全 文 ：图 1　HL-60细胞数对 OD值标准曲线
3.3　BC对 LPS诱导的 HUVEC -HL-60粘附的影
响(表 2)
正常组 HUVEC -HL -60 的基础粘附率为
20.22%。经 LPS 作用(阳性对照组)4h 后 HUVEC-
HL-60的粘附率上升至 69.21%,与正常组相比有显
著差异 。LPS+BC 组 , BC 浓度为 1×10-4 mol/L 和 1
×10-3 mol/L 时 , 粘附率分别下降至 44.65%和
27.26%,与 LPS 组相比有显著差异 。
表 2　BC 对 LPS 诱导的 HUVEC-HL-60 粘附的影响(n=3)
　　实验组 　OD 值 粘附率/ %
正常组 0.039±0.003 20.22
LPS(100 ng/mL) 0.122±0.006## 69.21
LPS+BC 1×10-5mol/
L
0.103±0.006 57.97
1×10-4mol/ L 0.081±0.007＊ 44.65
1×10-3mol/ L 0.051±0.003＊＊ 27.26
　　##P<0.01 ,与正常组比较;
　　＊P<0.05 , ＊＊P <0.01 , 与 LPS 组比较
4　讨论
白细胞与内皮细胞的粘附是白细胞趋化游走和吞
噬活动的基础 ,在炎症过程中具有重要作用。目前已
经证实在炎症反应发生时 ,体内产生大量 LPS 等细胞
因子 ,促进白细胞与内皮细胞的粘附。本实验模拟体
内炎症反应过程 ,以 LPS 诱导 HUVEC与 HL -60粘
附的增加 ,结果表明 ,在炎症因子 LPS 的诱导刺激下 ,
HUVEC与HL-60的粘附性有明显提高;中药有效成
分盐酸小蘖碱可以明显降低 LPS 的这种刺激作用 ,因
此作为抗炎药物其抑制炎症反应的作用机理部分可能
是通过调控细胞因子的作用来实现的。在各种炎症过
程中 ,细胞表现出明显的粘附特性 ,抑制细胞粘附可防
止因白细胞与内皮细胞的相互作用引起的血管内皮的
损伤 ,血管外周围组织的损伤以及防止微血管堵塞等
病理性疾患 ,因此是一种寻找抗炎症药物的新手段[ 3] 。
参考文献
[ 1]田敏.粘附分子的研究概况[ J] .国外医药抗生素分册 , 1998 ,
19(3):190-197.
[ 2]鄂征.组织培养与分子细胞学技术[ M] .北京出版社 , 1997.
125-126.
[ 3]张劭夫.细胞粘附分子阻滞疗法[ J] .一种抗炎治疗的新方
法.国外医学生理 、病理科学与临床分册 , 1996 , 16(2):85.
(收稿日期　2002-04-20)
水罗伞对小鼠记忆获得障碍的影响作用研究
李植钦(广西壮族自治区药品检验所 ,广西 南宁 530021)
摘　要　目的:对水罗伞的益智作用进行初步研究 , 为进一步筛选其有效成分提供依据。方法:以东莨菪碱 1 mg/ kg 造成小鼠记忆
获得障碍 ,用跳台法观察测定水罗伞 5种不同提取物对其改善作用;以戊巴比妥钠 15 mg/kg 造成小鼠方向辨别性记忆获得障碍 ,
用水迷路法观察测定水罗伞 5 种不同提取物对其改善作用。结果:模型组与正常组相比以及本品醇提取物 F5 组与模型组相比 , 两
者均有显著差异。结论:本品醇提取物 F5 对记忆获得障碍有显著改善作用 ,为水罗伞益智作用的活性部位所在。
关键词　水罗伞;干花豆;东莨菪碱;戊巴比妥钠;记忆获得障碍;跳台法;水迷路法
中图号　R285.5　文章编号:1006-8783(2002)02-0124-03　文献标识码:A
　　水罗伞为豆科植物干花豆 Fordia cauli f lora
Hemsl.的干燥根[ 1 ,2] ,亦称虾须豆 、土甘草 、玉郎伞[ 3] ,
广西壮语称“仁推” ,瑶语称“凡台” 。在壮 、瑶族民间常
以药材每天 20 g 水煎服用于风湿骨痛 、跌打损伤 、小
儿智力低下及体虚等症[ 1 , 2] 。近年研究表明本品有明
显增进小鼠记忆力的作用[ 4] 。本文对水罗伞的 5种不
同提取物进行了记忆获得障碍方面的作用研究 ,为进
一步筛选有效成分提供依据。
