全 文 ： ○中药研究○
紫外分光光度法测定杏香兔耳风药材中总酚酸的含
量＊
★ 张武岗 1, 2 孙丽仁2 刘受先2 冯育林 1, 2 罗晓健 1, 2＊＊ 杨世林 1, 2 (1.中药固体制剂制造技术国家工
程研究中心 南昌 330006;2.江西中医学院 南昌 330006)
摘要:目的:建立测定杏香兔耳风药材中总酚酸含量测定的方法 ,并对不同产地杏香兔耳风中总酚酸的含量进行测定。方法:
用紫外分光光度计对 3, 5-二咖啡酰奎宁酸标准溶液进行波长扫描 ,确定最适吸收波长并建立吸收度-浓度曲线。根据标准曲
线测定杏香兔耳风药材中总酚酸的含量。结果:在 328nm下 , 3, 5-二咖啡酰奎宁酸在 0.0025-0.0125mg/mL呈良好的线性关
系 ,回归方程为:Y=0.131 4X– 0.014 1, r=0.999 2(n=6);平均加样回收率为 97.9%(n=6)。结论:该方法快速简便 、精密
度好 、灵敏度高 ,可用于杏香兔耳风药材的质量控制。
关键词:杏香兔耳风;总酚酸;紫外分光光度法
中图分类号:R284.1 文献标识码:A
杏香兔儿风(AinsliaeafragransChamp)为菊科
兔儿风属植物 ,主产江苏 、浙江 、江西 、福建等地 ,生
于山坡灌木林下 ,沟边草丛等处。具有清热利湿 ,凉
血解毒等功效 ,用于治疗虚劳咳血 ,湿热黄疸 ,水肿 ,
痈疽肿毒等病症 , 已被 《江西省中药材标准 》记
载 [ 1] 。化学成分研究表明杏香兔耳风药材中富含
酚酸类成分 ,并具有抗氧化 、抗炎 、抑制微生物和病
毒 、酶抑制 、保肝 、抗凝血等多种生物活性 [ 2, 3] 。本
文以 3, 5-二咖啡酰奎宁酸为对照品 ,采用紫外分光
光度法对杏香兔耳风药材中总酚酸进行了测定 ,建
立快速简便 、精密度好 、灵敏度高的检测方法 ,为控
制杏香兔耳风药材及制剂质量提供了依据。
1 仪器与试药
紫外-可见分光光度计(ShimadzuUV-2550日本
的。本研究为青藤碱联合甲氨蝶呤抗 RA骨破坏的
作用机制提供了实验依据。
参考文献
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(收稿日期:2010-12-10 责任编辑:曾文雪)
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江西中医药 2011年 3月第 3期总 42卷第 339期
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基金项目:国家 “十一五 ”科技支撑计划资助项目(2006BAI06A01-01),国家 “重大新药创制 ”科技重大专项(2009ZX09103-352)
通讯作者:罗晓健 ,教授 ,研究方向:中药新剂型研究。 Tel:(0791)7119619, E-mail:luoxj98@ 126.com
○中药研究○
岛津), UVProbe工作站 , MetlerAE240型十万分之
一电子天平(瑞士 Metler), KQ-250DB型超声清洗
仪(昆山市超声仪器有限公司)。
3, 5-二咖啡酰奎宁酸(由中药固体制剂制造技
术国家工程研究中心提供 ,纯度大于 98%)。杏香
兔耳风为市售药材 ,经江西中医学院杨世林教授鉴
定为 菊科植物杏 香兔儿风 (Ainsliaeafragrans
Champ)的干燥全草。超纯水 ,其他试剂为分析纯。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备和测定方法
2.1.1 对照品溶液的制备及测定方法 精密称取
3, 5-二咖啡酰奎宁酸对照品 6.25 mg,置 100 mL棕
色容量瓶中 ,用 50%乙醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,
即得对照品贮备溶液。
2.1.2 供试品溶液的制备 取杏香兔耳风全草药
材粉末(过四号筛)约 0.17 g,精密称定 ,置 100 mL
棕色容量瓶中 ,加入 90 mL50%乙醇溶液 ,超声提取
