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藤茶总黄酮及二氢杨梅素降血脂作用研究



全 文 :茶 叶 科 学 2007,27(3):221~225
Journal of Tea Science

投稿日期:2007-01-08 修订日期:2007-04-26
基金项目:农业部农业结构调整重大技术研究专项。项目编号:06-08-02B
作者简介:陈玉琼(1968— ),女,重庆人,副教授,博士,主要从事茶用植物功能化学及综合利用的教学与研究。
藤茶总黄酮及二氢杨梅素降血脂作用研究
陈玉琼 1,倪德江 1,程倩 1,黄海波 1,孟燕 1,吴谋成 2
(1. 农业部亚热带农业资源与环境重点开放实验室,华中农业大学园艺林学学院,湖北 武汉 430070;2. 华中农业大学食品科技学院,湖
北 武汉 430070)
摘要:本文探讨了藤茶中主要活性成分黄酮及二氢杨梅素对高血脂症小鼠的降血脂效果。结果表明:与高脂模型组比
较,二氢杨梅素对高脂血症小鼠体重有明显减轻作用;黄酮及二氢杨梅素都能不同程度降低小鼠血清 TC、TG、LDL-C、
MDA含量,提高血清 HDL-C含量及 SOD活性,降低肝系数。肝脏病理学观察表明,喂饲藤茶黄酮及二氢杨梅素组
小鼠肝细胞变性、肿胀的程度减轻。说明藤茶黄酮及二氢杨梅素能降低小鼠血脂,增强机体抗氧化能力,减轻高脂对
肝细胞的损伤作用。
关键词:藤茶;黄酮;二氢杨梅素;降血脂;抗氧化
中图分类号:TS272.5+9;R972+.5 文献标识码:A 文章编号:1000-369X(2007)03-221-05


Study on the Hypolipidemic Effect of Flavones and
Dihydromyricetin From Tengcha
CHEN Yu-qiong1, NI De-jiang1, CHENG Qian1, HUANG Hai-bo1,
MENG Yan1, WU Mou-cheng2
(1. Key Lab of Subtropical Agriculture Resource and Environment MOA, College of Horticulture and Forestry Sciences Huazhong Agricultural
University, Wuhan 430070, China; 2. College of Food Science and Technology of Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China)
Abstract: The effects of Tengcha flavones and dihydromyricetin(DMY) on hypolipidemic mice were investigated. The results
showed, compared with the hyperlipidemia control group, DMY reduced the weights of mice significantly; Tengcha flavones
and DMY decreased serum TC、TG、LDL-C、malondiadehyde(MDA) contents and Liver coefficient, increased HDL-C levels
and the activities of SOD distinctly. The pathological observation on the liver tissue showed that Tencha flavones and DMY
could lighten the denaturation liver cell. As results, Tengcha flavones and DMY could prevent hypolipidemia in mice and
protect myocardial cells from oxidation and the liver harmful from of high lipid.
Keywords: ampelopsis-grossedentata, flavone; Dihydromyricetin, hypolipidemic, antioxidation


随着现代生活水平的提高,人们进食高脂、
高蛋白等食物增加,导致中老年人高血脂症患者
越来越多。而高血脂极易导致各种心脑血管疾病
的发生,严重威胁着人们的身心健康。现有的降
血脂药物大多有副作用,不宜长期饮用。因而,
寻求从天然植物中提取具调节血脂的活性成分
越来越得到人们的关注。藤茶属葡萄科蛇葡萄属
显齿蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata),主要分
布在我国湖北、湖南、广西、江西、福建等地,
为民间茶用、药用植物,其茎叶常用于治疗感冒
茶 叶 科 学 27卷

