全 文 ：血中内源性物质无干扰。
3.3　通过对药物代谢研究结果分析发现 , 大鼠灌胃黄连厚
朴提取物血浆样品中的盐酸小檗碱的达峰时间 Tmax(h)为
1.0h,峰浓度 Cmax(mg· L-1)为 0.162 0±0.021 7,平均滞留
时间 MRT(0 ～ ∞)为 28.75 ±16.28, 曲线下面积 AUC(0※∞)
2.088±0.822 5。黄连单味药材血浆样品中的盐酸小檗碱的
达峰时间为 3 h, 峰浓度为 0.067 0±0.010 8, 平均滞留时间
为 17.15±4.459, 曲线下面积 AUC(0※∞)0.937 0 ±0.253 0。
两者相比较可以看出 , 黄连 、厚朴配伍以后大鼠血浆中的盐
酸小檗碱血药浓度较高 , 吸收较快 , 消除较慢 , 小檗碱的吸收
程度增加。说明黄连与厚朴配伍后 ,厚朴能促进盐酸小檗碱
的吸收 , 减缓盐酸小檗碱的消除 , 提高黄连活性成分盐酸小
檗碱的生物利用度。
参考文献:
[ 1] 　哈小博.漫谈 “连朴饮 ” [ J] .开卷有益(求医问药)2006(7):
21.
[ 2] 　崔学军.黄连及其有效成分的药理研究进展 [ J].中国药师 ,
2006, 9(5):469-470.
[ 3] 　丁志平 ,林　力 ,郑晓鹤 ,等.不同粒径黄连粉在大鼠体内药代
动力学的研究 [ J] .中医药学刊 , 2004, 22(5):835-836.
[ 4] 　陈志扬 ,郑青山 ,孙瑞元.大型药理学计算软件 DAS的功能介
绍 [ J].中国临床药理学与治疗学 , 2002, 7(6):562.
RP-HPLC测定姜味草中熊果酸和齐墩果酸的含量
李坤平 1 , 　潘天玲 1 , 　袁旭江1 , 　潘天鸣 2
(1.广东药学院 ,广东 广州 510006;2.贵州省黔西南布依族苗族自治州人民医院 ,贵州 兴义 562400)
收稿日期:2008-08-24
作者简介:李坤平(1978-),男 ,讲师 ,博士生 ,从事中药制药工程方面的教学与研究。
关键词:姜味草;高效液相色谱法;熊果酸;齐墩果酸
中图分类号:R248.2　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2009)06-0945-03
　　姜味草(Micromeriabiflorabenth.), 别名小姜草 、小香
草 , 唇形科姜味草属植物;味辛 、性大温 ,具温中健胃 、祛风散
寒之功效;主要分布于贵州 、云南 、广西等地 [ 1] 。姜味草为黔
西南地区布依族 、苗族常用草药;李坤平等 [ 2]利用超临界
CO2萃取技术和水蒸汽蒸馏法提取姜味草挥发油 , 采用 GC-
MS联用法对其化学成分进行了分析和鉴定;万庆家等 [ 3]对
姜味草的化学成分进行了研究 , 从中分离得到了 β -香树脂
醇 、齐墩果酸 、5-去甲基橘黄素 、百里香素 、胡萝卜苷和 β -谷
甾醇等 5种化合物;万庆家等 [ 4]采用薄层扫描法对云南不同
产地姜味草中的齐墩果酸含量进行了测定。前期研究中发
现姜味草提取物中的三萜酸类成分主要是熊果酸和齐墩果
酸 , 且其测定方法尚未见文献报道。为建立姜味草中熊果酸
和齐墩果酸的定量分析方法 , 同时也为姜味草药材质量标准
的制定提供依据 , 本实验采用反相高效液相色谱法(RP-
HPLC)测定了姜味草中熊果酸和齐墩果酸的含量。
1　仪器与试药
仪器:高效液相色谱仪(LC-10ATVpPlus, SPD-10AVp
Plus检测器 ,日本岛津公司);LCsolutionLITE色谱工作站;
数控超声波清洗器(KH-400KDB, 昆山禾创超声仪器有限公
司)。
试剂:熊果酸 、齐墩果酸对照品 ,购自中国药品生物制品
