全 文 ：基金项目 江西省春市科技重点计划(编号JXY2005KSA021)。
作者简介 伍晓春(1973-),男,江西高安人,硕士,讲师,从事天然药
物化学研究。
收稿日期 2007!04!17
杏香兔耳风又名白走马胎、金边兔耳草,为菊科植物铁
灯兔耳风(AinsliaeamacroclinidioidesHay.)或杏香兔耳风
(AinsliaeafragransChamp.)的干燥全草[1]。杏香兔耳风全草
主要含黄酮类、无羁萜酮(friedelin)、表无羁萜醇(epifriedeli!
nol)、β!谷甾醇(β!sitosterol)、倍半萜内酯、丁香烯和豆甾醇
等[2]。笔者对不同年限野生及种植的杏香兔耳风总黄酮进行
了含量测定,并进行了比较分析,旨在为杏香兔耳风药材的
栽培及采集提供科学依据。
1 材料与方法
1.1材料 BP!I!5分析天平(上海医用激光仪器厂生产),
HHW!600恒温水浴箱(天津泰斯特生产),TU!1901双光束
紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司生产),
202A!2电热干燥箱(上海阳光实验仪器有限公司生产)等。
甲醇、硝酸铝、氢氧化钠、亚硝酸钠、石油醚等均为分析
纯(上海试剂一厂),芦丁对照品(批号 100080-200306购自
中国药品生物制品检定所);杏香兔耳风由宜春市林业科学
研究所提供,经鉴定为菊科植物杏香兔耳风(Ainsliaeafragrans
Champ.)的全草。
1.2 方法
1.2.1 对照品溶液的制备。精密称取 105℃干燥至恒重的
芦丁对照品 2.725mg,用甲醇溶解,定容至 25ml,摇匀,配
成浓度为0.109mg/ml的芦丁标准品溶液,作为储备液备用。
1.2.2 对照品测定波长的选择。精密吸取对照品溶液5ml,
置25ml容量瓶中,加水至 6ml,精密加入浓度 5%亚硝酸
钠溶液1ml,混匀,静置6min,精密加入10%硝酸铝溶液1
ml,摇匀,静置 6min,精密加入 4%氢氧化钠溶液 10ml,再
加水至刻度,摇匀,放置 15min,以相应试剂作空白[3],于
TU!1901紫外-可见分光光度计上进行全波长扫描,确定后
续试验波长。
1.2.3 线性关系考察。精密吸取对照品溶液 0、0.5、1.0、
1.5、2.0、2.5、3.0ml,分别置于 25ml容量瓶中,加水至 6ml,
按“1.2.2”操作加入各显色试剂,放置 15~20min,以第 1管
作空白,在波长510nm处用紫外可见分光光度计测定吸光
度,以对照品浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
1.2.4 样品溶液的制备。取杏香兔耳风药材80℃干燥5h,
粉碎,过80目筛,精密称取 5.000g,置于150ml三角瓶中,
加入50ml石油醚(馏程60~90℃),于70℃下水浴回流10h,
除去样品中的脂肪,抽滤后挥干石油醚。滤渣置于150ml三
角瓶中,加入蒸馏水50ml,水浴回流提取两次,每次2h,取
出,静置,滤过,用蒸馏水冲洗,滤液定容至 100ml容量瓶
中备用。
1.2.5 仪器精密度试验。精密称取杏香兔耳风样品3.000g,
按“1.2.4”方法提取,显色,在510nm处测定其吸光度,连续
测定5次。
1.2.6 重复性试验。取杏香兔耳风样品5份,每份3.000g,
精密称定,提取后显色,在510nm处测定其吸光度。
1.2.7 稳定性试验。精密称取杏香兔耳风样品3.000g,提取
后显色,分别于0、15、30、45、60min测定其吸光度。
1.2.8 加样回收率试验。取杏香兔耳风样品 6份,每份
1.500g,精密称重,1份测定含量,其余5份分别加入芦丁对
照品适量,在510nm处测定其吸光度。
1.2.9 样品总黄酮含量测定。精密称取不同杏香兔耳风样
品各 3份,按上述方法提取,定容。吸取样品液 5ml置于
野生与种植杏香兔耳风总黄酮含量比较
伍晓春,邹盛勤 (宜春学院生物工程研究所,江西省天然药物活性成分研究重点实验室,江西宜春 336000)
摘要 [目的]为了测定并比较不同年限野生及种植的杏香兔耳风总黄酮的含量,为杏香兔耳风药材的栽培及采集提供科学依据。[方
法]通过仪器精密度、重复性、稳定性和加样回收率试验,分析紫外分光光度法测定杏香兔耳风中总黄酮含量的可行性;采用紫外分
光光度法,对不同生长年限野生及种植杏香兔耳风中总黄酮的含量进行测定。[结果]生长年限和种植方式对杏香兔耳风总黄酮含量
有明显影响。人工种植杏香兔耳风的总黄酮含量较高,比野生杏香兔耳风高20%~50%。1年生种植杏香兔耳风总黄酮含量最高,达
5.92%。[结论]采用紫外分光光度法测定杏香兔耳风中总黄酮的含量,方法准确、快速,操作简便,重现性好,可作为控制杏香兔耳风
药材质量的方法。
关键词 杏香兔耳风;总黄酮;紫外分光光度法
中图分类号 Q946 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2007)23-07093-02
ComparisonofTotalFlavonoidContentbetweenWildandPlantedAinsliaeafragransChamp.