1　材料
1.1　药品　水罗伞原药材提取物 F1(石油醚提取物 ,
每克膏相当于原药材 54.2 g)、F2(氯仿提取物 ,每克膏
相当于原药材 150 g)、F3(正丁醇提取物 ,每克膏相当于
原药材 98.4 g)、F4(水提取物 ,每克膏相当于原药材 7.9
g)、F5(醇提取物 ,每克膏相当于原药材 5.0 g)等由广西
民族医药研究所化学室制备提供 ,对照液(每 mL 蒸馏
水中含 20 mg吐温-80),氢溴酸东莨菪碱注射液(上海
禾丰制药有限公司生产 ,批号 990901),戊巴比妥钠(佛
山市化工实验厂生产 ,批号 880903)。
1.2　动物　NIH 系小白鼠 ,雌雄兼用 ,体重 19 ～ 22
g ,广西药品检验所动物室提供 ,合格证号桂医动字第
11002号 。
124
第 18卷第 2 期 广　东　药　学　院　学　报 Vol.18No.2
2002年 6月 ACADEMICJOURNALOFGUANGDONGCOLLEGEOFPHARMACY Jun.2002
1.3　仪器　小鼠跳台测定仪 ,体积为 60 cm ×12 cm
×18 cm ,用不透明的黑色塑料板分隔成 5间 ,铜栅电
压为 36 V;Y型水迷宫 ,装置分长臂端和两分支短臂
端 ,左侧短臂端装有平台 ,另一短臂端用木板盖上作为
暗道 ,水深 10 cm ,水温 23 ～ 25 ℃。
2　方法与结果
2.1　跳台法测定水罗伞对东莨菪碱所致小鼠记忆获
得障碍的影响
2.1.1　分组给药　选合格小鼠 70 只 ,按分层分组法
分成 7组 ,对照组与模型组分别给 20 mL/kg 等体积
对照液 ,各组均在训练前连续口服给药 3 d。
2.1.2　训练　训练时先将跳台仪与可调变压器相连 ,
电压控制在 36 V 。于训练前 40 min给药 ,训练前 15
min模型组与给药组小鼠分别腹腔注射东莨菪碱 1
mg/kg ,空白对照组腹腔注射等容量的生理盐水。每
批实验各组分别有 1 只小鼠给药 ,平行操作 , 10 min
后再给第 2只小鼠注射 ,依此类推。训练时将第一批
的 5只小鼠分别放入跳台仪的 5 个格子内 ,先适应环
境 3 min ,然后通电 ,小鼠受电击后会跳上跳台来逃避
电击。跳下时以小鼠双足同时接触铜栅为触电 ,作为
错误反应。训练 5 min并记录在这之内的触电次数 ,
24 h后重新测试[ 5] 。
2.1.3　测试　测试时先将小鼠放在跳台上 ,同时开动
秒表 ,记录小鼠第一次跳下时间作为触电潜伏期 ,并记
录小鼠 5 min内跳下次数(错误次数),作为记忆指标。
统计方法采用 t 检验法 ,分别将各组记忆指标与模型
组进行比较 ,结果如表 1。
表 1　跳台法测定水罗伞对东莨菪碱所致小鼠记忆获得障碍的影响(x±s)
组别 动物数 原药材剂量(ω/ g·kg-1) 东莨菪碱剂量(ω/ mg·kg-1) 测试潜伏期(t/ s) 5 min 内错误次数/次
正常对照组 10 对照液 盐水 236.30±106.75 0.40±0.52
模型对照组 10 对照液 1 124.30±114.08# 1.10±0.74#
F1 组 10 40 1 177.50±129.99 1.00±1.25
F2 组 10 40 1 168.50±115.57 0.90±0.74
F3 组 10 40 1 127.30±124.48 0.90±0.74
F4 组 10 40 1 130.40±126.08 1.10±1.20
F5 组 10 40 1 229.40±93.57＊ 0.40±0.52＊
与正常对照组比较:#P <0.05;与模型对照组比较:＊P<0.05
　　如表 1所示 ,模型组与正常组相比 ,模型组潜伏期
显著缩短 ,5 min内错误次数显著增加 ,可见腹腔注射
1 mg/kg 的东莨菪碱已造成记忆获得障碍 。另外 F5
组与模型组相比 ,潜伏期显著延长 , 5 min内错误次数
显著降低 ,说明其对记忆获得障碍有显著改善作用;同
时F1组 、F2组潜伏期有延长的趋势 ,错误次数有减少
