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甜地丁药理作用研究



全 文 :甜地丁药理作用研究
崔春婷
(郑州市第一人民医院,河南 郑州450004)
摘 要:目的:研究甜地丁的药理作用。方法:将40只昆明种小鼠分为甜地丁高、中、低浓度组和空白对
照组各10例,考察甜地丁对小鼠溶血素抗体生成、耳廓肿胀度、醋酸致扭体反应的影响。结果:甜地丁
高、中、低浓度组小鼠OD值均显著高于空白对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);高、中、低浓度甜
地丁水煎液组、乙酸乙酯萃取物组小鼠15s内扭体次数、耳廓肿胀度均显著低于空白对照组,差异具有
统计学意义(P<0.05);高、中浓度水煎液组小鼠扭体次数、耳廓肿胀度显著低于低浓度组,差异具有统
计学意义(P<0.05);水煎液组小鼠扭体次数、耳廓肿胀度显著低于乙酸乙酯萃取物组,差异具有统计
学意义(P<0.05)。结论:甜地丁水煎液和乙酸乙酯萃取物均具有良好的免疫活性、抗炎活性、镇痛作
用,且乙酸乙酯萃取物活性强于水煎液。
关键词:甜地丁;免疫活性;抗菌作用;抗炎活性
中图分类号:R285   文献标识码:A   文章编号:1673-2197(2015)08-0014-02
DOI:10.11954/ytctyy.201508007
收稿日期:2014-12-21
作者简介:崔春婷(1986-),河南省郑州市第一人民医院中药师,研究方向为天然药物化学。
   甜地丁是豆科植物米口袋 Gueldenstaedtia verna
(Georgi)A.Bor.的干燥全草。近年来,关于甜地丁的药效
学研究报道越来越多,但对其清热解毒的药理作用研究则
相对较少[1]。为此,本研究对甜地丁的免疫、抗炎、镇痛活
性进行研究,明确其消肿凉血、清热解毒的物质基础,现报
道如下。
1 材料与仪器
1.1 实验动物
昆明种小鼠,雌雄各半,体重20~24g,均由山东中医药
大学实验动物中心提供。
1.2 试剂
鸡红细胞悬液(5%)、氯化钠注射液、1%刚果红、二甲
苯、乙酸乙醇、乙醇、伊文思蓝、醋酸均为分析纯;阿司匹林
片、羧甲基纤维素钠、甜地丁药材粗粉等。
1.3 仪器
电子天平、灌胃器、1mL注射器、吸量移液管、试管
(10mL、5mL)、分光光度计、低速离心机、玻璃铅笔、镊子、血
球吸管、旋转蒸发器、恒温真空干燥箱等。
2 方法
2.1 甜地丁免疫活性研究
2.1.1 药液制备 根据《药典》规定的甜地丁人正常用量
(9~15g),计算出小鼠的等效剂量,高剂量为等效剂量的8
倍。将甜地丁药材粗粉放入10倍量清水中浸泡30min,然
后进行煎煮,持续煮沸30min,过滤,在滤渣中加入8倍量清
水继续煎煮30min,滤出药液,合并两次所得药液,水浴浓
缩,分 别 制 成 高、中、低 三 种 浓 度 的 甜 地 丁 水 煎 液
(0.2g/mL、0.1g/mL、0.05g/mL)备用。
2.1.2 实验方法 将40只雄性小鼠随机分为4组,分别
采用高、中、低浓度甜地丁水煎液及生理盐水灌胃,剂量均
为0.02mL/g,每日1次,持续灌胃1周。于灌胃前1天腹
腔注射鸡红细胞0.2mL,进行刺激免疫。灌胃结束后第1
天,取小鼠眼球血,离心后取上层血清,加入 NS稀释。取
1mL稀释血清,加入0.5mL鸡红细胞、0.5mL补体(10%),
混合均匀后恒温水浴(30℃),在冰水中终止反应。然后离
