全 文 ：文章编号:1001-4829(2005)06-0794-03
　　收稿日期:2005-01-21
　　基金项目:重庆市科技创新能力建设专项
作者简介:雷开荣(1965-),副研究员 ,主要从事农业生物技术
研究工作。
香叶天竺葵组织培养快速繁殖技术研究
雷开荣
(重庆市农业科学研究所 ,重庆　400055)
摘　要:对香叶天竺葵组织培养快速繁殖技术进行了研究 ,建立了种苗快速繁殖技术规程。结果:适宜的增殖培养基为 MS+6-BA
为 0.5～ 1.0 mg/ L ,继代周期为 25～ 30 d ,繁殖系数 5以上;生根培养基为 1/ 2MS+IBA 0.2 mg/ L ,生根诱导率达 100 %;生根培
养 20 d后 ,将试管苗移栽到菜园土∶河沙=1∶1的混合基质中 ,保湿培养 ,移栽成活率达 98.6 %。
关键词:香叶天竺葵;组织培养;快速繁殖
中图分类号:S682.19　　　文献标识码:A
Study on tissue culture and high frequency propagation
of Pelargonium graveolens L.Her
LEI Kai-rong
(Chongqing Inst itute of Agricultural Sciences , Chongqing 400055 , China)
Abstract:The propagation technique of Pelargonium graveolens L.Her in vit ro w ere studied and a method for high f requency propagation
w as established.The result s showed that the appropriate medium for dif ferent culture stages w ere:(i)Dif ferentiation and subculture of
roset te buds:MS+6-BA 0.5-1.0 mg/ L;on this medium shoot multiplicat ion occurred at a up to 5-f old rate af ter 25 days;(ii)Root ing:
1/ 2 MS+IBA 0.2 mg/ L.In 20 days for rooting , the shoots could be direct ly rooted in t ransplantation medium (soil and sand in equal
p roport ion)wi th 98.6 % survival.
Key words:Pelargonium graveolens L.Her;tissue cultu re;high f requency propagation
　　香叶天竺葵(Pelargonium graveolens L.Her),
俗称香叶 、香草 ,属 牛儿苗科天竺葵属 ,多年生亚
灌木 ,原产南非 ,在我国南方部分省区引种栽培 ,云
南 、四川 、重庆及上海等为主要产地[ 1 ,2] 。香叶是香
料工业的主要原料作物之一 ,其枝 、叶含有浓厚的玫
瑰香挥发油 ,主要成分有香叶醇 、香茅醇 、玫瑰醇和
香气酯等;香叶的茎 、叶具有一定药用价值[ 3] 。
香叶天竺葵具有栽培管理易 、生长快 、适宜种植
范围广等优点。随着香料产业的发展 ,种植基地在
不断扩大 ,且随着其它用途(如观赏 、药用等)的发
掘 ,传统繁殖方法不能满足生产发展的需要 ,通过植
物组织培养快速繁殖香叶种苗 ,对加快香料产业发
展具有较大意义[ 4] 。
有关香叶天竺葵组织培养及快速繁殖的工作 ,
报道较少 ,缺乏系统研究[ 5 ～ 6] 。2001 ～ 2003 年 ,我
们系统开展了香叶天竺葵的组织培养快速繁殖技术
研究 ,解决了种苗组培快繁技术的关键问题 ,并开始
进入种苗规模化生产阶段。
1　材料与方法
1.1　材料
用本所苗圃种植的 1年生健康植株 ,剪取健壮
枝条的幼嫩部分作为实验材料。
1.2　无菌体系建立
首先 ,将枝条去叶并剪成 3 cm 左右茎段 ,放入
饱和洗衣粉溶液中浸泡 30 min ,将洗衣粉溶液漂洗
干净后 ,用滤纸吸干或晾干多余水分;其次 ,用 70 %
乙醇消毒 30 s ,再用 0.1 % HgCl2(加 1 ～ 2滴吐温
-80)摇荡处理 8 ～ 12 min ,用无菌水漂洗 4 ～ 6次 ,
无菌滤纸吸干多余水分;第三 ,将材料切成单节茎
段 ,接种于诱导培养基上。
794
西　南　农　业　学　报
Sou thw est China Journal of Agricultural S ciences
　　　　　　　　　　　　　　2005年 18卷 6期
Vol.18　　No.6
DOI :10.16213/j.cnki.scjas.2005.06.028
1.3　培养基与培养条件
1.3.1　诱导培养　培养基为 MS+6-BA 1.0(单位
