免费文献传递   相关文献

利用乙醇提取香叶天竺葵中香茅醇研究



全 文 :文章编号:1001 - 4829(2012)04 - 1534 - 03
收稿日期:2012 - 02 - 12
基金项目:南亚热作资源保护专项“热带香辛饮料作物种质资
源圃”(11RZZY-08)
作者简介:陈 鹏(1965 -) ,广东潮阳人,助理农艺师,主要研
究驱蚊草生物资源,ccp51@ 163. com,* 为通讯作者。
利用乙醇提取香叶天竺葵中香茅醇研究
陈 鹏1,2,谭乐和1,2,徐 飞1,刘向阳1,郝朝运1,2,吴 刚1,2,张翠玲1,2*
(1.中国热带农业科学院香料饮料研究所,海南 万宁 571533;2.农业部香辛饮料作物遗传资源利用重点实验室,海南 万宁 571533)
摘 要:本文利用香叶天竺葵的叶片,对香叶天竺葵中香茅醇的提取率进行研究。对提取香茅醇的最适乙醇浓度、温度、时间、料
液比分别进行了测定。结果表明,乙醇提取法的最佳工艺条件为乙醇浓度 75 %、温度 40 ℃、时间 4 h、料液比 1∶ 20 的最佳组合,在
该条件下香茅醇提取率可达 0. 88 mg /g。
关键词:香叶天竺葵;香茅醇;提取率
中图分类号:S567. 23 + 9 文献标识码:A
Optimization Experiment to Extract Citronellol from
Pelargonium graveolens with Ethanol
CHEN Peng1,2,TAN Le-he1,2,XU Fei1,LIU Xiang-yang1,HAO Chao-Yun1,2,WU Gang1,2,ZHANG Cui-ling1,2*
(1. Spice and Beverage Research Institute,Chinese Academy of Tropical Agriculutural Sciences,Hainan Wanning 571533,China;2. Key
Laboratory of Genetic Resources Utilization of Spice and Beverage Crops,Ministry of Agriculture,Hainan Wanning 571533,China)
Abstract:The extraction rate of citronellol from leaves of Pelargonium graveolens were determined. The optimum ethanol concentration,tem-
perature,time,and solid-liquid ratio for extracting the citronellol were examined. The results of statistical analysis showed that the ideal ex-
traction condition was as follows:75 % ethanol concentration,40 ℃,4 h,and 1∶ 20 of the solid-liquid ratio. Under this condition,the ex-
traction rate of citronellol from leaves of Pelargonium graveolens was 0. 88 mg /g.
Key words:Pelargonium graveolens;Citronellol;Extraction rate
香叶天竺葵(Pelargonium graveolens L.)牛儿
科,天竺葵属,为多年生草本植物或亚灌木,原产地
非洲南部,我国已引入 7 种广泛用于栽培[1 ~ 2]。
Zanmureenko(1979)和 Fomacek and kubeczka(1982)
