全 文 ：2006 年 9 月第 13 卷第 9期 中国中医药信息杂志 ·53·
薄层色谱-荧光分析法测定水罗伞药材中
水黄皮素含量的研究
杨东爱 1,杨立芳 2,马少妹 2,尹显洪 2,戴 斌 1
(1.广西民族医药研究所,广西 南宁 530001；2.广西民族学院,广西 南宁 530000)
摘要：目的 建立薄层色谱-荧光分光光度法测定水罗伞中水黄皮素含量的方法。方法 采用无水乙醇为溶剂,
硅胶 G为薄层板,苯-乙酸乙酯(8.5∶1.5)为展开剂,激发波长与荧光波长分别为 355 nm 和 428 nm。结果 水黄皮素
线性范围为 0.138～0.69 µg,r =0.9 991,平均回收率为 99.14%,RSD 为 1.94%(n =5)。结论 该法便捷、灵敏、准确、
重现性好,可以控制该药材的质量。
关键词：水罗伞；水黄皮素；薄层色谱-荧光光谱法
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2006)09-0053-02
Determination of Karanjin in Radix of Fofdia Caulifora by Thin Layer Chromatograph-
Fluorescent Method YANG Dong-ai1, YANG Li-fang2, MA Shao-mei2, et al (1.Guangxi Institute of National Medical
Research, Nanning 530001, China; 2. Guangxi College Institute of National , Nanning 530000, China)
Abstract：Objective To establish a thin layer Chromatograph-Fluores cent method for the determination
of karanjin in Radix of Fofdia caulifora. Methods Anhydrous-EtOH is solution, thin-sheet is silica gel,
expanding solution is Benzene-EtoAc (8.5∶1.5), with excitation wavelength at 355 nm and emission
wavelength at 428 nm. Results The average recovery of karanjin was 99.14% and RSD was 1.94% (n =5).
There is a good linear relationship within the range of 0.138～0.69 µg of karanjin. Conclusion The method
is convenient, sensitive, accurate and reproducible, and can be used the quality control of the Radix of
Fofdia caulifora.
Key words：Radix of Fofdia caulifora；karanjin；TLC - Fluorescent method
水罗伞为豆科植物干花豆 Fordia cauliflora Hemsl 的干
燥根[1]。广西瑶医常用于治疗小儿智力低下、小儿麻痹后遗症、
老年痴呆症、风湿骨痛、骨折及身体虚弱等。具有安神益智、
健脾利湿、活血散瘀的作用[2]。我们结合瑶医的用药经验,采
用现代科学技术手段对水罗伞进行了生药学[3]、化学成分[4-6]
及益智、抗炎、抗衰老、镇静、镇痛和毒性等药理作用[7-10]进
行了系统研究。水黄皮素是从豆科植物水罗伞中首次提取获得
的异黄酮类化合物。水罗伞中水黄皮素的含量测定方法已有紫
外分光光度法[11]、薄层扫描法[12]、反相高效液相色谱法[13]等。
为合理利用资源,评价不同产地水罗伞药材的内在质量,笔者
采用薄层色谱-荧光光谱法测定水罗伞药材中水黄皮素含量,
为建立薄层色谱-荧光分析法测定水黄皮素含量的方法提供科
学依据。
1 仪器与试药
PerkinElmer 荧光分光光度计(美国)；三用紫外光灯(江
阴市申港电光仪器厂)；KQ-100DB 数控超声波提取器(昆山市
超声仪器有限公司)；800 型离心机(上海手术器械厂)。硅胶
G(青岛海洋化工厂生产)；水黄皮素对照品：水黄皮素(3-甲氧
基水黄皮素)从广西大新产水罗伞中提取分离得到,经 UV、IR
确定结构,经 RP-HPLC 法测定并用峰面积归一化法计算含量为

基金项目：广西自然科学基金(0447016)
98.23%。其他试剂均为分析纯,实验用水为重蒸水。水罗伞药
材采自南宁、大新、天等、靖西、龙州等地。药材经鉴定均为
豆科植物干花豆 Fordia cauliflora Hemsl 的干燥根[3]。
2 方法
2.1 对照品溶液的制备
精密称取水黄皮素对照品,制成每毫升含水黄皮素0.69 mg
的对照品贮备溶液。
