全 文 ：Traditional Chinese Drug Research ＆ Clinical Pharmacology，2011 November，Vol．22 No．6
fit16 E:\输出 \排版 \中药新药 \2011年 \5期 刘晓星 new16\9-18\AS110800127
收稿日期：2011-03-28
作者介绍：周春权，男，助理研究员，研究方向为中药药理学。Email：zcq955020@sina.com。通讯作者：倪峰，女，研究员，从事中药药理学研
究。Email：nf5910@163.com。
基金项目：福建省发改委课题 [闽发改投资（2008）762 号文]；福建省卫生教育联合攻关计划项目（wkj2008-2-60）；福建省科技计划项目
（2009R10007-5）。
藤茶 [Ampelopsis grossedentata（Hand-Mazz）W．T．
Wang]是葡萄科蛇葡萄属的一种藤本植物，广泛分布
于我国长江流域以南的省区，是我国民间一茶用、
药用植物。俗称山甜茶、白茶、甘露茶、白毛猴等。
其味甘，淡，性凉。具有清热解毒，祛风湿、强筋
骨，消肿止痛之功效，民间流传应用已有数百年历
史，用于治疗感冒发热、咽喉肿痛、黄疸型肝炎等
症[1-2]。药理作用表明藤茶总黄酮具有抗氧化、保肝、
降血脂、降血糖、抗肿瘤等多种功效 [3-7]。本文研究
了超声波溶剂提取法得到的野生藤茶提取物（FL08
10）的体内外抗肿瘤作用。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂 藤茶提取物（FL0810），本实验室采
用超声波溶剂提取法分离。人前列腺癌细胞 DU145，
人乳腺癌细胞 MDA-MB-231、MDA-MB-435 均购自
藤茶提取物的抗肿瘤作用研究
周春权 1，姚 欣 1，陈晓明 3，倪 峰 2（1. 福建省中医药研究院，福州 350003；2. 福建卫生职业技术学院，福
州 350101；3. 福建医科大学附属第二医院，福建泉州 362000）
摘要：目的 观察藤茶提取物（FL0810）体内外抗肿瘤的作用。方法 采用 S180腹水瘤模型观察 FL0810体内抗
肿瘤作用。应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法研究 FL0810对肿瘤细胞体外增殖的影响。结果 FL0810能延长 S180
腹水瘤小鼠生存时间，与模型对照组相比有显著差异（P < 0.05）；FL0810 对人乳腺癌细胞 MDA-MB-231、
MDA-MB-435、人前列腺癌细胞 DU145均有较强的体外增殖抑制作用，且呈现明显的剂量依赖性，抑制率随
着药物浓度增加而增加；72 h半数抑制浓度（IC50）为别为 208.71，226.14，150 μg/mL。结论 藤茶提取物在体
内对 S180的生长有一定的抑制作用，在体外对人乳腺癌和人前列腺癌有明显的抑制作用。
关键词：藤茶提取物；抗肿瘤；四甲基偶氮唑蓝法
中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：1003-9783（2011）06-0640-03
Studies on Anti-tumor Effect of Ampelopsis grossedentata Extracts
ZHOU Chunquan1，YAO Xin1，CHEN Xiaoming3，NI Feng2（1. Fujian Institute of Traditional Chinese Medicine，
Fuzhou 350003，China；2. Fujian Health Vocational & Technical College，Fuzhou 350101，China；3. The Second
Affiliated Hospital，Fujian Medical University，Quanzhou 362000，China）
Abstract：Objective To observe the anti-tumor effect of FL0810（an extract from Ampelopsis grossedentata） in vivo
and in vitro. Methods S180 ascites tumor bearing mice model was used to observe inhibition of FL0810 on tumor
growth in vivo. Then we applied methyl thiazolyl tetrazolium（MTT）method to study the effect of FL0810 on tumor
cells proliferation in vitro. Results FL0810 could prolong the survival time of S180 ascites tumor bearing mice，and
the difference was significant compared with the model control group（P < 0.05）. FL0810 had obvious inhibition on
in-vitro proliferation of human breast cancer cells MDA-MB-231，MDA-MB-435 and human prostate cancer cells
DU145，and the effect was dose-dependent， inhibition rate increasing with drug concentration. IC50 after 72h for
MDA-MB-231，MDA-MB-435 and DU145 was 208.71，226.14，150 μg/mL，respectively. Conclusion FL 0810
has certain inhibition on the growth of S180 in vivo，and has anti-tumor effect on human breast cancer cells and human
prostate cancer cells in vitro.
