免费文献传递   相关文献

添加锌离子对啤酒酵母自溶的影响



全 文 :原浆啤酒富含活性酵母,含有对人体有益的 B
族维生素、膳食纤维、氨基酸和微量元素等,被称为
液体面包[1]。酵母自溶实际是酵母细胞酶促降解的
过程[2],在正常条件下,酵母细胞不会发生自溶,而
当工艺条件和生存条件恶化时,酵母受到各种物理
化学作用的影响,蛋白酶开始降解胞内自身物质,
导致酵母细胞壁破裂,酵母自溶随之开始,并在自溶
过程中释放出多糖、含氮化合物、核苷酸、脂类等物
质[3]。酵母自溶会产生酵母味,加重啤酒苦味、涩味,
造成双乙酰反弹,使酒体泡持性及稳定性变差[4]。在
啤酒保质期内,尽可能延缓酵母的自溶具有重要意
义。
收稿日期:2015- 09- 07
作者简介:赵志云(1989-),女,硕士研究生,研究方向:发酵工程。
*通讯作者:杜金华
添加锌离子对啤酒酵母自溶的影响
赵志云,杜金华 *
(山东农业大学食品科学与工程学院,山东 泰安 271018)
摘 要:在酒花麦汁中添加相当于锌离子浓度为 0.0,0.2,0.4,0.8和 1.6mg/ L的硫酸锌,培养啤酒酵母。培养酵母
洗涤、过滤,以 5.00×106cfu/ mL的细胞浓度添加到啤酒中,充分混匀,于 40℃贮存。测定第 1、3、5、7、9、11、13天
酒中的活酵母数、蛋白质、α- 氨基氮、总氮与氨基酸含量,确定添加锌离子对啤酒酵母自溶的的影响。研究结果
表明:贮存 24h后,添加 0.4mg/ L锌离子培养的存活酵母数最多,为 5.26×105cfu/ mL;啤酒中蛋白质含量随贮存
时间呈先升高后降低的趋势,而α- 氨基氮、总氮和游离氨基酸含量呈先升高后稳定或略有降低的趋势。与添
加 0.2、0.4mg/ L锌离子培养酵母相比,添加 0.8、1.6mg/ L锌离子培养的酵母使啤酒中α- 氨基氮含量提前 2天
有明显变化趋势。在第 1~7天,添加 0.0、0.8、1.6mg/ L锌离子培养酵母中啤酒游离氨基酸含量明显高于添加 0.2、
0.4mg/ L锌离子培养酵母。由此推断生产含酵母啤酒时添加 0.2~0.4mg/ L锌离子于麦汁可推迟啤酒酵母自溶。
关键词:锌离子;啤酒;酵母自溶;氮;氨基酸
中图分类号:TS262.5;TS201.2 文献标识码:B
The Effect of Zinc Ion Addition on Yeast Autolysis in Beer
ZHAO Zhi- yun, DU Jin- hua*
(College of Food Science and Engineering, Shandong Agricultural University, Shandong Taian 271018, China)
Abstract :Zinc sulphate solution was added to wort containing hop for cultivating Saccharomyces cerevisiae, which was respectively
equivalent to zinc ion content of 0.0, 0.2, 0.4, 0.8 and 1.6 mg/L. Cultivated Saccharomyces cerevisiae was washed, filtered and added to
beer in the cell concentration of 5.00×106cfu/mL, then beer was full mixed and stored at 40℃. Viable yeast cells, the content of α- AN,
protein, total nitrogen and amino acids of beer were determined on the 1st, 3rd, 5th, 7th, 9th, 11th and 13th day, in order to make sure the
appropriate zinc ion content of decreasing yeast autolysis. It was found that the number of viable yeast cells with adding zinc ion of 0.4 mg/L
had the largest after 24h, which was 5.26×105cfu/mL. The content of protein in beer showed a trend of descending after ascending with
storage- time going on, while the content of α- AN, total nitrogen and amino acids increased at first and then kept stable or decreased
lightly. Compared to adding 0.2 and 0.4mg/L zinc ion for cultivating yeast, the α- AN content with adding 0.8 and 1.6 mg/L zinc ion in beer
changed two days obviously in advance. On the 1st to 7th day, the amino acids content with adding 0.8 and 1.6 mg/L zinc ion in beer was
apparently higher than that with adding 0.2 and 0.4mg/L zinc ion. Therefore, adding 0.2 and 0.4 mg/L zinc ion to wort could delay beer
yeast autolysis when producing beer containing yeast.
