全 文 ：种在种植生长过程中 ,一年内每月植株的生长积累
量 、种植不同年限植株的最大生长积累量 、氮磷钾的
含量分析等 ,推算出药用牡丹种植过程中的科学需
肥量 。结果认为:丹皮地上部快速生长期主要在 7
月份之前 ,丹皮植株当年生嫩枝干物质积累在 6 月
底达到最大值 , 6月之后 ,地下部明显增重 ,可见根
部的增重主要在生长后期 。7月之前植株地上部生
长期对氮 、磷 、钾的吸收较高 ,而 7月之后植株根部
积累的氮 、磷 、钾较多 。可见 ,生长前期营养主要是
供地上部生长。生长后期营养主要是供地下根部生
长 。丹皮植株移栽 1年苗生长量较小 ,需肥量也较
少;移栽 2年苗地上部生长量开始增加 ,根部干物质
增加量更明显 ,但主要是根分枝增加 、增长;移栽 3 、
4年苗地上部生长量大幅度增加 ,根部干物质增加
量平稳 ,但主要是根增粗;所以种植丹皮再移栽 2年
时要追肥 ,满足丹皮生长的需要 。
另外 ,我们根据丹皮植株地上部 、地下部的营养
需要量之和 ,推算出丹皮各生长年的需肥量 ,丹皮植
株每亩 3 500株 ,生长每年的需氮约 1 500 g ,需磷约
160 g ,需钾约 640 g 。供种植丹皮的平衡施肥参考 。
收稿日期:2005-07-03
基金项目:江苏省中医药科研课题资助项目
作者简介:刘海萍(1979-),女 ,河南郑州人 ,硕士研究生,从事药用植物资源及质量研究。
药用植物茅苍术的组织培养
刘海萍 ,巢建国
(南京中医药大学 ,江苏 南京 210029)
　　摘 要:目的　针对茅苍术野生资源濒危的情况 ,系统地探讨了以组织培养为手段进行快速繁殖的途径。
方法　以叶柄和叶片为外植体 , 在 MS 培养基上添加不同的激素配比进行培养。结果　较适宜诱导叶柄形成
愈伤组织的激素组合是 2 , 4-D 4.0 mg · L -1 +Kt 0.4 mg · L-1 , 叶片适宜诱导愈伤组织的激素组合是 2 , 4-D
4.0 mg · L -1 +Kt 0.4 mg · L-1 ;对于芽的增殖 ,较适宜的激素组合是 6-BA2.0mg · L-1 +IBA0.4 mg· L-1
或 6-BA3.0 mg· L-1 +IBA0.4mg· L-1 ;而根的诱导则在 MS+IAA0.5 mg · L-1或M S+NAA0.5 mg· L-1
培养基上进行最好。结论　采用组织培养方式可以进行茅苍术的快速繁殖 ,为确保这一珍稀药用植物资源的
保护和可持续利用提供了有效途径。
　　关键词:茅苍术;组织培养;愈伤组织;芽丛
　　中图分类号:S567　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1004-2199(2005)05-0011-03
Tissue Culture of Atract ylodes lancea(Thunb.)DC.
LUI Hai-ping ,CHAO Jian-guo
(Nanjing Universi ty of Tradi tional Chinese M edicine , Nanjing 210029 ,China)
　　Abstract:Objective 　To research on the methods of rapid propagation o f Atracty lodes lancea
(Thunb.)DC.by w ay of t issue cul ture.Methods　The petiole and the leave w ere cho sen the best material
e xplants in rapid propagation.These explants w ere cultured on M S culture media by adding dif ferent po r-
tion o f hormones in various cultural conditions.Results　Fo r the petio les , the suitable hormone combina-
tion to induce callus is 2 ,4-D 4.0 mg ·L-1 +Kt 0.4 mg ·L-1 ;fo r the leaves , i t is 2 , 4-D 4.0 mg ·L-1 +Kt
0.4 mg ·L -1 ;for the advent itio us buds , they are 6-BA2.0 mg ·L-1 +IBA0.4 mg · L-1o r 6-BA3.0 mg ·
L
-1 +IBA0.4 mg ·L-1 ;and fo r the roots , they are MS+IAA0.5 mg ·L -1 or M S+NAA0.5 mg ·L-1 ,
respectively.Conclusion　To preserve resources and have a steady utilizat ion , it provided effectiv e w ay
fo r t issue culture o f A.lancea(T hunb.)DC.
