全 文 ：中药与临床 Pharmacy and Clinics of Chinese Materia Medica 2012;3(1) ·5·
山豆根为豆科槐属植物越南槐 Sophora tonkinensis
Gagnep.的干燥根及根茎[1]，主产于广西、贵州，为
常用中药材。山豆根中主要含生物碱、黄酮和皂苷
类成分[2]。《中国药典》（2010年版一部）以苦参碱
和氧化苦参碱为对照品，氨基键合硅胶为固定相，
采用高效液相色谱法对山豆根进行含量测定。规定
按干燥品计，山豆根中苦参碱和氧化苦参碱的总量
不得少于0.7%。但对于山豆根中黄酮类成分的定量
分析尚未见报道。
1 材料与方法
1.l 仪器
Agilent 1100 高效液相色谱仪:G1310A型泵；
G1313A型自动进样器；G1315B型DAD检测器（均
为美国惠普公司）。色谱柱为Symmetry shield RP
C18柱(4.6×250 mm，5 μm，美国Waters公司）。
1.2 试药
三叶豆紫檀苷对照品（自制，按面积归一化法
计纯度为96.1%）。
山豆根药材购于广西贵港市药材公司，经本
校鉴定教研室龙飞博士鉴定为豆科植物越南槐
（Sophroa tonkinensis Gapnep.）的根及根茎。甲醇为
色谱纯试剂；水为重蒸馏水。
1.3 方法
1.3.1 色谱条件 流动相：甲醇-水（50∶50）；流速
为1.0 mL.min-1；柱温为30 ℃；检测波长为310 nm。
1.3.2 对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的三叶
豆紫檀苷对照品约12.5 mg，置25 mL量瓶中，加甲
醇溶解，并稀释至刻度，作为对照品溶液。
1.3.3 山豆根样品液的制备 取山豆根粗粉约2 g[同时
另取本品粗粉测定水分（干燥失重法）]精密称定，
加入甲醇25 mL，称重，超声提取30 min，称重，
邓放，吴兵，董小萍
[摘要] 目的：建立RP-HPLC测定山豆根中三叶豆紫檀苷含量的方法。方法：色谱柱为Symmetry shield RP C18柱，流
动相为甲醇-水（50:50），检测波长为310 nm。结果：三叶豆紫檀苷在0.49～4.9μg范围内与峰面积有良好的线性关系；
精密度试验相对标准偏差为1.31%；加样回收率为96.69%～98.57%；山豆根中三叶豆紫檀苷含量为0.019%。结论：本法
操作简便，结果准确，可用于山豆根中三叶豆紫檀苷含量的测定。
[关键词] 反相高效液相色谱；山豆根；三叶豆紫檀苷
[中图分类号] R286.0 [文献标识码] A [文章编号] 1674-926X(2012)01-002-02
Determination of trifolirhizin in Radix et Rhizoma sophorae tonkinensis by RP-HPLC/DENG Fang, WU Bing, DONG
Xiao-ping//(Pharmacy College, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; The Ministry of Education Key Laboratory
of Standardization of Chinese Herbal Medicine; State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and
Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 610075, China)
[Abstract] Objective: To develop a method to determine trifolirhizin in Radix et Rhizoma sophorae tonkinensis by RP-HPLC.
Method: The analytical column was symmetry shield RP C18 column.The mobile phase was methanol-water（50:50）. Result:
The detection wavelength was set at 310 nm. The calibration curve was linear in the range of 0.49 μg～4.9μg for trifolirhizin.
The relative standard deviation (RSD) of precision test was 1.31%.The recovery was between 96.69% and 98.57%. Trifolirhizin
contents in Radix et Rhizoma sophorae tonkinensis was 0.019%. Conclusion: The method is simple, quick, accurate，and reliable
for the determination of trifolirhizin in Radix et Rhizoma sophorae tonkinensis.