2.2 供试品溶液的制备
精密称取经恒重后的水罗伞样品粉末(过 40 目筛)1 g,置
索氏提取器中,加入无水乙醇 60 mL,连续回流 6 h,放冷,滤过,
滤液置50 mL容量瓶中,用无水乙醇适量分次洗涤容器和滤器,
洗涤液合并入同一量瓶中,用无水乙醇稀释至刻度,摇匀即得。
2.3 测定方法
取上述两种溶液各 10 µL,分别点于同一硅胶 G薄层板上,
用展开剂苯-乙酸乙酯(8.5∶1.5)展开,取出,晾干,置紫外光
灯(365 nm)下检视,画出与对照品色谱相应位置上显相同颜色
的荧光斑点,定量刮取置具塞试管中,用无水乙醇超声提取 2
次(2、1.5 mL),每次 30 min。合并上清液,置离心机中,以 2 500
r/min 离心 10 min,倾取上清液置 5 mL 量瓶中,用无水乙醇稀
释至刻度,摇匀。照荧光分析法(2005 年版《中国药典》附录),
在激发波长 355 nm 与荧光光谱波长 428 nm 处测定荧光,读数,
计算,即得。
·54· Chinese Journal of Information on TCM Sep.2006 Vol.13 No.9
2.4 线性关系考察
精密量取上述对照品贮备液 2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 µL,
按照含量测定方法中薄层色谱法点样、展开、刮板、提取并采
用荧光分析法测定含量,以对照品的荧光强度为纵坐标,溶液
浓度为横坐标,进行线性回归,结果表明,点样浓度在 0.138～
0.69 µg 线性关系良好,其线性回归方程为：Y=86.27C+1.108,
r =0.9 991。
2.5 重复性试验
取供试品溶液(批号 0502 南宁)5 份分别于 0、2、5、10 d
进行含量测定,测定结果表明水黄皮素含量无明显变化,RSD
分别为 1.37%、1.05%、0.75%、1.33%。
2.6 稳定性试验
取同批样品(批号 0502 南宁)5 份,按 2.2 及 2.3 项下方
法制备供试品溶液,按上述条件测定,结果平均百分含量为
0.2 120,RSD 为 2.11%。
2.7 加样回收率试验
精密称取已知水黄皮素含量的样品约 0.5 g(批号 0502 南
宁,水黄皮素含量为0.2146%)5份,分别置100 mL园底烧瓶中,
加入水黄皮素对照品溶液(0.69 mg/mL)2 mL,按 2.2 及 2.3 项
下方法操作,分别进行含量测定,计算回收率。结果平均回收率
为 99.14%,RSD 为 1.94%(n =5)。结果见表 1。
表 1 水黄皮素加样回收率试验结果(n =5)
样品水黄皮素 水黄皮素加入 测得量 回收率 平均回收率 RSD
含量(µg) 量(µg) (µg) (%) (%) (%)
0.2 153 0.276 0.4 785 97.39
0.2 161 0.276 0.4 808 97.71
0.2 135 0.276 0.4 976 101.65 99.14 1.94
0.2 153 0.276 0.4 951 100.78
0.2 148 0.276 0.4 819 98.19
2.8 样品含量测定
在上述条件下测定 5 批样品的水黄皮素含量,分别精密吸
取供试品溶液进行荧光测定,结果见表 2。
表 2 5 批样品含量测定结果(n =3)
批号 样品量(g) 水黄皮素平均含量(%) RSD(%)
0502(南宁) 1.0 230 0.2 146 1.80
0412(天等) 0.9 775 0.1 886 3.06
0412(大新) 1.0 107 0.2 799 1.25
0501(靖西) 1.0 127 0.1 485 1.09
0505(龙州) 0.9 886 0.1 701 1.67
3 讨论
水黄皮素在水罗伞药材中为主要异黄酮类成分,文献报道
对其含量测定方法有紫外分光光度法[11]、薄层扫描法[12]、反相
高效液相法[13]等。本研究采用薄层色谱-荧光光度分析法,避免
了紫外分光光度法、薄层扫描法测定含量误差大、用 HPLC 法
直接进样对色谱柱污染大等缺点,取得了准确的、可靠的结果。
该法操作简便、灵敏、准确性、重现性较好,可用于水罗伞药
材中的水黄皮素含量测定。
试验通过对水黄皮素的激发光谱扫描,其在355 nm处荧光
强度最强,荧光光谱扫描其在 428 nm 处荧光强度最强,因此,
确定采用在激发光谱为 355 nm、荧光光谱为 428 nm 处测定水
罗伞药材中水黄皮素的含量。
水黄皮素的发射光谱与激发光谱有很好的镜像关系,这是
由于激发态和基态有相似的振动能级分布,而且从基态的最低
振动能级跃迁到第一电子激发态各振动能级的几率与由第一
电子激发态的最低振动能级跃迁到基态各振动能级的几率也
相近,因此,吸收谱与发射谱呈镜象对称关系(见图 1)。









图 1 水黄皮素发射光谱与激发光谱
参考文献：
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(收稿日期：2005-12-07,编辑：陈静)
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