　　Key words:A tracty lodes lancea(Thunb.)DC.;ti ssue cul ture ;callus ;adventitio us bud
—11—现代中药研究与实践 2005 年第 19 卷第 5 期Resea rch and Prac tice o f Chinese Medicine s
DOI :10.13728/j.1673-6427.2005.05.003
　　茅苍术 Atracty lodes lancea(Thunb.)DC.为
菊科苍术属多年生草本植物 ,又名南苍术 ,主产于江
苏 、安徽 、湖北 、河南 ,为江苏省著名的道地药材。性
辛 、苦 、温 。归脾 、胃 、肝经 。具有燥湿健脾 ,祛风 ,散
寒 ,明目等功能 ,临床上应用十分广泛 ,是一味很具
有开发前景的中药 。近年来因山地开垦和过度采
挖 ,茅苍术野生资源日趋枯竭 ,已被列为省级保护的
濒危植物[ 1] 。
1　材料与方法
1.1　材料
茅苍术药材种子采自宁镇山脉 ,经本院中药鉴
定教研室王春根教授鉴定为野生茅苍术 A trac-
ty lodes lancea(T hunb.)DC.的成熟种子。
1.2　方法
1.2.1　培养无菌苗　选取粒大饱满的种子 ,清水洗
净后用 75%酒精表面消毒 30 s ,再用 0.1%升汞消
毒 15 min ,无菌水冲洗 5 ～ 6次 ,接种于 MS 基本培
养基上 ,培养两周后 ,获无菌苗 。
1.2.2　愈伤组织的诱导　利用获得的无菌苗 ,将其
叶片分割成块状(大小约 0.3 cm 2),叶柄分割成段
(长约 0.5 cm),置于不同激素配比的培养基上诱导
愈伤组织 ,每种培养基接种 40个外植体 , 20 d 后统
计愈伤组织诱导结果 。
1.2.3　丛生芽的分化　由于茅苍术愈伤组织在转
接到分化培养基之后进行丛生芽诱导过程中容易褐
化死亡 ,且经愈伤组织诱导成苗增加了遗传变异的
机会 ,因此考虑到茅苍术的品种优良性 ,利用茅苍术
无菌苗胚轴诱导产生丛生芽 ,然后在分化培养基上
进行继代培养 ,利用腋芽分化法进行快速繁殖 ,再诱
导生根 ,培养产生试管苗 。
1.2.4　试管苗的移栽　当试管苗长出发达的根系 ,
植株长至 3 ～ 4 cm 高时 ,打开瓶盖 , 3 d 后取出试管
苗 ,洗净其上的培养基 ,移入小钵中 ,先期罩一薄膜
袋保湿 ,置培养室内 ,约 1 周后揭去薄膜袋 ,每天浇
1次水 , 2周后移入试验区 ,在自然条件下生长 。
1.3　培养条件
培养基:MS 基本培养基 , 附加不同浓度的激
素;蔗糖浓度:3.0%;pH 值 5.80;琼脂:0.4%;光照
强度:1 000 lx;光照时间:12 h/d;培养温度:(22±
2)℃。
2　结果与分析
2.1　不同激素配比对叶片与叶柄愈伤组织诱导的
影响　茅苍术种子萌发后从基部长出多丛叶片 ,以
叶片和叶柄为外植体在不同激素组合下诱导愈伤组
织 。由表 1可以看出 ,当 2 , 4-D 质量浓度为 2.0 ～
5.0 mg ·L-1 ,K t质量浓度为0.5 mg ·L -1时 ,均能
诱导出愈伤组织 ,且当 2 , 4-D为 4.0 mg ·L-1时 ,出
愈率较高 ,愈伤生长数量也较多;当 2 , 4-D 为 4.0
mg ·L-1 , Kt为 0 ～ 0.6 mg · L-1时 ,叶柄均有较好
的诱导率 ,尤其是 Kt 在 0.4 mg ·L-1时 ,出愈率可
达 100%,且愈伤生长数量最多;当 2 , 4-D浓度上升
为 5.0 mg ·L-1 ,Kt为 0 ～ 0.5 mg ·L-1时 ,叶柄诱
导出愈伤组织甚少或不能诱导出愈伤组织 。由表 2
可以看出 ,当 2 , 4-D 质量浓度为 2.0 ～ 5.0 mg ·
L
