全 文 ：实用中西医结合临床 2014年 2月第 14卷第 2期
用。（2）保持心肌细胞氧化和抗氧化平衡，阻断脂质
过氧化连锁反应，降低细胞内 Ca2+超负荷，减少
CK-MB酶从心肌细胞中漏出。（3）对心肌超微结构
损伤，特别是肌原纤维及细胞质损伤有明显的保护
作用。（4）对大鼠颈动脉血栓有抑制作用，有促进表
皮细胞合成并释放 PGI2，而不影响 TXA2生物合成
的纤溶作用。（5）能明显抑制家兔血清胆固醇升高
作用，对动脉粥样斑的形成有抑制和消除作用，抗
高脂血症，不增加主动脉、肝脏及肾上腺组织内的
脂质含量。可作为心脑血管疾病治疗的一线药物应
用。
（收稿日期：2013-08-28）
藤梨根拮抗四氯化碳致急性肝损伤作用活性部位的初步筛选
刘雯 1 张娣 1 宋友昕 1 李才堂 1 雷卓 1 刘强 2 罗文花 2
（1江西省中医药研究院 南昌 330046；2江西中医药大学科技学院 2007级中医专业 南昌 330000）
摘要：目的：通过建立四氯化碳（CCl4）致急性肝损伤小鼠模型，测定其血清中谷丙转氨酶（ALT）的含量，对藤梨根不同提取
部位抑制 ALT 升高的作用比较，筛选出具有拮抗肝损伤作用的提取部位。 方法：取藤梨根原药材，经过乙醇提取、乙酸乙酯萃取，
得乙酸乙酯提取部位；过聚酰胺柱洗脱，得不同提取部位，分为 X部位、Y部位、Z部位；小鼠预防性给药 2 d，以 CCl4橄榄油混合物
（1%）2 mL/kg腹腔注射造就小鼠化学性肝损伤模型，第 3 天给药后摘眼球取血，测血清中 ALT 活力。结果：乙酸乙酯部位、X部位、
Y部位均具有拮抗 CCl4致急性肝损伤小鼠血清 ALT 升高的作用，其中 X部位在一定剂量范围内具有量效关系。 结论：含有黄酮
类化合物的藤梨根提取 X部位，具有拮抗 CCl4致急性肝损伤的作用，且在一定剂量范围内具有量效关系。
关键词：藤梨根；活性部位；四氯化碳；急性肝损伤
Initial Screening of the Tengligen Active Site with antagonism of ALI by CCl4
LIU Wen1, ZHANG Di1, SONG You-xin1, LI Cai-tang1, LEI Zhuo1, LIU Qiang2, LUO Wen-hua2
(1Jiangxi Provincial Insititute of Traditional Chinese Medicine, Nanchang330046;
2Science and Technology College of Jiangxi University of TCM, Nanchang330000)
Abstract: Objective: Through the establishment of carbon tetrachloride (CCl4) caused by acute liver injury (ALI) model mice, to
determine the serum levels of alanine transaminase (ALT) in the Tengligen different extraction parts compared to inhibit the action of the
ALT elevations, select the extraction of liver damage parts have antagonism. Method: Take the Tengligen after ethanol extract and ethyl
acetate extraction, ethyl acetate extracted parts; Polyamide column elution, divided into parts X, Y, Z position; Preventive medication 2 d
in mice, by CCl4 olive oil mixture (1%) by intraperitoneal injection of 2 mL/kg chemical liver injury in mice model, 3 d after measured
ALT activity in serum. Results: The ethyl acetate parts, and the X, Y parts have antagonism CCl4 induced acute liver injury in mice serum
ALT elevations, where X parts has concentration-response relationship in certain dose range. Conclusion: Tengligen extract X parts which
contain flavonoids, has antagonism CCl4 induced acute liver injury, and to a certain dose range has the concentration-response relationship.