的趋势。
2.2　水迷路法测定水罗伞对戊巴比妥钠所致小鼠空
间识别记忆获得障碍的影响
2.2.1　分组给药　选合格小鼠 70只 ,按体重随机分
成 7组 ,每组 10只 。给药组分别给以各供试药液 ,对
照组与模型组分别给 20 mL/kg 等体积对照液 ,各组
均在训练前连续口服给药 5 d。
2.2.2　训练测试　各组动物于训练前 40 min 给药 ,
训练前 30 min 模型组与给药组小鼠分别腹腔注射戊
巴比妥钠 15 mg/kg ,空白对照组腹腔注射等容量的生
理盐水 ,各组动物平行操作 。实验时将小鼠从长臂端
轻轻放入水中 ,以其在 10 s内直接到达平台为正确反
应 。小鼠抵达平台后休息 15 s再重复训练 ,每天训练
10次 ,连续训练 5 d ,训练过程中连续饮水给药 ,以每
组平均正确反应率(%)和抵达平台所需时间(超过 10
s按 10 s计)作为评价记忆的指标[ 5] 。统计方法采用
χ2检验和 t 检验 ,分别将各组记忆指标与模型组进行
比较 ,结果如表 2。
表 2　水迷路法测定水罗伞对戊巴比妥钠所致小鼠记忆获得障碍的影响(x±s)
组别 原药材剂量(ω/g·kg-1)
正确反应时间(t/ s)
第 1 d 第 2 d 第 3 d 第 4 d 第 5 d
正确反应率/ %
第 1 d 第 2 d 第3 d 第4 d 第 5 d
正常组 对照液 7.33±2.00 5.83±1.88 4.69±1.67 4.58±1.43 3.64±1.38 40.0±19.4 59.0±21.3 71.0±20.2 74.0±18.4 85.0±17.2
模型组 对照液 8.71±1.36 8.10±1.26# 7.18±1.65## 6.82±1.75## 5.89±2.27## 24.0±17.1 30.0±17.0## 39.0±20.2## 41.0±19.7## 52.0±25.3##
F1组 40 8.49±1.29 7.58±1.29 6.68±1.93 6.35±1.68 5.59±1.69 28.0±21.0 41.0±18.5 54.0±20.7 55.0±17.8 63.0±22.6
F2组 40 8.65±1.13 7.74±1.35 6.83±1.93 5.71±1.79 27.0±17.7 39.0±16.6 53.0±21.6 53.0±21.6 53.0±20.6 60.0±22.6
F3组 40 8.93±0.88 8.36±0.92 7.09±1.64 7.04±1.58 6.08±1.58 26.0±17.1 33.0±17.0 43.0±20.0 45.0±20.1 56.0±21.2
F4组 40 8.68±1.04 8.09±1.08 7.25±1.59 6.77±1.79 5.65±2.06 26.0±14.3 34.0±16.5 42.0±22.5 46.0±21.7 59.0±24.2
F5组 40 8.35±1.13 6.92±1.57 5.80±1.94 5.13±1.77＊ 4.39±1.53 29.0±16.6 45.0±17.8 59.0±20.8＊62.0±17.5＊ 72.0±16.9
　　与正常对照组比较:#P<0.05 , ##P<0.01;与模型对照组比较:＊P<0.05
125
第 2期　李植钦:水罗伞对小鼠记忆获得障碍的影响作用研究
　　如表 2 所示 ,模型组与正常组相比 ,模型组第 2 d
至第 5 d训练中正确反应时间显著延长 ,正确反应率
显著降低 ,可见腹腔注射 15 mg/kg 的戊巴比妥钠已
造成记忆获得障碍。同时 F5组与模型组相比 ,第 4 d
的正确反应时间明显缩短 ,第 3天和第 4 天的正确反
应率显著提高。说明其对记忆获得障碍有显著改善作
用 ,这与跳台法结果是一致的 。
3　讨论
学习 、记忆实验方法的基础是条件反射 ,各种各样
的方法均由此衍化出来。广泛应用的回避性条件反射
方法 ,动物经一次训练即可学会逃避电击 ,且很快趋于
巩固和维持相当长一段时间。在这种情况下观察药物