30分钟 ,取出 ,放至室温 ,加 50%乙醇至刻度 ,摇匀 ,
过滤 ,取续滤液 ,即得。
2.2 测定波长的选择
取供试提取液和对照品制备液 ,用紫外分光光
度计扫描 400-190nm波长范围的紫外吸收光谱图。
结果表明:供试提取液和对照品均在 328 nm处有最
大吸收(见图 1、图 2),因此确定 328 nm为最示波
长。
2.3 方法学考察
2.3.1 标准曲线的制备 精密吸取对照品贮备溶
液 1, 1.5, 2.5, 3, 4 , 5mL置 25mL容量瓶中 ,加 50%
乙醇稀释至刻度 ,摇匀 ,以 50%乙醇为空白 ,测定吸
光度 。以溶液浓度为横坐标 ,吸光度为纵坐标 ,进行
线性回归 , 得到回归方程为:Y=0.131 4X-
0.014 1, r=0.999 2,在 0.002 5-0.012 5mg/mL呈
良好的线性关系。
2.3.2 精密度试验 取杏香兔耳风供试品溶液 1
份 ,测定吸光度 ,结果 RSD分别为 0.08%(n=6),
表明仪器精密度良好。
2.3.3 稳定性试验 取同一供试品溶液 ,于室温放
置 0、20、40、60、80、100、120分钟测定吸光度 , RSD
为 0.86%,表明溶液在 2小时内稳定。
2.3.4 重复性试验 取该批杏香兔耳风药材 6份 ,
按 2.1.2项下的方法制备供试品溶液 ,测定吸光度 ,
RSD为 0.46%,表明本方法重复性良好 。
2.3.5 加样回收率试验 取已知含量的杏香兔耳
风药材 0.1 g,精密称定 ,分别加入 0.003 g的对照
品 ,按供试品溶液制备方法处理 ,测定吸光度 ,回收
率结果见表 1。
表 1 3, 5-二咖啡酰奎宁酸加样回收率试验结果
编号 药材量/g 添加量/g 测得量/g 原有值/g 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%)
1 0.1002 0.0030 0.0062 0.0033 98.3
2 0.1005 0.0032 0.0064 0.0033 98.2
3 0.1058 0.0031 0.0064 0.0035 97.1 97.9 1.30
4 0.1033 0.0034 0.0066 0.0034 96.9
5 0.1000 0.0032 0.0063 0.0033 96.9
6 0.1026 0.0031 0.0065 0.0034 100.2
2.4 样品测定 取 4批杏香兔耳风药材 ,制备供试
品溶液 ,测定吸光度 ,按回归方程计算总酚酸的含
量 ,结果见表 2。
表 2 样品测定结果
批号 产地 总酚酸含量(%) RSD(%)
091011 江西 3.32 0.51
100504 江西 3.14 0.49
090923 广西 1.98 0.68
100604 广西 1.79 0.61
3 讨论
本实验比较过铁氰化钾 -三氯化铁比色法和直
接法测定药材含量 ,结果发现比色法干扰较大 ,含量
测定结果偏差较大。故确定直接测定法为药材含量
测定方法。
对紫外风光光度法测定杏香兔耳风中总酚酸含
量进行了方法学考察 ,并用不同体积分数乙醇以及
甲醇作提取溶剂进行比较。实验结果表明 ,用 50%
乙醇超声提取 ,样品中总酚酸含量最高。
本文测定了江西和广西产的杏香兔耳风中总酚
酸含量 ,结果表明 ,江西产的杏香兔耳风总酚酸含量
高于 3%,明显高于广西 。
参考文献
[ 1]江苏新医学院.中药大辞典 [ M] .上海:上海人民出版社 , 1977:1
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[ 2]刘波 ,谢亮亮 ,王英锋.杏香兔耳风化学成分研究 [ J] .首都师范
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[ 3]李祖晟 ,朱志安.二咖啡酰奎宁酸药理实验研究进展 [ J] .医学综
述 , 2004, 10(4):249-250.
(收稿日期:2011-01-19 责任编辑:曾文雪)
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