全 文 ：人参研究 GINSENG RESEARCH 2011 年第 2 期
美汉草中黄酮和多糖的积累动态研究
李小叶 郑友兰 吴 谦 蔡恩博 郝旭梅 田 阳 汪 瑶
（吉林农业大学中药材学院·吉林 长春·130118）
摘 要： 目的：测定不同生长期美汉草中黄酮及多糖的含量，确定美汉草的适宜采收期,为其资源的综合
开发应用提供科学依据。 采用比色法测定黄酮及多糖的含量，方法：以芦丁为对照品，在 500nm
波长下测定吸光度，测定黄酮的含量；以葡萄糖为对照品，在 620nm 波长下测定总多糖的吸光
度，分别测定可溶性多糖和粗多糖的含量。 结果：美汉草中黄酮的含量 6 月份较低，其他月份含
量变化趋于平稳，7 月 10 日黄酮含量最高为 2.27%。 美汉草中多糖的含量 5 月到 6 月份较低，7
到 10 月份含量偏高，多糖含量最高值为 7 月 31 日可达 14.97%。结论：本方法简便、快速、准确、
可靠，适合不同采收期美汉草中黄酮及多糖的含量分析，且含量差异显著，并确定了美汉草的
适宜采收期,为进一步研究美汉草植物资源的综合开发应用提供了参考数据。
关键词：美汉草；总黄酮；总多糖；积累动态研究
美汉草为唇形科(Labiatae)龙头草属(Meehania)植
物芝麻花 ［Meehania urticifolia (Miq.) Makino］的干燥
地上部分［1］，别名荨麻叶龙头草，芝麻花(辽宁)、美汉花
［2］，异名水升麻（四川）［3］，为多年生草本植物［4］，分布于
吉林省通化、白山等地，朝鲜、日本也有分布［5］。美汉草
全草入药，可作为民间药，味辛、苦、性微寒，具有清热
解表，利水消肿解毒作用，可治疗感冒发热，泻痢腹
痛，肝炎，胆囊炎，胃肠炎，小便不利，跌打损伤，肿毒，
蛇咬伤等症［3,6］。 研究表明，黄酮类化合物是一类低分
子天然植物成分，可以作用于中枢神经系统，黄酮类
化合物有明显的抗溃疡、解痉、抗炎及降血脂等系列
的生物活性。 而多糖类化合物普遍具有增强免疫功
能，抗流感，抗肿瘤，防衰老及抗辐射，改善心肌收缩
性能，缩小梗塞面积，减轻心肌损伤等作用［7］。 为了更
好地研究、开发和利用美汉草，本文通过比较美汉草
不同生长期黄酮及多糖的含量差异，确定了美汉草的
适宜采收期, 为今后更深一步研究美汉草这一潜在的
民间药用植物资源的综合开发应用提供科学依据。
1 材料、仪器与试剂
1.1 实验材料
实验所用样品美汉草，采于吉林省临江市，经吉
林农业大学园艺学院胡全德教授鉴定为唇形科植物
美汉草［Meehania urticifolia (Miq.) Makino］全草。
1.2 仪器设备与试剂
仪器：T6新世纪紫外可见分光光度计 （北京普析
通用仪器有限责任公司）；KQ-250DB 型数控超声波
清洗器 （昆山市超声仪器有限公司）； 电子计数天平
（500g/0.001g金羊天平仪器厂）；百灵 LA114型电子天
平 (110g/0.0001g 常熟市百灵天平仪器有限公司 )；
101-2 型数显电热鼓风干燥箱(上海锦屏仪器仪表有
限公司)。
试剂：芦丁对照品（中国食品药品检定研究院，
批号:086-9303）；无水乙醇；亚硝酸钠；硝酸铝；氢氧
化钠； 葡萄糖对照品 (中国食品药品检定研究院，批
号:086-9303)；蒽酮等。
2 实验方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
2.1.1 芦丁对照品溶液的制备
将芦丁对照品于烘箱中 105℃恒重 6h，精密称取
10.0000mg，75%乙醇 50ml 溶解后定容至 100ml 容量
瓶中，摇匀，备用。
2.1.2 葡萄糖对照品溶液的制备
将葡萄糖于烘箱中 60℃烘 1h， 再逐渐升温至
105℃干燥至恒重。 精密称取 11.0000mg,置 100ml 容
