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民间药随手香的急性毒性及抗炎镇痛作用研究



全 文 :成都中医药大学学报
Journal of Chengdu University of TCM
2012 年 6 月第 35 卷第 2 期
June. 2012,Vol. 35,No. 2
民间药随手香的急性毒性及抗炎镇痛作用研究
陈佳妮 蒋桂华 杨莎 赵芙蓉
(成都中医药大学 药学院 中药材标准化重点实验室 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地,四川 成都 611137)
摘 要:目的:研究川产民间药随手香的急性毒性及部分药效作用。方法:采用急性毒性试验考查随
手香的急性毒性;采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、醋酸致小鼠扭体反应实验,研究随手香的抗炎与镇痛作
用。结果:通过急性毒性试验表明随手香无明显的急性毒性,安全性较好;二甲苯致小鼠耳廓急性炎症实
验表明,随手香具有较好的抗炎作用;醋酸致小鼠扭体反应实验表明,随手香具有较好的镇痛作用。结
论:初步判定川产民间药随手香急性毒性小,安全性较好,且具有抗炎、镇痛的作用,与民间用法相符。
关键词:随手香;急性毒性;抗炎;镇痛
中图分类号:R282. 71;R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1004-0668 (2012)02-0078-03
基金项目:国家“十一·五”科技支撑计划 (编号:2007BAI10B07 - 02)
作者简介:陈佳妮,女,1986 年生,在读研究生;通讯作者:蒋桂华,女,1970 年生,硕士,教授;研究方向:中药品种
质量与资源开发。
Acute Toxicity and Anti-inflammatory,Abirritation Effects
on Sichuan Folk Medicine Acorus Gramineus Soland
CHEN Jia-ni,JIANG Gui-hua,YANG Sha,et al
(Chengdu University of Traditional Chinese Medicine College of Pharmacy,The Sstandardized Key Laboratories of Chinese Herbal Medicine,
The State Key Laboratory Cultivation Base Was Builded by Provincial Department to Research
the Resources System and Development and Utilization of Traditional Chinese Medicine,Chengdu,611137,China )
[Abstract] Objective:To research the acute toxicity and the anti-inflammatory,abirritation effects of Sichuan folk medicine
Acorus gramineus Soland. Methods:The acute toxicity tests check with Acorus gramineus Soland of acute toxicity. Mouse auricular in-
tumesce model induced by dimethylbenzene,and acetic acid writhing was used in the anti-inflammatory and analgesic effects of Acorus
gramineus Soland. Results:Through the acute toxicity tests show that Acorus gramineus Soland has no obvious acute toxicity,security
is better. Anti-inflammatory effect was found in Acorus gramineus Soland through the auricular intumesce experiment. Acorus gramineus
Soland had abirritation effect in the acetic acid writhing experiment. Conclusion:The preliminary judgement of Sichuan folk medicine
Acorus gramineus Soland is the smaller acute toxicity and security is better. Acorus gramineus Soland has anti-inflammatory and analge-
sic effects,its agree with the folk usage.
[Key words]:Acorus gramineus Soland;acute toxicity;anti-inflammatory;abirritation
随手香为天南星科菖蒲属植物金钱蒲 Acorus
gramineus Soland. 的干燥全草,又名洗手香、带手
