全 文 ：第 34 卷 第 5 期
2013 年 10 月
河 南 科 技 大 学 学 报 :自 然 科 学 版
Journal of Henan University of Science and Technology:Natural Science
Vol． 34 No． 5
Oct． 2013
基金项目:河南省科技厅科技攻关基金项目(102102310345)
作者简介:于相丽(1975 －) ，女，河南漯河人，讲师，硕士，主要从事植物生物技术研究．
收稿日期:2012 － 10 － 27
文章编号:1672 － 6871(2013)05 － 0078 － 04
茜草根不同部位提取物的抑菌效果
于相丽，李勇慧，秦 磊
(洛阳师范学院 生命科学系，河南 洛阳 471022)
摘要:为了明确茜草抑菌内含物的最佳提取方法和不同部位的乙醇萃取物的抑菌活性，用体积分数分别为
0%、50%、60%、70%、80%的乙醇对茜草根的不同部位进行提取，选择大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢
杆菌为测试菌。试验结果表明:60%乙醇提取液效果最好，基部根、粗根、细根以基部根抑菌效果最好。基部
根和粗根的提取液对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌最小抑菌浓度均为 0． 125 g /mL，对大肠杆菌最小抑菌
浓度为 0． 250 g /mL;细根对 3 种菌的最小抑菌浓度高于其他两者。
关键词:茜草;抑菌效果;乙醇提取物;最小抑菌浓度
中图分类号:R282． 71 文献标志码:A
0 引言
茜草(Rubia Cordifolia L．)为茜草科茜草属植物，别名活血草、锯子草、拉拉草、血见愁等。分布于欧
洲、亚洲、美洲和南部非洲［1］。中国有 12 种［2］，主产于陕西省、江苏省、安徽省、河南省、山东省。茜草
为中国传统常用中药之一，药用其干燥根及根茎，有凉血、止血、祛瘀、通经等功效［3］。
目前，国内对茜草的化学成分和药理作用有广泛的研究，茜草中主要含有水溶性的环已肽类系列物
质，脂溶性成分蒽醌及其糖苷、萘醌及其糖苷，此外还含有萜类、β 谷甾醇、脂肪酸化合物和微量元
素［4 － 5］。现代药理研究证明:茜草根水提液在体外对金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、流感杆菌和部分皮
肤真菌等均有一定的抑制作用［6］，但是对茜草有机溶剂的提取及根不同部位的抑菌效果没有系统的试
验研究。本文采用不同浓度的乙醇作溶剂，研究茜草根不同部位提取液对常见的 3 种细菌的抑菌效果，
以期为茜草的质量控制和临床使用提供科学依据。
1 材料与方法
1． 1 材料
本试验所用茜草于 2010 年 9 月份采挖于洛阳市孟津县，阴干后将其根分为 3 类，即块状的基部根、
直径 ＞ 8 mm的粗根以及直径 ＜ 8 mm的细根，分别粉碎并密封保存。
1． 2 菌种
供试菌种为大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)、枯草芽孢杆菌
(Bacillus subtilis) ，由洛阳师范学院生命科学系微生物实验室提供。
1． 3 主要仪器设备
QYC-2102 大容量双层全温摇床(上海新苗医疗器械制造有限公司) ;SW-CJ-2F 型双人双面净化工
作台(苏州净化设备有限公司) ;101-1AB型电热鼓风干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司) ;DK-98-IIA
电热恒温水浴锅(天津市泰斯特仪器有限公司) ;LDZX-40KB 不锈钢立式压力蒸汽灭菌器(上海申安医
疗器械厂) ;RE-201C旋转蒸发仪(郑州长城科工贸有限公司)。
1． 4 培养基与试剂
牛肉膏蛋白胨培养基［7］:牛肉膏，蛋白胨，琼脂，NaCl(HCl或 NaOH调 pH值 7． 2 ～ 7． 4)。
试剂为无水乙醇，无菌生理盐水等。
DOI:10.15926/j.cnki.issn1672-6871.2013.05.018
第 5 期 于相丽等:茜草根不同部位提取物的抑菌效果
1． 5 方法
1． 5． 1 不同体积分数乙醇提取物的制备［8］
取干燥粉碎后的茜草根样品 10 g置于锥形瓶中，加蒸馏水 100 mL，55 ℃水浴 1 h 后，过滤，残渣加
蒸馏水 100 mL于 55 ℃水浴 1 h，再重复 1 次，最后将 3 次滤液合并，使用旋转蒸发仪将滤液浓缩至黏着
状，用水溶解并定容 10 mL，制成 1 g /mL的水悬浊液。以上述方法分别获得体积分数分别为 0%、50%、
60%、70%、80%的茜草根提取液，依次标记为 0%、50%、60%、70%、80%，备用。
1． 5． 2 菌悬液的制备
将供试菌种置于灭菌的牛肉膏蛋白胨液体培养基中，在 37 ℃、120 r /min 的摇床上培养 24 h，经涂