心,取上层清液,使用分光光度计进行比色,检测OD值,以
OD值评价血清溶血素水平。
2.2 甜地丁镇痛作用研究
2.2.1 药液制备 取甜地丁药材粗粉适量,放入10倍量
清水中浸泡30min,煮沸后煎煮30min,滤出药液,在滤渣中
加入8倍量水继续煎煮30min,合并两次滤液,浓缩、蒸干,
以CMC-Na溶液(0.5%)溶解,制成高、中、低三种浓度
(0.2g/mL、0.1g/mL、0.05g/mL)药液。
取甜地丁药材粗粉适量,放入10倍量乙醇(70%)提取
3次,合并滤液,浓缩蒸干,以水分溶解浸膏,再以石油醚、乙
酸乙酯萃取,浓缩蒸干,在所得干膏中加入CMC-Na溶液
(0.5%)溶解,制成高、中、低三种浓度(0.2g/mL、0.1g/mL、
0.05g/mL)药液。
2.2.2 实验方法 将80只雄性小鼠分为8组,分别采用
高、中、低浓度甜地丁水煎液、乙酸乙酯萃取液、生理盐水、
阿司匹林灌胃,剂量均为2mL/g,每日1次,持续灌胃5天。
末次给药 0.5h后,腹腔注射醋酸(0.5ml/L),剂量为
0.01mL/g。记录各组小鼠注射后20min内的扭体次数。
2.3 甜地丁抗炎活性实验研究
药液制备方法、动物分组及灌胃方法均同镇痛作用实
—41—
验研究,连续灌胃7天,末次给药1h后,于小鼠右耳两面涂
抹二甲苯致炎,2h后处死。使用打孔器(8mm)在小鼠两耳
相同部位打孔,取耳片,计算耳片肿胀度(右耳片质量与左
耳片质量的差值)。
2.4 统计学方法
研究数据均应用统计学软件SPSS19.0进行处理,计量
资料以均数加减标准差(珚x±s)表示,进行t检验;计数资料
采用率(%)表示,进行χ
2 检验。P<0.05为差异具有统计
学意义。
3 结果
3.1 免疫活性实验结果
高、中、低浓度甜地丁水煎液组小鼠OD值均显著高于
空白对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);高、中、低浓
度甜地丁水煎液三组小鼠OD值比较差异无统计学意义(P
>0.05)。4组小鼠OD值比较见表1。
表1 4组小鼠OD值比较
组别 只数(n) 浓度(g/mL) OD值(珚x±s)
高浓度 10  0.2  1.53±0.72*
中浓度 10  0.1  1.67±0.22*
低浓度 10  0.05  1.26±0.24*
空白对照组 10 - 0.328±0.247
注:表示与空白对照组比较,*P<0.05。下表同。
3.2 镇痛作用实验结果
高、中、低浓度甜地丁水煎液组、乙酸乙酯萃取物组小
鼠15秒内扭体次数均显著低于空白对照组,差异具有统计
学意义(P<0.05);高、中、低浓度乙酸乙酯萃取物组小鼠扭
体次数比较差异无统计意义(P>0.05);高、中浓度甜地丁
水煎液组小鼠扭体次数显著低于低浓度组,差异具有统计
学意义(P<0.05);水煎液组小鼠扭体次数显著低于乙酸乙
酯萃取物组,差异具有统计学意义(P<0.05)。见表2。
表2 各组小鼠扭体次数比较
组别 只数(n) 浓度 15s内扭体次数(珚x±s)
煎液
高浓度 10  0.2g/mL  37.41±7.62*
中浓度 10  0.1g/mL  34.75±7.66*
低浓度 10  0.05g/mL  51.62±13.06*
乙酸乙酯
高浓度 10  0.2g/mL  57.45±13.07*
中浓度 10  0.1g/mL  49.50±7.51*
低浓度 10  0.05g/mL  59.91±5.57*