Keywords：Ampelopsis grossedentata extracts；Anti-tumor；Methyl thiazolyl tetrazolium
640· ·
中药新药与临床药理 2011年 11月第 22卷第 6期
fit16 E:\输出 \排版 \中药新药 \2011年 \5期 刘晓星 new16\9-18\AS110800127
中科院上海细胞所。S180腹水瘤购自厦门大学生物医
学工程研究中心，由 ICR小鼠传代；MEM 培养基、
F12培养基、RPMI1640 培养基、L15 培养基、胰酶
（含 0.02 % EDTA），美国 Gibco 公司；胎牛血清
（FBS）、双抗（青霉素-链霉素），美国 Hyclone公司；
二甲基亚枫（DMSO），Sigma产品，泰京公司分装；
磷酸缓冲溶液（PBS），杭州四季青公司；四甲基偶氮
唑蓝（MTT），上海生工；注射用环磷酰胺（CTX），
江苏恒瑞医药股份有限公司，批号：09062516。
1.2 仪器 HERACELL150i 型 CO2 培养箱，美国
Thermo Scientific 公司；BP211D 型电子天平，美国
Sartorius 公司；TS100 型倒置光学显微镜，日本
Nikon 公司；DSC-H50 型数码相机，日本 SONY 公
司；TD5Z 型离心机，湖南凯达科学仪器有限公司；
Multiskan MK3型酶标仪，芬兰 Labsystems Dragon 公
司；ECT-BV-85型超低温冰箱，美国 HARRIS公司。
1.3 动物 ICR小鼠，清洁级，雄性，6~8 周龄，体
重（20±2）g，上海斯莱克实验动物有限责任公司，许
可证号：SCXK（泸）2007-0005。饲养于空调温室内，
温度 20~24 ℃，湿度 40 %~50 %。
1.4 MTT法体外抗肿瘤实验 取处于对数生长期的
肿瘤细胞，用培养基稀释至适当浓度细胞悬液，使
96 孔板每孔细胞数约为 1×104个。置于 37 ℃、5 %
CO2 的培养箱中培养 24 h。然后加入不同剂量的
FL0810，继续培养 72 h。最后每孔加入含 MTT的不
完全培养基，放回培养箱中孵育 4 h，小心弃上清，
加入 150 μL DMSO，充分振摇使甲瓒结晶溶解，用
酶标仪于 492 nm 处测定各孔光密度值（OD），MTT
法中结晶物的形成量与活细胞数和功能状态成正比
例关系，因此，用 OD值大小来表示该活细胞数量的
多少；并以下式计算细胞生长抑制率：
细胞生长抑制率=（1-OD 实验 /OD 对照）×100 %
改良寇氏法计算半数抑制浓度（IC50），计算公式为：
Log10（IC50）=Xm-i（P-0.5）+i（1-Pm-Pn）/ 4
其中，Xm=Log10（最大剂量），i=Log10（最大剂量/
相临剂量），P=阳性抑制率之和，Pm=最大阳性抑制
率，Pn=最小阳性抑制率。
1.5 体内抗肿瘤实验
1.5.1 S180腹水瘤模型的建立 选择生长良好的 S180腹
水瘤小鼠，颈椎脱臼处死，在无菌条件下抽取腹水，
用无菌生理盐水将其调整成含细胞数约为 7.5×106/mL
的瘤液，每只 ICR小鼠腹腔注射瘤液 0.2 mL。
1.5.2 FL0810 对小鼠 S180 腹水瘤模型的影响 将 50
只 ICR小鼠按体重随机分为 5组，即 FL0810低剂量
组（100 mg/kg）和 FL0810高剂量组（200 mg/kg），CTX
阳性对照组、FL0810 高剂量组+CTX 组、模型对照
组。接种前预先给供试品 7 d，各组灌胃体积均为 20
mL / kg，其中 CTX阳性对照组与模型对照组给同体
积 1 %羧甲基纤维素钠溶液。接种当天开始计算小鼠
生存天数，CTX阳性对照组与 F0810高剂量+CTX组
于接种后第 1，4，7，10 天灌胃给 CTX 30 mg / kg，
其余各组均连续给药。观察和记录动物死亡时间，
计算生存天数。
用药组生存时间-模型对照组生存时间
模型对照组生存时间
生命延长率= ×100 %
2 结果
2.1 MTT法体外抗肿瘤实验
2.1.1 FL0810 对 MDA-MB-231 和 MDA-MB-435 的
增殖抑制作用 FL0810 对人乳腺癌细胞 MDA-MB-
