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砂生槐种子水提物的S_(180)小鼠体内抗肿瘤及免疫调节作用



全 文 :华西药学杂志WCJ· PS 2008, 23(4):424 ~ 426   
作者简介:贺学强 ,男 ,正攻读消化内科专业的硕士学位。
*通讯作者(Correspondentauthor)
砂生槐种子水提物的 S180小鼠体内抗肿瘤及免疫调节作用
贺学强 1 ,郭 君 2*
(1.中国人民解放军第 181中心医院 , 广西 桂林 541002;2.桂林医学院基础医学院 , 广西 桂林 541002)
摘要:目的 研究砂生槐种子水提取物(SMSWE)的小鼠体内抗瘤作用 , 探讨其抗癌及免疫调节的意义。方法 以 S180荷瘤
小鼠为研究对象 , 分别观察 SMSWE各剂量组对 S180荷瘤小鼠的抑瘤率 、生存期 、胸脾指数 、T淋巴细胞增殖活性以及白细胞介
素 -2(IL-2)和肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)等血清细胞因子的影响和变化。结果 SMSWE1.2 ~ 2.4 g·kg-1均可抑制肿瘤
的生长和延长小鼠带瘤生存时间(P<0.05), 高剂量组的抑瘤率高达 41.4%。 SMSWE0.6 ~ 2.4 g·kg-1可促进 ConA诱导的
T淋巴细胞增殖反应 ,中 、高剂量药物组与荷瘤对照组比较具有统计学意义(P<0.05), 其血清中 IL-2、TNF-α的含量明显
高于荷瘤对照组(P<0.05)。结论 SMSWE能明显抑制 S180小鼠体内肿瘤生长 , 具有提高荷瘤小鼠细胞免疫功能的作用。
关键词:砂生槐种子水提取物;体内抗肿瘤;免疫活性调节
中图分类号:R96  文献标识码:A   文章编号:1006-0103(2008)04-0424-03
Anti-tumorandimmunologicaleffectsofwaterextractsfromSophoraMoorcroftianaseed
onS180 sarcomainmice
HEXue-qiang1 , GUOJun2*
(1.181stHospitalofthePeople′sLiberationArmy, Guilin541002, China;2.SchoolofBasedMedicineofGuilinMedicalColege, Guilin
541002, China)
Abstract:OBJECTIVE Tostudytheanti-tumoreffectofwaterextractsubstancefromwaterextractsfromSophoraMoorcroftiana
seed(SMSWE)invivoonmice.METHODS S180 -bearingmicewereusedtoassaytheinhibitoryrateoftumor, survivalperiod, in-
dexesofthymus, andspleen, theproliferativeabilityofTlymphocytesandthelevelofIL-2、TNF-α.RESULTS 1.2 to2.4 g·
kg-1ofextractscouldinhibitthegrowthofS180 tumorinmice, prolongthesurvivalperiod(P<0.05), promotetheproliferativeabilityof
Thymphocytes(P<0.05).Theinhibitoryrateof2.4g·kg-1 was41.1%.ThecontentofIL-2 andTNF-αwassignificantlyhigher
thanS180 -bearingmicegroups(P<0.05).CONCLUSION SMSWEcouldinhibitthetumorgrowthinS180 -bearingmiceandthe
functionofimmunesystemwasenhanced.
