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青果总黄酮的抗炎作用研究



全 文 :青果总黄酮的抗炎作用研究
何 颖,杨桂林,胡祥宇,袁叶飞* (泸州医学院,四川泸州 646000)
摘要 [目的]研究青果总黄酮的抗炎作用。[方法]采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、蛋清致小鼠足跖肿胀、醋酸致小鼠毛细血管通透性增
加 3种模型,每种模型分为 5组,分别给药,即青果总黄酮 80、40、20 mg /kg剂量组、地塞米松组(10 mg /kg)、空白对照组(含浓度 5%吐
温 -80的生理盐水),以抑制率为考察指标,研究青果总黄酮的抗炎作用。[结果]青果总黄酮对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、蛋清致小鼠足
跖肿胀、醋酸致毛细血管通透性增加等急性炎症模型均有抑制作用。[结论]青果总黄酮具有一定的抗炎作用。
关键词 青果(FRUCTUS CANARII);总黄酮;抗炎
中图分类号 R284 文献标识码 A 文章编号 0517 -6611(2012)05 -02632 -01
Study on Anti-inflammatory Effect of Total Flavonoids from FRUCTUS CANARII
HE Ying et al (Luzhou Medical College,Luzhou,Sichuan 646000)
Abstract [Objective]To observe anti-inflammatory effects of total flavonoids from FRUCTUS CANARII.[Method]Using the inhibition rate
as index,3 conventional models including dimethylbenzene-induced ear swelling,egg white-induced paw edema swelling and acetic acid-in-
duced celiac capillary permeability addition in mice were applied to evaluate the anti-inflammatory effect total flavonoids from FRUCTUS CA-
NARII. For each model,mice were divided into 5 groups,which were respectively injected with 80,40,20 mg /kg total flavonoids from
FRUCTUS CANARII,10 mg /kg dexamethasone and normal saline containing 5% Tween-80 (as blank control). [Result] Total flavonoids
from FRUCTUS CANARII could inhibit the mouse ear swelling induced by dimethylbenzene,inhibit the mouse paw edema swelling induced by
e egg white and inhibit the increase of the mouse celiac capillary permeability induced by acetic acid. [Conclusion] Total flavonoids from
FRUCTUS CANARII have certain anti-inflammatory effect.
Key words FRUCTUS CANARII;Total flavonoids;Anti-inflammatory effect
基金项目 泸洲市科技局项目《合江青果开发及应用研究》(编号:泸市
科函[2008]23 号) ;泸州医学院项目《青果总黄酮抗炎作用
及机制研究》(编号:沪医院[2010]108 号。
作者简介 何颖(1984 -) ,女,四川泸州人,助理实验师,硕士,从事中
