全 文 ：H-7), 6.25(1H, d, J=8.8 Hz, H-6), 5.20(1H, dd, J=19.6
Hz, 7.6 Hz, H-23), 5.15(1H, dd, J=19.6 Hz, 7.6 Hz, H-22),
3.96(1H, m, H-3), 1.00(3H, d, J=6.8Hz, H-21), 0.91(3H,
d, J=6.8 Hz, H-28), 0.88(3H, s, H-19), 0.84(3H, d, J=6.8
Hz, H-26), 0.83(3H, s, H-18), 0.82(3H, d, J=6.8 Hz, H-
27);13C-NMR(CDCl3 , 100.5 MHz, DEPT)δ:(C1-28):37.05
(CH2), 30.14(CH2), 66.46(CH), 34.75(CH2), 82.27(C),
135.29(CH), 130.70(CH), 79.52(C), 51.19(CH), 37.05
(C), 20.71(CH2), 39.43(CH2), 44.65(C), 51.77(CH),
23.48(CH2), 28.71(CH2), 56.29(CH), 12.95(CH3), 18.25
(CH3), 39.78(CH), 20.96(CH3), 135.53(CH), 132.39
(CH), 42.86(CH), 33.15(CH), 19.72(CH
3
), 20.03(CH
3
),
17.64(CH3)。以上光谱数据与文献 [ 2]报道的一致 , 化合物
的结构鉴定为 3β -羟基-5α, 8α-过环氧麦角甾 -6, 22-二烯
(3β -hydroxy-5α, 8α-epidioxyergosta-6, 22-diene)。
化合物Ⅲ:无色针晶(石油醚), mp305 ～ 306℃, 5%香草
醛-浓硫酸反应和醋酐-浓硫酸反应阳性 , Molish反应阴性。
IR, 1H-NMR, 13C-NMR光谱数据与文献 [ 3]报道的齐墩果酸的
数据基本一致 , 故确定其结构为齐墩果酸。
化合物Ⅳ:淡黄色粉末 , HCl-Mg粉反应阳性 , Molish反
应阳性。1H-NMR(400 MHz, DMSO-d6)δ:12.57(1H, s,
5-OH), 10.80(1H, s, 7-OH), 9.60(1H, s, 4′-OH), 9.18(1H,
s, 3′-OH), 7.55(1H, dd, J=8.0, 2.0 Hz, 6′-H), 7.52(1H, d, J
=2.0 Hz, 2′-H), 6.83(1H, d, J=8.0 Hz, 5′-H), 6.37(1H, d,
J=2.1, 8-H), 6.18(1H, d, J=2.1 Hz, 6-H), 5.33(1H, d, J=
6.4 Hz, glc-1″-H), 4.41(1H, s, rha-1 -H), 1.11(3H, d, J=
5.2 Hz, rha-CH3)。13C-NMR(100.5 MHz, DMSO-d6 , DEPT)
δ:C-2 ～ C-10:156.4(C), 133.3(C), 177.3(C=O), 161.2
(C), 98.6(CH), 164.0(C), 93.5(CH), 156.6(C)103.3
(C), C-1′～C-6′:121.1, 115.2, 144.7, 148.4, 116.2, 121.5;
glcC-1″～ C-6″:100.7, 74.0, 76.4, 69.9, 75.9, 66.9;rhaC-1 -
6 :101.2, 70.5, 70.3, 71.8, 68.2, 17.7。以上光谱数据与文
献 [ 4]报道的一致 ,化合物Ⅳ的结构鉴定为芦丁 。
以上化合物均为首次从岩豆中分离得到。 这些化学成
分是否为岩豆抗风湿的有效成分有待继续研究。
致谢:本实验在中国科学院贵州省天然产物化学重点实
验室完成。
参考文献:
[ 1] 　《全国中草药汇编 》编写组.全国中草药汇编 [ M] .下册.北京:
人民卫生出版社 , 1996.
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nalsassignedbyuseofindirect13C, 1Hspincouplings[ J].Tetra-
hedronLet, 1974, (48):4227-4230.