231、MDA-MB-435的生长有抑制作用，且呈现明显
的剂量依赖性，抑制率随着药物浓度增加而增加，
见表 1。活细胞数量亦随着剂量的增加而减少，见图
1。根据改良寇式法公式计算得，FL0810对两种人乳
腺癌细胞 MDA-MB-231 和 MDA-MB-435 的 72 h
IC50分别为208.71，226.14 μg/mL。
表 1 FL0810对 MDA-MB-231、MDA-MB-435增殖的抑制
作用（x± s，n=6）
Table 1 Inhibitive effect of FL0810 on proliferation of human
breast cancer cells MDA-MB-231 and MDA-MB-435
FL0810浓度
/μg·mL-1
50
100
150
200
250
300
MDA-MB-231
1.63±2.94
16.12±3.52
39.61±4.02
56.87±5.71
67.06±5.67
72.26±6.20
MDA-MB-435
0.89±5.15
21.75±5.18
27.51±7.61
40.62±5.68
54.98±7.51
67.24±4.44
抑制率 /%
供试品浓度/μg·mL-1
光
密
度
值
（
OD
）
图 1 不同浓度的 FL0810对 MDA-MB-435、MDA-MB-231
细胞生长的作用
Figure 1 Effect of FL0810 on cell growth of human breast cancer
cells MDA-MB-435 and MDA-MB-231
641· ·
Traditional Chinese Drug Research ＆ Clinical Pharmacology，2011 November，Vol．22 No．6
fit16 E:\输出 \排版 \中药新药 \2011年 \5期 刘晓星 new16\9-18\AS110800127
2.1.2 FL0810 对 DU145 的增殖抑制作用 FL0810 对
人前列腺癌细胞 DU145的生长有抑制作用，且呈现
明显的剂量依赖性，抑制率随着药物浓度增加而增
加，见表 2；活细胞数量亦随着剂量的增加而减少，
见图 2。根据改良寇式法公式计算得，FL0810 对人
前列腺癌细胞 DU145的 72 h IC50为 150 μg /mL。
2.2 体内抗肿瘤实验
2.2.1 FL0810对小鼠 S180腹水瘤模型的影响 FL0810
对 S180腹水瘤小鼠有生命延长作用，且呈量效关系，
其中 FL0810 200 mg / kg 对 S180腹水瘤小鼠生命延长
率为 19.74 %，与模型对照组相比有显著差异（P <
0.05）。单用 CTX 对 S180 腹水瘤小鼠生命延长率为
17.11 %，而合用 FL0810 200 mg/kg 后，对 S180 腹
水瘤小鼠生命延长率为 26.97 %，与模型对照组相比
有非常显著差异（P < 0.01），见表 3。
3 讨论
藤茶提取物是从藤茶植物中提取的一种主要成
分为黄酮类的提取物，藤茶提取物具有多种生物活
性，如抗氧化、保肝、降血脂、降血糖等 [3-6]，同时
其在抗肿瘤方面的作用也越来越受到人们的关注。
目前，已有学者研究发现 [7-10]，藤茶提取物在体外对
S180细胞、H22细胞、L1210细胞、人胃癌 SGC-7901
细胞、人卵巢癌细胞 SK-OV-3 和人恶性黑色素瘤
A375细胞等的增殖有明显的抑制作用。通过结构分
析显示藤茶提取物总黄酮属于异黄酮类，异黄酮是
植物雌激素的一类，具有抗雄激素作用和弱的雌激
素样作用。因未见其对人前列腺癌的实验报道，因
此本课题组根据藤茶提取物具有的结构性质，进行
FL0810抗肿瘤的体内外试验。试验结果表明藤茶提
取物对人乳腺癌和人前列腺癌有明显的抑制作用，
且呈现明显的剂量依赖性。本试验仅对人前列腺癌
和人乳腺癌激素非依赖型肿瘤细胞进行了试验，而
激素依赖型肿瘤细胞的抑制作用、其抗肿瘤的机制
是我们今后需进一步深入研究的内容和方向。
参考文献：
[1] 中国科学院植物研究所． 中国高等植物图谱补编（第 2册）[M]． 北
京：科学出版社，1983：242.
