全 文 ：93
郭豫梅
( 陕西理工学院化学与环境科学学院，陕西汉中 723001)
摘 要:测定石参中多糖含量，并对其抗氧化活性进行了研究。采用水提醇沉法从石参中提取多糖，采用分光光度计
法，测得石参中多糖含量为 1493%。此外，还对石参中多糖的抗氧化活性进行了初步探究，石参中多糖对自由基及亚
硝酸盐的清除作用随着多糖浓度的增大而表现出明显的量效关系。
关键词:石参，多糖，抗氧化活性
Determination of polysaccharide in Eremurus chinensis
and its antioxidition activity
GUO Yu－mei
( School of Chemistry ＆ Environmental Sciences，Shaanxi University of Technology，Hanzhong 723001，China)
Abstract: The aim was to determine polysaccharide in Eremurus chinens and study its antioxidantThe polysaccharide
in Eremurus chinens were obtained by extraction，ethanol precipitation，removing protein by the ultrasonic methodIt
was demonstrated that the content of polysaccharide was 1493% by spectrophotometerThe antioxidant activities of
polysaccharide were studiedWith the increasing of polysaccharide，the removal effect on free radical and nitrite
became increasingly obvious
Key words: Eremurus chinensis; polysaccharide; antioxidant activity
中图分类号: TS2011 文献标识码: A 文 章 编 号: 1002－0306( 2011) 06－0093－03
收稿日期: 2010－04－07
作者简介:郭豫梅( 1975－ ) ，女，研究生，讲师，主要从事综合化学实验
教学和研究工作。
基金项目:陕西理工学院专项科研基金项目( SLGQD0711) 。
石参又名石蒜苔、崖参，属百合科独尾草属的独
尾草［Eremurus chinensis］，为多年生草本植物，其根
肉质，柔软，黄色或深褐色，为其食用部分，其干制加
工产品呈金黄色，味甘甜，是陕西南部山区稀见的一
种山野菜。然而这一宝贵资源并未被充分地开发利
用，只是被当地的居民采食或简单的加工。石参中
含有丰富的蛋白质和纤维素等，我国有 4 种，一种产
自西南，三种产自新疆。其在陕西最近几年才发现，
据调查其在陕西的分布仅见于略阳县境内西淮坝乡
的西淮坝村、张家山等几个狭窄地带，目前野生独尾
草已非常少见。据陕西省资源生物重点实验室初步
测定，其含有丰富的蛋白质和纤维素，蛋白质几乎接
近于大米中的含量［1－2］。但对于石参化学成分的研
究目前少见报道，目前这一宝贵资源并未被充分地
开发利用，没有被作为一种特色产品走向国内外市
场，只是被当地的居民采食或简单的加工。本文以
野生石参为材料，对其所含多糖进行了测定，然后对
石参多糖的体外抗氧化活性进行了测定，并与维生
素 C 进行了对比，为更好地开发利用石参资源提供
一定的理论基础。
1 材料与方法
11 材料与仪器
石参 市售，产地汉中略阳; 乙醇、蒽酮、硫酸、
葡萄糖、邻苯三酚、抗坏血酸、三羟基氨基甲烷
( Tris) 、盐酸、邻二氮菲、硫酸亚铁、对氨基苯磺酸溶
液、盐酸萘乙二胺溶液 均为分析纯。
TG328 电子天平 上海天平仪器厂; 722 型可见
分光光度计 上海精密科学仪器有限公司; 101 型电
热鼓风干燥箱 北京科伟永兴仪器有限公司; 恒温
水浴锅，旋转蒸发仪，真空泵。
12 实验方法
精确称取 82g 预处理过的石参粉末，加入蒸馏
水，煮沸 2h，过滤，滤液 80℃下减压浓缩至一定体积，
然后加入四倍体积的 95%乙醇，4℃静置过夜，离心
20min，收集沉淀。然后再用少量蒸馏水溶解，离心，
除去不溶物，上清液干燥后称重。蒽酮－硫酸法［3］测
多糖的含量。
13 标准曲线的绘制
DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2011.06.018
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标准曲线的制作: 取 01g /L 葡萄糖溶液 000、
020、040、060、080、100mL，用蒸馏水补到 200mL，
然后分别加入 400mL蒽酮试剂，迅速浸于冰水浴中
冷却，各管加完后一起浸于沸水浴中，管口加盖玻璃
球，以防蒸发，自水浴重新计算起，准确煮沸 10min
取出，用蒸馏水冷却，室温放置 10min左右，于 620nm
下比色。以蒸馏水为空白，以吸光度为纵坐标，葡萄
糖浓度为横坐标，绘制标准曲线( 如图 1 所示) 。