Key words:zinc ion, beer, yeast autolysis, nitrogen, amino acids
第 42卷 第 6期
2 0 1 5 年 11 月
酿 酒
LIQUOR MAKING
Vol.42.№.6
Nov.,2015
文章编号:1002- 8110(2015)06- 0071- 06
71
在啤酒酿造中,锌是酿酒酵母维持正常新陈代
谢所必需的的微量元素[5- 6],锌是乙醇脱氢酶和乳酸
脱氢酶的活性基,许多酶活性靠锌来激活[7];锌的补
给可以提高酵母对乙醇和热的耐受性[8- 9]。在蛋白质
的合成过程中,Zn2+同转录因子 TFIIIA的氨基酸相
结合,构成锌指区,这些锌指区参与了蛋白质同
DNA的特异性结合。另外,许多蛋白质的三、四级结
构型都需要 Zn2+通过金属键来维持和稳定[10],据估
计,接近 3%酿酒酵母蛋白组功能都需要锌[11]。在酿
酒酵母接种后的前几个小时或在发酵前,酵母将从
麦汁中迅速积累锌离子,用于细胞生长代谢及细胞
繁殖。锌离子不足,将会导致发酵停滞[12],然而过量
的锌对酵母细胞有一定的毒害作用[13- 14]。
本研究在麦汁中添加不同浓度的锌离子,用于
培养啤酒酵母。将培养好的酵母添加到啤酒中,于
40℃下贮存以促进自溶,以确定锌离子对酵母自溶
的影响。
1 材料与方法
1.1 试验材料
菌种:啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae sp.)
原料:麦芽、酒花(泰山啤酒有限公司),市售啤酒
药品:ZnSO4·7H2O,天津市大茂化学试剂厂;茚
三酮,天津市科密欧化学试剂开发中心;考马斯亮
蓝 G- 250,北京鼎国昌盛生物技术有限公司;18种
氨基酸标准品(天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、
组氨酸、色氨酸、苏氨酸、γ- 氨基丁酸、丙氨酸、脯
氨酸、精氨酸、酪氨酸、赖氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异
亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸),Sigma公司;其他试剂
均为分析纯及以上。
1.2 主要仪器与设备
LDZX- 30KBS立式压力蒸汽灭菌锅,上海申安
医疗器械厂;SHB-ШS循环水式多用真空泵,郑州
长城科工贸有限公司;BGT- 8A糖化仪,杭州博日科
技公司有限;HYG-Ш回转式恒温调速摇瓶柜,上海
欣蕊自动化设备有限公司;DHP- 9272 型电热恒温
培养箱,上海一恒科技有限公司;KDY- 08C自动凯
氏定氮仪,上海瑞正仪器设备有限公司;KDY- 12C
消化炉,上海瑞正仪器设备有限公司;UV- 2100分
光光度计,尤尼柯(上海)仪器有限公司;KQ3200超
声波清洗器,昆山仪器设备厂;C18 色谱柱
(250mm×4.6mm,5μm),Waters 公司;LC- 20AT 高
效液相色谱仪,日本岛津公司;101A电热鼓风干燥
箱,金坛市双捷实验仪器厂。
1.3 酵母培养
1.3.1 从斜面上挑取一环酵母细胞接种到装有
10mL麦汁的试管中,25℃培养 24h,定时摇动。取
1mL上述发酵液接种到 10mL麦汁的试管中,25℃
培养 24h。将试管中的发酵液全部转移到装有
100mL麦汁的 250mL三角瓶中,25℃培养 24h,定时
摇动。
1.3.2 锌离子配制:配制浓度为 600mg/L母液(以 Zn
计,用 ZnSO4·7H2O配制),分别取 0.0、0.5、1.0、2.0、
4.0mL于 3000mL三角瓶中,编号 1- 5,121℃灭菌
20min后待用。
1.3.3 将 1.3.1中 250mL三角瓶发酵液转移到 1.3.2