Keywords:WaterextractsfromSophoraMoorcroftianaseed;Anti-tumoronmice;Immunologicalregulation
CLCnumber:R96    Documentcode:A   ArticleID:1006-0103(2008)04-0424-03
  砂生槐 SophoraMoorcroftiana泛指豆科槐属 ,西
藏又名狼牙刺 、刺紫 ,产于西藏波密 、拉萨 、米林等
地 ,为西藏高原特有植物种 。砂生槐具有抑菌 、抗病
毒 、抗心率失常 、调节免疫等多种药理学作用 [ 1] 。
从砂生槐种子中提取的脂溶性生物碱具有抑菌 、抑
瘤的作用 [ 2] ,还具诱导 SCG-7901细胞凋亡的作
用 [ 3] 。因此 ,作者首次研究了砂生槐种子的水提取
物(SMSWE)在小鼠体内的抗肿瘤作用。
1 实验部分
1.1 试药 、动物与仪器
砂生槐种子水提取物由兰州理工大学杨云裳博
士馈赠;RPMI-1640培养基(美国 Invitrogen);小牛
血清(杭州四季青生物有限公司);刀豆蛋白 A(co-
nA)、四甲基偶氮唑蓝(MTT)、白细胞介素 -2(IL-
2)、肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)(华美生物工程公
司);环磷酰胺(CTX,江苏恒瑞医药股份有限公司 ,
批号:06050821);二甲亚砜(DMSO)为分析纯 。小
鼠 S180肉瘤腹水型细胞株(兰州大学药理研究所 ,由
本研究所定期腹腔接种传代保种);清洁级昆明种小
鼠(兰州大学医学实验动物中心合格证:医动字第
14-005号), 6 ~ 8周龄 , 22±2g, ♀♂兼用。 YJ-875
超净工作台(苏州净化设备公司);DG-3022酶联免
疫测定仪(华东电子医疗设备厂)。
1.2 方法与结果
1.2.1 肿瘤模型的建立 将接种 S180肉瘤细胞 7 d
后生长良好的小鼠 ,颈椎脱臼处死 ,置 75%的酒精
中浸泡 10min,置超净工作台上 ,从腹腔抽出的乳白
色腹水 ,用无菌生理盐水按 1:4比例配制成瘤细胞
悬液(2×106·ml-1),均在无菌环境中操作。荷瘤小
DOI :10.13375/j.cnki.wcjps.2008.04.011
鼠与对照组相比 ,活动减少 ,精神较差 ,饮水 、饮食减
少;药物治疗组小鼠活动增多 ,体重增加 ,精神尚可 。
1.2.2 分组及给药 将 60只小鼠均分为 6组 ,对
照组 10只;余 50只每只右腋皮下接种 0.2 ml瘤细
胞悬液 , 24 h后随机均分为荷瘤对照组 、环磷酰胺
阳性对照组及 SMSWE0.6、1.2、2.4 g·kg-1剂量组 。
对照组和荷瘤空白对照组 ig生理盐水;阳性药对照
组 sc20 mg·kg·d-1环磷酰胺连续给药 5d;3个剂量
组接种第 2天开始 ig给药 ,每天 1次 ,连续 10d,第
11天处死小鼠 。
1.2.3 脾细胞悬液的制备 给药结束后第 1天小
鼠眼球采血后颈椎脱臼处死小鼠 ,无菌条件下取出
肿瘤组织 ,脾脏分别置盛有 RPMI-1640培养液的
培养皿中 ,将脾脏剪碎后用玻璃针心轻轻挤压 ,使
细胞分散为悬液 ,用 200目不锈钢网滤出单细胞悬
液 ,经 1×103 r·10 min-1洗涤 2次后 ,用 RPMI-
1640培养液调细胞浓度至 5×106·ml-1。
1.2.4 肿瘤抑制率的测定 停药后第 1天处死小
鼠 ,剥离完整肿瘤组织 ,电子天平称量瘤体湿重(精
确到 0.001)并计算肿瘤生长抑制率。肿瘤组小鼠
平均质量小于 1表示肿瘤生长不良 ,实验组小鼠死
亡率超过 20%表示药物所致毒性 。实验显示 ,
SMSWE中 、高剂量组对 S180小鼠的生长具有一定抑
制作用 ,抑瘤率分别为 34.9%, 41.4%。与荷瘤对
照组比较均有显著性差异 (P<0.05、P<0.01)
(表 1)。
表 1 SMSWE对 S180荷瘤小鼠的影响( x±s, n=10)
Table1 InfluenceofS180 sarcomainmicebySMSWE( x±s, n=10)
Groups Dose/mg·kg-1 肿瘤重量 /g 抑瘤率 /% 生存时间 /d 生命延长率 /% IL-2/ng·ml-1 TNF-α/ng·ml-1