[Key words] RP-HPLC; Radix et Rhizoma Sophorae tonkinensis; trifolirhizin
RP-HPLC法测定山豆根中三叶豆紫檀苷的含量
·品种品质·
[基金项目] 成都中医药大学校基金课题（课题编号：ZRYB
200415）
[作者单位] 成都中医药大学药学院 中药材标准化教育部重点
实验室 中药资源系统研究与开发利用省部共建国
家重点实验室培育基地，四川 成都 610075
[作者简介] 邓放(1971-)，男，博士研究生，副教授，从事中
药复方物质基础及质量控制研究
Email: dengf99@ qq.com.cn
[收稿日期] 2011-09-06
中药与临床 Pharmacy and Clinics of Chinese Materia Medica 2012;3(1)·6·
用甲醇补足余重。用0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤
液10μL进样分析。对照品及样品色谱图见图一、图
二。
图一 三叶豆紫檀苷对照品色谱图 图二 山豆根样品色谱图
2 结果
2.1 标准曲线
精密称取干燥至恒重的三叶豆紫檀苷对照品
12.30 mg，置25 mL量瓶中，加甲醇溶解，并稀释至
刻度，作为对照品溶液（0.4920 mg.mL-1）。分别吸
取对照品溶液1、2、4、6、8、10 μL进样，测定峰
面积。以峰面积（A）对进样量（C）作线性回归，
得标准曲线方程为：A=648.6C-4.1 （r=1.0000）。可
知进样量在0.49～4.9μg范围内，三叶豆紫檀苷峰面
积值与进样量呈良好的线性关系。结果见表1。
表1 标准曲线测定结果
进样量 (μg) 峰面积
0.492 321.2
0.984 624.7
1.968 1279.3
2.952 1906.2
3.936 2546.4
4.920 3189.9
2.2 重复性试验
取同一样品6份，制备6份样品液，进样10μL，
根据测得的样品含量计算RSD%为1.31%，符合要
求。
2.3 回收率试验
在样品中定量加入标准品溶液，自然挥干后用
上述方法制备样品，测定加样回收率，结果见表2。
表2 回收率测定结果（n=3）
编号 取样量 已知含量 加入量 测得量 回收率
（g） （mg） （mg） （mg） （%）
1 1.0136 0.1716 0.1476 0.3171 98.57
2 1.1853 0.2006 0.1476 0.3448 97.64
3 1.0763 0.1822 0.1968 0.3727 96.80
4 1.2421 0.2103 0.1968 0.4036 98.23
5 1.0597 0.1794 0.2460 0.4176 96.81
6 1.0263 0.1737 0.2460 0.4116 96.69
2.4 山豆根中三叶豆紫檀苷的含量测定
按样品液制备方法制备山豆根样品，进样分
析，测定山豆根中三叶豆紫檀苷的含量，结果见表
3。
表3 山豆根中三叶豆紫檀苷的含量测定结果（n=3）
批次 含量（mg.g-1） RSD(%) 平均含量（mg.g-1）
1 0.194 1.86
2 0.196 1.52 0.194
3 0.193 1.47
3 讨论
3.1 山豆根中主要含生物碱、黄酮和皂苷类成分。对
山豆根中生物碱类成分苦参碱及氧化苦参碱的药理
作用研究报道较多，对山豆根中苦参碱及氧化苦参
碱的含量测定也有报道[3]。《中国药典》（2010年版
一部）以苦参碱和氧化苦参碱为对照品采用薄层层
析的方法对山豆根进行鉴别；以氧化苦参碱为对照
品，采用高效液相色谱法对山豆根进行含量测定，
规定按干燥品计，山豆根中苦参碱和氧化苦参碱的
总量不得少于0.7%。但对于山豆根中黄酮类成分
的定量分析尚未见报道，本实验建立了山豆根中三
叶豆紫檀苷的反相高效液相色谱测定法。在实验条
件下，样品中三叶豆紫檀苷与相邻峰的分离效果良
好，保留时间适宜（约为10 min），精密度试验相对
标准偏差小，加样回收率为96.69%～98.57%，测定
结果准确、可靠。
3.2 本文对山豆根中单一的黄酮成分进行了HPLC测
定。从测定结果看，山豆根中三叶豆紫檀苷的平均
含量为0.019%，提示在合理使用、开发山豆根的过
程中，有必要对山豆根中的黄酮类成分进一步进行
研究。
参考文献
[1] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典一部[S]. 北京:中
国医药科技出版社,2010.
[2] 阴健.中药现代研究与临床应用2[M].北京:中医古籍出版
社,1995:22.
[3] 方立琼,郭济贤,郑力行.中药山豆根与北豆根的质量评价[J].
上海医科大学学报,1992,19(2):124.
（责任编辑：胡慧玲）