222
发热、咽喉肿痛、黄疸型肝炎等症,已有数百年
的使用历史[1]。已有研究表明[2],藤茶安全无毒,
具有抗炎、镇痛、抑菌、抗高血压、降血糖、保
肝护肝及增强免疫等作用[3~7]。杨新跃[8]研究表
明,藤茶和荷叶水提物对大鼠具降脂减肥作用。
陈玉琼[9]、刘翠娥[10]、李玉山[11]等研究表明藤茶
水提液对高血脂大鼠有预防作用。陈晓军[12]等研
究表明,显齿蛇葡萄黄酮对蛋黄型高脂血症小鼠
血清 TC、TG有降低作用。为进一步探讨藤茶降
血脂的功能及其作用的功能成分,本文研究了藤
茶中的主要活性成分黄酮及二氢杨梅素降血脂
效果及机理,为藤茶的开发应用提供理论基础。
1 材料与方法
1.1 主要仪器及试剂
751型紫外可见分光光度计(上海棱光技术
科技有限公司);冷冻干燥仪( America,
Labconco);高速冷冻离心机( Eppendorf
Centrifuge 5810R: Germany)。TC、TG、HDL-C
试剂盒(上海科欣生物技术研究所);SOD、MDA
试剂盒(南京建成生物工程研究所)。其它试剂
均为分析纯。
1.2 样品
藤茶黄酮(HT):藤茶(来源于恩施州凤鸣藤
茶有限公司)经粉碎过 40 目,用石油醚回流去
脂后,挥干石油醚。用 70%的含水乙醇 80℃条
件下回流提取 100 min,提取液 45℃真空浓缩至
少量,然后冷冻干燥。
二氢杨梅素(DMY):上述黄酮经大孔树脂
初步纯化,再用水反复重结晶即得样品,经鉴定
为二氢杨梅素,含量 98%以上。
1.3 动物试验
1.3.1 试验动物
SPF级雌性 KM小鼠 90只,体重 20±2 g,
由湖北预防医学科学院动物中心提供,实验动物
生产许可证号为 SCXK(鄂)2003-0005。实验
温度 22~24℃,湿度 65%~80%。
1.3.2 剂量选择
高脂饲料配方(%):基础饲料 88.7,猪油
10.0,胆固醇 1.0,脱氧胆酸盐 0.3。设 9组:正
常对照(NC);高脂模型(HFC);药物对照(XZK)
(血脂康剂量 10 mg/kg·bw);黄酮低剂量(FL)
( 300 mg/kg·bw);黄酮中剂量(FM)( 600
mg/kg·bw);黄酮高剂量(FH)(900 mg/kg bw);
DMY 低剂量(DL)(100 mg/kg bw);DMY 中
剂量(DM)(300 mg/kg bw);DMY 高剂量(DH)
(500 mg/kg bw)。灌胃量 0.25 ml/20 g·bw,正常
对照组、模型组以等剂量的蒸馏水灌胃。
1.3.3 实验方法
将动物适应性喂养 3 d后,随机分为 9组,
每组 10 只。正常对照组喂以普通基础饲料,
其余组喂高脂饲料。动物自由进食和饮水,为
期 42 d,每周称体重一次,于实验第 42 d停食
不停水 8 h,称重后眼眶采血,血浆 2 000 r/min
5℃离心 10 min,立即分离出血清,5℃冷藏待
用。实验末处死动物,并解剖小鼠,肉眼观察
小鼠体内脂肪沉着情况及脏器变化情况。
1.4 小鼠血清相关指标测定方法
血清总胆固醇(TC)、血清甘油三脂(TG)、
血清高密度脂蛋白(HDL-C)、血清 SOD、血清
MDA的测定:用相应的试剂盒。
血清低密度脂蛋白(Friedewald公式计算):
LDL=TC-HDL-TG/5
动脉硬化指数:AI=(TC-HDL)/HDL
1.5 肝脏相关指标测定
肝系数测定:小鼠取血处死后,及时解剖,
取出肝脏称重并观察记载病变情况。
肝脏系数=脏器重/体重×100
肝脏病理观察:处死后的小鼠解剖后,取各
组小鼠同一叶肝脏 0.5 g左右于 10%的中性福尔
马林液中固定,并不时摇动,使肝脏固定完全、
充分。石蜡包埋切片,HE 染色,光学显微镜下
3期 陈玉琼,等:藤茶总黄酮及二氢杨梅素降血脂作用研究