-1 ,K t质量浓度为 0.5 mg ·L-1时 ,均能诱导出愈
伤组织 ,且当 2 , 4-D 为 4.0 mg ·L -1时 ,出愈率较
高 ,愈伤生长数量也较多;当 2 , 4-D 为 4.0 mg ·
L-1 ,K t为 0.4 ～ 0.6 mg · L-1时 ,叶片均能诱导出
愈伤组织 ,且 Kt为 0.4 mg ·L -1时 ,出愈率最高 ,愈
伤生长数量也最多;当 2 ,4-D浓度上升为 5.0 mg ·
L-1时 , Kt为 0 ～ 0.5 mg ·L-1时 ,只有当 Kt为 0.5
mg ·L-1时 ,有 53.87%的出愈率 ,其他 K t浓度均
不产生愈伤 。因此 ,对于叶柄和叶片来说 ,最佳愈伤
组织诱导培养基为 1号培养基(即 MS+2 , 4-D 4.0
mg ·L-1 +Kt 0.4 mg · L-1)。实验结果表明 ,叶
柄诱导愈伤组织的能力较强 ,观察到叶柄较叶片先
诱导出愈伤组织 ,且其愈伤组织生长旺盛 ,生命力
强 ,褐变较少 ,且褐变速度明显比叶片诱导的愈伤组
织慢;叶片较叶柄难诱导出愈伤组织 ,大多数只是膨
大卷曲 ,且叶片诱导出的愈伤组织随着时间的延长
易褐变 ,不宜作为继代培养的材料。
表 1　不同激素配比对茅苍术叶柄愈伤组织诱导的影响
Tab.1　Effect of di fferent hormone combination on callus induced of
A.lancea petiole
培养基编号 2 ,4-D/mg· L -1 Kt/m g· L-1 出愈率/ % 愈伤生长数量
1 4.0 0.4 100.00 + ++
2 4.0 0.5 86.49 + +
3 4.0 0.6 77.78 + +
4 4.0 0 67.50 +
5 5.0 0 30.02 +
6 2.0 0.5 84.21 + +
7 3.0 0.5 80.65 +
8 5.0 0.5 10.26 +
9 5.0 0.2 0 -
10 5.0 0.4 0.08 +
　　+:少量;++:长势较旺盛 ,浅黄色 ,质地疏松;++ +:大量 ,
长势旺盛 ,淡白色 ,较紧密;-:无
—12— 现代中药研究与实践 2005 年第 19 卷第 5 期Resea rch and Practice o f Chinese Medicine s
表 2　不同激素配比对茅苍术叶片愈伤组织诱导的影响
Tab.2　Effect of di fferent phytohormone combination on callus in-
ducement of A.lancea leaves
培养基编号 2 , 4-D/mg· L-1
K t
/mg· L -1
出愈率/% 愈伤生长数量
1 4.0 0.4 89.74 ++ +
2 4.0 0.5 69.23 + +
3 4.0 0.6 76.92 + +
4 4.0 0 0.05 +
5 5.0 0 30.77 +
6 2.0 0.5 69.23 + +
7 3.0 0.5 71.79 + +
8 5.0 0.5 53.87 + +
9 5.0 0.2 0 -
10 5.0 0.4 0 -
　　+:少量;+ +:长势较旺盛 ,浅黄色 ,质地疏松;+ ++:大量 ,
长势旺盛 ,淡白色 ,较紧密;-:无
2.2　不同激素配比对芽增殖的影响　将茅苍术无
菌苗胚轴诱导出的丛生芽分成单株 ,用微型扦插法
接种于表 3所列培养基中 ,一个月后统计结果 。可
以看出 , 6-BA 在 2.0 ～ 3.0 mg · L-1 ,同时 IBA 在
0.4 mg · L-1时 ,芽的增殖率较高 ,且苗的长势好;
当 6-BA 质量浓度大于 3.0 mg · L-1时 ,茅苍术的
生长将受到抑制;当 IBA 质量浓度小于 0.4 mg ·
L-1时 ,芽苗颜色浅 ,比较纤弱;当 IBA 质量浓度大
