全 文 ：九头狮子草的抗菌作用研究
覃容贵　李淑芳
(贵阳医学院药理学教研室　贵阳　550004)
摘要　采用平板打孔法 ,分别用九头狮子草全草的乙醇提取和水煎浓缩得到的药液给药 , 在营养
琼脂培养基和 LB(Luria-Ber tani)培养基上筛选出敏感细菌。然后采用试管稀释法 , 测定各敏感
菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果表明九头狮子草对金黄色葡萄球菌 、溶血性链球菌 、绿脓杆菌 、肺
炎克雷伯菌有较强的抑制作用。
关键词　九头狮子草　微生物敏感性试验　最低抑菌浓度
中国图书馆分类法分类号　R285.5　R282.71
　　九头狮子草为爵床科植物 。九头狮子草
[ Peristrope japonica(Thunb)Brem]全草 ,性
味辛 、凉 ,功用为祛风 、清热 、化痰 、解毒 ,治疗
风热咳嗽 、小儿惊风 、喉痛 、疔毒 、乳痈等 ,清
热效果尤佳[ 1] 。为推测其解热作用机理之
一为抗菌作用 ,为此 1999 年 6月 ,我们进行
了体外抗菌作用实验研究 ,报告如下。
1　实验材料
1.1　菌株　金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、
溶血性链球菌(ATCC10379)、绿脓杆菌
(ATCC28753)、肺炎克雷伯菌 ,由贵阳医学
院微生物学教研室及检验系提供。
1.2　试药　九头狮子草(市售)由贵阳医学
院药用植物学及生药学教研室鉴定 。醇提
液:80%乙醇回流提取两次 ,合并提取液 ,水
浴挥发至干 ,用蒸馏水配制成 1 g/ml浓度;
水煎液:用蒸馏水浸泡 ,煎煮两次 ,合并滤液 ,
浓缩至 1 g/ml浓度。115 ℃68.95 kPa灭菌
20 min备用。
1.3　培养基　营养琼脂 、营养肉汤均为上海
市医学化验所试剂厂生产 , LB 液体培养基
(胰蛋白胨 1 g ,葡萄糖 1 g ,氯化钠 1 g ,酵母
提取物 0.5 g 加 100 ml蒸馏水加热溶化 ,调
pH至 7.6), 2倍浓缩肉汤 ,2倍浓缩 LB培养
基 ,必要时在培养基中加 7%脱纤维羊血。
2　实验方法
2.1　平板打孔法测定各敏感细菌抑菌圈[ 2]
　将各实验菌种 35 ℃培养 5 h(溶血性链球
菌在 LB培养基中培养过夜)的液体培养物
用生理盐水校正浓度至 0.5麦氏比浊标准 ,
再用无菌棉签分别将其均匀涂布在平板上 ,
干燥后用无菌打孔器在每个平板上打三个孔
(孔径 5mm),分别加入九头狮子草醇提液 、
九头狮子草水煎液和蒸馏水 ,置 35 ℃孵育
18 h后测量抑菌圈直径 。
2.2　试管稀释法测定各敏感细菌 M IC[ 3]
2.2.1　不同浓度含药培养基的准备　取 10
支试管编号 ,每支试管内加 2 倍浓缩肉汤 2
ml ,吸取 2 ml九头狮子草醇提液加入第 1支
试管 ,混匀后依次对倍稀释至第 7管 ,制成含
药培养基 ,含九头狮子草的浓度分别为 500 、
250 、125 、62.5 、31.2 、15.6 和 7.8 g/L。10
支试管加棉塞后 , 115 ℃68.95 kPa 灭菌 20
min。
2.2.2　菌液的准备　同 2.2.1 ,用生理盐水
校正浓度至 0.5 麦氏比浊标准 ,再用营养肉
汤稀释至 1∶10(含菌约 107 CFU/ml ,CFU为
集落生成单位)。
2.2.3　接种　用微量移液器取 100 μl菌液
依次由低浓度到高浓度分别加入 7支含药试
管中(最终接种菌量约 5×105 CFU/ml),其
余 3支试管分别作有药无菌 ,有菌无药 、西药
阳性对照(金黄色葡萄球菌 、溶血性链球菌以
青霉素 G 为阳性对照 ,绿脓杆菌 、肺炎克雷
伯菌以庆大雷素为阳性对照)。
2.2.4　培养与检查　置 35 ℃孵育过夜 ,用
接种环取管底菌液涂片 ,细胞壁染色 ,镜检 。
细菌不生长的最低浓度即为药物对该菌的
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第 25卷　第 2期
2000年 6月 　 贵 阳 医 学 院 学 报JOURNALOF GUIYANG MEDICAL COLLEGE　Vol.25　No.22000.6
