全 文 ：收稿日期: 2008 - 06 - 31
作者简介:潘亚琴 ( 1983 - ) ,女, 浙江绍兴人,硕士研究生, 研究方
向:中药资源开发与利用。
通讯作者:姚振生 ( 1964 - ),男,上海人,教授,硕士研究生导师, 研
究方向:中药资源开发与利用。
和 60e 超声提取两种提取方法进行了比较, 结果显示这两
种提取方法所制备的供试液中葛根素的含量相近, 但考虑
超声提取法操作简便, 杂质少,且提取时间短, 故本实验采
用超声提取法制备样品。同时还考察了不同提取时间
( 20、30、40m in)的对测定结果的影响, 结果显示提取时间
对心血宁片中葛根素含量的影响没有明显的差别。为了节
省提取时间和减少能耗,本实验选择超声提取 20m in处理
样品。
3. 2 流动相的确定
HPLC法测定葛根素流动相大多选择甲醇 -水体
系 [4 - 6]。本文分别试验了甲醇 -水 -磷酸 ( 20B80B0. 1)、甲
醇 -水 -磷酸 ( 23B77B0. 1 )、甲醇 -水 -磷酸 ( 23B77 B
0. 2)、甲醇 -水 -磷酸 ( 23B77B0. 5)等不同配比,结果以甲
醇 -水 -磷酸 ( 23B77B0. 2)为流动相时, 峰形较好, 样品中
葛根素的分离度、理论塔板数、拖尾因子均符合要求, 故本
文选择甲醇 -水 -磷酸 ( 23B77B0. 2)为流动相。
3. 3 制剂质量
本文所测的 3批不同批号心血宁片, 其葛根素的含量
差异较大。从而提示为保证心血宁片的制剂质量, 首先要
控制原药材的质量。
4 结 论
本文采用紫外检测器,以 Zo rbax Ec lipseXDB - C18为色
谱柱,甲醇 -水 -磷酸 ( 23B77B0. 2)为流动相, 建立了心血
宁片中葛根素的高效液相色谱含量测定方法, 该法操作简
便,结果可靠, 重现性好,可用于心血宁片的质量控制。
参考文献
[ 1 ] 林启光.心血宁片治疗冠心病 186例临床疗效观察 [ J ].中成
药, 1994, 16( 7 ): 25 - 26.
[ 2 ] 王靖,吉民,华维一,等.葛根素研究进展 [ J ].药学进展, 2003
( 2) : 176.
[ 3 ] 姜静岩,何燕,巩密密.葛根素的药理及临床应用 [ J ].现代中
西医结合杂志, 2004( 21) : 869.
[ 4 ] 国家药典委员会.中华人民共和国药典 # Ñ 部 [ S ]. 北京:化
学工业出版社, 2005: 233 - 234.
[ 5 ] 路玫,韦戈,黄雪梅,等.反相高效液相色谱法测定心安宁片
中葛根素的含量 [ J ].中国现代应用药学, 2003, 20( 4 ): 305 -
306.
[ 6 ] 石天松.高效液相色谱法测定葛根素注射液的含量 [ J ].中国
药师, 2004, 7( 8 ): 623.