于 0.4 mg ·L-1时 ,苗虽不娇弱 ,但芽的分化率低 。
表 3　不同激素配比对茅苍术芽增殖的影响
Tab.3　Effect of di fferent hormone combination on prol iferation of
lateral buds of A.lancea
培养基编号 6-BA/mg· L-1 IBA/mg· L -1 芽平均数/个 苗生长状况
1 2.0 0.2 3.73 苗娇弱
2 2.0 0.3 3.27 苗娇弱
3 2.0 0.4 4.0 苗壮
4 2.0 0.5 1.64 生长不良
5 3.0 0.2 3.5 苗娇弱
6 3.0 0.3 2.915 苗娇弱
7 3.0 0.4 3.575 苗壮
8 3.0 0.5 2.18 苗娇弱 ,生长慢
9 4.0 0.2 3.45 生长不良
10 4 .0 0.3 1.45 生长不良
11 4.0 0.4 2.36 苗娇弱 ,生长慢
12 4.0 0.5 2.0 苗娇弱 ,生长慢
2.3　不同激素配比对试管苗生根的影响　将高 2.
5 cm 以上的无根苗切下 ,转接到生根培养基上 ,约
10 d 后 ,在芽的基部开始产生白色的小突起 ,然后
迅速生长成具有浓密根毛的白色根 ,约 20 d 后 ,长
成根系发达的再生植株 。由表 4 可见 , MS 加质量
浓度为 0.5 mg · L-1的 IA A 、NAA 、 IBA 时 ,茅苍
术可达较高生根率 ,且根的长势好 ,移栽容易成活 ,
其中以加 0.5 mg · L-1的 IAA 对茅苍术的生根诱
导效果最好;1/2M S 加质量浓度为 0.25 mg ·L-1
的 IAA 、NAA 、 IBA 时 ,对茅苍术试管苗的诱导生
根较差 ,且苗及根的长势不好 ,不利于移栽 。
表 4　不同激素配比对茅苍术试管苗生根的影响
Tab.4　Effect of different hormone combination on test tube root in-
duced of A.lancea in vi t ro
培养基编号 培养基配方/m g· L -1 生根率/ % 平均根数 　　根的长势
1 MS+IAA0.5 100.0 13.9 根粗 ,向下及两侧生长 ,有分岔
2 MS+NAA0.5 98.5 11.6 根较粗 ,多数有分岔
3 MS+IBA0.5 95.0 9.1 根较粗 ,少分岔
4 1/ 2MS+NAA0.25 62.3 9.3 根较细 ,少分岔
5 1/ 2MS+IAA0.25 59.2 8.8 根较细
6 1/ 2 MS+IBA0.25 53.0 3.6 根最细
3　讨论
在对茅苍术进行芽增殖诱导的过程中 ,发现以
前相关文献[ 2] 中芽增殖率最高的培养基现在的增殖
率已没有那样高了 ,这可能也印证了继代培养时间
过长会引起品种退化现象的理论 。
本研究为茅苍术的无性繁殖提供了一种方法 ,
有助于短期内提供大量的试管苗 ,通过人工栽培扩
大资源 ,确保茅苍术资源的保护和可持续利用。
参考文献
[ 1] 　任全进 ,于金平 ,盛　宁,等.江苏珍稀濒危植物的调查与保护
对策[ J] .中国野生植物资源 , 1997 , 16(4):14-17.
[ 2] 　巢建国 , 谈献和 , 张　瑜 , 等.茅苍术快速繁殖[ J] .中药材 ,
2001 , 24(7):473-474.
2006年全国各医药期刊征订启事
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号 ,邮政编码:650223 , 联系电话:0871-5183005 ,传真:0871-5183005
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