[2] 全国中草药汇编编写组. 全国中草药汇编（下册）[M]． 北京：人民
卫生出版杜，1978：789.
[3] 伍杨，凤鸣 . 藤茶抗氧化作用的研究 [J]. 湖北民族学院学报，
2006，23（3）：14-15.
[4] 陈玉琼，倪德江，程倩，等. 藤茶总黄酮及二氢杨梅素降血脂作
用研究[J]. 茶叶科学，2007，27（3）：221-225.
[5] 钟正贤，覃洁萍，周桂芬，等. 广西藤茶总黄酮降血糖的实验研
究[J]. 中国中药杂志，2002，27（9）：687-689.
[6] 郑作文，胡远燕. 藤茶双氢杨梅树皮素对实验性慢性肝损伤的保
护作用[J]. 中国药物应用与监测，2008，5（3）：12-14.
[7] 郑作文，谭为，周雅君，等. 藤茶蛇葡萄素对人卵巢癌细胞和人
恶性黑色素瘤细胞增殖的抑制作用 [J]. 广西中医药，2009，32
（1）：47-48.
[8] 杨柯，曾春晖，李玲芝，等. 广西藤茶提取物 TTF抗肿瘤作用的
实验研究[J]. 科学技术与工程，2006，6（14）：2038-2040.
[9] 郑作文，郭成贤，唐云丽，等. 藤茶蛇葡萄素抗人胃癌细胞作用
的实验研究[J]. 中国药物应用与监测，2007，4（1）：29-31.
[10] 李刚，郑作文，唐云丽，等. 藤茶总黄酮体外抗人肝癌细胞作用
研究[J]. 中国药房，2008，19（9）：652-653.
（编辑：梁进权）
组 别
模型对照组
FL0810低剂组
FL0810高剂组
FL0810+CTX组
CTX组
剂量/g·kg-1
-
0.1
0.2
0.2+0.03
0.03
生存天数/d
15.2±2.66
16.9±3.54
18.2±2.66*
19.3±2.91**
17.8±2.10*
生命延长率/%
11.18
19.74
26.97
17.11
供试品浓度 /μg·mL-1
50
100
150
200
250
抑制率%
3.89±2.34
35.49±3.46
60.68±3.12
87.57±7.35
92.21±1.31
光
密
度
值
（
OD
）
供试品浓度/μg·mL-1
表 2 FL0810对 DU145增殖的抑制作用（x± s，n=6）
Table 2 Inhibitive effect of FL0810 on proliferation of human
prostate neoplasm cancer cells DU145
图 2 FL0810不同浓度对 DU145细胞生长的作用
Figure 2 Effect of FL0810 on cell growth of human prostate neo－
plasm cancer cells DU145
表 3 FL0810对S180腹水瘤小鼠生命延长率的影响（x±s，n=10）
Table 3 Effect of FL0810 on prolonging survial time of mice bear－
ing ascites tumor of S180
注：与模型对照组比较， *P < 0.05， **P < 0.01。
642· ·