全 文 ：高效液相色谱法测定苋菜黄连素胶囊中盐酸小檗碱的含量
林 强 (福州市药品检验所 福州 350007)
摘要: 目的　建立了一种快速、准确的高效液相色谱法测定苋菜黄连素胶囊中盐酸小檗碱的含量的方法。方法　色谱柱 HypersiL ODS2( 5μm,
250mm× 4. 6mm)流动相:乙腈 - 0. 033%磷酸二氢钾 ( 45∶ 55) ;流速: 1m L· min- 1;检测波长: 350nm;柱温:室温 ;进样量: 20μL。结果　盐酸小
檗碱进样量在 0. 05μg～ 0. 30μg范围内线性良好 , r= 0. 9999。平均回收率为 99. 86% , RSD= 1. 07% ( n= 9)。结论　试验结果表明本法简便快
速 ,重现性好 ,结果准确可靠 ,可以作为苋菜黄连素胶囊中盐酸小檗碱含量测定的方法。
关键词: 苋菜黄连素胶囊 ;盐酸小檗碱 ;含量测定
中图分类号: R927. 2　文献标识码: A　文章编号: 1006-3765( 2005) 06-0082-02
Determination of Berberine in xiancaihuangliansu Capsule by HPLC
LIN Qiang (Fuzhou Institute for Drug Control ; Fuzhou 350007;China )
ABSTRACT: OBJECTIVE　 To establish a rapid and accurate method for detemining berberine in xiancaihuan-
gliansu capsule by HPLC. METHODS　 The Chromatog raphic condi tions included Hypersil ODS2 ( 5μm, 250mm
× 4. 6mm ); the mobile phase was acetont rile and 0. 033% po tassium phossphate monobasic ( 45∶ 55) ; the f low
rate w as 1mL· min- 1 ; the detection waveleng th w as 350nm; column temperature at room temperature. RE-
SULTS　 There w ere good linear relationship for berberine wi th the range of 0. 05μg～ 0. 30μg, r= 0. 9999 , the
average recoveries were 99. 86% , RSD= 1. 07% ( n= 9) . CONCLUSION　 The method is simple and rapid, the
results is accurate and good reproducible. It can be used control the quli ty of berberine in xiancaihuangliansu cap-
sule.
KEY WORDS: HPLC; Berberine; Assay
　　苋菜黄连素胶囊是治疗腹泻的新药 ,由铁苋菜、
黄连素、甘草制成。国家药品标准〔 1〕采用薄层色谱法
鉴别盐酸小檗碱 ,采用先过柱 ,然后用紫外分光光度
法测定盐酸小檗碱的含量。操作繁琐、费时。本文参
考文献〔 2、 3〕采用高效液相色谱法测定苋菜黄连素胶
囊中盐酸小檗碱的含量 ,操作简便 ,重现性好 ,结果
准确。
1　仪器与试药
AgiLent 1100系列高效液相色谱仪 ;盐酸小檗
碱对照品 (中国药品生物制品检定所 ,批号: 110713
- 200208) ;苋菜黄连素胶囊 (市售 ,批号为: 050401、
050402、 050503) ;乙腈为色谱纯 ;甲醇、磷酸二氢钾
为分析纯。
2　试验方法和结果
2. 1　色谱条件 色谱柱 HypersiL ODS2 ( 5μm,
250mm× 4. 6mm ) (大连依利特 ) ;流动相: 乙腈 -
0. 033%磷酸二氢钾 ( 45∶ 55) ;流速: 1mL· min- 1;
作者简介:林强 ,女 ( 1970. 10～ ) ,毕业于中国药科大学药物分析理学
士。职称:主管药师。从事药品检验工作。联系电话: 0591- 88030312
检测波长: 350nm;柱温:室温。
2. 2　线性关系　精密量取盐酸小檗碱对照品
10. 00mg置 100mL量瓶中 ,用甲醇溶解并稀释至刻
度 ,摇匀 ,精密量取 5mL置 50mL量瓶中 ,加甲醇稀
释至刻度 ,即制成每 mL含盐酸小檗碱 10μg的对照
品溶液。在上述色谱条件下 ,分别精密吸取对照品溶
液 5μL, 10μL, 15μL, 20μL, 25μL, 30μL注入液相色
谱仪 ,记录峰面积 ,以峰面积为纵坐标 ,进样量 (μg )