中 5 个 3000mL 三角瓶,用酒花麦汁定容至
1500mL,此时锌离子浓度分别为 0.0、0.2、0.4、0.8、
1.6mg/L,25℃培养 48h,定时摇动。将三角瓶静置,使
酵母泥沉降,倾倒上清液,用冷却的无菌水洗涤酵
母泥三次,并用 0.45μm的滤膜抽滤,获取酵母泥。
注:酵母培养所用麦汁,均为 115℃灭菌 15min
后,冷却静置取上层麦汁。
1.4 模拟实验
称取 0.6000g酵母泥于啤酒中,压新盖,充分混
匀,放置在 40℃下加速自溶实验,分别在第 1、3、5、
7、9、11、13天时取样测定相关指标。
1.5 分析方法
1.5.1 存活酵母数的测定
取啤酒样轻微摇动,使酵母均匀悬浮在酒液中,
倒入无菌三角瓶中摇匀并除气。取 1.00mL酒液加
入到装有 9.00mL无菌水的试管中,摇匀,并进行梯
度稀释,取稀释到 1000 倍的酒液 100μL注射于
YPD平板培养基并涂布,25℃培养 2~3天,记录菌
落数。
1.5.2 蛋白质含量的测定
将三角瓶中的啤酒液经 0.45μm膜过滤除去酵
母,取 1.00mL,采用考马斯亮蓝法[15]测定。
1.5.3 α- 氨基氮(α- AN)含量的测定。
取除去酵母的酒液,稀释 25倍,采用茚三酮法[16]
测定。
1.5.4 总氮含量的测定
取除去酵母的酒液 20.00mL,采用凯氏定氮法[16]
第六期 2015酿 酒
72
赵志云,等:添加锌离子对啤酒酵母自溶的影响第六期 2015
测定。
1.5.5 氨基酸含量的测定
取除去酵母的啤酒液 2.00mL进行衍生化、萃
取净化,并用 0.22μm有机膜过滤,进样,采用高效
液相色谱法[17]测定。
1.6 数据分析
文中实验结果均为 3次平行试验的平均值,采
用 Excel 2003 软件进行统计分析,数据显示平均
值±标准差。采用 DPS数据处理软件进行差异性分
析,置信区间为 95%(P=0.05),不同字母表示数据显
著差异(P<0.05)。
2 结果与分析
2.1 啤酒中存活酵母数的测定
在加速自溶过程中对啤酒存活酵母数进行了
测定,由表 1可以看出,在 40℃贮存下,啤酒中存活
酵母数下降迅速。起始啤酒中存活酵母数以 5.00×
106cfu/mL计,在啤酒贮存的第 1天,添加 0.4mg/L锌
离子啤酒中存活酵母数最多,为 5.26×105cfu/mL;
在啤酒贮存的第 3 天,已无活酵母检出,主要是因
为在 40℃贮存下,啤酒酵母可利用的营养物质匮
乏,抵抗外界不良环境(温度高)的能力减弱。
2.2 啤酒中蛋白质含量的测定
如表 2所示,啤酒中蛋白质含量随贮存时间呈
现先升高后下降的趋势。采用考马斯亮蓝法测啤酒
中的蛋白质,只能检测含有碱性氨基酸和芳香族氨
基酸残基且分子量大于 3.5kDa的蛋白质。啤酒中蛋
白质升高是啤酒酵母自溶的标志之一,这主要是因
为随着啤酒酵母自溶,酵母的胞内酶被释放,酵母
细胞壁的甘露糖蛋白被降解,细胞壁通透性变大,
导致啤酒酵母中大分子物质(如蛋白质)被释放到
细胞外,使啤酒中蛋白质含量升高,同时啤酒中蛋
白质被酵母自溶释放的蛋白酶降解,从而使啤酒中
蛋白质含量降低。添加 1.6mg/L锌离子培养的酵母
使啤酒中蛋白质在第 7 天出现最大值,为
63.44mg/L,对照组及添加 0.2、0.4、0.8mg/L锌离子培
养的酵母使啤酒中蛋白质在第 3天出现最大值,分
别为 64.35、64.94、64.75、63.44mg/L;这跟啤酒酵母
自溶快慢有关系,啤酒酵母自溶速度快,啤酒中蛋白
质被降解得快。在啤酒贮存的第 1天中,与添加 0.2、
0.4mg/L锌离子培养酵母的啤酒蛋白质含量相比,添
加 0.8、1.6mg/L锌离子培养酵母的啤酒中蛋白质含
量存在显著性差异(P<0.05),低 5.10~7.13mg/L。
2.3 啤酒中α- AN 含量的测定