药药效评价研究,E-mail:yinqi_746 @ 163. com。* 通讯作
者,副教授,博士,从事中草药化学成分研究,E-mail:yuan_
yefei@ 126. com。
收稿日期 2011-10-19
青果(FRUCTUS CANARII)为橄榄科(Burseraceae)橄榄
属(Canarium)植物橄榄(Canarium album Raeusch.)的干燥
成熟果实,又名橄榄。青果是我国常用的一种中药材,主要
分布于福建、四川等省区,为《中国药典》收载的品种,其性味
甘、酸、涩、温、平、无毒,归肺胃 2 经,具有清热、利咽、祛痰、
生津、健脾、解毒等功效,常用于治疗咽喉肿痛、咳嗽、烦渴、
鱼鳖中毒等[1 -2]。青果中含多酚类、三萜类、黄酮类、香豆素
类等化学成分[3]。前期试验首次采用乙醇加热回流提取及
聚酰胺柱色谱分离方法得到了青果总黄酮。目前,关于青果
总黄酮的抗炎作用的研究鲜有报道,故试验对青果总黄酮的
抗炎作用进行了探讨,旨在为临床应用青果总黄酮治疗急性
咽喉肿痛等疾病提供理论依据。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 研究对象。青果总黄酮,黄色粉末,为青果干重的
1. 0%,总黄酮含量 52%,自制,临用时以浓度 5%吐温 - 80
配成适当浓度。
1. 1. 2 试验动物。昆明种小鼠,体重(20 ± 2)g,雌雄各半,
由泸州医学院动物试验中心提供,生产许可证号:SCXK(川)
2008-17,使用许可证号:SCXK(川)2008 -065。
1. 1. 3 主要仪器。UV1700PC紫外可见分光光度计,购自上
海凤凰光学科仪有限公司;FA1004 电子天平,购自上海民侨
精密科学仪器有限公司;52A 医用低速离心机,购自安心县
白洋离心机厂。
1. 1. 4 主要试剂。吐温 - 80,购自成都金山化学试剂有限
公司,批号:0809028,临用时以生理盐水配置成浓度为 5%;
地塞米松,购自浙江仙琚制药股份有限公司,批号:110310;
二甲苯,分析纯,购自成都市科龙化工试剂厂,批号:
20110916;伊文思蓝,购自 Sigma 公司;冰醋酸,分析纯,购自
成都市科龙化工试剂厂,批号:20100104。
1. 2 方法
1. 2. 1 二甲苯致小鼠耳廓肿胀试验。取昆明种小鼠 50 只,
体重 18 ~22 g,雌雄各半,随机分为 5 组,每组 10 只,分别为
青果总黄酮 80、40、20 mg /kg 剂量组、地塞米松组(10
mg /kg)、空白对照组(含浓度 5%吐温 -80的生理盐水)。连
续灌胃给药 7 d,每天 1次。末次给药 30 min后,于小鼠右耳
2侧均匀涂布二甲苯 50 μl /只,左耳不涂作为对照。致炎 15
min后颈椎脱臼处死小鼠,剪下左右 2 耳廓,用直径 6. 0 mm
打孔器取双耳对称耳片,于电子天平上分别称重,以左右耳
片重量差为肿胀程度,并计算肿胀抑制率。抑制率(%)=
[(空白对照组平均肿胀度 -给药组平均肿胀度)/空白对照
组平均肿胀度]×100。
1. 2. 2 蛋清致小鼠足跖肿胀试验。取昆明种小鼠 50 只,雌
雄各半,分组及给药同前。末次给药后 30 min,于每只小鼠
左后肢足跖注射浓度 10%蛋清液 50 μl,3 h后颈椎脱臼处死
小鼠,于踝关节处剪下左右后肢,称重,以左右后肢重量之
差作为炎症肿胀程度。抑制率计算方法同“1. 2. 1”。
1. 2. 3 醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加试验。取昆明
种小鼠 50只,雌雄各半,分组及给药同前。末次给药 1 h后,
在各小鼠尾静脉注射浓度 1%伊文思蓝生理盐水溶液(0. 01
ml /g) ,随即腹腔注射浓度 0. 6%醋酸(0. 01 ml /g) ,20 min后
(下转第 2650页)
责任编辑 石金友 责任校对 卢瑶安徽农业科学,Journal of Anhui Agri. Sci. 2012,40(5):2632,2650
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.05.096
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283 -285.