用色质联动分析了香叶油的主要成分,方洪钜等和
于维国等用毛细管色谱与核磁共振仪也对香叶油作
了化学成分分析,现已基本确定各种不同来源的香
叶油主要成分为香茅醇、香叶醇、芳樟醇、异薄荷酮、
甲酸香叶醋和甲酸香茅醋等近种成分,这 6 种成分
约占总量的 76. 6 %[3 ~ 8]。香叶油提取自香叶天竺
葵鲜叶与茎杆,粘稠油状呈橙色,气味清新似薄荷,
芬芳如玫瑰,因此香叶油是制造香水、精油、驱蚊剂
的常用原料[9 ~ 11]。随着近几年对香叶油的研究,其
开发的药用价值正渐渐被人们发掘出来。本研究采
用乙醇提取法从香叶天竺葵鲜叶中提取香茅醇,为
香叶油驱蚊产品的开发利用提供理论依据。
1 材料与方法
1. 1 材料与仪器
材料:香叶天竺葵叶片于 2011 年 6 月份采自海
南省兴隆香料饮料研究所试验基地,采收完全成熟
的香叶天竺葵叶片→清洗→摊放、摊薄→晒干→粉
碎。过 100 目筛备用;香茅醇生化试剂(sigma 99
%)、甲醇、乙醇、乙腈等均为分析纯。
仪器:粉碎机(广东佛山市顺德区欧科电器有
限公司)、电子天平(梅特勒 - 托利多仪器有限公
司)、超纯水机(锐思捷科学仪器有限公司)、电热恒
温水浴锅(天津市泰斯特仪器有限公司)、SHB -循
环式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)、旋转
蒸发仪(东南科创有限公司 IKA RV10)、安捷伦液
相色谱仪-1260。
4351
西 南 农 业 学 报
Southwest China Journal of Agricultural Sciences
2012 年 25 卷 4 期
Vol. 25 No. 4
DOI:10.16213/j.cnki.scjas.2012.04.060
1. 2 试验设计
1. 2. 1 不同乙醇浓度的提取试验 在料液比 1∶ 20
提取温度为 40 ℃,提取时间为 4 h 的条件下,比较
不同乙醇浓度(A1 25 %、A2 50 %、A3 75 %、A4
100 %)对香叶天竺葵叶片香茅醇提取效果的影响。
1. 2. 2 不同温度的提取试验 在料液比为 1 ∶ 20,
乙醇浓度为 75 %,提取时间为 4 h 的条件下,比较
不同提取温度(B1 30 ℃ 、B2 40 ℃、B3 50 ℃、B4 60
℃)对香叶天竺葵叶片香茅醇提取效果的影响。
1. 2. 3 不同时间的提取试验 在料液比为 1 ∶ 20,
乙醇浓度为 75 %,提取温度为 40 ℃的条件下,比较
不同提取时间(C1 2 h、C2 4 h、C3 6 h、C4 8 h)对香
叶天竺葵叶片香茅醇提取效果的影响。
1. 2. 4 不同料液比的提取试验 乙醇浓度为 75
%,提取温度 40 ℃,提取时间 4 h 条件下比较不同
的料液比(D1 1∶ 10、D2 1∶ 20、D3 1∶ 30、D4 1∶ 40)香
叶天竺葵叶片香茅醇提取效果的影响。
1. 3 优化试验设计
为近一步优化乙醇提取香叶天竺葵中香茅醇试
验条件,在单因素试验的基础上,设计四因素水平的
优化试验,确定最佳提取条件。
1. 4 试验方法
先准确称取 5. 0 g 香叶天竺葵粉末,用提取剂
按照试验方案的料液比溶解于 200 mL溶量瓶中,在
试验方案条件下进行提取,重复 3 次,提取液用滤纸
过滤,并用旋转蒸发仪浓缩,取浓缩液用乙醇定溶于
25 mL的容量瓶,摇匀,放置 10 min 后,用 0. 45 μm
滤膜过滤后直接进样。
1. 5 数据分析
乙醇提取浓度、温度、时间、料液比分别进行单
因素方差分析,用 LSD 法(α = 0. 05)比较各处理的
差异显著性。上述统计工作用 SPSS 16. 0(SPSS
Inc.,USA)统计软件完成。
2 结果与分析
2. 1 单因素试验
2. 1. 1 乙醇浓度对提取效果的影响 不同浓度的
表 1 乙醇浓度对提取效果的影响
Table 1 Effects of ethanol concentration on extraction efficiency