Blank - - - 40±2.2 - 4.97±2.21 1.97±1.23
Model - 1.11±0.11 - 24±3.2 - 3.72±2.26 1.58±0.95
CTX 20 0.61±0.16 49.9% 38±2.2 58 4.01±2.61 1.81±1.19
Ldose 600 0.83±0.12 25.2% 30±2.1 25.1 3.86±2.26 1.61±1.12
Mdose 1200 0.72±0.13* 34.9% 32±1.7* 33.3 4.26±2.97* 1.78±1.21*
Hdose 2400 0.65±0.20** 41.4% 35±1.1** 45.7 4.51±2.56* 1.89±0.46*
Comparedwithmodelgroup:*P<0.05, **P<0.01
1.2.5 对 S180荷瘤小鼠生存天数和生命延长率的
影响 生命延长率(%)=(给药组平均存活天数 -
模型组平均存活天数)/模型组平均存活天数 ×
100%。砂生槐种子水提取物对 S180荷瘤小鼠的生
存天数和生命延长率的影响由表 1可见 , SMSWE能
够明显延长小鼠带瘤生存时间 ,各剂量组小鼠平均
存活时间均延长 ,中 、高剂量组明显高于荷瘤对照组
(P<0.05、P<0.01)。
1.2.6 对小鼠免疫器官的影响 ig给药后次日 ,解
剖小鼠 ,取出胸腺 、脾脏 ,计算脏器重量 、脏器指数 。
实验中显示 ,各剂量组的胸腺和脾脏指数与荷瘤对
照组比较无显著差异(P>0.05)。
1.2.7 荷瘤小鼠 T淋巴细胞增殖活性的测定 应
用噻唑蓝比色法(MTT法)测定 T淋巴细胞转化活
性 ,以 570、630 nm为参比波长进行比色 ,测 A值 。
以刺激指数(SI)作为判断淋巴细胞增殖的程度 。
SI=A实验孔 /A对照组;淋巴细胞转化率 =(A实验孔 -
A对照孔)∕ A对照孔 ×100%。结果显示 ,低剂量组与荷
瘤对照组比较无显著差异。中 、高剂量组小鼠 ConA
诱导的脾淋巴细胞增殖反应高于对照组 (P<
0.05)。中剂量药物组与阳性组比较有非常显著性
差异(P<0.01)(图 1)。
1.2.8 细胞因子的测定 采用小鼠 IL-2、TNF-α
图 1 SMSWE对 S180荷瘤小鼠脾 T淋巴细胞增殖活性影响
Fig1 InfluenceofpromotetheproliferativeabilityofTintheS180 -
bearindismicebySMSWEat48h
放免试剂盒 ,严格按照说明书操作 。从表 1可看出 ,
荷瘤小鼠的血清中 IL-2、TNF-α水平较对照组明
显降低。 SMSWE中 、高剂量组荷瘤小鼠的血清中
IL-2、TNF-α含量显著高于荷瘤对照组 (P<
0.05)。
1.2.9 统计学方法 用 SPSS10.0统计软件分析。
各组间均数比较采用单因素方差分析 ,实验组与对
照组间均数比较用独立样本 t检验 。
2 讨论
文中对小鼠体内抗肿瘤试验结果显示 ,砂生槐
种子水提物(SMSWE)具有明显的抗肿瘤作用 ,中 、
高剂量组的抑瘤率分别可达 34.9%、35.6%;与荷
425第 4期 贺学强 , 等。砂生槐种子水提物的 S180小鼠体内抗肿瘤及免疫调节作用    
华西药学杂志WCJ· PS 2008, 23(4):426 ~ 428   
瘤组相比 ,能显著提高荷瘤小鼠的生存时间 ,其中 ,
高剂量组生命延长作用效果显著(P﹤ 0.01),且未
出现小鼠体重和免疫器官指数显著降低 ,说明各剂
量组短期内对小鼠免疫系统无明显抑制作用 。
SMSWE对 T淋巴细胞增殖有促进作用 ,中 、高剂量
组能促进刀豆蛋白 A诱导的荷瘤小鼠增殖活化 T
淋巴细胞(P<0.05)。
SMSWE中 、高剂量组可刺激小鼠血清中 TNF-
α、IL-2水平明显升高 。高剂量药物组与荷瘤对照
组比较 ,血清中 IL-2, TNF-α含量均有显著性差
异(P<0.05)。由此可见 , SMSWE可能通过增强荷
瘤小鼠体内细胞因子的分泌 、调节淋巴细胞的增殖
活性等途径 ,而呈现抗肿瘤效果。
综上所述 ,砂生槐种子水提物对 S180荷瘤小鼠
具有明显抗肿瘤效果 ,且能调节荷瘤小鼠的免疫活
性 ,值得进一步研究 。
参考文献:
[ 1]   中国医学百科全书编委会 ,中国医学百科全书·藏医学 [ M].