为横坐标绘制标准曲线 ,结果盐酸小檗碱在 0. 05μg
～ 0. 30μg范围内线性良好。
回归方程为: A= 3. 725× 103X+ 2. 5, r =
0. 9999。
2. 3　精密度试验　吸取对照品溶液 20μL,连续重
复进样 6次 ,记录色谱峰面积 , RSD为 0. 3% 。
2. 4　重复性试验　取同一批号样品 ,按 样品测定
项下的方法 ,测定 6次 ,其含量测定结果的 RSD为
0. 6%。
2. 5　稳定性试验　取 2. 7项下的样品溶液在室温
下放置 0h、 1h、 2h、 3h、 4h、 5h、 6h,按上述色谱条件试
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海峡药学　 2005年　第 17卷 第 6期
验 ,记录色谱峰 ,峰面积基本不变。
2. 6　阴性干扰试验　取阴性对照样品 (缺黄连素 ) ,
精密称取适量 ,按样品测定方法进行测定 ,记录色谱
图。结果盐酸小檗碱对照品相应位置上无干扰峰出
现 ,说明处方中其它成分对测定结果无干扰 (见图
1)。
图 1　 HPLC色谱图
A. 盐酸小檗碱对照品　 B. 样品　 C. 阴性对照
1.为盐酸小檗碱
2. 7　回收率试验　采用加样回收法 ,分别精密称取
已知含量的样品适量 ,分别精密加入浓度为
0. 989mg· mL- 1盐酸小檗碱对照品 3mL, 5mL,
7mL,按 样品测定 项下的方法测定回收率 ,结果
(见表 1)
表 1　回收率测定结果 ( n= 9)
序　号
样品中盐酸小檗碱含量
( mg)
加入盐酸小檗碱量
(mg )
测得量
( mg)
回收量
( mg)
回收率
(% )
平均回收率 (% ) RSD(% )
1 7. 148 2. 967 10. 110 2. 962 99. 83
2 7. 148 2. 967 10. 121 2. 973 100. 20
3 7. 148 2. 967 10. 056 2. 908 98. 01
4 5. 091 4. 945 10. 113 5. 022 101. 56
5 5. 091 4. 945 10. 020 4. 929 99. 68 99. 86 1. 07
6 5. 091 4. 945 10. 004 4. 913 99. 35
7 3. 133 6. 923 10. 052 6. 919 99. 94
8 3. 133 6. 923 9. 989 6. 856 99. 03
9 3. 133 6. 923 10. 137 7. 004 101. 17
3　样品测定
　　取苋菜黄连素胶囊 10粒 ,精密称取内容物适量
(约相当于盐酸小檗碱 10mg )至 100mL量瓶中 ,加
甲醇适量超声振荡 30min使溶解 ,加甲醇稀释至刻
度 ,摇匀 ,过滤 ,精密量取续滤液 5mL置 50mL量瓶
中 ,加甲醇稀释至刻度。 用 0. 45μm滤膜滤过 ,滤液
为供试品溶液。按上述色谱条件 ,分别取对照品溶液
和供试品溶液各 20μL注入液相色谱仪中 ,记录色谱
图 (见图 1) ,记录峰面积 ,按外标法计算含量 ,结果
(见表 2)
表 2　样品的含量测定结果 (n= 2)
批号 HPLC(% ) 紫外分光光度法 (% )
050401 99. 8 99. 5
050402 101. 2 102. 0
050503 100. 9 100. 3
4　讨论
4. 1　盐酸小檗碱含量的测定方法较多　本文采用
高效液相色谱法测定苋菜黄连素胶囊中盐酸小檗碱
的含量 ,从表 2可见结果与现行标准的方法测定结
果比较未见显著性差异 ,可以作为苋菜黄连素胶囊
中盐酸小檗碱的含量测定方法 ,并可用于盐酸小檗
碱的鉴别 ,方法简便 ,快速 ,准确 ,有适用价值。
4. 2　检测波长的选择　盐酸小檗碱在 350nm处有
最大吸收 ,灵敏度高 ,且杂质无干扰 ,故选择 350nm
为检测波长。
4. 3　流动相的选择　本实验根据文献〔 2、 3〕对不同比
例的乙腈-0. 033%磷酸二氢钾流动相进行选择 , 选
用乙腈-0. 033%磷酸二氢钾 ( 45∶ 55)为流动相 ,出
峰时间快 ,能达到分离的效果。
参考文献
〔1〕国家药品监督管理局标准 (试行 ) WS- 660( Z- 123) - 2001〔S〕.
〔 2〕国家药典委员会编 .中国药典 (一部 ) 〔S〕 . 北京 ,化学工业出版
社 , 2000, 525.
〔3〕何兴富 ,左承学 ,褚福胜 . HPLC法测定复方黄连素片中盐酸小檗
碱的含量〔 J〕 .华西药学杂志 , 1999, 14( 2): 132～ 133.
· 重要启事·
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《海峡药学》编辑部
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Strai t Pharmaceutical Journal Vol 17 No. 6 2005