全 文 ：FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
食 品 科 技
2010年 第 35卷 第 5期
Study on the extraction process of cucurbitacin B from
Cucumis melo L.
SHAN Hai-feng, TANG Lan, LI Le, SHAN Wei-guang*
(Zhejiang University of Technology, Hangzhou 310014)
Abstract: Study on the ethyl alcohol extraction in the cucurbitacin B extraction process from Cucumis melo L.
Take in cucurbitacin B content as a target, with orthogonal tests method to the ethyl alcohol density, ratio of
material to liquid, the extraction time, times of extraction 4 factors has conducted the research. Uses the HPLC
determination: the chromatographic column is XDB-C18 (4.6 mm×150 mm), the flowing for the methyl alcohol -
water(60∶40, v/v), the speed of flow is 0.8 mL/min, the column warm 25 ℃, the examination wave length is 228
nm. Obtains the best technological conditions is: Under 80 ℃ the condition, take 65% ethyl alcohol as the
resolver, ratio of material to liquid 11, the extraction time is 0.5 h, the times of extraction is 3 times, its
cucurbitacin B relative extraction rate is 86.15%. The process is feasible, reasonable.
Key words: Cucumismelo L.; cucurbitacin B; extraction process
单海峰， 唐 岚， 李 乐， 单伟光 *
(浙江工业大学，杭州 310014)
摘要： 采用乙醇回流提取的方法筛选了从甜瓜蒂中提取葫芦素 B的最佳工艺。方法：葫芦素 B
的含量为评价指标，用正交试验的方法对乙醇浓度、料液比、提取时间、提取次数 4个因素进
行了考察，采用高效液相色谱法测定葫芦素 B的含量：色谱柱为 XDB-C18(4.6 mm×150 mm)，流
动相为甲醇-水(60∶40，v/v)，流速为 0.8 mL/min，柱温 25 ℃，检测波长为 228 nm。结果：得到
最佳工艺条件为：以 65%乙醇为溶剂，在 80 ℃条件下，料液比 11∶1，回流提取 0.5 h，提取次数
3次,其葫芦素 B的相对提取率可达 86.15%。结论：优选所得工艺合理可行。
关键词： 甜瓜蒂；葫芦素 B；提取工艺
中图分类号： TS 201.2 文献标志码： A 文章编号： 1005-9989(2010)05-0219-03
甜瓜蒂中葫芦素 B提取
工艺研究
收稿日期： 2009-07-31 *通讯作者
基金项目： 2006年浙江省中药现代化专项项目(20060356)。
作者简介： 单海峰(1985—)，男，硕士研究生，研究方向为天然药物的提取与分离。
甜瓜蒂(Cucumismelo L.)为葫芦科植物甜瓜的
果蒂，又名瓜蒂、瓜丁、苦丁香、甜瓜把。味苦，
性寒，有毒，归脾、胃经，具有涌吐痰宿食，泻
水祛湿退黄等功能。目前从甜瓜蒂中已经分离得
到的有葫芦素B、E、D，异葫芦素B，葫芦素B-葡
萄糖苷。另外还含有α-菠菜甾醇、豆甾-7-烯-
3β-醇[1]。药理作用表明，葫芦素B(cucurbitacin B，
结构式见图1)是抗肝炎和抗癌的主要有效单体。为
提取物与应用
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DOI:10.13684/j.cnki.spkj.2010.05.006
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了充分提取其有效成分葫芦素B，本实验采用单因
素考察及正交试验设计，对甜瓜蒂中葫芦素B提取
进行了研究，确定最佳的提取工艺。
1 材料与仪器
1.1 材料
甜瓜蒂药材：购自安徽亳州，经鉴定为葫芦
科植物甜瓜(Cucumis melo L.)的干燥果蒂；葫芦素
B对照品：自制，色谱归一法含量不低于98%；甲
醇：色谱纯；水：重蒸水；其余试剂均为分析纯。
1.2 仪器
UV2450型紫外-可见分光光度计：日本岛津；
Agilent 1200型高效液相色谱仪：美国安捷伦；
R210旋转蒸发仪：瑞士步琪。
2 方法与结果
2.1 葫芦素B对照品的制备
2.2 葫芦素B含量测定方法
2.2.1 葫芦素B吸收光谱的测定 葫芦素B适量用
甲醇溶解，在200～600 nm 波长范围内扫描，确定
吸收光谱，选取测定波长。由图1可知，选择最大
测定波长为228 nm。
2.2.2 色谱条件 色谱柱为XDB-C18(4.6 mm×150
mm)，流动相为甲醇-水(60∶40，v/v)，流速为0.8
mL/min，柱温25 ℃，检测波长为228 nm。
2.2.3 标准曲线绘制 分别精密配制0.4、0.2、
