全 文 ：2010, Vol.27 No.1化学与生物工程
Chemistry & Bioengineering92　
收稿日期:2009-10-28
作者简介:吴军侠(1972-), 女 ,陕西西安人 , 执业药师 , 研究方向:中药制剂学和中药现代化工程;通讯作者:赵红侠 ,执业药师。 E-
mail:zhxyjt@126.com。
高效液相色谱法测定甜瓜蒂中葫芦素 B含量
吴军侠 ,赵红侠
(陕西天远药业有限公司 ,陕西 西安 710072)
　　摘　要:建立了高效液相色谱法测定甜瓜蒂药材中葫芦素 B 含量的方法。采用 H yper sil C18色谱柱 ,以乙腈-0.05
mol· L -1 K 2HPO 4(40∶60)为流动相 ,波长 228 nm 下检测。葫芦素 B浓度在 25.2～ 252 μg·m L-1范围内线性关系良
好 ,平均回收率为 98.82%。不同产地药材的葫芦素 B 含量相差很大。该法简便快速 、重现性好 , 可用于甜瓜蒂药材中
葫芦素 B 含量的测定。
关键词:葫芦素 B;甜瓜蒂;高效液相色谱
中图分类号:O 657.72　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:1672-5425(2010)01-0092-03
　　甜瓜蒂为葫芦科一年生草质藤本植物甜瓜(Cuc-
umis melo L.)的果蒂 ,别名瓜蒂 、苦丁香 , 始著录于
《神农本草经》 ,为上品之药 ,系《中国药典》一部 1977
年版收载品种 ,味苦 ,性寒 ,入胃经 ,可用于治疗痰涎宿
食 、壅塞上脘 、胸中痞鞭 、风痰癫痫 、湿热黄疸 、四肢浮
肿 、鼻塞 、喉痹等。实践证明甜瓜蒂治疗顽固性黄疸疗
效显著[ 1] 。成分研究表明 ,甜瓜蒂主要含葫芦素系化
合物 ,包括葫芦素 B 、葫芦素 E 、葫芦素 D 、异葫芦素B 、
葫芦素 B葡萄糖苷等 ,还含有甾醇 、皂苷及氨基酸[ 2] 。
葫芦素系化合物中 , 葫芦素 B(Cucurbi tacin B)占
80%以上 ,是抗肝炎 、肝癌的有效单体 ,主要用于因湿
热毒盛所致迁延性肝炎 、慢性肝炎及原发性肝癌的辅
助治疗[ 3] 。虽然高效液相色谱(HPLC)已成为中药原
料和制剂质量控制的重要手段 ,但运用 HPLC 测定葫
芦素 B 的报道很少[ 4 ～ 6] ,且尚未见用于甜瓜蒂中葫芦
素 B的测定报道 。作者采用高效液相色谱法测定葫
芦素 B含量 ,方法简便 、快速 、可靠 、实用 ,可作为甜瓜
蒂药材的质量控制方法 。
1　实验
1.1　材料 、试剂与仪器
甜瓜蒂药材购自西安药材批发市场。
葫芦素 B对照品(TLC 检查为单一斑点 ,归一化
法计算纯度为 99.13%),百灵威化学技术有限公司;
乙腈为色谱纯 ,水为超纯水 ,其它试剂为分析纯 。
L2000型高效液相色谱仪 ,紫外可见光检测器;
UV-1200型紫外可见分光光度计。
1.2　方法
1.2.1　色谱条件
色谱柱:Hypersi l C18柱(4.6 mm ×250 mm , 5
μm);流动相:乙腈-0.05 mol · L-1K 2 HPO 4(40 ∶
60);检测波长:228 nm 。在此条件下葫芦素 B峰与其
它杂质峰 R>1.5 ,理论板数按葫芦素 B 峰计达 3000
以上。
1.2.2　对照品溶液的配制
精密称取葫芦素 B 对照品适量 ,置棕色瓶中 ,加
乙腈制成 100 μg ·mL -1的溶液。
1.2.3　供试液的配制
取甜瓜蒂 , 粉碎 ,过 100 目筛 , 精密称取适量置
100 mL 容量瓶中 ,加甲醇 100 mL ,浸泡过夜 ,超声处
理 60 min ,放冷 ,加甲醇定量 ,微孔滤膜过滤 ,取续滤
液进样测定。
1.2.4　标准曲线的绘制
称取葫芦素 B 对照品约 25 mg , 精密称定 ,置
100 mL 容量瓶中 ,用流动相溶解并稀释至刻度 ,摇
匀 。精密量取 1 mL 、2 mL 、5 mL 、7.5 mL 和 10 mL ,
置 10 mL 容量瓶中 ,用流动相稀释至刻度 ,摇匀。分
别取 20 μL 注入液相色谱仪 ,记录峰面积 ,以峰面积
A对浓度 c(μg ·mL-1)绘制标准曲线 , 拟合线性回
归方程 A= 4610.4c-1023 , R =0.9994(n=5),线
