 4, 6-三硝基苯磺酸(TNBS)为
美国 Sigma公司产品;5-氨基水杨酸(5-ASA)原料药由国怡
药业有限公司提供;MPO, SOD, MDA检测试剂盒由南京建成
生物工程研究所提供;TNF, IL-8试剂盒由解放军总医院科技
开发中心放免所提供;IL-10试剂盒由深圳晶美生物工程公
司提供;Aeroset09D05-01全自动生化分析仪(美国);TL-16G
型高速冷冻离心机(上海实验仪器厂生产);GC-1200放射免
疫计数器(中国安徽科大创新股份有限公司)。 健康 SD大
鼠 , 雌雄兼用 ,体质量 220 ～ 250 g, 由江西中医学院实验动物
中心提供 , 编号:zjdwNo:20080245。
1.2　方法　大鼠禁食 24h后(饮水照常),将溶于 500 mL/L
乙醇的 TNBS按 100 mg/kg, 体积 0.25 mL/只 , 用导管(直径
4 mm)经肛门插入结肠内约 8 cm灌肠 1次 , 建立结肠炎模
型 [ 2] 。实验设正常组 、模型组 、阳性药物对照组(5-ASA,
100mg/kg)、不同剂量铁苋菜给药组(灌服铁苋菜剂量分别
为 100, 300, 600 mg/kg), 从制备模型 7d后开始灌胃给药 ,每
日 1次 , 共 14 d。正常组与模型组均给予等量生理盐水灌
胃。实验完成后处死动物 , 参照文献 [ 3]方法及标准评价 CM-
DI, 评分标准为:0=无损伤;1=轻度充血 , 水肿 , 表面光滑 ,
无糜烂或溃疡;2=充血水肿 , 黏膜粗糙呈颗粒状 ,有糜烂或
肠黏连;3=高度充血水肿 , 黏膜表面有坏死及溃疡形成 , 溃
疡最大纵径 <1 cm, 肠壁增厚或表面有坏死及炎症;4=在 3
分基础上溃疡最大纵径 >1 cm,或全肠壁坏死。结肠标本常
规石蜡包埋 , 切片 , HE染色 , 光镜观察。尾动脉采血放免法
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第 30卷第 3期　　　　　　　　　　　赣　南　医　学　院　学　报　　　　　　　　　　Vol.30NO.3
2010年 6月　　　　　　　　JOURNALOFGANNANMEDICALUNIVERSITY　　　　　　　JUN.2010
检测 TNF, IL-8, IL-10。另取新鲜结肠组织 ,用预冷的生理盐
水冲洗除去血液 ,滤纸吸干称质量 , 加 9倍生理盐水 , 在低温
(冰水)中用玻璃研磨器研磨制成 100 mL/L的组织匀浆 , 高
速离心取上清液低温(3 ℃)保存待测 , MPO、MDA、SOD按试
剂盒说明书进行。
1.3　统计学处理　实验数据采用 SPSSforWindows11.0软
件进行 t检验统计处理。
2　结　果
2.1　各组大鼠结肠黏膜病理学及炎症反应　模型组大鼠结
肠黏膜充血水肿 , 大量炎性细胞浸润 , 肠壁增厚 ,黏膜表面有
明显坏死及溃疡形成 , 腺体中杯状细胞减少 , 而不同剂量的
铁苋菜提取物用药组以上病理组织表现明显缓解。 CMDI,
MPO活性在模型组大鼠升高 , 而不同剂量铁苋菜给药组
(100, 300, 600 mg/kg)与 5-ASA(100 mg/kg)灌胃不同程度降
低(P<0.05, P<0.01),且铁苋菜给药组呈现一定量效关系
(表 1)。
表 1　铁苋菜提取物对结肠炎大鼠炎症反应的影响　(n=10)
分组 剂量(mg/kg) CMDI
MPO
(nkat/g)
正常组 0.00±0.00 856.66±127.84
模型组 4.37±0.35△ 2856.43±537.98△
5-ASA组 100 1.73±0.15■ 2026.32±125.56■
给药组 100 2.69±0.44＊ 1865.17±389.36＊
300 2.11±0.32■ 2247.23±452.41■
600 1.96±0.35■ 2024.67±217.38■
　与模型组比较＊P<0.05, ■P<0.01;与对照组比较△P<0.01
2.2　铁苋菜提取物对大鼠氧自由基和免疫功能的影响　与