量瓶中,用蒸馏水溶解并稀释至刻度，摇匀，备用。
2.2 样品待测液的制备
2.2.1 黄酮待测液的制备
精密称定干燥的美汉草的样品 (过 40 目筛)各
1.0000g，置 50ml 具塞锥形瓶中 ,分别精密加入 75%
乙醇 30ml，密塞超声 30min(共 3 次)，重复提取 3 次，
合并提取液，摇匀，过滤，转移至 100ml 容量瓶中定
容，备用。
2.2.2 可溶性多糖待测液的制备
精密称定干燥的美汉草样品 (过 40 目筛 )各
1.0000g，置 50ml 具塞锥形瓶中 ,分别精密加入 75%
乙醇 30ml，密塞超声 30min(共 3 次)，重复提取 3 次，
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人参研究 GINSENG RESEARCH 2011 年第 2 期李小叶等：美汉草中黄酮和多糖的积累动态研究
合并提取液，摇匀，过滤，转移至 100ml 容量瓶中定
容，备用。
2.2.3 粗多糖待测液的制备
将提取过可溶性多糖后的滤渣蒸干， 加 2％的盐
酸 30ml，置沸水浴中提取 lh，充分放冷，于 100ml 容
量瓶中滤过，重复提取 2 次，过滤，洗涤滤纸，以 2%
HCL定容至刻度，备用。
2.3 标准曲线的绘制
2.3.1 黄酮标准曲线的绘制
分别精密量取芦丁对照品溶液 0.0、0.5、1.0、2.0、
3.0、4.0、5.0ml， 分别移入 25ml 容量瓶中， 分别加入
75%乙醇至 5ml， 加入质量分数为 5%的亚硝酸钠溶
液 1.0ml，摇匀，静置 6min；加入质量分数为 10%的硝
酸铝溶液 1.0ml，摇匀，静置 6min，加入质量分数为
4% 的氢氧化钠溶液 10ml，再加体积分数为 75%的乙
醇至刻度，摇匀，放置 15min。 以 75%乙醇为空白对照
液， 分别于 500nm 波长处测定吸光度。 以吸光度值
（A）对质量(m)进行线性回归，将所得数据进行统计处
理，其回归方程为 A=0.4751m+0.0031﹙R2﹦0.9990﹚，
结果表明， 芦丁检测质量在 0.05~0.5mg 范围内线性
关系良好。
2.3.2 多糖标准曲线的制备
分别精密量取葡萄糖对照品溶液 0.0、0.2、0.4、
0.6、0.8、1.0ml，加入具塞试管中，分别加入蒸馏水至
1ml，再加入蒽酮-浓硫酸试剂 5.0ml，混匀，除空白试
液外，其余 5组做三次平行。 置沸水浴中加热 10min，
冷却至室温，于 620nm 处测定吸光度，记录数据。 以
吸光度值（A）对质量(m)进行线性回归，将所得数据进
行统计处理，其回归方程为 A=3.9227m -0.0109（R2=
0.9996），结果表明，葡萄糖检测质量在 0.02~0.1mg 范
围内线性关系良好。
2.4 样品的测定
2.4.1 黄酮的测定
分别吸取供试品液 1ml 于 25ml 容量瓶中, 再加
入 75%乙醇至 5ml。 加入质量分数为 5%的亚硝酸钠
溶液 1.0ml，摇匀，静置 6min；加入质量分数为 10%的
硝酸铝溶液 1.0ml，摇匀，静置 6min，加入质量分数为
4% 的氢氧化钠溶液 10ml，再加体积分数为 75%的乙
醇至刻度，摇匀，放置 15min。 以 75%乙醇为空白对照
液，分别于 500nm波长处测定吸光度，重复 3次。
2.4.2 可溶性多糖的测定
各取可溶性多糖提取液 5ml， 分别置于 25ml 容
量瓶中， 用 75％的乙醇定容至刻度， 混匀。 分别取
1.0ml可溶性多糖提取液加入具塞试管中，加入蒽酮-
浓硫酸试剂 5.0ml，混匀，重复 3 次，同时另取一支具
塞试管加 75％EtOH1.0ml， 加入蒽酮-浓硫酸试剂
5.0ml，作为空白实验。置沸水浴中加热 10min，冷却至