性范围 25.2 ～ 252 μg ·mL -1 。
吴军侠等:高效液相色谱法测定甜瓜蒂中葫芦素 B含量/2010 年第 1期 93　
2　结果与讨论 2.1　高效液相色谱图(图 1)
图 1　葫芦素 B对照品(a)和甜瓜蒂药材(b)的 HPLC图谱
Fig.1　HPLC Chromatograms of cucurbitacin B(a)and Cucumis melo L.(b)
2.2　稳定性实验
取甜瓜蒂药材 ,按 1.2.3方法配制溶液 ,放置 0 h 、
1 h 、2 h 、6 h 、12 h分别进样 ,各测定 5次 ,结果葫芦素
B含量测定的 RSD为 1.34%。
2.3　重复性实验
取甜瓜蒂药材 ,按 1.2.3方法配制溶液 ,测定其葫
芦素 B 含量 , 测定 5 次 , 其葫芦素 B 平均含量为
0.821%,RSD=1.68%。
2.4　回收率实验
精密称取已测定含量的样品适量 ,加入定量的葫
芦素B对照品 ,按 1.2.2和1.2.3方法配制溶液 ,测定
葫芦素 B的含量 ,计算回收率 ,结果见表 1。
表 1　 葫芦素 B的回收率
Tab.1 Recovery of cucurbitacin B(n=6)
Cucu rbitacin B f rom
Cucum is melo L./mg
Cucu rbi tacin B
added/mg
Cucurbi tacin B
found/m g Recovery/ %
4.297 3.024 7.231 96.99
4.377 3.024 7.362 98.65
4.112 4.032 8.039 97.43
4.076 4.032 8.108 100.00
3.927 5.040 9.052 101.60
3.864 5.040 8.814 98.14
　　由表 1 可知 , 平均回收率为 98.82%, RSD =
1.75%。
2.5　样品测定
取不同产地的甜瓜蒂 ,按上述方法操作 ,测定葫芦
素 B的含量 ,结果见表 2。
表 2 不同产地甜瓜蒂药材的葫芦素 B含量
Tab.2 Cucurbitacin B content of samples
from different producing area
产地 陕西户县 陕西渭南 宁夏中卫 河北邯郸 江西吉安 四川德阳
含量/ % 0.821 1.123 0.987 0.952 0.647 0.622
由表 2可知 , 6个不同产地药材的葫芦素 B 含量
差别较大 ,总体来说 ,北方药材的葫芦素 B含量高于
南方药材 ,可能与各地土壤 、气候 、采收时间有关 。
2.6　讨论
(1)葫芦素 B分子结构中仅含α,β-不饱和酮的共
轭结构(图 2), β-位含一烷基取代基 ,其最大紫外吸收
波长预计为(215+12)nm 。紫外扫描测定结果显示 ,
其最大吸收波长为 228 nm ,符合经验计算结果 ,也与
文献报道完全一致[ 4 ～ 6] 。故检测波长采用 228 nm 。
图 2　葫芦素 B的分子结构
Fig.2　Molecular structure of cucurbitacin B
(2)采用甲醇系统分析 ,发现测定重复性较差 ,这
可能是由于甲醇在 230 nm 的吸光度约为 0.15 ,本底
吸收大 ,不同程度地影响到测定结果 。改用乙腈-0.1
mol·L -1 K2 HPO 4为流动相后 ,测定重复性大幅提
高 ,符合定量要求 。
吴军侠等:高效液相色谱法测定甜瓜蒂中葫芦素 B含量/ 2010 年第 1 期94　
3　结论
建立了高效液相色谱法测定甜瓜蒂药材中葫芦素
B 含量的方法。采用 Hypersi l C18色谱柱 , 以乙腈
-0.05 mo l·L-1 K2HPO 4(40∶60)为流动相 ,波长
228 nm 下检测。葫芦素 B 浓度在 25.2 ～ 252 μg ·
mL-1范围内线性关系良好 ,平均回收率为 98.82%。
不同产地药材的葫芦素 B 含量相差很大 。该法简便
快速 、重现性好 ,可用于甜瓜蒂药材中葫芦素 B 含量
的测定 。
参考文献:
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的含量[ J] .中草药 , 2003 , 34(5):421-422.