片镜检确定为单一菌种后，用无菌生理盐水将菌液稀释成 0． 5 × 109个 /mL 左右。将该菌液置于 4 ℃冰
箱中保存备用。
1． 5． 3 药敏纸片法测定抑菌圈［9］
用打孔器将滤纸打成孔径为 5 mm的圆纸片，高压蒸汽灭菌。分别取 3 mL的 0%提取液的基部根、
粗根、细根原液于灭菌平皿中，加入等体积的蒸馏水，将灭菌滤纸浸泡 30 min后，置于 55 ℃的干燥箱中
烘干制成药敏纸片。在超净工作台上将灭菌后的营养琼脂培养基倒入无菌平皿中，每皿约 20 mL，取 3
种供试菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌)0． 1 mL 均匀涂布到直径为 100 mm 的营养琼脂
培养基中，用无菌镊子夹取烘干的滤纸片贴在含菌培养基表面，并轻轻按压使充分接触，每皿等距离放
4 片，并再放入一个浸生理盐水的纸片作为空白对照，每个试验平行 5 次，置于 37 ℃的恒温培养箱中培
养 20 ～ 24 h后培养观察并测定抑菌圈直径大小，取平均值。结果为 5 次平行试验的平均值，取两位有
效数字。同样方法分别进行 50%、60%、70%、80%提取液的药敏纸片法测抑菌圈试验操作，计算出抑
菌圈的直径并取平均值。将所得的试验结果进行分析比较，从而得出最佳抑菌效果的茜草提取液以进
行下面的试验操作。
1． 5． 4 最小抑菌浓度(MIC)的测定［9］
在特殊条件下培养 24 h，可抑制某种微生物出现明显增长的最低药物浓度即最小抑菌浓度。将
具有最佳抑菌效果的提取原液(1 g /mL)用无菌水按照 1∶ 2、1∶ 4、1∶ 8、1∶ 16、1∶ 32、1∶ 64 的体积比进
行倍半稀释，得到 6 个浓度的稀释提取液，加之原液一共有 7 个浓度梯度的提取液，并且分为基部
根、粗根、细根 3 种。在无菌培养皿中分别加入 1． 5 mL 不同浓度和不同种类的茜草提取液，然后倒
入 20 mL的 55 ℃左右灭菌的营养琼脂培养基充分混匀，冷却凝固。分别取 0． 1 mL 的供试菌悬液，
并分别加入到70 mL的无菌生理盐水中混匀，制成浓度 106个 /mL 左右的菌悬液。取 0． 1 mL 的稀释
菌悬液于平板上涂布均匀，每一系列培养基接种一种菌，每个浓度做 3 个重复，以未添加提取液的系
列培养基作为空白对照，然后置于 37 ℃下培养 24 h 后观察。无菌生长的最低浓度即为提取物的
MIC。
2 结果与分析
2． 1 茜草根不同提取物的抑菌效果比较
表 1 为茜草根不同部位的提取液对 3 种菌的抑菌圈直径，由表 1 可知:水的提取液对 3 种供试菌的
抑菌效果不明显，而用不同体积分数的乙醇提取的茜草液(浓度为 0． 5 g /mL)抑菌效果较好。由表 1 还
可以看出:60%乙醇提取液对 3 种菌均有相对较好的抑菌效果;从 60%乙醇提取液的抑菌活性向两侧
整体呈减小趋势。为了验证这一结论，又多次重复 50%和 70%乙醇提取液的抑菌实验，结果没有显著
差异。60%乙醇茜草基部根提取液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的抑菌圈直径分别为
7． 80 mm、8． 78 mm、7． 88 mm。60%乙醇茜草粗根提取液对 3 种菌的抑菌圈直径分别为 7． 65 mm、
8． 63 mm、7． 58mm。60%乙醇茜草细根提取液对 3 种菌的抑菌圈直径分别为 7． 08 mm、7． 80 mm、
8. 58mm。由 50%、70%、80%乙醇提取液抑菌效果及上述结果表明:茜草根不同部位提取液总体上对
金黄色葡萄球和枯草芽孢杆菌的抑菌效果要比大肠杆菌的效果好，特别是 60%细根提取液对枯草芽孢
杆菌抑菌效果要比基部根和粗根明显。
·97·
表 1 茜草根不同部位的提取液对 3 种菌的抑菌圈直径
供试菌种 根不同部位
不同提取液抑菌圈直径 /mm
50% 60% 70% 80% 0%
大肠杆菌
基部根 5． 65 7． 80 7． 55 6． 88 5． 48
粗根 5． 48 7． 65 6． 93 6． 75 5． 15
细根 5． 60 7． 08 6． 75 7． 03 5． 18
金黄色葡萄球菌
基部根 7． 65 8． 78 7． 69 6． 20 5． 50
粗根 7． 85 8． 63 7． 40 6． 13 5． 53
细根 7． 60 7． 80 7． 58 6． 58 5． 45
枯草芽孢杆菌
基部根 7． 60 7． 88 7． 63 7． 00 5． 95
粗根 7． 65 7． 58 6． 75 6． 88 5． 63
细根 7． 38 8． 58 7． 83 6． 60 6． 73
对照 5． 00 5． 00 5． 00 5． 00 5． 00
表 2 为不同提取液抑菌效果差异显著性分析。由表 2 可知:60%提取液与 50%、70%、80%及水提