改善记忆的作用是困难的 ,即使待试药物有很好的效
果 ,但由于组间差异很小 ,在统计学上不易通过。采用
记忆缺失的动物模型则较正常动物能更正确反映药物
的作用 ,不但有助于评定药物的作用 ,且可初步分析药
物的作用机制。采用不同的给药方案和不同类型的记
忆障碍模型 ,可分别观察药物对记忆获得 、记忆巩固及
记忆再现等不同记忆过程的影响 ,从而可以更全面地
了解药物作用的性质 ,初步分析益智药物的作用机理。
本实验研究正是基于以上观点而设计。鉴于抗胆碱能
药物影响记忆的机制比较清楚 ,结果易重复 ,且无明显
非特异性作用[ 6] ,在跳台实验中用东莨菪碱来造成记
忆获得障碍模型是较为理想的 ,能显著破坏动物的学习
和记忆获得。在水迷宫实验中以中枢抑制药戊巴比妥
钠来破坏动物的方向辨别性记忆获得 ,也取得显著效
果。通过跳台法和水迷路法实验 ,观察到本品醇提物
F5对记忆获得障碍有显著改善作用 ,说明本品可通过
改善记忆获得来达到益智效果。至于其更全面的作用
机理和对其他记忆过程的影响 ,则有待于进一步研究 。
致谢:本研究部分实验得到本科室韦奇志 、周智同
志的大力协助 ,在此表示感谢 !
参考文献
[ 1] 广西卫生厅编.广西中药志[ M] .第二辑.南宁:广西人民出
版社 , 1963.227.
[ 2]广西卫生局.广西本草选编[ M ] .南宁:广西人民出版社 ,
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[ 4] 顾正余 , 刘建瓴 ,张朝纯.干花豆对小鼠记忆力的影响[ J] .
南京铁道医学院学报 , 1993 , 12(2):84.
[ 5] 李仪奎.中药药理实验方法学[ M] .上海:上海科学技术出
版社 , 1991.248.
[ 6] 张均田.现代药理实验方法[ M] .北京:北京医科大学中国
协和医科大学联合出版社 , 1998.158.
(收稿日期　2002-04-22)
小柴胡片及其包装用铝箔封口垫片的急性毒性实验研究
朱颖虹1　张清民1　傅泳梅2　许实波2　许东晖2　梅雪婷2
(1.广东环球制药有限公司 ,广东 顺德 528303;2.中山大学药学系药物药理研究室 ,广东 广州 510275)
摘　要　目的:研究小柴胡片及其包装用铝箔封口垫片的急性毒性作用。方法:参照“新药临床前研究指导原则汇编”中急性毒性
实验方法 ,及 GB/ T16175 ～ 1996 。结果与结论:小柴胡片及其包装用铝箔封口垫片在实验小鼠急性毒性试验中 ,未见毒性反应 。
关键词　小柴胡片;铝箔封口垫片;急性毒性
中图号　R965.3　文章编号:1006-8783(2002)02-0126-03　文献标识码:A
　　小柴胡片源于东汉时期张仲“伤寒论”中的小柴胡
汤 ,本方由柴胡 、黄芩 、半夏 、生姜 、党参 、甘草 、大枣七
味药组成 。具有和解少阳 、扶正祛邪的作用。
本文研究小柴胡片及其包装用铝箔封口垫片的急
性毒性情况。
1　小柴胡片的急性毒性
1.1　实验材料
1.1.1　受试药物
小柴胡片:分为 A1 、A2 、A3 号 ,均由广东环球制
药有限公司生产 , 规格为 0.667g/片 , 批号分别为
010901 、010902 、010903。
A空白对照组　生理盐水溶液。
1.1.2　试验动物
N IH 小鼠 ,实验动物合格证号:2000A028 ,由广州
中医药大学实验动物中心提供 。
1.1.3　实验环境
中山大学生命科学学院药学系药物药理研究室 ,
实验环境合格证(粤检证字 2001C020号)
1.2　实验方法[ 1]
1.2.1　LD50实验
选用体重 18 ～ 22 g 健康 NIH 小鼠160只 ,随机分
成 4组 ,即 A空白对照组 、A1号小柴胡片组 、A2号小
126
第 18卷第 2期 广　东　药　学　院　学　报 Vol.18 No.2
2002年 6月 ACADEMIC JOURNAL OF GUANGDONG COLLEGE OF PHARMACY Jun.2002