为 mg/ L)。
1.3.2　增殖培养　以 MS为基本培养基 ,附加不同
激素种类和浓度。将茎尖培养的丛生芽切成单芽 ,
选取 0.5 cm 芽苗接种在培养瓶中 ,每瓶植 3苗 , 3
次重复 , 每重复 6瓶 ,随机排列 。分别于培养 25 、
30 、35 d时 ,任取其中两瓶调查 0.5 cm 以上芽苗数 。
1.3.3　生根诱导培养　以 MS为基本培养基 ,附加
不同激素种类和浓度 。将大小均匀的幼苗分别接种
在生根诱导培养基上 ,每培养基接种 9 瓶 , 每瓶 3
苗 ,培养 20 d后 ,小心取出 ,洗净培养基 ,调查根数
和根长 ,求平均值。
上述培养基均附加蔗糖 3 %、琼脂 0.7 %, pH
5.8。
1.3.4　培养条件　培养室温度25±2 ℃,光照时间
14 h ,光照强度 1500 lx 。
1.3.5　炼苗与移栽　打开培养瓶盖 ,在驯化培养室
内过渡培养 3 d ,在室外自然光下炼苗 4 d后 ,小心取
出试管苗 ,去除老叶和黄叶 ,洗净基部培养基 ,将其移
栽到菜园土∶河沙=1∶1的混合基质上 ,保湿培养。
2　结果与分析
2.1　诱导培养
单节茎段在接种后的第 7天起 ,基部逐渐膨大 ,
并有淡黄色突起产生 ,从第 15 天起有大量芽点形
成 ,不定芽开始分化;经 35 ～ 45 d培养 ,每个节段可
产生 0.5 cm以上不定芽 6 ～ 8个 。诱导产生的不定
芽作为增殖培养研究的材料。
2.2　增殖培养的比较
2.2.1　在无激素培养基上的表现　在无激素 6-
BA 、KT 的 MS基本培养基中 ,没有新芽增殖 ,接种
7 d后有根原基产生 ,20 d后有 4 ～ 6条 0.5 cm 以上
幼嫩白根。
2.2.2　6-BA对香叶天竺葵继代增殖的影响　在只
有 6-BA的培养基中 ,当 6-BA为 0.5 ～ 1.0 mg/ L 时 ,
均有相对较高的繁殖系数 ,超过 2.0 mg/ L 时 ,明显
影响香叶天竺葵的增殖;在继代培养时间上 ,因诱导
萌发早 、繁殖能力较强 ,以 25 ～ 30 d为宜(图 1)。
2.3.3　K T 对香叶天竺葵继代增殖的影响　在只
有 KT 的培养基中 ,浓度在 2.0 mg/ L 以内时 ,培养
25 ～ 35 d 后 ,增殖效果不如 6-BA ,繁殖系数较低。
因此 , 在香叶天竺葵快速繁殖过程中 , 不宜使用
KT 。
2.3.4　KT 与 6-BA交互作用对香叶天竺葵继代增
殖的影响　当 KT 浓度为 2.0 mg/ L 时 ,繁殖系数
明显降低 ,芽基部畸形膨大非常明显;当 KT 浓度为
1.0 mg/ L 、6-BA为 0.5 ～ 1.0 mg/ L 时 ,香叶天竺
葵仍能正常繁殖 ,但繁殖系数与单独使用 6-BA 0.5
～ 1.0 mg/ L 时没有本质区别(表 1)。
2.4　不同培养基间生根诱导的差异
由表 2可知 ,以根原基萌发时间 、发根条数 、平
均根长为指标 , 香叶天竺葵在 1/ 2M S +IBA0.2
mg/ L 上诱导生根的效果较好;在 MS0上诱导香叶
天竺葵生根的效果最差 ,主要表现在发根迟 、根数
少 、生长缓慢(图 2)。
2.5　试管苗的移栽
生根诱导培养 20 d后 ,打开培养瓶盖 ,分别在
室内外炼苗 3 ～ 4 d ,洗净基部培养基 ,移栽到泥炭
土∶沙土=2∶1 的混合基质中 ,保湿培养。10 d后 ,
移栽试管苗即开始正常生长 , 30 d 后调查 ,移栽成
活率达 98.6 %(图 3 ,4)。
图 1　在培养基MS+6-BA 1.0 上诱导 25 d时的丛生芽
Fig.1　The roset te buds on MS+6-BA 1.0 in vit ro for 25 d
图 2　在生根诱导培养基 1/ 2MS+IBA 0.2 上培养 20
d的试管苗
Fig.2　The shoot w ith roots on 1/ 2MS+IBA0.2 in vit ro for 20 d
7956期 雷开荣:香叶天竺葵组织培养快速繁殖技术研究
表 1　不同激素配比对香叶天竺葵继代繁殖的影响
Table 1 　Effect of dif ferent hormone posit ion on Pelargonium
graveolens L.Her propagation
激素配比
Hormone posit ion
KT BA
培养时间(d)
Time in vi tro
25 30 35
0.0 0.0
0.5
1.0
2.0
0＊ 0 0
5 8 12
6 11 15
3.5 6 7
1.0 0.0
0.5
1.0
2.0
2 3 3.5
5 7.5 12
5.5 12 14
2 3.5 4
2.0 0.0
0.5
1.0
2.0
3 5 5.5
2 5 6
3 4.5 6
0 1 3
　　注:＊每一丛生芽中 0.5 cm 以上的芽苗数。
Note:＊ num ber of shootings w ith more than 0.5 cm plant-heigh t
per cluster-bud.