检定所(批号分别为:110742-200516、 110709-200304);甲醇
为色谱纯 ,石油醚(60 ～ 90)℃市售分析纯 ,水为乐百氏纯净
水。
药材及其处理:姜味草全草 , 2006年 8月中旬采自贵州
省黔西南布依族苗族自治州兴义市下午屯镇郊 , 经本校中药
学院生药教研室老师鉴定为唇形科姜味草属植物姜味草
Micromeriabiflorabenth。全草阴干 ,粉碎 , 过 40目筛 ,置于索
氏提取器中以石油醚回流 3 h, 自然晾干后 85℃干燥 , 备用。
2　方法与结果
2.1　色谱分析条件　色谱柱为 KromasilC18柱(250 mm×
4.6 mm, 5 μm);流动相为甲醇-水-磷酸(90∶10∶0.2), 流速:
0.85mL/min;熊果酸和齐墩果酸的检测波长均为 210 nm;
进样量 10 μL;柱温为 25℃。
2.2　对照品溶液的制备　精确称取熊果酸 10.02 mg和齐
墩果酸 10.06 mg, 分别置于 10 mL量瓶中 , 加甲醇溶解 , 定
容;精密吸取上述溶液各 5 mL置于 10mL量瓶中 ,即得熊果
酸 0.501 mg/mL、齐墩果酸 0.503 mg/mL的混合对照品溶
液。
2.3　样品溶液的制备　准确称取姜味草 1.000 g置于 100
mL比色管中 ,加入甲醇 30mL,功率 320 W频率 40kHz超声
波处理 60 min, 过滤 ,用少量甲醇洗涤滤渣并合并滤液至 50
mL量瓶中 , 放置至室温 , 定容 ,摇匀 , 即为样品溶液。
2.4　系统适用性试验　取熊果酸和齐墩果酸对照品溶液 、
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样品溶液 , 按上述色谱条件 ,进样 10μL,测得其 HPLC图谱 ,
如图 1所示。齐墩果酸和熊果酸的保留时间分别为:13.0
min和 13.8min;理论塔板数分别为 16 584.05和 17 600.66;
分离度分别为 1.905和 1.557;符合定量分析的要求。
图 1　齐墩果酸(a)、熊果酸(b)对照品和样品(c)的 HPLC
色谱图
1.齐墩果酸　2.熊果酸
2.5　线性关系考察　分别精密吸取对照品混合溶液 100、
200、 400、600、800、1000 μL于 2 mL量瓶中 , 以甲醇稀释 , 定
容。按 “ 2.1”项条件分析并测定峰面积。以峰面积(Y)对进
样量(X)进行线性回归 ,熊果酸和齐墩果酸的回归方程分别
为:YUA=1.36×105X+3.68×103 , r=0.999 7, YOA=2.85 ×
105X+5.11 ×103 , r=0.999 6, 表明当熊果酸进样量在
0.250 5 ～ 2.505 μg,齐墩果酸进样量在 0.251 5 ～ 2.515 μg
时 ,线性关系良好。
2.6　精密度实验　精密吸取熊果酸和齐墩果酸对照品混合
溶液 10 μL进样 , 重复 5次 , 测得熊果酸的峰面积 RSD为
0.61%(n=5),齐墩果酸的峰面积 RSD为 0.82%(n=5),
表明仪器精密度良好。
2.7　稳定性实验　按照 “ 2.3”项制备样品溶液 , 在 2.1项条
件下按照 0, 2, 4, 8, 12, 24h间隔进样 , 每次 10 μL, 测得熊果
酸和齐墩果酸的峰面积 RSD分别为 0.62%和 0.78%, 表明
熊果酸和齐墩果酸的甲醇溶液在 24 h内性质稳定。
2.8　重复性实验　取姜味草 5份 , 按 “ 2.3”项下方法制备样
品溶液 ,再按 2.1项条件精密吸取各样品溶液 10 μL进样分
析 ,测得熊果酸和齐墩果酸峰面积的 RSD分别为 0.96%和