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vonoidsofEupatoriumspecies[ J] .Phytochem, 1972, (11):2859-
2863.
贵州地区威灵仙类药材中齐墩果酸的含量比较
黄　婕 , 　王祥培＊ , 　靳凤云 , 　孙宜春 , 　李保峰
(贵阳中医学院 ,贵州 贵阳 550002)
收稿日期:2008-02-11
基金项目:贵阳中医学院博士科研启动基金:国家中医药管理局西部重点学科建设项目(200414)
作者简介:黄　婕(1983-),女 ,硕士生 ,研究方向:中药质量控制及新药研发。 Tel:(0851)8119459
＊通讯作者:王祥培(1975-),副教授。
关键词:威灵仙;齐墩果酸;高效液相色谱法
中图分类号:R284.1　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2009)04-0619-02
　　威灵仙为毛茛科铁线莲属植物威灵仙 ClematisChinensis
Osbeck、棉团铁线莲 ClematishexapetalaPal.及东北铁线莲
ClematismanshuricaRupr.的干燥根及根茎 [ 1] 。 具有祛风除
湿 、通络止痛的功效 , 临床常用治疗风湿痹痛 、关节麻木 、筋
脉拘挛 、骨哽咽喉等症。笔者在贵州不同地区调查中发现商
品威灵仙药材的品种繁多 , 其中同科植物柱果铁线莲 Clema-
tisuncinataChamp成为药材威灵仙的主要来源。有文献报
道表明;威灵仙中的主要有效成分为齐墩果酸等苷元形成的
三萜皂苷类 [ 2] 。因此 ,为了探讨威灵仙类药材的质量 , 本文
采用高效液相色谱法对贵州不同地区收集到的药材进行齐
墩果酸的含量测定 , 并作比较 ,以期为威灵仙药材的质量控
制及其临床应用提供参考。
1　仪器与试药
1.1　仪器　Agilent1100高效液相色谱仪(自动进样器 、智能
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柱温箱 、二极管阵列检测器);HS10260D型超声波清洗器(天
津奥泰公司);MettlerAB204-S型电子天平(十万分之一)。
1.2　试药及样品　齐墩果酸对照品(批号 110709-200304
供含量测定用 , 中国药品生物制品检定所);药材来源见表
1, 并由贵阳中医学院王祥培副教授鉴定;甲醇为色谱纯;其
他试剂均为分析纯;水为纯净水。
表 1　 贵州不同地区威灵仙类药材中齐墩果酸的含量(n=3)
品名 拉丁名 来源 含量 /(mg/g) RSD/%
威灵仙 ClematischinensisOsbeek 四川峨眉山 4.420 8 0.94
威灵仙 ClematischinenslsOsbeck 深圳同仁堂药店 2.470 2 1.71
威灵仙 ClematischinensisOsbeck 贵阳花果园 5.725 2 0.80
威灵仙 ClematischinensisOsbeek 广东 8.571 1 0.99
威灵仙 ClematischinensisOsbeck 广西 5.997 0 1.58
威灵仙 ClematischinensisOsbeck 四川成都 4.963 3 1.71
柱果铁线莲 ClematisuncinataChamp. 贵阳三桥 14.934 7 0.79
柱果铁线莲 ClematisuncinataChamp. 贵阳新天寨 23.683 5 0.59
柱果铁线莲 ClematisuncinataChamp. 贵阳乌当 28.898 1 0.65
柱果铁线莲 ClematisuncinataChamp. 贵州六盘水 29.834 5 0.50
柱果铁线莲 ClematisuncinataChamp. 贵州六盘水 18.141 5 0.48
柱果铁线莲 ClematisuncinataChamp. 贵州安顺 15.371 8 1.07