WUXiao!chunetal(KeyLaboratoryofActiveIngredientsinNaturalMedicinesofJiangxiProvince,Bio-engineeringInstituteofYichun
Colege,Yichun,Jiangxi336000)
Abstract [Objective]TheresearchaimedtodetermineandcomparetotalflavonoidcontentinwildandplantedAinsliaeafragransChamp.with
diferentyearstoprovidethescientificbasisforthecultivationandcolectionofmedicinalmaterialsA.fragrans.[Method]Accordingtothe
experimentsonapparatusprecision,repeatability,stabilityandtherecoveryrateofaddedsamples,thefeasibilityofusingultraviolet
spectrophotometrymethodtodeterminethecontentoftotalflavonoidinA.fragranswasanalyzedandthecontentsoftotalflavonoidinwildand
plantedA.fragranswithdiferentyearsweredeterminedbyultravioletspectrophotometrymethod.[Result]Plantingyearsandpaternshad
obviousefectsonthecontentoftotalflavonoidinA.fragrans.ThecontentoftotalflavonoidinA.fragransplantedartificialywashigher,
increasedby20~50%thanthatinwildA.fragrans.Thecontentoftotalflavonoidin1!year!oldA.fragransplantedwashighest,being5.92%.
[Conclusion]Theultravioletspectrophotometrymethodusedtodeterminethecontentoftotalflavonoidwasarapidandsimplemethodwithhigh
accuracyandgoodrepeatabilitywhichcouldbetakenasakindofqualitycontrolmethodformedicinalmaterialsA.fragrans.
Keywords AinsliaeafragransChamp.;Totalflavonoid;Ultravioletspectrophotometry
安徽农业科学,JournalofAnhuiAgri.Sci.2007,35(23):7093-7094 责任编辑 姜 丽 责任校对 王 淼
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2007.23.043
动床的优点也能体现;模拟移动床技术与色谱结合,使色谱
分离从间歇变为连续;模拟移动床模拟了逆流,使得固定相
和流动相能反复利用,从而大大提高了效率,降低了成本;
模拟移动床色谱是在谱带首尾切取馏分,从而使提纯过程
更易控制;模拟移动床引进了精馏、回流机制,使分离能力
和产品收率提高;由于引进了连续机制,从而提高了产率,
克服了移动床和层析色谱的不足。
模拟移动床的分离单元仍是层析色谱柱。将高性能的
动态轴向压缩柱替换常规的层析色谱柱,就得到了模拟移
动床动态轴向压缩色谱。它兼具模拟移动床色谱与动态轴
向压缩柱色谱的优点而克服了其中的不足。相比之下,使用
模拟移动床动态轴向压缩色谱纯化玉米须黄酮比低压正相
和高压反相动态轴向压缩色谱法更省时、省力,成本更低。
动态轴向压缩柱技术与模拟移动床技术结合是玉米须黄酮
及其单体低成本生产的最有效的技术支持。
参考文献
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学,2004.
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学研究与应用,2004,16(3):429-430.
注:a.t=t0;b.t=t0+1/2ΔT;c.t=t0+ΔT;d.t=t0+△T+1/2ΔT。t0为初始时刻;ΔT为切换时间。
图2 模拟移动床运行方式
洗脱液
残余液
洗脱液
残余液
萃取液 萃取液
样品溶液 样品溶液
残余液
洗脱液 萃取液
样品溶液
残余液
洗脱液 萃取液
样品溶液
流动相 流动相 流动相 流动相
a b c d
25ml容量瓶中,分别加水至6ml,加入各显色试剂,放置
15~20min,于510nm处测定吸光度,计算总黄酮含量。
2 结果与分析
2.1 对照品测定波长的选择 最大吸收波长510nm,见图1。
2.2 线性关系考察 标准曲线为 A=0.58727C-0.01742,
r=0.9992。
2.3 仪器精密度试验结果 样品峰面积积分值的 RSD为
0.15%,仪器精密度良好。
2.4 重复性试验结果 样品峰面积积分值的RSD为0.72%,
表明该方法重现性良好。
2.5 稳定性试验结果 样品峰面积积分值的RSD为2.81%,
样品在60min内显色基本稳定。
2.6 加样回收率试验结果 测得杏香兔耳风样品平均回
收率 97.31%,RSD为 1.54%,这表明该方法具有良好的加
样回收率。
2.7 样品总黄酮含量测定结果(表 1) 由表 1可知,人工
种植杏香兔耳风中总黄酮的含量均高于野生,其总黄酮含
量比野生杏香兔耳风高出20%~50%。生长年限越短的杏
香兔耳风总黄酮含量越高,其中1年生种植2005年采集的
杏香兔耳风总黄酮含量最高,达到5.92%。
3 结论与讨论
采用紫外分光光度法测定杏香兔耳风中总黄酮的含
量,方法准确,快速,操作简便,重现性好,可作为控制杏香
兔耳风药材质量的质控方法,对于深入开展杏香兔耳风的种
植驯化研究及资源利用有重要意义。
研究结果表明,生长年限和生长方式对杏香兔耳风总
黄酮含量的影响较大,采收 1年生杏香兔耳风入药较为合
理,为进一步开发利用杏香兔耳风的药用成分提供了参考
依据。
参考文献
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上海科学技术出版社,1999:461.
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(11):486.
[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京:化学工业出版社,
2000:257.
采集年份 样品来源 平均含量∥%
2006 1年生种植 4.54
2年生种植 3.68
3年生种植 3.09
2005 1年生种植 5.92
2年生种植 4.03
3年生种植 3.51
2006 1年生野生 3.54
2年生野生 2.62
3年生野生 2.29
表1 杏香兔耳风总黄酮含量测定结果(n=3)
吸
光
度
A
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安徽农业科学 2007年
(上接第7092页)
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