1.02%(n=5),表明方法重现性好。
2.9　加样回收率实验　准确称取已知熊果酸和齐墩果酸含
量的姜味草 6份 ,每组两份 , 按高 、中 、低 3种浓度分别加入
适量混合对照品溶液 ,按 2.3项制备样品溶液 ,在 “ 2.1”项条
件下测定其含量 ,计算加样回收率。 结果表明 , 本实验的提
取与处理方法对熊果酸和齐墩果酸同时具有较高的回收率 ,
见表 1。
2.10　姜味草中熊果酸和齐墩果酸含量测定　按照 2.3项
方法制备姜味草全草样品溶液 , 精密吸取 10 μL, 进样 , 测定
熊果酸和齐墩果酸峰面积 , 平行实验 3次 , 外标法计算平均
含量。结果姜味草全草中熊果酸和齐墩果酸的含量分别为
0.594%和 0.286%。
表 1　 熊果酸和齐墩果酸加样回收率结果(n=6)
组分 样品中含量/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回收
率 /%
RSD
/%
熊果酸
5.989 0.251 6.153 98.61
5.972 0.251 6.058 97.35
5.912 0.501 6.551 102.15
5.894 0.501 6.473 101.22
5.948 1.002 6.786 97.64
5.871 1.002 6.762 98.38
99.23 1.98
齐墩果酸
2.889 0.252 3.098 98.63
2.880 0.252 3.074 98.15
2.851 0.503 3.426 102.15
2.843 0.503 3.394 101.43
2.869 1.006 3.796 97.96
2.831 1.006 3.791 98.80
99.52 1.80
3　讨论
3.1　齐墩果酸和熊果酸化学结构极为相似 , 薄层色谱法很
难分离 , 所以利用薄层扫描法同时测定齐墩果酸和熊果酸的
含量准确度较低。本实验参考文献 [ 5, 6] , 采用 RP-HPLC法 ,
选择 210 nm为检测波长同时测定两者含量 ,样品处理简单 ,
无其它杂质的干扰 , 分离度 、理论塔板数符合定量分析要求;
方法重现性和稳定性好。
3.2　齐墩果酸是临床治疗急性黄疸型肝炎和慢性病毒性肝
炎较理想的药物;熊果酸具有多种生物活性 , 尤其在抗肿瘤 ,
抗氧化 , 护肝 ,降血脂方面的作用显著。姜味草中齐墩果酸
和熊果酸的含量较高 , 可以考虑进一步开发利用姜味草资
源。
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参考文献:
[ 1] 　中华本草编委会.中华本草(第 19卷)[ M] .上海:上海科学技
术出版社, 2000.
[ 2] 　李坤平 ,潘天玲 ,张莺颖 ,等.姜味草水蒸汽蒸馏和超临界 CO
2
提取物的化学成分研究 [ J].贵州大学学报(自然科学版),
2008, 25(2):165-168.
[ 3] 　万庆家 ,张庆芝 ,张国发 ,等.姜味草的化学成分研究 [ J] .中草
药 , 2005, 36(7):991-992.
[ 4] 　万庆家 ,张庆芝 ,饶高雄 ,等.云南不同产地姜味草中齐墩果酸
的含量测定[ J] .云南中医学院学报 , 2004, 27(4):10-11.
[ 5] 　刘　伟 ,丁海杰.HPLC测定夏枯草中熊果酸 、齐墩果酸 、迷迭
香酸的含量[ J] .中成药 , 2008, 30(4):577-580.
[ 6] 　邹盛勤 ,陈　武.反相高效液相色谱法测定鹿衔草中熊果酸和
齐墩果酸的含量 [ J] .天然产物研究与开发 , 2008, 20(1):110-
112.