柱果铁线莲 ClematisuncinataChamp. 贵州都匀 20.831 9 0.53
扬子铁线莲 Clematisganpiniana(levl.etVant.)Tamum 贵州安顺 4.667 3 1.08
显脉旋覆花 InulanervosaWal. 贵州兴义 -
草珊瑚 Sarcandraglaber(Thunb.)Nakai 贵州遵义 -
安徽威灵仙 ClematisanhweiensisM.C.Chang 贵州遵义 0.335 1 1.96
安徽威灵仙 ClematisanhweiensisM.C.Chang 贵州安顺 0.508 8 1.76
安徽威灵仙 ClematisanhweiensisM.C.Chang 贵阳花果园 0.573 0 1.87
2　实验方法
2.1　色谱条件　依利特 HypersilODS色谱柱(4.6 mm×150
mm, 5 μm), 流动相:甲醇 -0.1%磷酸溶液(83∶17), 流速
1.0 mL/min,柱温 25 ℃, 检测波长:210 nm。 在此色谱条件
下 , 齐墩果酸色谱峰对称 , 供试品色谱图中齐墩果酸色谱峰
与其它成分色谱峰分离良好。
2.2　样品测定方法
2.2.1　对照品溶液的制备　精密称取齐墩果酸对照品适
量 , 用甲醇溶解 , 制成每 1 mL中含 0.200 8 mg的对照品溶
液。
2.2.2　供试液的制备　取药材粉末(过 40目筛)约 1 g, 精
密称定 , 置圆底烧瓶中 ,精密加入 10%硫酸溶液 30 mL, 沸水
浴上加热回流 4 h,冷却至室温后滤过 , 滤渣用水洗至中性后
烘干 , 精密加入 50 mL氯仿 , 密塞 , 称定重量 , 超声处理 30
min,放冷 , 再称定重量 ,用氯仿补足减失的重量 ,摇匀 , 滤过 ,
精密量取续滤液 25 mL,回收氯仿至干 ,残渣加适量甲醇使溶
解 , 转移至 10 mL量瓶中 , 加甲醇至刻度 , 摇匀 , 用 0.45 μm
微孔滤膜滤过 , 即得。
2.2.3　测定方法　分别精密吸取对照品溶液 10 μL和供试
品溶液 3 μL,注入液相色谱仪 , 测定峰面积 , 计算 ,即得。
2.3　方法学考察
2.3.1　线性关系考察　精密称取齐墩果酸对照品适量 , 用
甲醇溶解 , 制成每 1mL中含 0.200 8mg的对照品溶液 ,精密
吸取对照品溶液 1, 5, 9, 13, 17, 21, 25 μL依次进样 ,记录色谱
图。以齐墩果酸的进样量(μg)为横坐标 , 峰面积为纵坐标
进行线性回归 , 得回归方程:Y=5 472.3X-7.098 3, r=
0.999 5(n=7), 结果表明齐墩果酸进样量在 0.020 1 ～
5.020μg范围线性关系良好。
2.3.2　稳定性试验　精密吸取柱果铁线莲(贵阳新天寨)制
备的供试液 3 μL,定时进样测定 ,时间间隔为 0、2、4、 8、12h,
记录峰面积积分值 ,结果齐墩果酸的 RSD为 0.43%, 表明供
试品在 12h内稳定。
2.3.3　精密度试验　精密吸取齐墩果酸对照品溶液 10 μL,
连续进样 6次 , 记录峰面积积分值 ,结果齐墩果酸的 RSD为
0.58%,表明精密度良好。
2.3.4　重复性试验　取柱果铁线莲(贵阳新天寨)药材粉末
5份 ,各约 1 g, 精密称定 , 按上述方法制备供试液 , 测定。 5
份样品齐墩果酸平均值为 14.934 7 mg/g, RSD为 0.79%,表
明方法重复性良好。
2.3.5　加样回收试验　取柱果铁线莲(贵阳新天寨)药材粉
末 6份 , 各约 0.25 g,精密称定 , 于每份中加入齐墩果酸对照
品(0.498 1 mg/mL)适量 , 按含量测定项制备供试液 ,进样 ,
记录色谱图 , 计算齐墩果酸回收率 , 平均回收率为 99.85%,
RSD为 1.60%, 表明回收良好。结果见表 2。
表 2　 回收率实验结果(n=6)
取样量
/g
原有量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回收率
/%