取液均有极显著差异，60%乙醇提取液抑菌效果最好，所以在 MIC的确定中，使用 60%乙醇提取液。
表 2 不同提取液抑菌效果差异显著性分析
提取物 抑菌圈直径 /mm 样本容量 差异显著性
50% 6． 94 45 C
60% 7． 97 45 A
70% 7． 33 45 B
80% 6． 67 45 C
0% 5． 62 45 D
对于不同菌种的抑菌活性差异见表 3。由表 3 看出:茜草根提取液对大肠杆菌抑菌效果较差，而对
于枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌来说，其效果有显著差异。
表 3 不同菌种抑菌活性的差异显著性
菌种 抑菌圈平均直径 /mm 样本容量 差异显著性
枯草芽孢杆菌 7． 18 75 A
金黄色葡萄球菌 7． 08 75 A
大肠杆菌 6． 46 75 B
2． 2 茜草根不同提取物对 3 种供试菌的 MIC的测定和比较
表 4 为不同茜草根 60%乙醇提取液MIC。由表 4 可知:对照组有大量的菌生长，说明待测物的抗菌
活性来自于其本身。茜草基部根提取液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的最低抑菌浓度分
表 4 不同茜草根 60%乙醇提取液 MIC g /mL
类型 提取物稀释度 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌
基部根提取物
1 — — —
0． 5 — — —
0． 25 — — —
0． 125 + — —
0． 062 5 + + +
0． 031 25 + + + + +
0． 015 625 + + + + + +
粗根提取物
1 — — —
0． 5 — — —
0． 25 — — —
0． 125 + — —
0． 062 5 + + + +
0． 031 25 + + + + + + +
0． 015 625 + + + + + + + + +
细根提取物
1 — — —
0． 5 — — —
0． 25 + — —
0． 125 + + —
0． 062 5 + + +
0． 031 25 + + + +
0． 015 625 + + + + + + +
对照 + + + + + + + + +
注:—为不长菌，+为少量菌生长，+ + 为较多，+ + +为很多。
·08· 河 南 科 技 大 学 学 报 :自 然 科 学 版 2013 年
第 5 期 于相丽等:茜草根不同部位提取物的抑菌效果
别为 0． 250 g /mL、0． 125 g /mL、0． 125 g /mL;茜草粗根提取液对 3 种供试菌的最低抑菌浓度分别为
0. 250 g /mL、0. 125 g /mL、0. 125 g /mL;茜草细根提取液对 3 种菌的最低抑菌浓度分别为 0． 500 g /mL、
0. 250 g /mL、0. 125 g /mL。说明茜草的基部根、粗根、细根提取液对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的
抑菌效果优于大肠杆菌。
3 讨论
茜草根不同部位的抑菌活性有显著差异，以基部根效果最好，说明其药效也是最好的，基部根正处
于根和茎连接处，抑菌物质合成与运输都要通过此处，故其有效成分含量较高，抑菌效果最好。而细根
由于处于快速生长期，其抑菌物质的积累较少，故抑菌效果较差。
茜草抑菌物质的提取时间和提取温度也会影响试验结果，在提取过程中抑菌物质会有一定的损失，
在一定程度上也会影响试验结果。不同地域的茜草根含有的抑菌物质的含量也不尽相同，需要进一步
地对本地产茜草的抑菌物质进行分析，以得出抑菌物质的成分，将有利于人们利用茜草，发挥其作用。
参考文献:
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(6) :855 － 856，860．
·18·
No． 5 CONTENTS AND ABSTRACTS ·Ⅶ·
Combination application produces the moderate effects． The significant effects of nitrogen forms on wheat
aboveground biomass and yield-forming components ultimately lead to a higher grain yield:an average increase
of 21. 1% applied with SN alone compared with the control，and 9. 1% increase compared with AS alone;and
an increase of 13. 1% applied in combination compared with the control.