14 抗氧化活性的测定
141 对超氧自由基( O －2 ·) 的清除作用 采用邻苯
三酚自氧化法［4－6］。取 005mol·L －1，pH82 的 Tris－
HCl缓冲液 45mL加入盛有 42mL蒸馏水的试管中，
置于 25℃水浴中预热 20min。分别加入不同的试样
水提物溶液 01mL，立即加入在 25℃水浴中预热的
3mmol·L －1邻苯三酚 ( 由 10mmol·L －1 HCl 配制)
03mL，混匀后 25℃水浴中准确反应 4min，立即加入
8mol·L －1 HCl 2 滴终止反应，在 420nm 处测定吸光
度( 样品管以同浓度的试样水提物溶液做参比) 。模
型组以 01mL蒸馏水代替样品试液 ( 以蒸馏水做参
比) 。用抗坏血酸( VC ) 做对照，临用前以浓度为
50mmol·L －1的 Tris－HCl缓冲液( pH80) 配制。超氧
自由基( O －2 ·) 按以下公式计算清除率。
O －2 ·清除率 = ( A空白－A样品 ) /A空白 × 100%
142 对羟基自由基 ( ·OH) 的清除作用 用邻二
氮菲－Fe2 +氧化法［7－8］测定 Fe2 + /H2O2 体系中产生的
羟基自由基。依次加入邻二氮菲 15mL，pH74 的
PBS溶液 38mL及试样总黄酮溶液 1mL( 损伤管及未
损伤管不加试样多糖溶液) 混匀，再加 FeSO4 溶液
15mL，立即混匀，最后加 H2O2 1mL ( 未损伤管不
加) 。最终浓度邻二氮菲 075mmol· L －1、FeSO4
075mmol·L －1、H2O2 001%，总体积 9mL( 不足用蒸
馏水补足) 。各管置于 37℃恒温水浴箱保温 60min，
分别测定各管 A536值( 样品管以同浓度的试样水提物
溶液做参比，损伤管及未损伤管以蒸馏水做参比) 。
用抗坏血酸( VC ) 做对照，临用前以蒸馏水配制。羟
基自由基按以下公式计算清除率。
·OH 清除率( % ) = ( A样品－A损伤 ) / ( A未损－A损伤 )
× 100%
143 对亚硝酸盐的清除作用［9］ 取已知浓度的提
取液 2mL 于 25mL 容量瓶，加入 5μg /mL 的 NaNO2标
准溶液 3mL，加入柠檬酸－磷酸缓冲溶液 ( pH30 )
5mL，37℃下反应 15min，立即加入 2mL 04%对氨基苯
磺酸溶液，混匀，静置 3～5min 后，加入 1mL 02%盐酸
萘乙二胺溶液，加蒸馏水至刻度，混匀，静置 15min，以
5mL 提取液为空白，在 544nm处测吸光度。用抗坏血
酸( VC ) 做对照。按下式计算 NO
－
2 的清除率。
NO －2 清除率( % ) = ( A0－A) /A0 × 100%
式中，A0 － NO
－
2 的溶液吸光度; A －样品的吸
光度。
2 结果与分析
21 石参多糖含量的测定
绘制葡萄糖标准曲线，由图 1 得标准曲线的回
归方程: Y =37357X +00348( R =09975) ，将测定的
吸光度值代入回归方程，得到石参中粗多糖浓度，再
计算求得样品中多糖的含量为 1493%。
图 1 葡萄糖标准曲线
22 抗氧化性的研究
221 对超氧自由基( O －2 ·) 的清除作用 根据方法
141，配制五种不同浓度的样品溶液，测定其吸光
度，并计算其对 O －2 ·的清除率，见图 2。以抗坏血酸
为对照，同法测定其吸光度，并计算其对 O －2 ·的清
除率，见图 3。
图 2 石参多糖对超氧自由基( O －2 ·) 的清除率
图 3 VC 对超氧自由基( O
－
2 ·) 的清除率
222 对羟基自由基 ( ·OH) 的清除作用 根据方
法 142，配制五种不同浓度的样品溶液，测定其吸光
度，并计算其对·OH的清除率，见图 4。以抗坏血酸
为对照，同法测定其吸光度，并计算其对·OH 的清
除率，见图 5。
图 4 石参多糖对羟基自由基( ·OH) 的清除率
223 对亚硝酸盐 ( NO －2 ) 清除作用 根据方法
143，配制五种不同浓度的样品溶液，测定其吸光
度，并计算其对 NO －2 的清除率，见图 6。以抗坏血酸
为对照，同法测定其吸光度，并计算其对 NO －2 的清除
率，见图 7。
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图 5 VC 对羟基自由基( ·OH) 的清除率
图 6 石参多糖对亚硝酸盐( NO －2 ) 清除率
图 7 VC 对亚硝酸盐( NO
－
2 ) 清除率
测得石参中多糖含量为 1493% ; 石参多糖浓度
为 3760g /L时，对超氧自由基 ( O －2 ·) 的清除率为
2987% ;石参多糖浓度为 03040g /L 时，对羟基自由
基( ·OH ) 的清除率为 3961% ; 石参多糖浓度为
01640g /L时，亚硝酸盐的清除率为 3756%。
3 结论
通过对石参多糖清除自由基能力的测定，确定
其具有较强的清除超氧自由基( O －2 ·) 、羟基自由基
( ·OH) 及亚硝酸盐( NO －2 ) 的能力，可将其作为抗氧
化剂应用到食品和药品行业中，这也将为进一步地
促进天然抗氧化剂的研究与开发提供一定的理论
依据。
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