室温。 于 620nm处测定吸光度，记录数据。
2.4.3 粗多糖的测定
各取粗多糖提取液 2.5ml，分别置于 25ml 容量瓶
中，用 2%的盐酸定容至刻度，混匀，分别取 1.0ml 粗
多糖提取液加入具塞试管中， 再加入蒽酮-浓硫酸试
剂 5.0ml，混匀，重复 3 次，同时另取一支具塞试管加
入 2％的盐酸 1.0ml， 再加入蒽酮-浓硫酸试剂 5.0ml，
混匀，作空白实验。 置沸水浴中加热 10min，冷却至室
温，于 620nm处测定吸光度，记录实验数据。
2.5 方法学考察
2.5.1 回收率实验
分别精密称取已知总黄酮和总多糖含量的 7 月
31 日的美汉草细粉 1.0000g，5 份,置于磨口锥形瓶中,
分别加入芦丁对照品溶液 2ml 和葡萄糖对照品溶液
0.6ml,按前述样品处理法提取,并按样品测定项操作,
计算黄酮和多糖含量和回收率 , 平均回收率分别为
102. 58%和 99.26％ ,RSD 分别为 0.81%和 1.21%（n=
5）。
2.5.2 精密度实验
分别精密称取已知总黄酮和总多糖含量的 7 月
31 日美汉草细粉 1.0000g, 按样品测定操作连续测 5
次 , 测得吸光度并计算含量 ,RSD 分别为 1.218%和
1.216%(n=5)。
2.5.3 稳定性实验
精密称取 7 月 31 日的美汉草细粉 1.0000g，按样
品溶液的制备方法分别制备黄酮和多糖待测溶液，每
隔 10min 测一次吸光度， 记录在 60min 内的吸光度
值， 计算 RSD 值。 得 RSD 值分别为 1.43%(n=5)和
1.31%（n=5）。
2.5.4 重复性实验
分别精密称取已知总黄酮和总多糖含量的 7 月
31 日美汉草细粉 1.0000g,制备供试品溶液,进样测定,
RSD分别为 1.58% 和 1.46%(n=5)。
2.6 结果与分析
2.6.1 含量测定结果
不同采收期的美汉草中黄酮及多糖的含量测定
结果，结果见表 1、图 1。
表 1 美汉草不同采收期样品中黄酮及多糖含量结果
部
位
全草
全草
全草
全草
全草
全草
全草
全草
5.27
6.10
6.30
7.10
7.31
8.15
9.11
10.10
黄酮
（％）
1.87
1.45
1.91
2.27
1.77
1.62
1.85
1.97
可溶性
多糖（％）
2.51
2.91
3.43
3.34
4.26
2.71
3.54
2.38
粗多糖
（％）
7.49
8.31
5.58
9.01
1.71
8.36
10.19
9.92
总多糖
（％）
10.01
11.22
9.01
12.35
5.97
11.07
13.73
12.31
采收期
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人参研究 GINSENG RESEARCH 2011 年第 2 期
参 考 文 献
［1］樊绍钵，等.主编.吉林药材图志续集［M］.北京:中医古籍出版社,1995年，116～118.
［2］中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志［M］.北京:科学出版社,1988，65(2):335.
［3］国家中医药管理局中华本草编委会编.中华本草［M］.上海:上海科学技术出版社,1999年.
［4］陈雅君,刘慧民.美汉草的繁殖方法［J］.植物杂志,2002，04：37.
［5］通化地区农业区划委员会办公室编.长白山西南坡野生经济植物志［M］.1985年.
［6］冯洪钱编著.兽医本草补遗［M］.北京市:科学技术文献出版社,1999年.
［7］田庚元,冯字澄,林颖.植物多糖的研究进展［J］.中国中药杂志,1995,20(7):441.