223
观察组织变化,用 Olympus万用显微镜摄影记录
实验结果。
1.6 数据处理
用 SPSS软件作 T test显著性分析。
2 结果分析
2.1 藤茶黄酮及二氢杨梅素对小鼠体重的影响
藤茶黄酮及二氢杨梅素对小鼠体重的影
响见表 1。表 1表明,各组始重较模型组都无
显著差异,但实验结束时,DMY 高剂量组小
鼠体重接近正常对照组小鼠体重,都显著低于
模型对照组小鼠体重。说明,高剂量的 DMY

剂量有降低小鼠体重的作用。
2.2 藤茶黄酮及二氢杨梅素对小鼠血脂的影响
藤茶黄酮及二氢杨梅素对小鼠血脂的影响
见表 2。由表中可以看出,正常对照组小鼠血清
TC 值极显著低于模型组,说明模型成功。与模
型组比较,DMY中剂量能显著降低小鼠血清 TC
值;阳性对照药,DMY 中、高剂量,黄酮低、
中剂量能显著降低血清 TG含量;DMY、黄酮高
剂量能极显著提高小鼠血清 HDL-C 的含量;
DMY中剂量能显著降低血清 LDL-C含量。动脉
硬化指数 AI 除正常对照组极显著低于模型组
外,其余各组与模型组差异不明显。
表 1 黄酮及二氢杨梅素对小鼠体重的影响
Table 1 Efects of Tengcha flavones and DMY on weights of mice( x ± sd)
组别
Group
剂量
Dosage (g/kg·d)
动物数
Numbers of tested animal
始重
Initial weight (g)
终重
Final weight(g)
增重
Weight increasing(g)
NC - 10 22.06±1.22 30.24±1.87* 7.90±1.38*
HFC - 10 22.68±1.88 33.56±2.61 10.88±2.75
XZK 0.01 10 21.98±1.47 31.70±3.03 9.71±2.93
FL 0.30 10 21.78±1.17 32.66±2.11 10.88±2.18
FM 0.60 10 21.79±1.38 32.12±3.20 10.33±2.71
FH 0.90 10 22.15±1.64 33.00±1.95 10.32±2.84
DL 0.10 10 21.98±1.23 33.24±1.87 11.26±2.43
DM 0.30 10 21.68±1.10 31.64±2.64 9.97±2.56
DH 0.50 10 21.86±1.67 30.56±2.46* 8.87±2.75
注:NC: 正常对照组;HFC:高脂模型组;XZK:血脂康药物对照组;FL:黄酮低剂量组;FM:黄酮中剂量组;FH:黄酮高剂量组;DL:
DMY低剂量组;DM:DMY中剂量组;DH:DMY高剂量组;与高脂模型组比较在“*”:P <0.05,“**”:P<0.01,以下同。
Note:NC: Normal control; HFC: High fat control; XZK: Xuzhikang treatment group; FL: Flavones low dose group; FM: Flavones middle dose group;
FH: Flavones high dose group; DL: Dihydromyricetin low dose group; DM: Dihydromyricetin middle dose group; DH: Dihydromyricetin high dose
group. Compare with hyperlipidemia control group: * p<0.05; **p<0.01. Same as follows.