[ 5] 　黄璐琦 ,姚三桃.高效液相色谱法测定湖北栝楼根中葫芦素 B的
含量[ J] .中国中药杂志 , 1994 , 19(8):490-491.
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的含量[ J] .中草药 , 1994 , 25(10):555-557.
Determination of Cucurbitacin B in Cucumis Melo L.by HPLC
WU Jun-xia , ZHAO Hong-xia
(Shan xi T ianyuan Pharmaceut ical Co.,Ltd.,X i′an 710072 ,China)
Abstract:A method for the determination of cucurbitacin B in Cucum is melo L.was described using high
prefo rmance liquid chromatog raphy.The determination w as pe rfo rmed on Hype rsil C18column by UV detector
at 228 nm w ith acetoni trile -0.05 mol·L-1 K 2HPO 4(40∶60)as mobile phase.T here w as a linear correlation
betw een peak area and concentration o f cucurbitacin B w i thin the range of 25.2 ～ 252 μg ·mL -1 .The average
recovery w as 98.82%.Seven samples f rom dif ferent producing area w ere dete rmined.This developed method is
convenient , accurate and reproducible.It serves as a novel w ay to determine cucurbi tacin B in Cucumis melo L ..
Keywords:cucurbi tacin B;Cucumis melo L.;HPLC
广西金源破解木薯乙醇节能难题
如何对木薯深加工过程进行节能改造 ,一直是中小型木薯乙醇企业面临的一道难题 。广西金源酒精实业有
限公司采用木薯乙醇深加工技术较好地解决了这一难题 。
金源公司将乙醇生产过程中的蒸煮 、蒸馏等主要用汽工序的余热交换回收 ,变传统的水冷却为料浆冷却 ,通
过螺旋板式换热器对热 、冷两种不同温度醪液进行热交换及回用 ,不但节约了大量蒸汽 ,节煤 10%,还节约大量
的冷却水 ,日减少水资源消耗 8000 m3 。
另外 ,在传统乙醇生产过程中 ,会有高浓度 、高 COD含量的乙醇糟排出 。该公司原有的生化处理系统满足
不了废液处理需求 。为了综合治理废液 ,该公司进行了技术“会诊” ,决定实施废水治理及沼气回收发电技术改
造 。他们采用固液分离和上流式厌氧污泥床反应器技术 ,对废液进行二次厌氧处理 ,日处理能力达 6000 m3 ,并
回收由此产生的大量沼气供锅炉使用 。然后采用序批式活性污泥法技术对经厌氧处理后的废液进行二次好氧处
理 ,进一步处理废液中的 COD及其它有机物 ,实现水质达标排放。
经过上述技术改造 ,该公司每年减少温室气体 CO2 排放量 83 840 t 、冷却水量近 264万 t 、COD 排放量 8.89
万 t ,年用煤量降低 40%,年节煤 32 000 t ,减少二氧化硫排放量 400 t以上 。
(摘编)