Key words: Tengligen; Active site; CCl4; Acute liver injury
中图分类号：R285.5 文献标识码：B doi:10.13638/j.issn.1671-4040.2014.02.057
猕猴桃科软枣猕猴桃[Actinidia arguta（Sieb. et
Zucc.）Planch] 和中华猕猴桃（Actinidia chinesis
Planch）的根入药称藤梨根。江西民间有将猕猴桃根
入药的传统，《江西草药》中记载：猕猴桃根四两、红
枣十二枚，水煎当茶饮可治急性肝炎；猕猴桃根一
两、地稔五钱、黄毛耳草五钱、六月雪一两、白茅根
三钱、大腹皮四钱、凤尾草五钱、沙虫五只，水煎服
可治疗肝硬化腹水[1]。现有研究表明，藤梨根的提取
物能够体外抑制食管癌、肺腺癌、胃癌等癌症细胞
的生长[2~4]，乙酸乙酯萃取部分对肝脏损伤有保护作
用[5]；但是对其拮抗肝损伤作用的研究不够深入，报
道较少。因此，我们利用四氯化碳（CCl4）致小鼠急性
肝损伤动物模型，观察藤梨根乙酸乙酯部位对小鼠
肝脏的保护作用，并进一步观察乙酸乙酯部位过柱
洗脱部位 X部位、Y部位的拮抗肝损伤作用，为进
一步筛选出藤梨根中具有拮抗化学性肝损伤的活
性成分提供理论基础。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试验动物 昆明种小白鼠雌雄各半，体重
18~22 g，江西中医药大学动物试验中心提供。按照
体重随机分组，每组 8只，正常饲养。
1.1.2 试验试剂 藤梨根购买于江西省中医院（热
敏灸分院）药房；ALT试剂盒，上海荣盛生物药业有
限公司，Lot：20121101；甘利欣胶囊，江苏正大天晴
药业股份有限公司，Lot：121222102；CCl4，广东省化
学试剂工程技术研究开发中心，AR 级，Lot：
20080220；橄榄油，江西宝荣油脂实业有限公司，家
泰牌，Lot：2012925。
1.1.3 试验器材 离心机：上海医疗器械（集团）有
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实用中西医结合临床 2014年 2月第 14卷第 2期
限公司手术器械厂；紫外分光光度计：日本岛津
UV-2401pc/2450；HH-4数显恒温水浴锅：金坛市江
南仪器厂；体重计：杭州友恒称重设备有限公司
12001。
1.2 试验方法
1.2.1 给药剂量及分组 按照试验要求分为正常
组（Normal）、模型组（Model）、甘利欣阳性药组
（DGL）、乙酸乙酯部位组、X部位组、Y部位组、Z部
位组。根据藤梨根的人临床常用量 30 g/60 kg，折算
成小鼠用量为 0.09 g/20 g。X部位设置三个剂量组，
分别为 0.09 g/20 g、0.18 g/20 g、0.27 g/20 g，甘利欣
按照人给药剂量的最大剂量 9粒 /d（150 mg/粒）折
算成小鼠用药量。以上所有给药组均用蒸馏水配制
药物，用超声仪助溶。按照给药体积 10 mL/kg灌胃
给药，N组和M组给予等体积的蒸馏水。以上给药
量均为生药量。
1.2.2 藤梨根的提取 取 1 kg藤梨根，用 8倍量的
60%乙醇回流提取 2次，2 h/次；浓缩后先以石油醚
萃取，再以乙酸乙酯萃取，回收，得干膏；以聚酰胺
柱进行柱层析，分别以水、20%乙醇、80%乙醇、无水
乙醇洗脱，其中 80%乙醇洗脱部位蒸干，得 X部位，
水 +20%乙醇洗脱部位合并，得 Y部位，无水乙醇洗
脱部位蒸干，得 Z部位。
1.2.3 试验过程 小鼠预防性给药 2 d，第 2天给
药 4 h后，按照给药体积 2 mL/kg对小鼠腹腔注射
1%浓度的 CCl4橄榄油混合物造模，注射后用手指
轻轻揉腹腔，使得混合物均匀分布，禁食不禁水 14
h，第 3天给药后 4 h，摘眼球取血，4℃静置半小时
