全 文 ：第 17卷 第 12期
Vol.17 No.12
2011年 12月
December.2011Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
不同产地苦参饮片水煎液中
三叶豆紫檀苷含量测定*
陈 磊1，刘 怡2（通讯作者）
（1.广东药学院中药学院，广东 广州 510006；2.南方医科大学中医药学院，广东 广州 510515）
[摘要] 目的：建立苦参饮片水煎液中三叶豆紫檀苷含量测定方法。方法：采用HPLC法，Alltech Apollo C18（4.6 mm×150 mm，
5 μm）为色谱柱，以乙腈-水（30∶70）为流动相，流速：1.0 mL·min-1，检测波长：310 nm，柱温：25 ℃。结果：三叶豆紫檀苷回归方
程Y=676.08X+7.5（r=0.9994），三叶豆紫檀苷在0.982-4.64 μg线性关系良好；方法的平均回收率为99.09%，RSD%=1.31%。结
论：所建立的方法准确、灵敏、重复性好，可用于考察不同产地苦参饮片水煎液中主要黄酮成分含量。
[关键词] 苦参饮片；三叶豆紫檀苷；HPLC法
[中图分类号] R284.1 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X（2011）12-0070-02
Determination Content of Trifolirhizin in Sophora flavescens
Herbal Pieces Decoction from Different Areas
Chen Lei1，Liu Yi2(Corresponding author)
(1.Guangdong Pharmaceutical University, Guangdong 510006;2.Southern Medical University, Guangdong 510515)
[Abstract] Objective:To establish the determination method of trifolirhizin content in Sophora flavescens herbal pieces de－
coction and to investigated the major flavonoid components in Sophora flavescens herbal pieces decoction. Method: Alltech
Apollo C18（4.6 mm×150 mm，5 μm）colmnn was used，the mobile phase was acetonitrile-water(30 ∶70);with the flow rate as 1.0
mL·min-1，the detection wavelength was at 310 nm. Result:The linear relation of hyperin was good in the range from 0.982 to
4.64 μg.The average recovery was 99.09%，RSD 1.31%. Conclusion:The method established is accurate，sensitive and good in
reproducibility. It can be applied to the quality control of Sophora flavescens Herbal Pieces.
[Key words] Sophora flavescens herbal pieces; Trifolirhizin
苦参为豆科槐属植物苦参（Sophora flavescens Ait.）的干
燥根，始载于《神农本草经》。其性苦，寒，归心、肝、大肠、胃、
膀胱经，具有清热燥湿、杀虫利尿的功效。主治热痢、胃肠道
出血、便血、黄疸尿闭、赤白带下、阴痒阴肿、湿疹、皮肤瘙痒、
疥癣麻风等证；外治滴虫性阴道炎，是许多复方的重要组成
药味。近年来研究证明其黄酮类成分具有广泛的药理作用，
是中药苦参发挥药效的主要物质基础之一。三叶豆紫檀苷为
苦参中的主要黄酮成分，近年来研究认为其非常有可能成为
新型的治疗Ⅱ型糖尿病药物，同时是治疗皮肤病的良好候选
药物并其结构骨架可成为新型神经氨酸（糖）苷酶抑制剂先
导结构[1-2]。鉴于《中国药典》（2010版）要求中药制剂均以饮片
形式为原料，笔者为苦参饮片及药材提供质控方法依据，
首次对三叶豆紫檀苷在不同产地苦参饮片水煎液中的含量
进行了测定。
1 仪器与材料
Agilent 1100高效液相色谱仪，紫外检测器；Sartorious BT
25S型1/100000电子分析天平（北京赛多利斯仪器有限公司）；
KQ-500DE型超声波清洗器（昆山超声仪器有限公司）；旋转
蒸发器（中国科学院生物物理所科龙仪器厂）；
三叶豆紫檀苷对照品自制，纯度>98%。甲醇、乙腈（Fisher
公司），色谱纯；屈臣氏重蒸水（液相用水）；Milli-Q系统纯化
水（液质用水）。0.45 μm微孔滤膜、Cleanert C18 SPE固相萃取
柱（3 mL，200 mg，60 μm，北京艾杰尔科技有限公司）。
各产地苦参饮片经广东药学院中药标本馆王红刚药师
鉴定均来源于豆科槐属植物苦参的干燥根。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱：Alltech Apollo C18（4.6 mm ×150 mm，
5 μm）；流动相：乙腈-水（30∶70）；流速：1 mL/min；检测波长：
310 nm；柱温：25 ℃。依上述色谱条件，分别精密吸取三叶豆
紫檀苷对照品溶液、苦参饮片供试品溶液各10 μL，分别进
样。在对照品溶液和供试品溶液色谱图相应位置上，有相同
* 基金项目：广东高校优秀青年创新人才培养计划项目
（LYM10095）