处理
香茅醇含量
(均值 ±标准误)
(mg /g)
95 %置信区间(%)
下限 上限
A1 0. 25 ± 0. 02 a 0. 15 0. 35
A2 0. 31 ± 0. 01 a 0. 24 0. 38
A3 0. 87 ± 0. 01 b 0. 82 0. 92
A4 0. 61 ± 0. 02 c 0. 49 0. 72
注:* 香茅醇以各重复的均值 ±标准误来表示。不同小写字母
表示差异显著(单因素方差分析,P < 0. 01) ,下同。
表 2 温度对提取效果的影响
Table 2 Effects of temperature on extraction efficiency
处理
香茅醇含量
(均值 ±标准误)
(mg /g)
95 %置信区间(%)
下限 上限
B1 0. 44 ± 0. 01 a 0. 38 0. 52
B2 0. 79 ± 0. 01 b 0. 75 0. 85
B3 0. 52 ± 0. 01 c 0. 49 0. 55
B4 0. 35 ± 0. 01 d 0. 28 0. 41
乙醇对香茅醇提取有不同程度的影响(表 1)。单因
素方差分析表明,乙醇浓度对提取率的影响有显箸
性差异(F3,11 = 206. 0,P < 0. 01)。而 A3 处理的提
取率显著高于 A1、A2、A4,香茅醇提取率随着浓度
的增大而增加,当乙醇浓度达 75 %,香茅醇提取率
最高为 0. 87 mg /g,当乙醇浓度提高到 100 %时,提
取率反而下降。
2. 1. 2 温度对提取效果的影响 从表 2 可见,单因
素方差分析表明,温度对提取率的影响有显箸性差
异(F3,11 = 213. 88,P < 0. 01) ,而 B2 处理的提取率
显著高于 B1、B3、B4,香茅醇在乙醇中的提取率随
着温度升高而增加,提取香茅醇为 0. 79 mg /g。当
温度为 50 ℃时,香茅醇在乙醇中的提取率随着温度
升高而减少,乙醇提取温度以 40 ℃为宜。
2. 1. 3 时间对提取效果的影响 从表 3 可见,单因
素方差分析表明,时间对提取率的影响有显箸性差
异(F3,11 = 234. 45,P < 0. 01) ,而 C2 处理的提取率
显著高于 C1、C3、C4,香茅醇在乙醇中的提取率随
着时间增加而减少。乙醇提取时间以 4 h 为宜,提
取香茅醇为 0. 88 mg /g。
2. 1. 4 不同料液比的提取效果的影响 从表 4 可
见,单因素方差分析表明,料液比对提取率的影响有
显箸性差异(F3,11 = 65. 55,P < 0. 01) ,而 D2 处理的
提取率显著高于 D1、D3、D4,香茅醇在乙醇中的提
取率随着料液增加而增加。当料液比增加到 1∶ 30、
1∶ 40 反而下降,乙醇提取料液比 1 ∶ 20 为宜。提取
香茅醇为 0. 84 mg /g。
2. 2 优化试验
由表 5 可知,提取工艺中各因素影响程度为提
表 3 时间对提取效果的影响
Table 3 Effects of time on extraction efficiency
处理
香茅醇含量
(均值 ±标准误)
(mg /g)
95 %置信区间(%)
下限 上限
C1 0. 33 ± 0. 02 a 0. 24 0. 43
C2 0. 88 ± 0. 01 b 0. 84 0. 92
C3 0. 48 ± 0. 02 c 0. 39 0. 57
C4 0. 37 ± 0. 01 d 0. 34 0. 41
53514 期 陈 鹏等:利用乙醇提取香叶天竺葵中香茅醇研究
表 4 料液比对提取效果的影响
Table 4 Effects of solvent ratio on extraction efficiency
处理
香茅醇含量
(均值 ±标准误)
(mg /g)
95 %置信区间(%)
下限 上限
D1 0. 51 ± 0. 03 a 0. 39 0. 64