中药胡颓子叶的挥发油成分分析
贾献慧 1 , 　王晓静 1 , 　牟忠祥2 , 　丁杏苞 1 , 　付义成 1
(1.山东省医学科学院药物研究所 ,山东省现代医用药物与技术重点实验室 ,山东 济南 250062;2.山东省中
医院 ,山东 济南 250011)
收稿日期:2008-04-12
基金项目:山东省自然科学基金资助项目(Y2008C171)
作者简介:贾献慧(1977-),女 ,硕士 ,助理研究员,从事天然药物研究。 Tel:(0531)82919967　E-mail:njxh@tom.com
关键词:胡颓子叶;挥发油;气相色谱-质谱联用
中图分类号:R284.1　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2009)06-0947-02
　　胡颓子叶为胡颓子科植物胡颓子(Elaeagnuspungens
Thunb.)的干燥叶 ,分布于长江流域以南各省区。胡颓子叶
性酸 、平 ,无毒 , 作为止咳平喘要药 ,我国历代本草及《中国药
典》 1977年版一部中均有收载 ,并被广泛应用于止咳平喘成
方制剂中。但是近代对其研究较少 , 近两年报道 [ 1] [ 2]从胡颓
子叶中陆续分离出了烷烃 、黄酮 、皂苷 、有机酸 、植物甾醇等
成分。笔者在其成分分离过程中 ,发现其石油醚部位含大量
挥发油 , 然而到目前为止 , 还未见有关其挥发油成分的研究
报道。为了更好地了解胡颓子叶的性质 , 本文用 GC-MS技
术对常规水蒸汽蒸馏法制备的胡颓子叶挥发油的化学组成
进行了研究 , 以期为胡颓子叶的开发利用提供进一步的实验
依据。
1　材料
1.1　药材　胡颓子叶购自安徽亳州敬德药业 , 经本所天然
药物研究室鉴定为胡颓子科植物胡颓子(Elaeagnuspungens
Thunb.)的干燥叶。粉碎成粗粉 ,备用。
1.2　仪器与试剂　TraceGC-TraceDSQ气相色谱-质谱联用
仪(美国热电公司 ,配 Xcalibur1.3工作站);无水乙醚 , 醋酸
乙酯(AR,重蒸);无水硫酸钠 (550℃ , 烘烤 4 h)。
2　方法与条件
2.1　挥发油的提取　称取 100 g胡颓子叶粗粉 , 置圆底烧
瓶中 , 按常规水蒸汽蒸馏法提取 10 h, 得馏出液 600 mL左
右。无水乙醚萃取 3次 , 每次 150mL, 合并萃取液 , 加入 10 g
无水 Na2SO4干燥 12h以除去水分 。过滤 ,所得滤液减压蒸
馏除去溶剂得黄色透明油状液体 ,具浓郁特殊香味 , 出油率
为 0.3%(w/w)。挥发油用醋酸乙酯溶解 , 0.45μm微孔滤
膜过滤。
2.2　分析条件　色谱条件:BD-5MS色谱柱 (30 m×0.25
mm×0.25 μm, J＆W公司);进样量 1 μL;载气:高纯氦气 ,
流量 1mL/min;柱温:50 ℃, 以 8 ℃/min升至 250 ℃, 保持
20 min;进样口温度:230 ℃,不分流进样。
质谱条件:离子源(EI)温度:250 ℃ , 电子轰击能量
70eV, 传输线温度 250℃ , 扫描质量范围 m/z:20 ～ 600,溶
剂延迟时间 3 min。
3　结果
3.1　对提取得到的胡颓子叶挥发油样本进行 GC-MS分析 ,
其总离子流图见图 1,共分离得到 46个峰。
图 1　胡颓子叶挥发油的 GC-MS分析总离子流图
3.2　通过检索 Replib质谱图库 , 结合人工谱图解析 ,并查对
有关质谱资料 [ 3 , 4] ,从基峰相对丰度等几个方面进行比较 ,
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