第 26卷 第 11期
2 0 08年 11月
中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 26 N o. 11
Nov. 2 0 0 8
中华中医药
2517
学刊
山核桃叶与美国山核桃叶中化学成分的初步分析
潘亚琴 1,李全清 2,张森尧1,姚振生 1
( 1.浙江中医药大学药学院,浙江 杭州 310053; 2. 浙江萧山医院,浙江 萧山 311201)
摘 要:目的: 通过预实验,初步了解山核桃叶和美国山核桃叶中的化学成分。方法:采用化学成分系统预试
法,分别对山核桃叶和美国山核桃叶的水提取液、乙醇提取液和石油醚提取液进行研究, 通过多种指示剂和显色
剂的颜色反应或沉淀反应, 初步推断两种植物叶中可能含有的化学成分。结果: 两者所含的化学成分类型基本相
同,可初步确定其可能含有多糖、鞣质、酚类、有机酸、黄酮类、蒽醌类、强心苷、三萜类化合物及其皂苷等化学成
分。结论:首次报道山核桃叶和美国山核桃叶化学成分预试验, 有利于对其有效成分的提取、分离、纯化研究, 为
今后深入研究与开发利用该资源提供一定的研究基础。
关键词:山核桃叶;美国山核桃叶; 化学成分;预试
中图分类号: R284 文献标识码: A 文章编号: 1673 -7717( 2008) 11 -2517 - 03
S tudy on Chem icalC omponents in the Leaves o f
Carya ca thayensis andC . illinoÄnsis
PAN Ya-qin1, L I Quan-q ing2, ZHANG Sen-yao1, YAO Zhen-sheng1
( 1. Pharm acy C ollege, Zhejiang C hineseM ed icalUn iversity, H angzhou 310053, Zhe jiang, Ch ina;
2. Zhejiang X iaoshan Hospita,l X iaoshan 311201, Zhe jiang, Ch ina)
Abstrac t: Ob jective: To study the chem ical com ponen ts in the leaves o f carya cathayensis and Carya illinoÄnsis nsis
by prelim inary tes.t Me thods: Som e re searches we rem ade o f the ex trac ted m ix ture fo r the leaves o f carya cathayensis and
C. illinoÄns is from wa ter, e thano l and pe troleum e ther by sy stema tic p re lim inary tes.t And the chem ica l com ponents in
the leaves o f the two p lants w as prim arily dem onstracted acco rding to co lor reaction or pre cip ita tion reac tion w ith va rious
2517
DOI：10.13193/j.archtcm.2008.11.214.panyq.064
第 26卷 第 11期
2 0 08年 11月
中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 26 N o. 11
Nov. 2 0 0 8
中华中医药
2518
学刊
indicator. R esu lts: Two o f them m ay con ta in the sam e chem ica l com ponen t pa tte rns, polyose, ac id tannic, pheno ls, org an-
ic acid, flavono ids, anth raquinone, cardiac g lycoside, trite rpenoids and its saponin e tc. C onclusion: Th is tex t is the first
one to repo rt the pre lim inary test for the chem ica l components in the leaves ofCarya cathay ensis and C. illinoÄnsis. I tm ay
be bene ficia l to the research on ex traction, separa tion and purifica tion of e ffec tive components in the leaves of Carya
ca thayens is and C. illinoÄnsis, and prov ide resea rch basis for furthe r resea rch and exploitation of the resource s.
Keyw ords: leave s of C arya ca thayensis; leaves o fC. illinoÄns is; chem ical components; p re lim inary test
山核桃 ( Carya cathayensis Sarg. )和美国山核桃 [C.