阿司匹林组 10  0.2g/kg  11.54±3.07*
空白对照组 10 - 75.3±10.41
3.3 抗炎活性实验结果
甜地丁水煎液各组、乙酸乙酯萃取物各组、阿司匹林组
小鼠耳肿胀度均显著低于空白对照组,差异具有统计学意
义(P<0.05);乙酸乙酯萃取物各组小鼠耳肿胀度比较差异
无统计学意义(P>0.05);甜地丁水煎液中、高浓度组小鼠
耳肿胀度显著低于低浓度组,差异具有统计学意义(P<
0.05);甜地丁水煎液各组小鼠耳肿胀度均显著低于乙酸乙
酯萃取物各组,差异具有统计学意义(P<0.05)。见表3。
4 讨论
甜地丁为米口袋属豆科植物,其化学成分以黄酮、挥发
油、有机酸类、甾醇、萜为主[2]。现代药理学研究显示[3],米
口袋属植物具有抗炎、抗菌、抗氧化等作用,主要用于治疗
腹泻、肠炎、化脓性炎症、阑尾炎、痢疾等,其不仅是民间常
用药,更是多种中成药的重要原料。
表3 各组小鼠的耳肿胀度比较
组别 只数(n) 浓度 肿胀度(珚x±s,mg)
煎液
高浓度 10  0.2g/mL  7.06±1.25*
中浓度 10  0.1g/mL  7.52±0.73*
低浓度 10  0.05g/mL  8.30±0.76*
乙酸乙酯
高浓度 10  0.2g/mL  10.74±3.54*
中浓度 10  0.1g/mL  9.92±3.55*
低浓度 10  0.05g/mL  9.12±3.43*
阿司匹林组 10  0.2g/kg  5.61±2.33*
空白对照组 10 - 13.7±2.80
  甜地丁含有皂苷、多糖、氨基酸、黄酮等活性物质,具有
补益功效[4]。一般来说,中药的治疗效果是整体有效成分
群共同作用的结果,甜地丁多以水煎液形式入药,故在免疫
活性实验研究中选用了水煎剂。血清溶血素水平是反映机
体非特异性免疫功能的重要指标,通过测定溶血值,可了解
B细胞增殖分化情况以及体液在补体结合后的溶血素分泌
能力,监测给药与未给药小鼠的溶血素值,可反映甜地丁对
机体免疫功能的影响[5]。研究结果显示,高、中、低浓度甜
地丁水煎剂组小鼠OD值均显著高于空白对照组,差异具有
统计学意义(P<0.05),但组间比较无统计学差异(P>
0.05)。提示甜地丁水煎液能有效刺激B细胞分化增殖,使
之转变为浆细胞,从而增强机体免疫功能。
甜地丁具有消痈散疖、清热解毒的功效,是治疗痈疽疔
疫、丹毒、黄疸、目赤肿痛等证的常用药[6]。小鼠醋酸致扭
体实验结果显示,不同浓度甜地丁水煎剂、乙酸乙酯提取物
均能有效减少扭体次数,对化学致痛具有良好的止痛效果,
且以甜地丁水煎剂的镇痛效果更优。
甜地丁作为民间常用中草药,被广泛用于腹泻、阑尾
炎、肠炎、痢疾等多种炎症的临床治疗,其抗炎作用广泛。
炎症是机体的一种防御性反应,在人类疾病中十分常见,组
织增生、血管反应、局部组织损伤等均属于炎症范畴。小鼠
耳廓肿胀实验结果显示,甜地丁乙酸乙酯提取物、水煎液均
能有效抑制小鼠耳廓肿胀,表明甜地丁可有效抑制局部组
织损伤引起的炎症反应,具有良好的抗炎活性。
综上所述,甜地丁水煎液和乙酸乙酯萃取物均具有良
好的免疫活性、抗炎活性、镇痛作用,且乙酸乙酯萃取物活
性强于水煎液。
参考文献:
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(责任编辑:尹晨茹)
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