表 2 黄酮及二氢杨梅素对小鼠血脂的影响
Table 2 Effects of Tengcha flavones and DMY on serum lipid level of mice
组别
Group
剂量(g/kg·d)
Dosage
动物数
Animal numbers
TC
(mmol/l)
TG
(mmol/l)
HDL-C
(mmol/l)
LDL-C
(mmol/l)
动脉硬化指数
AI
NC - 10 3.36±0.28** 0.89±0.12** 2.23±0.13 0.950±0.20** 0.47±0.11**
HFC - 10 7.21±0.81 0.68±0.088 2.15±0.19 4.92±0.71 2.27±0.51
XZK 0.01 10 6.68±0.79 0.56±0.15* 2.28±0.35 4.29±0.75 2.00±0.57
FL 0.30 10 6.39±1.03 0.53±0.062** 2.23±0.38 4.06±1.05 1.81±0.66
FM 0.60 10 7.48±0.97 0.51±0.081** 2.27±0.169 5.11±0.96 2.31±0.47
FH 0.90 10 7.49±1.29 0.55±0.072* 2.34±0.23* 5.03±1.37 2.21±0.56
DL 0.10 10 6.91±0.68 0.65±0.073 2.28±0.28 4.51±0.72 2.05±0.50
DM 0.30 10 6.28±0.66* 0.58±0.079* 2.32±0.37 3.85±0.85** 1.86±0.53
DH 0.50 10 6.73±0.94 0.63±0.067 2.41±0.13** 4.19±0.96* 1.84±0.66

茶 叶 科 学 27卷

224
表 3 藤茶黄酮及二氢杨梅素对小鼠血清抗氧化的影响
Table 3 Effects of HT and DMY on serum SOD and MDA of mice
组别
Group
剂量
Dosage(g/kg·d)
动物数
Numbers of tested animal
血清
Serum SOD(U/ml)
血清
Serum MDA(nmol/ml)
NC - 10 163.46±25.57 9.15±1.36**
HFC - 10 160.43±11.40 12.21±2.42
XZK 0.01 10 177.04±22.56 9.29±1.60*
FL 0.30 10 177.01±12.68** 8.96±1.16**
FM 0.60 10 171.85±9.25* 10.10±1.94*
FH 0.90 10 177.00±14.64* 9.03±0.65**
DL 0.10 10 174.72±10.68* 9.99±2.52
DM 0.30 10 179.97±16.57* 8.18±1.60**
DH 0.50 10 180.78±13.61** 8.13±1.33**

2.3 藤茶黄酮及二氢杨梅素对小鼠血清抗
氧化的影响
小鼠血清抗氧化指标 SOD、MDA测定结果
如表 3所示。结果表明,与模型组比较,黄酮、
二氢杨梅素各剂量能显著提高小鼠血清 SOD 的
活性,降低小鼠血清MDA的含量;血脂康对小
鼠血清 SOD、MDA影响不明显。
2.4 黄酮及二氢杨梅素对小鼠肝脏的影响
小鼠肝脏系数测定结果表明(表 4),各剂
量组肝脏系数都极显著低于模型组。小鼠经解
剖,肉眼观察发现正常组小鼠肝呈暗红色,色泽
均匀,形态正常。模型组肝脏肿大较严重,肝呈
褐黄色,各剂量组肝色泽较模型色泽有所改善。
进一步作肝脏显微形态学观察表明(图 1~图 5),
正常对照组肝细胞的肝小叶、中央静脉、肝细胞
索、肝窦清楚,肝细胞大小较一致,细胞核、胞
浆清晰。模型组肝小叶界限不清,肝细胞肿胀,
胞浆呈空泡状,核淡染。肝窦变窄至消失。药物
组肝细胞随剂量的增加,肝细胞水泡的细胞数量
减少,肝细胞变性、肿胀的程度降低,细胞间界
限较清晰。因此,藤茶黄酮及二氢杨梅素对高脂
饲养的小鼠肝脏有一定的保护作用。

表 4 黄酮及二氢杨梅素对小鼠肝脏系数的影响
Table 4 Effects of Tencha flavones and DMY on Liver coefficient
组别
Group
剂量
Dosage(g/kg·d)
动物数
Numbers of tested animal
血 清
Serum SOD(U/ml)
血清
Serum MDA(nmol/ml)
NC - 10 163.46±25.57 9.15±1.36**
HFC - 10 160.43±11.40 12.21±2.42
XZK 0.01 10 177.04±22.56 9.29±1.60*
FL 0.30 10 177.01±12.68** 8.96±1.16**
FM 0.60 10 171.85±9.25* 10.10±1.94*
FH 0.90 10 177.00±14.64* 9.03±0.65**
DL 0.10 10 174.72±10.68* 9.99±2.52
DM 0.30 10 179.97±16.57* 8.18±1.60**
DH 0.50 10 180.78±13.61** 8.13±1.33**
图 1 正常组肝脏细胞(100×)
Fig. 1 Liver cells of control(100×)