illinoÄnsis (W angenh. ) K. K och ]均为胡桃科 ( Jug landace-
ae)山核桃属 (Carya )植物, 具有营养、保健、美容及药用
价值。山核桃具有解毒、消肿之功效 ,临床多用于脚痔、皮
肤癣症等 [1 ]。现代研究表明 , 山核桃叶片提取物对金黄
色葡萄球菌、大肠杆菌、酵母菌、黄曲霉菌、青霉菌和黑曲
霉菌均有抑制作用 [ 2]。另据文献报道, 山核桃叶片提取
物还具有抑制胃癌 SGC - 7901细胞增殖和诱导该肿瘤
细胞凋亡的作用 [3 ]。由此可见, 山核桃叶中含有具抑菌
和抗肿瘤的有效成分,但对其化学成分方面的研究尚未见
报道。美国山核桃与山核桃同属, 两者亲缘关系相近, 一
般认为, 植物之间亲缘关系相近的个体, 常具有类似的化
学成分和相似临床疗效的规律。本文采用化学成分系统
预试法, 首次对山核桃叶和美国山核桃叶的水提取液、乙
醇提取液和石油醚提取液进行了化学成分的初步研究, 以
期为今后进一步研究其具体的化学成分及作用机理提供
科学依据。
1 实验部分
1. 1 材料
实验所用样品于 2007年 7月采自浙江省杭州市临安
西天目山,经浙江中医药大学药学院资源与鉴定教研室姚
振生教授鉴定。
1. 2 仪器与试剂
HH -S型水浴锅 (巩义市英峪予华仪器厂 ), UV -1型
三用紫外分析仪 (上海顾村电光仪器厂 ) , SHZ -D ( Ó )循
环水式真空泵, FA1104型电子分析天平, WND -200A型高
速中药粉碎机。 95% 酒精、石油醚、A -萘酚、乙酸酐、明
胶、三氯化铁、氢氧化钠、氢氧化钾、3, 5 -二硝基苯甲酸、苦
味酸、氨水、盐酸、镁粉、氯仿、浓盐酸、浓硫酸等均为分析
纯;实验用水为双蒸水; 其他试剂的配制均参考中华人民共
和国药典。
1. 3 样品供试液的制备
分别取山核桃叶和美国山核桃叶 100g, 于 85e 干燥
4h,粉碎成粗粉即为实验品粗粉。
1. 3. 1 水提取液的制备 分别取山核桃叶和美国山核桃
叶粗粉 10g,加蒸馏水 100mL, 室温浸泡过夜, 过滤, 取滤液
10m L作氨基酸、多肽和蛋白质的预试。其余部分放在
60e 水浴中加热约 30m in, 过滤 [4 ]。滤液作糖、多糖、苷类、
皂苷、鞣质、酚类、有机酸等项的预试。
1. 3. 2 乙醇提取液的制备 分别取山核桃叶和美国山核
桃叶粗粉 15g,加 95%乙醇 150m L,于 60e 水浴中加热回流
30m in,趁热过滤, 取其中一部分滤液供酚类、鞣质、黄酮、蒽
醌、香豆素、内酯、强心苷、甾体或三萜类化合物等项的预
试。其余滤液浓缩成膏状 (至无乙醇味 ), 加 0. 5% 盐酸使
溶解,过滤, 酸性滤液作生物碱检查 [5 ]。
1. 3. 3 石油醚提取液的制备 分别取山核桃叶和美国山
核桃叶粗粉 4g, 加 40m L 60~ 90e 石油醚, 振摇 1h,取中上
层部分作挥发油和油脂检查,其余置表面皿上挥干, 残留物
进行甾体或三萜类检查。
1. 4 检查方法
根据供试液可能含有的化学成分类型, 选择各类成分
特有的化学反应,如颜色反应、沉淀反应等做系统的化学成
分预试。
2 结果与分析
山核桃叶和美国山核桃叶粗粉的水提取液、乙醇提取
液和石油醚提取液的预试验结果分别见表 1~ 3。
综合上述各表可见, 山核桃叶和美国山核桃叶中所含
化学成分类型基本相同,两者均可能含有糖、多糖、鞣质、酚
类、有机酸、黄酮类、蒽醌类、强心苷、三萜类化合物及其皂
苷,不含氨基酸、多肽、蛋白质、香豆素、内酯、生物碱、挥发