如表 3所示,啤酒中α- AN含量随贮存时间呈
现先升高后略有下降的趋势。随着啤酒酵母自溶,
胞内酶被释放,啤酒酵母自身的或者啤酒中的大分
子物质(如蛋白质)被降解,导致小分子含氮物质
(如氨基酸)增多,从而使啤酒中α- AN含量增加;
后期啤酒中α- AN略有下降,推测跟啤酒老化有关
系[1]。
表1 添加锌离子对啤酒存活酵母数的影响 cfu/mL
贮存时间
(天)
1
3
5
0.0
3.66×105
-
-
0.2
4.39×105
-
-
0.4
5.26×105
-
-
0.8
2.40×105
-
-
1.6
2.53×105
-
-
添加锌离子浓度(mg/L)
添加 1.6mg/L 锌离子培养的酵母使啤酒中
α- AN含量在第 5天出现最大值,为 38.95mg/L,添
加其它含量锌离子培养的酵母使啤酒中α- AN含
量出现最大值的时间较晚,集中在第 7 天和第 9
表2 添加锌离子对啤酒蛋白质含量的影响 mg/L
贮存时间
(天)
1
3
5
7
9
11
13
0.0
61.21±0.45Abc
64.35±0.51ABa
62.12±0.19BCb
61.39±0.06Bbc
61.03±0.58ABbc
60.01±0.26Cc
55.53±0.51BCd
0.2
62.98±0.39Abc
64.94±0.06Aa
63.53±0.13Ab
62.35±0.13ABc
62.35±0.06Abc
62.10±0.00Ac
58.39±0.45Ad
0.4
62.35±0.64Ab
64.75±0.58ABa
63.89±0.13Aa
61.62±0.00Bb
61.85±0.19Ab
61.16±0.26Bb
58.07±0.26Ac
0.8
57.25±0.26Bde
63.44±0.03Ba
62.30±0.45Bab
61.25±0.26Bb
59.25±0.64BCc
58.35±0.00Dcd
56.44±0.13Be
1.6
55.85±0.45Bcd
59.57±0.06Cb
61.12±0.32Cb
63.44±0.64Aa
57.53±0.64Cc
57.48±0.32Dc
54.80±0.26Cd
添加锌离子浓度(mg/L)
注:不同大写字母表示相同时间条件下,添加不同锌离子浓度下蛋白质含量的差异性(P>0.05);
不同小写字母表示添加相同锌离子浓度条件下,不同时间的蛋白质含量的差异性(P>0.05)。
73
天;在啤酒贮存的第 5 天中,添加 0.8mg/L 和
1.6mg/L锌离子培养的酵母与对照组相比,啤酒中
α- AN含量无显著差异性;添加 0.2mg/L和 0.4mg/L
锌离子培养的酵母与对照组相比,啤酒中α- AN含
量存在显著性差异(P<0.05),这主要由于酵母自溶
快,啤酒酵母自身的或者啤酒中的大分子物质(如
蛋白质)被降解得快,产生的α- AN含量多。添加
0.8mg/L和 1.6mg/L锌离子培养的酵母使啤酒中的
α- AN 含量在第 3~5 天变化较为明显,而添加
0.2mg/L和 0.4mg/L锌离子培养的酵母使啤酒中的
α- AN含量在第 5~7天变化较为明显,对照组则变
化较为平缓。
2.4 啤酒中总氮含量的测定
由表 4可知,啤酒中总氮含量随贮存时间呈现
先升高后略有降低的趋势,其中,添加锌离子培养
的酵母使啤酒中总氮含量在第 3~7 天变化较为明
显,这说明啤酒酵母在这段时间自溶速度较快。
添加 1.6mg/L锌离子培养的酵母使啤酒中总氮
含量在第 5天出现最大值,此时其总氮含量与添加其
它锌离子培养的酵母相比,存在显著性差异(P<0.05),
此时添加 0.2mg/L和 0.4mg/L锌离子培养酵母的啤
酒中总氮含量无显著性差异;对照组及添加 0.2、
0.8mg/L锌离子培养的酵母使啤酒中总氮含量在第
7天出现最大值,添加 0.4mg/L锌离子培养的酵母则