香、路边香、三柰香。在四川民间很多地区以其入
药,具有行气止痛,祛风逐寒,解毒利水,豁痰开
窍等功效。用于痰迷心窍,神志昏迷,牙关紧闭,
胸闷腹痛,湿浊中阻,风湿关节痛,疝痛,水肿;
外用治无名肿毒,且香气浓郁而持久[1-2]。就目前
来看,其药理作用方面的研究尚处于空白,故本文
进行了随手香急性毒性实验、抗炎和镇痛实验研
究,为进一步研究提供了科学依据。
1 材料
1. 1 受试药物
随手香水煎液,急性毒性试验所用浓度为 5 g /
mL,小鼠耳肿胀实验与醋酸扭体实验所用高浓度为
0. 75 g /mL、中浓度为 0. 375 g /mL、低浓度为
0. 1875 g /mL。制法:将随手香全草进行粉碎,粉末
过 2号筛。称取粉末,依次分别用 8 倍、6 倍、4 倍
蒸馏水提取 3次,时间分别为 1 h、40 min、30 min,
·87·
DOI:10.13593/j.cnki.51-1501/r.2012.02.027
第 2 期 陈佳妮 等 民间药随手香的急性毒性及抗炎镇痛作用研究
滤过,合并滤液,然后将滤液浓缩至最大浓度,避
光冷藏备用;耳肿胀实验与醋酸扭体实验所需浓度
是将最大浓度稀释成所需浓度,避光冷藏备用。
阿司匹林肠溶片,拜耳医药保健有限公司,批
号 BJ01051,进口药品注册证号 H20080331;小鼠
实验剂量为 0. 6 g /Kg,药物浓度为 0. 03 g /mL,小
鼠灌胃给药体积为 0. 2 mL /10g。醋酸地塞米松片,
天津天药药业股份有限公司,产品批号 0911021,
国药准字 H12020686;小鼠实验剂量为 2 mg /Kg,
药物浓度为 0. 1 mg /mL,小鼠灌胃给药体积为 0. 2
mL /10 g。
1. 2 试剂
二甲 苯,成 都 科 龙 化 工 试 剂 厂,批 号
20101102;冰乙酸,天津市致远化学试剂有限公
司,批号 20101012。
1. 3 实验动物
昆明种小鼠 (普通级) ,体重 18 ~ 22 g,成都
达索生物科技有限公司提供,动物生产许可证编
号:SCXK-2008-24。
1. 4 仪器
YP601N型电子天平,上海精密科学仪器有限公
司;可调式移液器,热电 (上海)仪器有限公司。
1. 5 统计方法
数据用 SPSS 17. 0 专业版统计软件包联合进行
统计分析。
2 方法
2. 1 急性毒性试验[3-4]
选用健康昆明种小鼠 24 只,体重 18 ~ 22 g,
雌雄各半,每组 12 只,实验前禁食不禁水 12 h。
以随手香水煎液最大浓度药液按 0. 4 mL /10 g (体
重)给予小鼠灌胃 1 次,连续灌胃 7 d,并观察 7 d
内小鼠的中毒反应和死亡情况。根据公式:药物浓
度 ×给药体积 ×给药次数 /24 h,计算小鼠的最大
给药量; [每只小鼠的给药量 /小鼠平均体重 (20
g) ]× [成人平均体重 (60 kg) /成人每日最大
用量],计算小鼠的最大给药量倍数。
2. 2 抗炎实验
取健康昆明种小鼠 60 只,体重 (20 ± 2) g ,
雌雄各半,按体重随机分为 5 组,每组 12 只,分
别为:①空白组 (给予灌胃生理盐水 0. 2 mL /
10g) ,②阳性药物组 (灌胃地塞米松 0. 2 mL /
10g) ,③随手香水煎液高剂量组,④随手香水煎
液中剂量组,⑤随手香水煎液低剂量组。各剂量组
均灌胃给药,0. 2 mL /10g体重,1 日 1 次,连续用
药 5 d。于末次给药 30 min后,用可调式移液器吸
取 30 μL二甲苯涂于小鼠右耳两面致小鼠耳肿胀。
1 h后处死小鼠,剪下耳片,用直径 8 mm 的打孔
器分别在左右耳同一部位打下耳片,称重,求左右
耳片重量之差作为肿胀度,并求出肿胀抑制率。抑
制率 = [(空白对照组肿胀度均值-用药组肿胀度
均值) /空白对照组肿胀度均值] × 100 %。
2. 3 镇痛实验
取健康昆明种小鼠 60 只,体重 (20 ± 2) g ,
雌雄各半,按体重随机分为 5 组,每组 12 只,分
别为:①空白组 (给予灌胃生理盐水 0. 2 mL /
10g) ,②阳性药物组 (灌胃阿司匹林肠溶片 0. 2
mL /10g) ,③随手香水煎液高剂量组,④随手香水
煎液中剂量组,⑤随手香水煎液低剂量组。各剂量
组均灌胃给药,0. 2 mL /10 g 体重,1 日 1 次,连
续用药 5 d。于末次给药 30 min后,每只小鼠腹腔
注射 0. 7 %的冰醋酸溶液 0. 2 mL,立即观察并记
录小鼠发生扭体反应的潜伏期和在 15 min 内出现
扭体反应的次数,并按公式计算小鼠扭体反应潜伏
期的延长率 (%)和镇痛率 (%)。
延长率 (%) = [(给药组潜伏期- 空白对照
组潜伏期) /空白对照组潜伏期] × 100%
镇痛率 (%) = [(空白对照组扭体次数- 给
药组扭体次数) /空白对照组扭体次数] × 100%
3 结果
3. 1 急性毒性试验
7 d内有 3 只雄性小鼠死亡,死亡原因为被同
笼小鼠咬死。其余的小鼠给药后出现眯眼、困乏、
行动减少等现象,上述不良反应 12 h 后均消失,
实验动物恢复正常饮食和饮水,推测是由于药物浓
度大、粘稠,大容量灌胃后,动物短时间内胃肠蠕
动障碍,腹部胀满引起。连续观察 7 d,发现动物
体重逐渐增长,未出现死亡现象,处死后系统解
剖,未见明显病理改变。根据所给公式,计算得出
随手香水煎液小鼠最大给药量为 200 g /kg,最大给
药量倍数为成人每日用量的 267 倍 (参照随手香
临床每日最大用量 45 g)。初步判断随手香水煎液