D2 0. 84 ± 0. 03 b 0. 73 0. 96
D3 0. 58 ± 0. 01 a 0. 54 0. 62
D4 0. 44 ± 0. 01 a 0. 38 0. 51
表 5 优化试验
Table 5 Optimization tests
处理
香茅醇含量
(均值 ±标准误)
(mg /g)
95 %置信区间(%)
下限 上限
CK 0. 87 ± 0. 01 0. 82 0. 92
C2A3D2B2 0. 88 ± 0. 01 0. 86 0. 90
取时间 >乙醇浓度 >提取料液比 >提取温度,最佳
提取组合为 C2A3D2B2。将优化结果进行了方差分
析,从方差分析来看,优化处理组合与处理 A3 为对
照对提取率的影响没有明显差异,优化后的组合提
取香茅醇为 0. 88 mg /g,优化处理组合提取香茅醇
工艺稳定。
3 讨论与结论
乙醇浓度、温度、时间、料液比对香叶天竺葵中
具有驱蚊效果的香茅醇的提取率有极显著的影响
(P < 0. 01) ,乙醇浓度的提取率为 A1 < A2 < A4 <
A3,A1 和 A2 差异不显著,A3 提取率高于 A1、A2、
A3,所以最佳提取乙醇浓度为 A3 (75 %) ,可能是
因为乙醇浓度高容量挥发,影响提取率的效果。提
取温度 B 处理的提取率为 B4 < B1 < B3 < B2 (P <
0. 01) ,存在差异极显著性,温度高,乙醇接近沸点
容易挥发,影响提取效果,最佳提取温度为 B2 (40
℃)。提取时间 C 处理的提取率为 C1 < C4 < C3 <
C2,差异达极显著,最佳提取时间为 C2 (4h)。提取
料液比 D处理的提取率为 D4 < D1 < D3 < D2,差异
达极显著,最佳提取料液比为 D2 (1∶ 20)。因此提
取工艺中各因素影响程度为提取时间 >乙醇浓度 >
提取料液比 > 提取温度,最 佳 提 取 工 艺 为
C2A3D2B2。
天然香料及其精油作为香精的一部分目前大量
用于各类食品、日用品、化妆产品。人们对其功能性
尚未有系统研究。本研究结果将有助于现有驱蚊产
品功能的提升或拓展,指导芳香驱蚊新产品的开发,
为天然香料提供广阔的经济市场。
参考文献:
[1]徐朗然,黄成就,李秉滔. 中国社会科学院中国植物志编辑委员
会. 中国植物志(第四十三卷,,第一分册) [M]. 北京:科学出
版社,1998.
[2]张承曾,刘景华,汪清泉. 天然香料手册[M]. 北京:轻工业出版
社,1989.
[3]B. M. Lawren. progress in essential oils[J]. Perfum Flavor ,1984,9
(5) :88.
[4]石若夫,王光林. 微波辐照诱导萃取香叶天竺葵挥发油[J]. 大
连理工大学学报,2001(5) :542 - 544.
[5]孙 伟,徐志敏,王淳凯,等. 香叶天竺葵精油及单体抗氧化能
力比较[J].中药材,2005(2) :87 - 88.
[6]袁萌芽,陈季武,陆泉枝,等.香叶天竺葵叶非精油组分清除自由
基、抗氧化作用[J].发光学报,2008(4) :381 - 385.
[7]孙 伟,瞿伟菁.香叶天竺葵的药理研究进展[J]. 中药材,2002
(8) :600 - 601.
[8]于维国,娃尼亚.香叶挥发油化学成分的研究[J].北京中医学,
1993,16(1) :33.
[9]方洪钜,苏秀玲,刘红岩,等.香叶天竺葵挥发油的化学成分及抗
瘤作[J].药学学报,1989,24(5) :366.
[10]郑青荷,姜 萍,周晓兰.香叶天竺葵鲜叶挥发油的镇咳活性成
分分析[J].生物化学工程,2011(1) :37 - 40.
[11]李大红,姚 雷,梁建生.不同月份香叶天竺葵精油的含有率与
成分变化分析[J].上海交通大学学报,,2006(8) :334 – 357.
(责任编辑 李 洁)
6351 西 南 农 业 学 报 25 卷