使啤酒中总氮含量在第 9天出现最大值。
表3 添加锌离子对啤酒α-AN含量的影响 mg/L
贮存时间
(天)
1
3
5
7
9
11
13
0.0
32.88±0.15Ae
36.42±0.31Ad
37.39±0.38ABd
39.51±0.16Aa
38.96±0.23Bab
38.24±0.16Bbc
36.26±0.03Bbc
0.2
32.11±0.66ABc
31.92±0.31Bc
32.08±0.00Cc
36.92±0.39Cb
38.19±0.08Cab
39.45±0.16Aa
39.32±0.08Aa
0.4
30.39±0.29BCe
31.74±0.00Bd
31.97±0.00Cd
38.41±0.00Ba
37.86±0.23Ca
36.10±0.23Cb
34.68±0.00Cc
0.8
31.43±0.73ABCe
30.19±0.55Ce
37.18±0.23Bbc
38.41±0.00Bb
39.84±0.08Aa
36.24±0.04Ccd
34.82±0.00Cd
1.6
29.82±0.07Cc
29.36±0.00Cc
38.95±0.76Aa
40.01±0.39Aa
39.34±0.16ABa
34.73±0.24Db
33.52±0.00Db
添加锌离子浓度(mg/L)
注:不同大写字母表示相同时间条件下,添加不同锌离子浓度下α- AN 含量的差异性(P>0.05);
不同小写字母表示添加相同锌离子浓度条件下,不同时间的α- AN 含量的差异性(P>0.05)。
2.5 啤酒中游离氨基酸含量的测定
采用 HPLC测定啤酒中的 18种游离氨基酸,根
据图 1、2、3,脯氨酸含量一直居高,其次是γ- 氨基
丁酸,再次是丙氨酸和色氨酸。脯氨酸含量最高,主
要是因为在啤酒酿造中,酵母对脯氨酸的利用率极
微或者不利用,使啤酒中本身的脯氨酸含量高。
18种游离氨基酸总体随贮存时间呈现先升高
后下降的趋势,变化速度由快到缓。大部分氨基酸
在 13天有下降趋势,但组氨酸含量一直升高,苏氨
酸含量则在第 3天就出现下降的趋势。
根据添加不同锌离子培养的酵母在贮存同一时
间里啤酒中氨基酸的含量,对照组和添加 0.8、
表4 添加锌离子对啤酒总氮含量的影响 mg/L
贮存时间
(天)
1
3
5
7
9
11
13
0.0
273.76±1.24Ad
272.58±0.41ABd
296.64±3.73Cbc
317.99±1.56Ba
312.19±3.32Ba
303.69±1.24Cab
294.29±0.00Cc
0.2
254.05±0.77Cd
268.51±1.30Bc
281.68±0.00Db
312.49±1.24Ba
311.13±1.81Ba
317.16±3.71Ba
287.29±0.00Db
0.4
260.55±0.00BCd
267.60±6.64Bcd
285.76±0.80Db
286.33±4.09Cb
306.33±4.98Ba
318.65±2.49ABa
280.28±2.48Bbc
0.8
270.24±1.24ABd
283.44±2.49Ac
305.55±1.39Bb
330.97±0.00Aa
329.17±0.87Aa
327.45±0.00Aa
301.30±0.00Bb
1.6
267.01±5.81ABd
282.85±1.66Ac
313.37±0.00Aab
323.35±4.15ABa
325.69±2.49Aa
322.49±2.94ABa
308.31±0.00Ab
添加锌离子浓度(mg/L)
注:不同大写字母表示相同时间条件下,添加不同锌离子浓度下总氮含量的差异性(P>0.05);
不同小写字母表示添加相同锌离子浓度条件下,不同时间的总氮含量的差异性(P>0.05)。
第六期 2015酿 酒
74