油及油脂等物质。
表 1 山核桃叶与美国山核桃叶水
提取液成分预试结果
检查项目 试剂或反应名称
山核桃叶 美国山核桃叶
现象 结果 现象 结果
氨基酸、多肽、
蛋白质
茚三酮试剂 无 - 无 -
双缩脲反应 无 - 无 -
加热或加酸
沉淀试验 无 - 无 -
糖、多糖、
苷类
菲林试剂 红棕色沉淀 + 红棕色沉淀 +
A -萘酚试
验
界面出现
紫红色环 +
界面出现
紫红色环 +
皂苷
泡沫试验
振摇产生大
量泡沫, 放
置 10m in后
不消失
+
振摇产生大
量泡沫, 放
置 10m in后
不消失
+
乙酸酐 -浓
硫酸反应 呈紫红色
+ (三萜
皂苷 ) 呈紫红色
+ (三
萜皂苷 )
鞣质 氯化钠明胶试剂
出现白色沉
淀 +
出现白色沉
淀 +
酚类
滤去鞣质,
加三氯化铁
试剂
呈墨绿色 + 呈墨绿色 +
有机酸 PH试纸 PH5~ 6 + PH5~ 6 +
注: / + 0表示为阳性结果, / -0表示为阴性结果。
2518
第 26卷 第 11期
2 0 08年 11月
中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 26 N o. 11
Nov. 2 0 0 8
中华中医药
2519
学刊
表 2 山核桃叶与美国山核桃叶乙醇提取液成分预试结果
检查项目 试剂或反应名称
山核桃叶 美国山核桃叶
现象 结果 现象 结果
酚类 三氯化铁试剂 呈墨绿色 + 呈墨绿色 +
鞣质 氯化钠明胶试剂 出现白色沉淀 + 出现白色沉淀 +
黄酮 盐酸 -镁粉反应 红棕色 + 红棕色 +
氨熏 淡黄变黄色 + 淡黄变黄色 +
蒽醌 1% 氢氧化钠试剂 呈红色 + 呈红色 +
1% 氢氧化
钾试剂
呈红色, 加酸
褪色 +
呈红色, 加酸
褪色 +
5% 氢氧化
钾试剂 (滤
纸实验 )
蓝色荧光 + 蓝色荧光 +
香豆素与内酯 滤纸试验 无 - 无 -
重氮化试验 无 - 无 -
强心苷
3, 5 -二硝
基苯甲酸试
剂
红色 + 紫红色 +
碱性苦味酸
试剂 橙色 + 橙红色 +
甾体或三萜类 乙酸酐 -浓硫酸反应
由黄色变红紫
色
+ (三
萜类 )
由黄色变红紫
色
+ (三
萜类 )
氯仿 -浓硫
酸反应
氯仿层显红
色, 浓硫酸层
有绿色荧光
+
氯仿层显红
色, 浓硫酸层
有绿色荧光
+
生物碱 碘 -碘化钾试剂 无 - 无 -
硅钨酸试剂 无 - 无 -
苦味酸试剂 无 - 无 -
表 3 山核桃叶与美国山核桃叶石油醚
提取液成分预试结果
检查项目 试剂或反应名称
山核桃叶 美国山核桃叶
现象 结果 现象 结果
甾体或三萜类 乙酸酐 -浓硫酸反应
由黄色变红
紫色
+ (三
萜类 )
由黄色变红
紫色
+ (三
萜类 )
氯仿 -浓硫
酸反应
氯仿层显红
色, 浓硫酸层
有绿色荧光
+
氯仿层显红
色, 浓硫酸层
有绿色荧光
+
挥发油及油脂 滤纸试验 滤纸上无油斑 - 滤纸上无油斑 -
注: / + 0表示为阳性结果, / - 0表示为阴性结果。
3 讨 论
目前从中草药中提取天然活性成分开发高效低毒的新
药已成为当前的研究热点之一。多年来, 人们已对药典所
记载的多种传统中药进行了屡次筛选, 并在临床上广泛应
用,同时有些民间用药也在逐渐成为人们关注的焦点。山
核桃是我国山区重要的经济树种, 通常人们将其作为干果
和油料作物进行研究,但在民间已有较长的药用历史, 近几
年研究也表明,其叶片提取液具有抗菌和抗肿瘤活性, 但对