Key words:nitrogen fertilizer forms;wheat;dry matter production;grain yield
CLC number:S143． 1 Document code:A Article ID:1672-6871(2013)05-0074-04
Antibacterial Effect of Different Type Extraction of Root of Rubia Cordifolia L． (78 )………………
YU Xiangli，LI Yonghui，QIN Lei (Life Science Department，Luoyang Normal University，Luoyang 471022，
China)
Abstract:To elaborate the best extraction methods of the antibacterial contents of Rubia Cordifolia L．，three
different types of the root of Rubia Cordifolia L． with 0%，50%，60%，70%，80% volume fractions of alcohol
were extracted． Three species of bacteria of E． coli，Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis were selected to
know the antibacterial activity of the extraction of ethanol from its different part． The experimental results show
that the best extraction method is the 60% of the volume fraction of ethanol． For basal root，thick root and thin
root，basal root has the best effect on inhibition． MIC of the extraction of basal root and thick root is 0． 125
g /mL to Bacillus subtilis and Staphyloccocus aureus，but 0. 250 g /mL to Escherichia coli． Thin root MIC to three
bacteria is higher than the other two．
Key words:Rubia Cordifolia L．;antibacterial effect;ethanol extract;minimal inhibitory concentration(MIC)
CLC number:R282． 71 Document code:A Article ID:1672-6871(2013)05-0078-04
·Mathematics and Physics·
Double Function Expansion Method and Travelling Wave Solutions of mKdV Equation (82 )……
LI Xiangzheng (Mathematics ＆ Statistics School，Henan University of Science ＆ Technology，Luoyang 471023，
China)
Abstract:The double function expansion method was proposed，by which the travelling wave solutions involving
parameters of the mKdV equation were obtained． The travelling wave solutions were expressed by the
hyperbolic functions，the trigonometric functions and the rational functions． The proposed method takes
advantage of relative conclusions of second order linear ordinary differential equation(LODE for short)． The
method is direct，concise，elementary and effective，and can be used for many other nonlinear evolution
equations．
Key words:double function expansion method;mKdV equation;homogeneous balance;travelling wave
solutions
CLC number:O175． 2 Document code:A Article ID:1672-6871(2013)05-0082-05
A Novel Multi-criteria Decision-making Method Based on Interval-valued Intuitionistic Fuzzy Sets
(87 )……………………………………………………………………………………………………
SUN Xiaohui1a，WU Tao1a，1b，SUN Heng2，BAI Lihu1a (1a． School of Mathematical Sciences;1b． Key
Laboratory of Intelligent Computing ＆ Signal Processing of Ministry of Education，Anhui University，Hefei
230039，China;2． School of Soil ＆ Water Conservation，Beijing Forestry University，Beijing 100083，China)
Abstract:Based on the score function and accuracy function of existing interval-valued intuitionistic fuzzy set，
a new score function was defined，which overcomes the defect of existing score function and accuracy function．
Moreover，some properties were provided． By the weighted average operator and weighted geometric integrated
operator of interval-valued intuitionistic fuzzy set，multi-criteria interval-valued intuitionistic fuzzy set was
aggregated． According to the new score function，a novel interval-valued decision-making method based on the
intuitionistic fuzzy set was presented． An example shows the good effectiveness of the method．
Key words:interval-valued intuitionistic fuzzy set;aggregation operators;score function;accuracy function;
decision-making
CLC number:O232 Document code:A Article ID:1672-6871(2013)05-0087-04
Image Subdivision Method Used in Laser Speckle Technology (91 )………………………………