1.6mg/L锌离子培养酵母使啤酒氨基酸的含量明显
高于添加 0.2、0.4mg/L锌离子培养的酵母,可判断
对照组和添加 0.8、1.6mg/L锌离子培养酵母的自溶
程度明显高于添加 0.2、0.4mg/L锌离子培养的酵母
自溶程度;在第 1天,存在显著性差异(P<0.05),随着
自溶程度加大,差异性逐渐降低;相同时间段内,添
加不同锌离子培养的酵母其自溶速度不同,对照组
和添加 0.8、1.6mg/L锌离子培养酵母的自溶速度明
显高于添加 0.2、0.4mg/L锌离子培养的酵母自溶速
度,但增量减缓,主要因为在第 1天内对照组和添加
0.8、1.6mg/L锌离子培养酵母的自溶程度高导致的。
3 讨论
在 40℃加速啤酒酵母自溶的过程中,啤酒中含
氮物质变化明显,其中蛋白质含量随贮存时间呈先
升高后降低的趋势,α- AN、总氮及氨基酸含量随贮
存时间呈先增加后略有降低的趋势,其结果与 A.J.
Martínez- Rodriguezdenz等人[18- 19]研究一致。其中,蛋
白质含量增加是酵母自溶的重要标志之一。啤酒酵
母自溶过程中含氮物质含量之间的关系:①游离氨
基酸中的氮含量总和大于茚三酮法测定的 α- AN
中氮含量总和,虽然氨基酸在碱性溶液中能和茚三
酮生成蓝紫色化合物,其颜色深浅与氨基酸含量成
正比,但不包括脯氨酸,因为脯氨酸是亚氨酸,与茚
三酮反应生成黄色化合物,且此啤酒中脯氨酸含量
高。②总氮中氮含量大于蛋白质和α- AN含量中氮
含量总和。这主要是因为采用考马斯亮蓝法测蛋白
质,只能检测含有碱性氨基酸和芳香族氨基酸残基
且分子量大于 3.5kDa的可溶性蛋白质,具有局限性。
4 结论
本实验探索了添加锌离子对啤酒酵母自溶的
影响。根据 40℃下加速啤酒酵母自溶过程中测定的
存活酵母数及啤酒中含氮物质含量变化,现总结如
下:在加速酵母自溶体系贮存 24h 后,添加 0.2、
0.4mg/L锌离子培养酵母,啤酒中存活酵母数相对
较多,分别为 4.39×105、5.26×105cfu/mL。随着酵母
自溶,蛋白质含量呈先增加后降低的趋势;啤酒中
α- 氨基氮、总氮及游离氨基酸含量都有先升高后
稳定或略有降低的趋势,根据其含量出现最大值的
时间及变化速率的快慢,确定生产含酵母啤酒时添
加 0.2~0.4mg/L锌离子于麦汁可推迟啤酒酵母自溶。
[参考文献]
[1]何桂芬. 浑浊小麦啤酒贮存老化的初步研究 [D]. 山东农业大学,
2013
[2]Tatang Hernawan, Graham Fleet. Chemical and cytological changes
during the autolysis of yeasts [J]. Journal of Industrial
Microbiology. 1995, 14: 440- 450
[3]Hervé Alexandre and Michèle Guilloux- Benatier. Yeast autolysis
in sparkling wine - a review [J]. Austriallian journal of grape
and wine research. 2006, 12: 82- 176
[4]Weina Xu, Jinjing Wang and Qi Li. Microarray studies on lager
bre wers yeasts reveal cell status in the process of autolysis [J].
Federation of European Microbiological Societies. 2014, 14: 714- 728
[5]Eide DJ. Zinc transporters and the cellur trafficking of zinc [J].