(上接第 2632页)
颈椎脱臼处死小鼠,剪开腹腔,用 6 ml 生理盐水分 3 次冲洗
腹腔,收集冲洗液,离心,取上清液在 UV1700PC分光光度计
590 nm处测定吸光度 A值,以 A值表示伊文思蓝含量,判断
小鼠腹腔毛细血管通透性。抑制率(%)= [(空白对照组吸
光度 -给药组吸光度)/空白对照组吸光度]×100。
2 结果与分析
2. 1 二甲苯致小鼠耳廓肿胀试验 青果总黄酮低、中、高 3
个剂量组对二甲苯致小鼠耳廓肿胀有较明显的抑制作用,与
空白对照组比较有显著或极显著性差异(P < 0. 05或 P <
0. 01) ,其对小鼠耳廓肿胀抑制率分别为53. 89%、69. 44%和
74. 72%,具有剂量依赖效应,剂量越大,作用越强。
表 1 青果总黄酮对二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型的影响(珔x ± s,n =10)
组别
剂量
mg /kg
耳廓肿胀度
mg
抑制率
%
空白组 - 7. 24 ±1. 27 -
地塞米松组 10 3. 13 ±2. 26* 56. 48
青果总黄酮低剂量组 20 3. 32 ±1. 42* 53. 89
青果总黄酮中剂量组 40 2. 20 ±1. 44** 69. 44
青果总黄酮高剂量组 80 1. 82 ±1. 57** 74. 72
注:与空白组比较:* P <0. 05,**P <0. 01。
2. 2 蛋清致小鼠足跖肿胀试验 结果表明,青果总黄酮低、
中、高 3个剂量组对蛋清致小鼠足跖肿胀有较明显的抑制作
用,与空白对照组比较有显著或极显著性差异(P <0. 05或 P
<0. 01) ,其对小鼠足跖肿胀抑制率分别为 25. 83%、63. 14%
和 72. 29%,具有剂量依赖效应,剂量越大,作用越强。
表 2 青果总黄酮对蛋清致小鼠足跖肿胀模型的影响(珔x ± s,n =10)
组别
剂量
mg /kg
足跖肿胀度
mg
抑制率
%
空白组 - 23. 40 ±7. 25 -
地塞米松组 10 4. 93 ±2. 30** 78. 90
青果总黄酮低剂量组 20 17. 33 ±3. 83* 25. 83
青果总黄酮中剂量组 40 8. 61 ±2. 00** 63. 14
青果总黄酮高剂量组 80 6. 48 ±3. 90** 72. 29
注:与空白组比较:* P <0. 05,**P <0. 01。
2. 3 醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加试验 青果总
黄酮低、中、高 3个剂量组对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透
性的增加有较明显的抑制作用,与空白对照组比较有显著
或极显著性差异(P < 0. 05 或 P < 0. 01) ,其对醋酸致小鼠
腹腔毛细血管通透性增加的抑制率分别为 44. 61%、
56. 82%和 60. 89%,具有剂量依赖效应,剂量越大,作用
越强。
表 3 青果总黄酮对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加的影响(珔x ±
s,n =10)
组别
剂量
mg /kg
吸光度
A
抑制率
%
空白组 - 0. 320 9 ±0. 088 4 -
地塞米松组 10 0. 044 0 ±0. 012 0** 86. 91
青果总黄酮低剂量组 20 0. 177 8 ±0. 085 3* 44. 61
青果总黄酮中剂量组 40 0. 139 4 ±0. 076 6** 56. 82
青果总黄酮高剂量组 80 0. 125 2 ±0. 071 6** 60. 89
注:与空白组比较:* P <0. 05,**P <0. 01。
3 讨论
炎症是机体组织对局部损伤的反应。在炎症的早期,炎
症介质刺激血管,使血管扩张,血管内皮间隙扩大,血管壁通
透性增加,血浆内的液体、蛋白质和白细胞等渗出到组织间
隙,随着渗出的增加,造成组织肿胀[4]。因此,炎性渗出、组
织肿胀是炎症早期的重要指标。
二甲苯致小鼠耳廓肿胀试验、蛋清致小鼠足跖肿胀、醋
酸致小鼠腹腔毛细血管通透性试验是研究药物抗炎作用的
常用试验方法。试验通过建立小鼠的上述 3 种炎症模型,发
现青果总黄酮能显著地抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀,抑
制鸡蛋清所致足跖肿胀等作用,抑制醋酸至小鼠腹腔毛细血
管通透性增加,且随青果总黄酮浓度的增加抑制作用也增
大,表明青果总黄酮对炎症早期血管通透性增高和水肿有明
显的抑制作用,为临床应用青果总黄酮治疗急性咽喉肿痛等
疾病提供了试验依据。但其抗炎机制还需进一步研究。
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