其有效成分的研究尚未见报道。本实验结果表明, 美国山
核桃叶与山核桃叶中所含化学成分类型基本相同,由此可
见,美国山核桃叶中也可能含有抑菌和抗肿瘤的有效成分,
但具体的化学成分及作用机制有待进一步研究。
化学成分的预试结果还表明, 山核桃叶和美国山核桃
叶中可能含有蒽醌类、酚类、黄酮类、多糖、强心苷、三萜类
化合物及其皂苷、鞣质、有机酸等化学成分。这些化学成分
具有多种生理活性和应用前景, 如蒽醌类具有抗菌、抗炎、
抗癌、收敛、镇静等作用;酚类具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化、保
肝等作用;黄酮类化合物对心血管系统、抗肝脏毒性、抗肿
瘤、抗菌消炎、抗病毒等作用;多糖具有抗癌、抗衰老、增强
免疫力等作用; 强心苷主要作用于心脏, 有加强心肌收缩
性,减慢窦性频率, 影响心肌电等生理特性; 三萜类化合物
及其皂苷具有溶血、抗癌、抗炎、抗菌、抗病毒、降低胆固醇
等作用。本文首次报道山核桃叶和美国山核桃叶化学成分
预试验,有利于对其有效成分的提取、分离、纯化研究, 为今
后深入研究与开发利用该资源提供一定的研究基础。
参考文献
[ 1 ] 浙江药用植物志编写组.浙江药用植物志 (上册 ) [M ].杭州:
浙江科学技术出版社, 1980: 159.
[ 2 ] 殷舒,毛胜凤,杨琼霞, 等. 山核桃叶片提取物的抑菌作用
[ J ].浙江林学院学报, 2007, 24( 5) : 604 - 607.
[ 3 ] 胡旭姣,赵肖君,周奋,等. 山核桃提取物体外抗肿瘤作用研
究 [ J]. 中华中医药学刊, 2007, 25( 2 ): 369 -370.
[ 4 ] 苑雅萍,赵洪云,秦香芹, 等.山核桃壳化学成分的研究 [ J ].
黑龙江医药, 2006, 19 ( 1) : 33 -34.
[ 5 ] 甄汉深,莫缓恒,周燕园, 等.青天葵化学成分定性鉴别的试
验研究 [ J].广西中医学院学报, 2007, 10( 1 ) : 53 - 55.
少吃碳水化合物 减肥又降胆固醇
以色列研究人员日前公布的一项研究结果显示, 降低碳水化合物摄入量、提高蛋白质摄入量的阿特金斯减肥法比其他
传统减肥方法更有利于降低体内胆固醇水平, 减肥效果更显著。
美联社说,这一研究在同类研究中属于耗时最长、规模最大的几项之一。资助研究的罗伯特# C博士和韦罗妮卡# 阿
特金斯基金会的阿比# 布洛克说: /这相当于-盖棺论定 .。0
这项研究在以色列一个相对与外界隔绝的核研究设施内开展, 持续两年时间, 共涉及 322名参与者。大约 85% 的参
与者都遵守了研究的饮食规定。研究过程中, 参与者在设施的餐厅内吃午餐,按照分组吃不同的食品。他们早餐和晚餐的
食品可在研究人员的建议之下自行选择, 但就餐后要填写调查问卷。
通过这种方式, 研究人员得以对比阿特金斯减肥法、传统的低脂肪摄人减肥法和以主吃家禽、鱼类、橄榄油和坚果减肥
的 /地中海瘦身法0的效果,结果发现, 阿特金斯减肥法更有助于降低体内的胆固醇水平。
研究结果显示,阿特金斯减肥法对改善人体内胆固醇多项衡量指标最为有利, 尤其是参与者体内对身体有益的高密度
脂蛋白胆固醇比例增加。
此外,阿特金斯减肥法的减肥效果也更显著。阿特金斯减肥法参与者体重平均下降 4. 6kg, /地中海瘦身法0参与者平
均下降 4. 5kg,而低脂肪摄入减肥法参与者下降 2. 9kg。
这一研究由以色列本# 古里安大学的艾里斯# 沙伊主持,研究结果在日前出版的美国5新英格兰医学杂志6周刊上发表。
2519