Biochimica et Biophysica acta. 2006, 1763(7): 711- 722
[6]Raffaele De Nicola*, Grame M , Walker. Accumulation and cel-
lular distribution of zinc by brewing yeast [J]. Enzyme and Micro-
bial Technology. 2009, 44: 210- 216
[7]Raffaele De Nicola, Nichola Hall, Stuart G. Melville and Graeme
M. Walker. Influence of Zinc on Distillers Yeast: Cellular Accu-
mulation of Zinc and impact on Spirit Congners [J]. Journal of
图1 第1天添加锌离子对啤酒氨基酸含量的影响
图2 第7天添加锌离子对啤酒氨基酸含量的影响
图3 第13天添加锌离子对啤酒氨基酸含量的影响
20.00
18.00
16.00
14.00
12.00
10.00
8.00
6.00
4.00
2.00
0
m
g/
L
26.00
24.00
22.00
20.00
18.00
16.00
14.00
12.00
10.00
8.00
6.00
4.00
2.00
0
m
g/
L
m
g/
L 26.00
24.00
22.00
20.00
18.00
16.00
14.00
12.00
10.00
8.00
6.00
4.00
2.00
0
Asp Glu Ser Gly His Arg Thr Ala Tyr Val Met Ile Leu Phe Trp Lys
Asp Glu Ser Gly His Arg Thr Ala Tyr Val Met Ile Leu Phe Trp Lys
Asp Glu Ser Gly His Arg Thr Ala Tyr Val Met Ile Leu Phe Trp Lys
0
0.2
0.1
0.8
1.6
0
0.2
0.1
0.8
1.6
0
0.2
0.4
0.8
1.6
m
g/
L
GABA Pro
GABA Pro
GABA Pro
m
g/
L
m
g/
L
220.00
200.00
180.00
160.00
140.00
120.00
100.00
80.00
60.00
40.00
20.00
0
200.00
180.00
160.00
140.00
120.00
100.00
80.00
60.00
40.00
20.00
0
240.00
220.00
200.00
180.00
160.00
140.00
120.00
100.00
80.00
60.00
40.00
20.00
0
赵志云,等:添加锌离子对啤酒酵母自溶的影响第六期 2015
75
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!

!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!

黑龙江省民企百强“领头雁”评定结果揭晓 富裕老窖作为全省唯一酒企名列其中
本刊讯:“我省首次评定民企百强‘领头雁’刚刚结束,我们公司没有辜负省委的厚望,作为全省唯一酒企名列其中。”日
前,黑龙江省富裕老窖酒业有限公司董事长王秀仁高兴地说。
该公司于 2007年被省委纳入“新型工业化的基本构架中白酒类唯一龙头企业”后,领导主动担当,率领员工坚持艰苦
奋斗、改革创新铸就了辉煌。据统计,截至目前,累计实现税利接近 5个亿,上缴税金一直雄踞全省诸多酒企榜首,先后安排
就业再就业人员达 500多人(次)。尤其 2014年,理性消费成为白酒消费主要趋势,但该酒企产品销售形势仍然很火:上缴
税金总额达 4277万多元,现有 479名员工人均上缴税金接近 9万元。同时,为职工及时足额上缴保险金 643万多元,还上
缴工会会费接近 20万元。多年来,该公司还先后为“圆梦工程”、“春蕾工程”、“扶贫济困工程”、“抗洪抢险”和“援建灾区”等
开展社会救助总额达 200多万元,不断彰显了构建和谐社会的新风貌。
采访中得知,富裕老窖酒业有限公司之所以取得如此成效,经验尽管有多条,但许多员工都众口一词:车厢跑得快,全
凭车头带。董事长、首任总经理王秀仁履职 20年来,靠他的人格魅力,靠他的无私奉献精神,靠他的改革创新意识带起了一
个坚强有力的领导班子。他先后获得了 2009年感动龙江‘十大’人物”、“新中国成立以来齐齐哈尔市‘十大’最具影响劳动
模范”、“黑龙江省劳动模范”、“全国五一劳动奖章”等殊荣。新履职的总经理陈凤阁,原来主管销售工作,一年 365天大都辛
勤工作在销售第一线。他十分讲究科学的市场营销,采取“一地、一策、一品”的战略,坚持抓好销售的“金网”和队伍作风建
设,在“哈、大、齐”形成了销售主线,在“牡、佳、黑”及外省形成了复线的销售网络,先后成立 6个实体办事处、销售网点遍布
许多乡村。同时,还与省农业科学院联合打造万亩“龙糯 1号”高粱绿色原料基地,不仅填补了我国北方酿酒史上的空白,该
企业先后获得了“全国五一劳动奖状”“全国轻工行业先进集体”“全国酿酒行业百名先进企业”和“全省五一劳动奖状”等一
连串殊荣。
据悉,这次全省民企百强评定工作不采用企业申报的惯例,而是依据省统计局、国税局、地税局等有关部门提供的客观
数据,综合考虑企业对社会的贡献大小,主要以 2014年度纳税额和安排就业人数为评价指标,其中安排就业人数以缴纳社