以上，3 500 rpm离心 5 min，吸取上清。按照 ALT试
剂盒说明书进行操作，紫外分光光度计上 505 nm
处测吸光度 A值。
1.2.4 盐酸镁粉反应 对藤梨根提取部位 X、Y、Z
进行盐酸镁粉显色反应试验。在样品的乙醇溶液中
加入少许镁粉振摇，再滴加浓盐酸几滴，1~2 min后
即显色。黄酮、黄酮醇类等化合物一般显红色到紫
红色，个别显蓝绿色。
1.2.5 统计方法 用 excel软件对数据做 student-T
检验，P＜0.05 表示有差异，P＜0.01 表示有显著性
差异。
2 试验结果
2.1 藤梨根不同提取物对 CCl4致急性肝损伤小鼠
血清 ALT 的影响 见表 1。Model组与 Normal组
比较，P＜0.01，有显著性差异，表示造模成功。阳性
药甘利欣、乙酸乙酯部位、X部位、Y部位均有拮抗
CCl4致肝损伤小鼠血清 ALT升高的作用，Z部位无
效。提示藤梨根乙酸乙酯部位中具有拮抗 CCl4致肝
损伤小鼠血清 ALT升高作用的活性部位为 X部位
和 Y部位。
表 1 藤梨根不同提取物对 CCl4致急性肝损伤小鼠血清 ALT的影响 (X±S)
注：与 Normal 组比较，*P＜0.01，有显著性差异；与 Model 组比较，#P＜
0.05，有差异，##P＜0.01，有显著性差异。
2.2 藤梨根提取 X 部位不同剂量对 CCl4致急性肝
损伤小鼠血清 ALT的影响 见表 2。藤梨根提取 X
部位的高、中、低剂量组与模型组比较，有显著性差
异，P＜0.01；且具有量效关系，y=-15.25x+208.57，
R2=0.915。提示藤梨根提取 X部位的三个剂量组均
具有拮抗 CCl4致肝损伤小鼠血清 ALT升高作用，
并在此剂量范围内具有一定的量效关系。
表 2 藤梨根提取 X部位不同剂量对急性肝损伤小鼠血清 ALT的影响 (X±S)
注：与 Normal 组比较，*P＜0.01，有显著性差异；与 Model 组比较，#P＜
0.01，有显著性差异。
2.3 藤梨根提取各部位盐酸镁粉显色反应结果
藤梨根提取 X部位的盐酸镁粉显色反应结果为阳
性，Y、Z部位为阴性。提示藤梨根提取 X部位中主
要成分为黄酮类化合物，而提取 Y、Z部位不含黄酮
类化合物。
3 讨论
藤梨根又名藤梨、阳桃、木子、猕猴桃根等，主
要分布于东北地区及河北、江西等地，江西全省
90%以上的县市有猕猴桃属植物分布[1]。其性味酸、
涩、凉，可清热解毒、祛风除湿、利尿止血。临床应用
上，多名老中医针对恶性肿瘤的“扶正祛邪”方中，
藤梨根是一味不可或缺的药物，其抗癌作用明显。
姚庆华等将藤梨根、水杨梅根、虎杖根、党参等制成
复方藤梨根制剂，临床药效显著，体外抗肿瘤细胞
作用明显，且机制探讨深入[2]。朱秀山等用壁虎、三
七、大黄、藤梨根、蓬术、太子参和白术制成昭黄散，
临床治疗胃癌取得疗效[3]。张虹等则对温州民间传
统药方“壁虎藤梨根”进行了体外抗肿瘤细胞实验，
抑制作用明显[4]。现有研究表明，藤梨根中主要成分
组别 n
人给药量
（g/60kg）
小鼠给药量
（g/20g）
A值
（505nm）
ALT
（KarU）
Normal组
Model组
DGL组
乙酸乙酯部位组
X部位组
Y部位组
Z部位组
8
8
8
8
8
8
8
1.35
30
30
30
30
4.05
0.09
0.09
0.09
0.09
0.317±0.0262
0.504±0.0287*
0.359±0.0256##
0.464±0.025#
0.435±0.0155##
0.431±0.0327##
0.494±0.0108
135.0±13.1
228.9±14.4*
156.5±12.6##
208.5±12.5#
194.2±7.8##
192.3±16.4##
223.8±5.4
组别 n 人给药量（g/60 kg） 小鼠给药量（g/20 g） ALT（KarU）
Normal组
Model组
X1组
X2组
X3组