模型组比较 , 不同剂量铁苋菜提取物给药组(100, 300,
600mg/kg)与 5-ASA(100 mg/kg)灌胃均降低结肠组织中
MDA含量 , 升高 SOD活性 , 且铁苋菜提取物给药组中 、大剂
量作用显著(P<0.01,表 2)。与对照组比较 , 模型组大鼠血
清中 TNF, IL-8水平明显升高 , IL-10明显降低(P<0.01);
经过 2周的灌胃用药 , 模型组大鼠血清 TNF, IL-8水平降低 ,
IL-10明显升高(P<0.05, P<0.01, 表 2)。
表 2　铁苋菜提取物对结肠炎大鼠氧自由基和免疫功能的影响　(n=10)
分组 剂量(mg/kg)
MDA
(μmol/g)
SOD
(nkat/g)
TNF
(μg/L)
IL-8
(μg/L)
IL-10
(ng/L)
正常组 1.58±0.15 5015.70±538.46 1.78±0.22 0.67±0.21 79.95±10.95
模型组 3.47±0.72△ 3433.40±428.40△ 3.53±0.47△ 1.36±0.27△ 29.37±9.96△
5-ASA组 100 2.97±0.51 4875.47±324.67■ 2.11±0.39■ 0.92±0.18■ 72.81±8.94■
给药组 100 1.98±0.54＊ 4276.49±519.48＊ 2.31±0.13＊ 1.11±0.19＊ 45.62±9.21＊
300 1.89±0.56■ 3631.80±531.10■ 2.33±0.34■ 1.07±0.06■ 52.17±7.47■
600 1.75±0.49■ 3551.87±322.61■ 2.18±0.46■ 0.98±0.03■ 59.16±10.87■
　　　　　与模型组比较＊P<0.05, ■P<0.01;与对照组比较△P<0.01
3　讨　论
TNBS与乙醇诱发大鼠结肠炎的主要机制为乙醇破坏
结肠黏膜屏障 , TNBS渗入结肠与大分子物质结合 , 形成全
抗原引起肠壁一系列免疫应答与炎症反应 , 因其发病机制
及病理表现与人类炎症性肠炎非常相似 [ 4] , 免疫异常 、氧自
由基作用在炎症性肠病的发病机制中占有重要地位。
本实验采用 TNBS与乙醇诱发大鼠结肠炎模型后 , 发现
大鼠血清中的促炎因子与抗炎因子水平变化明显 , 结肠组
织中 MDA含量明显升高 、SOD活性降低 , 证明了免疫异常
与氧自由基在炎症性肠病的发病机制中起重要作用。我们
观察到 , 铁苋菜提取物给药组组织病理损伤程度明显缓解 ,
且呈一定剂量效应 , 显示采用铁苋菜提取液灌胃用药可明
显减轻模型组大鼠结肠损伤 , 缓解炎症反应 , 表现出抗炎 、
抗损伤的保护作用;实验中铁苋菜提取液灌胃用药能降低
结肠炎模型组大鼠代谢产生的脂质过氧化物 MDA含量 ,升
高重要抗氧化酶 SOD活性 , 表现出抗氧化特性 ,从而抑制结
肠组织中的脂质过氧化反应 , 保护组织细胞。免疫异常在
炎症性肠病的发病机制中起重要作用。而细胞因子实质上
是维持免疫细胞功能协调运转 ,相互联络的 “信使”, 其促炎
因子与抗炎因子间的失衡是导致结肠免疫损伤的主要因
素 , 实验结果显示 ,铁苋菜提取物灌胃能明显降低模型组大
鼠 TNF, IL-8及升高 IL-10水平 , 足以表明其对免疫异常有
一定调节恢复作用 ,从而缓解结肠免疫损伤与炎症反应。
总之 , 铁苋菜提取物通过免疫调节及抗脂质过氧化作
用 , 对大鼠结肠炎结肠损伤进行修复 , 抑制结肠炎大鼠炎症
反应 , 对结肠炎具有抗损伤保护作用。 铁苋菜为野生植物
资源 , 具有很高药用价值 , 开发利用前景广阔。
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(收稿日期:2010-03-23)
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3期　　　　　　　贺方兴 ,等　铁苋菜提取物对大鼠溃疡性结肠炎结肠组织的实验研究