会养老保险额为依据,按照企业的纳税总额加上缴纳养老保险额进行打分排序,并进行综合评价。对存在纳税信用较低、不
依法缴纳保险等违法行为的企业予以剔除,确定初步名单后上报省委、省政府审定,最终确定了 2014年全省民营企业百
强。其中,富裕老窖酒业有限公司名列第五十八位。 (矫 海,杨朝晖)
the institute of brewing. 2009, 3(115): 265- 271
[8] X.Q. Zhao, C. Xue, X.M. Ge, W.J. Yuan, J.Y. Wang, F.W.
Bai*. Impact of zinc supplementation on the improvement of
ethanol tolerence and yield of self- flocculating yeast in continous
ethanol fermentation [J]. Journal of Biotechnology. 2009, 139: 55- 60
[9]Xin- Qing Zhao, Feng- wu Bai. Zinc and yeast stress tolerance:
Micromutrient plays a big role [J]. Journal of Biotechnology. 2012,
158(4): 176- 183
[10]Lisa M. Regalla, Thomas J. Lyons. Zinc in yeast: mechanisms
involved in homeostasis [J]. Molecular Biology of Heavy Metal
Homeostasis and Detoxification: From Microbes to Man. 2006, 37- 54
[11]Eide DJ. The molecular biology of metal ion transport in Sac-
charomyces cerevisiae [J]. Annual Review of Nutrition. 1998, 18:
441- 469
[12]Mochaba F, Oconnor- Cox ESC, Axcell BC. Metal ion concentra-
tion and release by a brewing yeast: characterization and
implications. Journal of the American Society of Brewing
Chemists. 1996, 54(3): 155- 63
[13]Colin W. MacDiarmid, Mark A. Milanick, and David J. Eide.
Biochemical Properties of Vacuolar Zinc Transport Systems of
Saccharomyces cerevisiae [J]. The journal of biologicalchemistry.
2002, 277(42): 39187- 39194
[14]Pagani MA, Casamayor A, Serrano R, Arino S, Arifio J. Disrup-
tion of iron homeostasis in Sacchoromyces cerevisiae by high zinc
levels: a genome- wide study [J]. Molecular Microbiology. 2007,
65: 521- 537
[15]MM Bradford. A rapid and sensitive method for the quantitation
of microgram quantities of protein utilizing the principle of
protein- dye binding [J]. Analytical Biochemistry. 1976, 72(1- 2):
248- 54
[16]中华人民共和国轻工行业标准 QB/T 1686- 2008啤酒麦芽[S].
[17] 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T 4356- 2012黄酒中游离氨
基酸的测定 - 高效液相色谱法[S].
[18]A.J. Martínez- Rodriguezdenz, A.V. Carrascosa, M.C. Polo. Re-
lease of nitrogen compounds to the extracellular medium by three
strains of Saccharomyces cereoisiae during induced autolysis in a
model wine syetem [J]. International journal of food microbiology.
2001, 68: 155- 160
[19]A dolfo J. Martínez- Rodriguezdenz, M. Carmen Polo. Charac-
terzation of the nitrogen compounds released during yeast
autolysis in a model wine system [J]. Journal of agriculture food
chemistry. 2000, 48: 1081- 1085
第六期 2015酿 酒
76