8
8
8
8
8
30
60
90
0.09
0.18
0.27
135.0±13.1
228.9±14.4*
194.2±7.8#
172.7±10.4#
165.5±8.3#
87· ·
实用中西医结合临床 2014年 2月第 14卷第 2期
（上接第 21页）电图示室性早搏消失，或动态心电
图示室性早搏小于 240次 /24 h。无效：动态心电图
示室性早搏大于 240次 /24 h，或出现其它心律失
常。
1.5 治疗结果 A 组有效率为 90.0%（126 例），B
组有效率为 61.5%（64例），两组差别有显著意义，χ2
=14.02，P<0.01。A组治疗前室性早搏平均（6 204±
73）次 /24 h，治疗后室性早搏平均（59±8）次 /24 h，
治疗前后比较有显著意义，经配对 t检验，t=17.87，
P<0.01。A组无新的心律失常发生，有 2例出现轻微
上腹部不适，对症治疗后症状消失，未影响治疗。B
组有 6例出现头晕、恶心，6例窦性心动过缓，2例
Ⅰ度房室传导阻滞，1例 QT间期延长。A组显效后
复方丹参滴丸用量不变，美西律减量为每日
150~200 mg，疗效稳定。B组显效后减量疗效不稳
定。
2 讨论
如何提高难治性室性早搏的疗效又减少抗心
律失常药物的副反应是我们临床工作者共同关心
的问题。复方丹参滴丸由丹参、三七、冰片组成，现
代药理实验证明有效成分是丹参素、丹参酮。有资
料表明，复方丹参滴丸抗心肌缺血及室性早搏的主
要机制是[3]：（1）良好的慢钙通道阻滞作用产生扩管
效应；（2）心肌细胞膜稳定，消除氧自由基和能量调
节作用；（3）降低血小板聚集功能，降低血脂和降低
血黏度，改善微循环。本文用复方丹参滴丸联合美
西律治疗有效率为 90.0%，与单用美西律比较明显
地提高了疗效（P<0.01），且副反应少。我们还观察到
心肌缺血的 ST-T改变在 A组改善明显。因此，我们
认为复方丹参滴丸联合美西律治疗难治性室性早
搏疗效好，服用方便，值得临床广泛应用。
参考文献
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药复方丹参现代学术研讨会》,1999.86-87
（收稿日期：2013-12-06）
有三萜类、多糖类、黄酮类、生物碱、挥发油等，针对
其有效成分抗肿瘤、增强免疫力方面的作用已经得
到大量开展[5~8]，而对其保肝降酶作用方面的研究报
道较少，且集中在对三萜类、多糖类成分的研究上
[9~12]。王小平等发现家种藤梨根中总黄酮的含量高达
10%以上[13]，王岚等发现藤梨根正丁醇提取物和总
黄酮苷均有体内抗肿瘤作用[14]。提示总黄酮可能是
藤梨根药效作用的主要物质基础之一。
CCl4致急性肝损伤小鼠模型是传统的肝毒模
型，存在于肝细胞质中的可溶性酶 ALT在肝细胞损
伤后可释放入血，其水平高低可以反应肝细胞损伤
程度，可作为早期肝损伤的指标[15]。CCl4致急性肝损
伤小鼠试验血清 ALT活力结果显示，藤梨根乙酸乙
酯部位、提取 Y部位与 Model组比较，P＜0.05；提
取 X部位的三个剂量组与 Model组比较，P＜0.01；
且提取 X部位在一定的剂量范围内，量效公式为：
y=-15.25x+208.57，R2=0.915；盐酸镁粉反应结果显
示，藤梨根提取 X部位含有黄酮类化合物，而 Y、Z
部位均不含黄酮类化合物。结果提示藤梨根提取 X
部位含有黄酮类化合物，具有拮抗 CCl4致急性肝损
伤的作用，且在一定剂量范围内具有量效关系；提
取 Y部位不含黄酮类化合物，具有一定的拮抗 CCl4
致急性肝损伤作用。藤梨根提取 X部位中黄酮类化
合物类型的确认、含量的测定、拮抗化学性肝损伤
作用机制的深入研究有待进一步试验，提取 Y部位
中有效成分确定也有待考证。
参考文献
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