图 1 美汉草不同采收期样品中黄酮及多糖含量结果
由表 1、图 1 可知：美汉草中黄酮及多糖的含量
都很高。 黄酮的含量 6 月份较低，其他月份含量变化
趋于平稳，7月份黄酮含量最高，可达 2.27%。 多糖的
含量 5 月到 6 月份含量较低，7 到 10 月份含量偏高，
多糖含量最高值为 7月份，即 14.97%。
2.6.2 描述统计量分析及 S-W 正态检验结果， 结果
见表 2。
表 2 描述统计量分析及 S-W检验结果
表 3相关性分析结果
由表 2 可以看出，美汉草因采收期不同，黄酮和
多糖含量的 S-W 检验的显著性概率(Asmyp.sig.)均大
于 0.05，可以认为其总量均服从于正态分布。 各组样
本的标准偏差都很高，说明含量因采收期不同差异较
大。
2.6.3 相关性分析结果，结果见表 3。
由表 3 可知： 总黄酮和总多糖的相关系数为
0.072，由于相关系数 ρ 是一个无量纲的数值，且-1≤
ρ≤1，ρ>0 为正相关，ρ<0 为负相关，ρ 的绝对值接近
于 1，说明相关性越好，ρ 的绝对值接近于 0，说明相
关性越差，即总黄酮和总多糖呈正相关，总多糖的含
量随总黄酮的含量增加而增加。
3 讨论
3.1 美汉草中总黄酮和总多糖的含量随发育节律呈
现明显的动态变化
不同采收期美汉草中总黄酮和总多糖的含量存
在着很大的差异。 5～7月份美汉草中总黄酮含量整体
上呈先上升趋势， 后又呈下降趋势，8 月份总黄酮含
量达到低谷，而 9 月份时含量迅速回升，而后又趋于
平稳。 美汉草中总多糖的含量从 5 月到 6 月份较低，
从 7 月份开始增长且达到一个最高值，即 14.97%，随
后这种趋势逐渐下降，8 月份达到一个低谷，9、10 月
份总多糖又有所增长，但幅度不大，趋于平稳。 因此，
了解美汉草的季节变化规律的差异对于确定美汉草
最适宜的采收期具有重要的意义，以便更高效的利用
植物资源。
3.2 经过 SPSS统计学软件分析得出
美汉草中黄酮及多糖的 S-W 检验的显著性概率
均大于 0.05，符合正态分布，且黄酮及多糖含量的标
准偏差都很高，说明含量因采收期不同差异较大。 由
相关性分析可知：总黄酮和总多糖呈现正相关，即总
多糖的含量随总黄酮的含量增加而增加，但相关性并
不显著，表明黄酮的含量增减并不会影响到多糖。
3.3 综上所述
结合美汉草中黄酮及多糖含量积累动态分析可
知：7 月份或 9 月中旬作为美汉草的最佳采收期，这
个时期美汉草中含有的黄酮及多糖的含量均很高。因
此，在研究美汉草这一潜在的民间药用植物资源的同
时， 应该重视其不同时期所含有效成分的变化规律，
更有利于扩大用药价值及临床应用，为日后深入研究
提供理论依据。
3.4 实验应用紫外分光光度法测定美汉草中的黄酮
含量， 采用蒽酮－硫酸比色法测定美汉草中的多糖含
量，从回收率和精密度可看出，本方法简便、快速、准
确、可靠，适合不同采收期美汉草中黄酮及多糖的含
量分析，并确定了美汉草的适宜采收期 ,为进一步研
究美汉草植物资源的综合开发应用提供了参考数据。
















 


总黄酮
可溶性多糖
粗多糖
总多糖
Statistic
0.169
0.142
0.158
0.142
df
8
8
8
8
Sig.
0.200*
0.200*
0.200*
0.200*
Statistic
0.968
0.946
0.947
0.981
df
8
8
8
8
Sig.
0.886
0.666
0.681
0.966
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Pearson Correlation
Sig. (2-tailed)
Pearson Correlation
Sig. (2-tailed)
总黄酮
1
0.072
0.866
总多糖
0.072
0.866
1
总黄酮
总多糖
27