4 素对小鼠肝脏系数的影响
Table 4 The effects of Tencha flavones and DMY on Liv r co fficient
组别
Group
剂量
Dosage(g/kg.d)
动物数
Numbers of tested animal
肝系数
Liver coefficient
- 10 3.3705±0.2496**
F - 10 5.2099±0.1845
0.01 10 4.5228±0.1819**
F 0.30 10 4.8365±0.4311*
F 0.60 10 4.4973±0.5456**
F 0.90 10 4.7540±0.3375**
0.10 10 4.8748±0.3420*
0.30 10 4.2931±0.4571**
0.50 10 4.2764±0.3328**

3期 陈玉琼,等:藤茶总黄酮及二氢杨梅素降血脂作用研究

225

3 讨论
利用高脂饲料诱导大鼠高脂血症模型的研
究表明,一定剂量的藤茶黄酮及二氢杨梅素能显
著降低小鼠血清 TC、TG、LDL含量,升高血清
中 HDL-C的含量。研究表明[13],胆固醇的 LDL
是致动脉粥样硬化的重要原因之一,特别是经过
氧化修饰的 LDL(OX-LDL)。SOD是机体重要的
抗氧化酶,在清除过氧化物和保护细胞免于氧化
损伤中起重要作用。试验结果表明,藤茶黄酮及
二氢杨梅素能显著提高血清 SOD 的含量,降低
MDA 的含量,说明藤茶黄酮及二氢杨梅素可以
通过降低脂质过氧化对心血管起到保护作用。

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[下转第 242页]
图 2 模型组肝脏细胞(100×)
Fig. 2 Liver cells of model group (100×)
图 3 阳性药组肝脏细胞(100×)
Fig. 3 Liver cells of XZK treatment group (100×)
图 4 黄酮中剂量组肝脏细胞(100×)
Fig. 4 Liver cells of FM treatment group(100×)
图 5 DMY高剂量组肝脏细胞(100×)
Fig. 5 Liver cells of DH (100×)
茶 叶 科 学 27卷

242
檬醇、4-(2,4,4-三甲基-1,5-环己二烯基)-2-丁烯
-4-酮、棕榈酸甲酯等的含量要高于其它季节
的产品,尤其是 1-乙基-1H-吡咯-2-甲醛成分,
在春、夏、暑茶叶中并没有检测得到。该种成
分在茶叶香气中所起的作用还有待于进一步
研究。由于上述秋茶中含量较高的香气成分大
多为醛类和醇类,秋茶中烯类物质含量较少,
尤其是呈现青草气味的石竹烯、律草烯、杜松
烯等含量较低或较少。这些都是形成花香气味
的重要因素,所以秋茶花香要比它季节的茶叶
更明显。烯类物质含量高,醛、酮、醇类物质
含量低,可能是单丛夏、暑茶花香低淡的原因。
不同季节的单丛茶香气分析结果与感官审评
一致,即秋茶花蜜香较清醇持久,浓醇,回味
甘,不失为优异的单丛品质特征。综合感官审
评和理化分析结果,由于春茶氨基酸含量较
高,香气成分与感官得分都与秋茶较为接近,
所以春、秋季节较适宜加工乌龙茶;而重发酵
单丛的茶黄素、茶红素、茶褐素的含量均比传
统工艺单丛要高,说明重发酵单丛具有红茶特
征,可作为高香型红茶原料加以利用,这对于
改良茶叶中和茶叶资源利用都具有重要意义。

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