表 2　不同培养基配方对诱导生根的影响
Table 2　Ef fect s of diff erent medium on root ing of Pelargonium
graveolens L.Her
培养基
Medium
根原基萌发时间
Time of root
p rimordium
germinat ion(d)
平均根数
Root number
平均根长
Average of
root length
(cm)
MS 71) 4.2 1.2
1/ 2 MS 6 7.0 1.4
MS+0.2 IBA 6 6.8 1.7
1/ 2 MS+0.2 IBA 5 8.6 2.4
　　注:1)接种后天数。Note:1)the days af ter t ransfer.
3　讨　论
香叶天竺葵快速繁殖对激素的要求比较简单 ,
在附加 0.5 ～ 1.0 mg/ L 6-BA 的 MS培养基上继代
增殖 ,即有较高的繁殖系数 ,完全能满足香叶天竺葵
快速繁殖的需要;在附加 0.2 mg/ L IBA的 1/ 2MS
培养基上就能诱导(培养 20 d)出 8条以上粗壮白
根 ,为香叶天竺葵试管苗的驯化 、移栽提供了保证 。
由于香叶天竺葵繁殖能力强 ,增殖速度快 ,继代
培养周期一般为25 ～ 30 d。如延迟继代 ,芽丛过于拥
挤 ,芽苗变弱 ,且它自身挥发性物质含量高 ,对瓶内小
环境易造成不良影响 ,影响试管苗质量 ,增殖力降低。
因此 ,在香叶天竺葵组培快繁中必须适时继代。
在香叶天竺葵组织培养过程中 ,由于芽的萌发
时间不一 ,培养一定时间后 ,芽的大小差异较大 ,对
图 3　炼苗时的试管苗
Fig.3　The shoots in vitro in t raining stage
图 4　移栽成活的组培苗
Fig.4　T he su rvival of shoots in vitro in t ransplantation medium
芽丛的芽数很难进行定量统计 ,本文以培养一
定时间后每个芽丛的 0.5 cm 以上芽苗数量作为定
量指标[ 7] ,对香叶天竺葵的快速繁殖特性进行了系
统研究 ,对研究其他类似作物或许有借鉴作用。
本文对香叶天竺葵的组织培养及快速繁殖技术
进行了研究 ,取得了初步结果 ,对种苗快速繁殖过程
中的成本与效益核算及成本控制等还需进一步研
究 。
参考文献:
[ 1] 余树勋.天竺葵家族的分类[ J] .中国花卉盆景 , 1998(1):18.
[ 2] 杨凤刚.香叶天竺葵高产高油栽培技术[ J] .云南农业 , 1995
(1):10-11.
[ 3] 孙　伟 , 瞿伟菁.香叶天竺葵的药理研究进展[ J] .中药材 ,
2002 , 25(8):600-601.
[ 4] 曹孜义 ,刘国民.实用植物组织培养技术教程[ M ] .兰州:甘肃
科学技术出版社 , 1996.167-226.
[ 5] 谢利娟 ,李晓东 ,李永红 ,等.柠檬天竺葵的组织培养及快速繁殖
[ J] .林业科学研究 , 2004 , 17(3):379-381.
[ 6] 刘京贞.天竺葵的应用和组织培养[ J] .北方园艺 , 2002(2):54
-56.
[ 7] 朱德蔚.植物组织培养与脱毒快繁技术[ M] .北京:中国科学技
术出版社 , 2001.
(责任编辑　李正华)
796 西　南　农　业　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　18卷