M IC 。
每种敏感细菌为 1 组 ,共 4组。溶血性
链球菌用 2倍浓缩 LB培养基。
3　结果
九头狮子草对金黄色葡萄球菌作用最
强 ,对溶血性链球菌 、绿脓杆菌次之 ,对肺炎
克雷伯菌较弱。见表 1 、表 2。
表 1　平板打孔法实验用菌株抑
菌圈直径( x ±s)
Tab.1　The diameters of antibacterial circle
of experimental bacterium w ith disc agar
dif fusion method( x ±s)
菌株 抑菌圈直径(mm)醇提液 水煎液
金黄色葡萄球菌 18.5±0.15 15.4±1.30
溶血性链球菌 13.7±0.85 15.2±1.91
绿脓杆菌 14.7±0.83 12.7±0.70
肺炎克雷伯菌 11.4±1.06 10.8±0.40
4　讨论
4.1　九头狮子草有较强的解热作用 ,民间医
生常用来治疗肺炎 、小儿惊风 、原因不明的高
热等 。上述实验结果提示其解热作用机理之
一可能为抑制病原微生物 ,从而抑制机体内
致热原的产生。
表 2　试管稀释法实验用菌株 M IC
Tab.2　The MIC of experimental bacterium
with tube broth method
菌株 最低抑菌浓度(g/ L) 药物稀释度
金黄色葡萄球菌 31.2 1∶32
溶血性链球菌 62.5 1∶16
绿脓杆菌 62.5 1∶16
肺炎克雷伯菌 500.0 1∶2
4.2　九头狮子草醇提液的抑菌作用强于水
煎液 ,80%乙醇回流提取液中主要含黄酮类 ,
水煎液中主要含甙类 ,可初步推测其抗菌作
用有效成分为黄酮类物质 。
4.3　用试管稀释法测定敏感细菌 M IC ,细
胞壁染色镜检时 ,发现细菌形态发生显著变
化 ,表现为菌体明显增大 ,呈球形或不规则
形 ,为典型的细胞壁缺陷镜下表现 。因而推
测九头狮子草抗菌作用机理在于破坏细菌细
胞壁 ,对此将作进一步研究。
参考文献
1　江苏新医学院编.中药大辞典.上海;新华书店
上海发行所 , 1986.48 ～ 49
2　陈奇主编.中药药理研究方法学.北京:人民卫
生出版社 , 1993.276
3　李影林主编.临床微生物学及检验.北京:人民
卫生出版社 , 1995.85
(1999-07-12 收稿 , 1999-09-14 修回)
An Experimental Study on Antibacterial Action
of Peristrope japonica(thunb)Brem
Qin Ronggui , Li Shufang
Department of Parmacology , Guiyang Medical College
The tincture and decoction of Peristrope japonica(thunb)Brem were prepared and the
method of disc agar diffusion was used to choose susceptible bacterium on the medium of agar and
LB.Then the method of tube broth was used to test the MIC of each susceptible bacterium.The
result indicated that Peristrope japonica (Thunb)Brem had strong antibacterial action on
S taphylococcus aureus , S .treptococcus hemolyticus , Pseudomonas aeruginosa and Klebsiel la
pneumonia.
Key Words　Peristrope japonica(thunb)Brem;microbial sensitivity test;minimal inhibi to-
ry concentration
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　2期　　　　　　　　　覃容贵等　九头狮子草的抗菌作用研究