0.1、0.05、0.025 mg/mL的浓度的葫芦素B对照品溶
液，分别精密吸取各浓度对照品溶液5 μL，经
HPLC测定，即得。以对照品溶液的进样浓度为横
坐标，峰面积为纵坐标，得到标准曲线方程：Y=
7893.3X-1.4625，R=0.9999 实验结果表明，葫芦
素B浓度在0.025～0.4 mg/mL 范围内 , 线性关系良
好，见图2。
2.3 甜瓜蒂中葫芦素B提取方法研究
2.3.1 提取温度的考察 根据甜瓜蒂中有效成分
葫芦素的理化性质，选取温度65、70、80、90 ℃
为单因素考察水平，进行实验。
2.3.2 方法 取甜瓜蒂药材4份，每份称取10 g，
在平行操作的条件下，加11倍量65%乙醇，分别在
65、70、80、90 ℃温度条件下回流提取0.5 h，提
取3次，提取液减压滤过，滤液加65%乙醇定容至
500 mL。经HPLC检测，65、70、80、90 ℃温度条
件下，葫芦素B的含量分别为84.2、96.4、105.9、
97.5 mg。温度与葫芦素B提取率的关系见表1。
结果表明，回流温度为80 ℃时，葫芦素B的提
取高于温度为65、70 ℃和90 ℃。
2.4 正交实验优选提取条件
选择影响葫芦素B提取率的料液比、乙醇浓
度、提取次数，提取时间为考察因素，以葫芦素B
的含量为评价指标进行L9(34)正交实验，因素水平
设计见表2。
实验方法：取甜瓜蒂10 g，按L9(34)正交表设定
条件进行回流提取，回流温度均为80 ℃。提取液
过滤，合并，浓缩。加各自乙醇浓度定容至500
mL，备用。按2.1项下葫芦素B的含量测定方法测
定葫芦素含量。
结果：正交实验设计及结果、方差分析结果
见表3和表4。
图 1 葫芦素 B的结构
HO
O
O
HO O
OAc
H H
图 1 葫芦素 B的紫外吸收图谱
200.00 3000.00 400.00 500.00 600.00
1.000
0.500
0.000
-0.100
Ab
s
12
5
11 10 9 8 7
1234
6
图 2 葫芦素 B标准曲线
3500
3000
2500
2000
1500
1000
500
0
峰
面
积
(A
)
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4 0.45
对照品浓度/(mol/mL)
葫芦素 B标准曲线
表 1 温度对葫芦素 B提取的影响
温度/℃ 65 70 80 90
葫芦素 B提取含量/mg 84.2 96.4 105.9 97.5
提取物与应用
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表 2 因素水平表
水平
因素
料液比
A
乙醇浓度/%
B
提取次数/次
C
提取时间/h
D
1 1:9 55 1 1
2 1:11 65 1.5 2
3 1:13 75 2 3
结果分析：以葫芦素B为考察指标时，4个因
素的影响大小顺序为乙醇浓度、提取时间、料液
比、提取次数，最佳工艺为A2B2C1D3，即用11倍量
65%乙醇提取3次，每次1 h。因素C中，因素D中，
考虑到提取时间对葫芦素B的影响不大，为了节约
时间，同时考虑到葫芦素B在溶液中可能转化为
葫芦素E，故将提取时间选为每次0.5 h。
2.5 验证实验
称取甜瓜蒂10 g，按最佳工艺X(11倍量65%乙
醇提取3次，每次1h)和选定工艺Y(11倍量65%乙醇
提取3次，每次0.5 h)进行重复验证对比实验，测定
葫芦素B含量，结果见表5。
可见，以葫芦素B含量为考察指标时，选定工
艺Y(11倍量65%乙醇提取3次，每次0.5 h)比最佳工
艺X(11倍量65%乙醇提取3次，每次1 h)要好，而且
选定工艺更加省时，节能。相对提取率达到
86.15%。
3 结论
甜瓜蒂中含有多种葫芦素类单体，其中葫芦
素B是抗肝炎和抗癌的主要有效单体，是甜瓜蒂中
具有代表性的活性成分。本文以葫芦素B为评价指
标，筛选出的甜瓜蒂提取工艺是合理的。用回流
提取法，其葫芦素B的相对提取率可达86.15%，确
定最佳提取工艺为在回流温度为80 ℃条件下，乙
醇体积为65%，乙醇用量为药材质量的11倍，回流
提取3次，每次0.5 h。
参考文献：
[1] 宋立人,等.现代中药学大辞典(上册)[M].北京:人民卫生
出版社,2000:722-724
[2] 吉宏,李宗友.葫芦素及其药理学研究.国外医学中医中
药分册,1996,18(6):13-14
[3] 张霄翔.葫芦素片中葫芦素 BE化学稳定性预测.基层中
药杂志,1997,11(1):44-46
表 3 正交实验设计及结果
实验号
因素 葫芦素 B
的含量/mgA B C D
1 1 1 1 1 71.8
2 1 2 2 2 91.1
3 1 3 3 3 78.0
4 2 1 2 3 63.9
5 2 2 3 1 96.6
6 2 3 1 2 81.8
7 3 1 3 2 64.4
8 3 2 1 3 96.8
9 3 3 2 1 68.3
k1 240.9 200.1 250.4 236.7
k2 242.3 284.5 223.3 237.3
k3 229.5 228.1 239 238.7
极差 R 12.8 84.4 27.1 2
优水平 A2 B2 C1 D3
表 4 方差分析结果
方差来源 偏差平方和 自由度 方差比
A 32.86 2 1.96
B 1232.04 2 73.41
C 123.43 2 7.35
D 0.70 2 0.04
误差 33.56 4
注：葫芦素 B的含量指相当于原生药的百分比。
注：F0.05(2,4)=6.94;F0.01(2,4)=18.00。
表 5 验证实验及结果
实验号 实验条件
葫芦素 B含量
含量/% 平均含量/%
1 X 0.930
0.9612 X 0.980
3 X 0.972
4 Y 1.052
1.0615 Y 1.064
6 Y 1.068
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