口服给药无明显急性毒性,安全性较好。
3. 2 抗炎实验
结果见表 1。
表 1 随手香对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响
组别
剂量
(g /kg)
动物数
(n) 肿胀度 (mg)
抑制率
(%)
空白组 同体积 12 4. 53 ± 1. 81 -
阳性组 0. 002 12 1. 37 ± 0. 70** 69. 84
高剂量组 15. 0 12 1. 93 ± 1. 02** 57. 36
中剂量组 7. 5 12 1. 65 ± 0. 83** 63. 49
低剂量组 3. 75 12 2. 61 ± 0. 86** 42. 47
与空白组比较,**P < 0. 01
与空白组比较,随手香水煎液的高、中、低 3
个剂量组对二甲苯引起的小鼠耳肿胀均有显著的抑
制作用 (P < 0. 01)。同时 3 个剂量组相比较可以
看出,中剂量组对二甲苯引起的小鼠耳肿胀的抑制
作用最为明显。 (下转第 85 页)
·97·
第 2 期 金丽鑫 等 川芎药材薄层指纹色谱鉴别研究
♂∑Y2i
Xi:10 批川芎样品的相对 Rf值
Yi:10 批川芎样品相对 Rf值的均值
由表可知,不同产地的川芎、山川芎、藁本样
品各自具有较高的相似度,而山川芎与川芎样品相
似度较低,藁本与川芎的差异较大。
3 讨论
3. 1 我们分别建立了川芎中阿魏酸、欧当归内酯
A、藁本内酯薄层指纹色谱鉴别方法,该方法对川
芎中阿魏酸、欧当归内酯 A、藁本内酯的鉴别有较
好的适应性,其方法简便,重现性较好。
3. 2 用建立的薄层指纹色谱鉴别方法对 10 批川芎
样品、3 批山川芎样品及 2 批藁本样品进行了对比
分析,发现川芎、山川芎、藁本在薄层指纹色谱上
有明显的区别,可以此作为鉴别依据。
3. 3 我们参照文献[5]采用 Rf 值进行相似度的计
算。据报道[6]还可采用薄层扫描的方法对每个药
材样品进行扫描从而形成色谱图,计算各指纹峰与
参照物峰的相对峰面积 Ai,s及平方值,采用夹角余
弦公式计算相似度进行评价。由上述色谱图可知,
不同产地的川芎药材在薄层指纹色谱中的共有斑点
较为稳定且分离度较好,所以也可以采用薄层扫描
的方法对其相似度进行评价,且与山川芎药材和藁
本药材比较。
参考文献
[1]国家药典委员会 . 中国药典 [S]. 2010 年版 . 一部.
北京:中国中医药科技版社,2010:38.
[2]沙世炎 . 中草药有效成分分析法 [M]. 北京:人民卫
生出版社,1982:33-34.
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[4]魏敏芸,蔡力行. 不同产地中药材何首乌的薄层指纹
图谱鉴别研究 [J]. 中药材,2007,(8) :24-29.
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谱相似性的新方法:向量夹角法 [J]. 药学学报,
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[6]高鹏,代龙 . 薄层色谱法在中药指纹图谱研究中的应
用 [J]. 山东医药工业,2002. 21 (6) :17-19.
(收稿日期:2012-03-01 责任编辑:薛红
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)
(上接第 79 页)
3. 3 镇痛实验
表 2 随手香对醋酸致小鼠扭体反应的影响
组别
剂量
(g /kg)
动物数
(n)
潜伏期
(min)
延长期
(%) 扭体次数
镇痛率
(%)
空白

同体

12 3. 46 ± 0. 56 - 43. 67 ± 14. 25
阳性

0. 6 12 6. 75 ± 1. 66** 95. 08 15. 58 ± 9. 90** 64. 32
高剂
量组
15. 0 12 4. 14 ± 0. 73 19. 65 27. 67 ± 8. 83** 36. 64
中剂
量组
7. 5 12 5. 13 ± 2. 05** 48. 26 22. 08 ± 7. 35** 49. 44
低剂
量组
3. 75 12 3. 68 ± 0. 85 6. 36 33. 72 ± 6. 28* 22. 78
与空白对照组比较,**P < 0. 01,* P < 0. 05
结果见表 2。与空白对照组比较,随手香水煎
液的高、中、低 3 个剂量组能显著减少小鼠扭体次
数 (P < 0. 05) ,且中剂量组效果最为明显,亦能
显著延长扭体反应潜伏期 (P < 0. 01) ,延长期为
48. 26 %,镇痛率为 49. 44 %。
4 讨论
首次对随手香进行了急性毒性及抗炎、镇痛的
药效学研究,通过急性毒性试验,发现随手香的 1
d最大给药量为成人每日用量的 267 倍,急性毒性
小,安全性较好;二甲苯所致小鼠耳廓急性炎症,
随手香水煎液有明显的抗炎作用;醋酸致小鼠扭体
反应实验结果表明,随手香水煎液有较明显的镇痛
作用。抗炎和镇痛均以中剂量组对其作用最为显
著。综上,初步认为随手香具有抗炎、镇痛作用,
与其行气止痛、消肿解毒之功效相符,与民间用法
一致。
参考文献
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(收稿日期:2012-01-01 责任编辑:薛红)
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