第一版.上海:上海科技出版社 , 1999.204.
[ 2]   马兴铭 ,李红玉.西藏砂生槐生物碱抑菌抑瘤的实验研究
[ J] .兰州大学学报(自然科学版), 2003, 39(6):74-76.
[ 3]   马兴铭 ,李红玉.砂生槐种子生物碱诱导 SCG-7901细胞调
亡的实验研究 [ J].中成药 , 2004, 26(8):654.
收稿日期:2007-06
作者简介:黎凤明(1979-),男 ,正攻读烧伤整形专业的硕士学位。
*通讯作者(Correspondentauthor)
曲尼司特对大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合及瘢痕形成的作用
黎凤明 ,许学文 ,于 蓉 ,陈俊杰 ,岑 瑛*
(四川大学华西医院烧伤整形科 ,四川 成都 610041)
摘要:目的 探讨曲尼司特在大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合及瘢痕形成中的作用。方法 制作大鼠深 Ⅱ度烫伤模型 ,并随机分
为曲尼司特组和对照组 ,分别在伤后 14 d和创面愈合时取标本 , 比较两组创面的愈合时间 、Ⅰ /Ⅲ型胶原的含量及比例 、胶原
的总含量及创面愈合时成纤维细胞的超微结构。结果 两组创面痊愈时间无明显差别 , 实验组的Ⅰ / Ⅲ型胶原含量及比例和
总胶原含量明显降低 、成纤维细胞超微结构呈现功能降低改变。结论 曲尼司特对大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合无明显影响 ,但
可降低创面胶原含量 ,对大鼠烧伤创面愈合后早期瘢痕形成具有一定抑制作用。
关键词:曲尼司特;烫伤;创面愈合;瘢痕
中图分类号:R965  文献标识码:A   文章编号:1006-0103(2008)04-0426-03
EffectsofTranilastonthewoundhealingandscarformationofdeeppartial-thicknessburn
inrats
LIFeng-ming, XUXue-wen, YURong, CHENJun-jie, CENYing*
(DepartmentofBurnandPlastic, WestChinaHospital, SichuanUniversity, Chengdu610041, China)
Abstract:OBJECTIVE  ToinvestigatetheeffectsofTranilastonthewoundhealingandscarformationofdeepⅡ degreeburn
woundinrats.METHODS ThemodelofdeepⅡ degreeburnwoundwasusedandtheanimalswererandomizedequallyinto2groups
(24/group), theexperimentalgroupandthecontrolgroup.Biopsiesweredoneonthe14thdayandcuringday.Healingtime, Ⅰ /Ⅲ
colagenratio, thetotalcollagencontentandtheultrastructureoffibroblastwerecompared.RESULTS Thereisscarcelyanydiffer-
encebetweentwogroupsinwoundhealingtime.Comparingwiththecontrolgroup, theexperimentalgroupshowedamarkedlylowerⅠ /
Ⅲcolagenratioandthetotalcollagencontent.Alsotheultrastructureoffibroblastintheexperimentalgroupwaschanged.CONCLU-
SION TranilastshowsnoobviouslyeffectonthewoundhealingofdeepⅡ degreenoundinrats.Sinceitcansignificantlydecrease
woundcollagencontent, itmayhasthepotentialofinhibitiveefectonpost-burnscarformationinearlyperiod.Itwillbeapromising
therapyforpreventionfrompost-burnscarformationinearlystage.
Keywords:Tranilast;Burn;Woundhealing;Scar
CLCnumber:R965    Documentcode:A   ArticleID:1006-0103(2008)04-0426-03
  病理性瘢痕是烧伤和创伤创面愈合后患者面临
的一大难题 ,对患者的身体和精神带来严重损害 ,其
发病机制尚不完全清楚 ,治疗也一直是困扰整形外
科的一大难题 。曲尼司特(Tranilast, TNL)通过抑制