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DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2011.12.050
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保留时间的色谱峰，且供试品中三叶豆紫檀苷与其它成分分
离良好，无干扰。（见图1）
A-对照品 B-供试品
图1 苦参饮片水煎液HPLC图
2.2 对照品溶液的制备 精密称取三叶豆紫檀苷对照品
5.80 mg，置25 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度摇匀，作
为对照品溶液（0.232 μg/μL）。
2.3 供试品溶液的制备 精密称取苦参饮片粉末（40目）约
10 g，置250 mL锥形瓶中，加入10倍量水，浸泡30 min，加热
煎煮使保持微沸25 min，过滤，洗涤药渣2次，滤液置于250 mL
锥形瓶中。药渣再加入10倍量水，加热煎煮25 min，过滤，合
并两次滤液，浓缩，放冷，置100 mL容量瓶中，加水稀释至刻
度。用0.45 μm微孔滤膜滤过，滤液作为苦参饮片水煎液供试
品溶液。
2.4 线性关系考察 精密吸取三叶豆紫檀苷对照品溶液(浓
度为0.232 mg/mL) 4、8、12、16、20 μL，注入液相色谱仪，测定
色谱峰峰面积。以对照品进样量为横坐标，色谱峰峰面积为
纵坐标，绘制标准曲线，并进行线性回归，计算回归方程为：
Y=676.08X+7.5（r=0.9994），表明三叶豆紫檀苷在0.982-4.64 μg
范围内线性关系良好。以三叶豆紫檀苷计，理论塔板数不低
于3000。
2.5 精密度试验 精密吸取“2.3”项下供试品溶液10 μL，连
续进样5次，测定三叶豆紫檀苷色谱峰峰面积。计算RSD%=
2.56 %（n=5），表明精密度良好。
2.6 稳定性试验 精密吸取供试品溶液的制备项下供试品
溶液10 μL，分别于制备后0、2、4、8、12、24 h进样，测定三叶豆
紫檀苷色谱峰峰面积，计算RSD%=0.73%。表明供试品溶液在
24 h内基本稳定。
2.7 重复性试验 取同一批苦参饮片，按供试品溶液的制备
项下方法制备供试品溶液，进行含量测定。平行测定6份，计
算三叶豆紫檀苷平均含量为0.22%，RSD%=2.50%，表明本测
定方法重复性好。
2.8 加样回收率试验 精密称取已知含量的苦参饮片
（0.22%）5份，每份约7 g，分别加入5 mg/mL三叶豆紫檀苷对照
品溶液4 mL，按照苦参药材溶液的制备项下方法制备，进行
测定，计算平均回收率99.09%。RSD%为1.31%。（见表1）
2.9 样品含量测定 精密称取不同产地苦参饮片粉末（40
目）约10 g，置250 mL锥形瓶中，按“2.3”项下方法制备供试
液。分别精密吸取上述供试液溶液注入液相色谱仪，测定色
谱峰峰面积，计算含量。（见表2）
表1 回收率实验结果 （n=5）
样品 样品中对 添加对 测得对 回收率 平均 RSD
称样量 照品含量 照品量 照品总量 回收率
（g） （mg） （mg） （mg） （%） （%） （%）
7.000 15.40 20 35.299 99.49
6.998 15.39 20 35.297 99.51
6.996 15.39 20 35.373 99.90 99.09 1.31
6.992 15.38 20 35.340 99.79
6.986 15.36 20 34.726 96.78
表2 不同产地苦参饮片中三叶豆紫檀苷含量测定结果（n＝3）
批次 产地 含量（%） RSD（%）
1 安徽 0.13 2.05
2 湖北 0.12 1.04
3 河南 0.15 1.27
4 山东 0.14 1.49
5 山西 0.22 1.68
6 内蒙 0.23 1.23
7 河北 0.17 2.25
3 讨 论
根据文献报道，发现苦参中黄酮类成分紫外吸收波长范
围主要在280-320 nm，经过比较290、300、310 nm下苦参提取
液液相图谱，结果在310 nm波长色谱图较理想，最终确定了
310 nm为苦参供试品溶液紫外检测波长。在流动相选择上，
比较了甲醇、乙腈、甲酸、醋酸等多个系统，最终选择了乙腈-
水（30∶70）溶液系统，在该系统下，各色谱峰分离情况均较好。
尽管近年来对苦参黄酮药效作用的研究越来越多，其黄酮成
分明确的药理活性也得到越来越多的认可，但对苦参黄酮类
成分的质量控制未见《中国药典》（2010年版）和地方标准收
载。
三叶豆紫檀苷及其主要代谢产物近年来引起多方面关
注，认为其在药理作用机制和分子结构都非常具有研究价
值；结合文献对苦参黄酮成分药理作用的研究报道，表明三
叶豆紫檀苷具有很多和苦参传统、现代临床应用一致的药理
作用。故本文首次考察了不同来源苦参饮片水煎液中三叶豆
紫檀苷的含量，同时建议建议将含量较高的三叶豆紫檀苷作
为中药苦参药材及其饮片的指标性成分加以质量控制。
参考文献
[1] Young Bae Ryu, Marcus J，Curtis -Long, et al. Ptero－
carpans and flavanones from Sophora flavescens display－
ing potent neuraminidase inhibition [J]. Bioorganic &
Medicinal Chemistry Letters，2008，(18)：6046-6049
[2] Seizo Sato, Jiro Takeo, Chihiro Aoyama, et al. Na+-Glu－
cose cotransporter (SGLT) inhibitory flavonoids from the
roots of Sophora flavescens [J]. Bioorganic & Medicinal
Chemistry，2007，(15)：3445-3449
（收稿日期：2011-09-22 编辑：李海洋）
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