RSD
/%
0.250 4 3.739 6 3.735 8 7.520 4 101.20
0.250 7 3.744 1 3.735 8 7.391 9 97.64
0.251 3 3.754 1 3.735 8 7.498 9 100.27 99.85 1.60
0.249 2 3.721 7 3.735 8 7.523 5 101.77
0.249 1 3.720 2 3.735 8 7.450 6 99.85
0.250 6 3.742 6 3.735 8 7.418 4 98.39
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2.3.6　样品测定结果　按上述方法和色谱条件对贵州不同
地区威灵仙类药材进行含量测定 ,结果见表 1。
3　讨论
3.1　提取条件的选择　对水解条件和提取方法进行了考
察 , 实验结果表明 ,酸度为主要影响因素 , 故拟定上述供试品
的制备方法。
3.2　分离条件的选择　本文选择了 3种色谱柱:(1)Hyper-
silODS(5μm, 4.6 mm×150mm, Agilent)色谱柱 , (2)Hyper-
silODS(5 μm, 4.6 mm×150 mm, 大连依利特)色谱柱 , (3)
DiamonsilC18(5 μm, 4.6mm×250mm, 迪马公司), 及 4个流
动相:(1)甲醇-水 (90∶10);(2)甲醇-0.1%磷酸溶液
(83∶17);(3)乙腈-水(90∶10);(4)乙腈 -0.1%磷酸溶液
(83∶17)进行系统适用性试验。试验结果表明本文所选色谱
条件能使供试品中齐墩果酸色谱峰与相邻色谱峰达到基线
分离 , 出峰时间短 ,重现性好 , 回收率高。
3.3　研究结果表明 , 所收集到的同科同属植物柱果铁线莲 、
扬子铁线莲和安徽威灵仙的根均含有齐墩果酸 ,且前三者含
量明显高于正品的威灵仙药材 , 而不同科植物草珊瑚 、显脉
旋覆花药材均未检测出齐墩果酸。因此 , 规范市场药材品种
来源 , 才能保证临床用药安全 、有效。
3.4　柱果铁线莲与正品威灵仙的功效和主治十分相近 , 且
齐墩果酸含量高 ,资源也相当丰富 , 在南方地区有作商品威
灵仙药材广泛使用 , 但能否作为正品威灵仙药材使用 , 还有
待于进一步研究。
参考文献:
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[ 2] 　吴寿金 ,赵　泰 ,秦永琪.现代中草药成分化学 [ M] .北京:中国
科学技术出版社 , 2002:486.
锡类缓释贴膜的制备工艺研究
王小平 , 　何晓晖 , 　涂国卿
(江西中医药高等专科学校 , 江西 抚州 344000)
收稿日期:2008-03-12
基金项目:江西省卫生厅中医药科研基金课题(2005A67)
作者简介:王小平(1973-),男 ,硕士 ,讲师 ,从事中药药剂学教学及中药新药开发。 Tel:(0794)8239328E-mail:jxrcwxp@ 163.com
关键词:制备工艺;口腔缓释贴膜;锡类;羟丙甲基纤维素;卡波普
中图分类号:R944　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2009)04-0621-02
　　锡类散出自《金匮翼 》, 收载于《卫生部药品标准 》中药
第 2册 , 主要由牛黄 、青黛 、冰片 、珍珠 、象牙屑 、人指甲 、壁钱
炭等组成 , 具有解毒化腐功能 [ 1] , 在临床上被广泛应用于治
疗口腔溃疡。利用生物黏附技术制成生物黏附贴膜--锡类
缓释贴膜 , 具有速效 、定位 、缓释给药的作用特点 , 可减少给
药次数 , 增加病灶的药物浓度 , 同时能隔离唾液 、酶 、微生物
对溃疡面的刺激 , 迅速缓解疼痛及促进溃疡愈合。本文对锡
类缓释贴膜的制备工艺进行了初步研究。
1　仪器与材料
Tu-1901型紫外可见分光光度计(北京普析);DHG-101
型电热恒温鼓风干燥箱(巩义市英峪予华仪器厂);电热恒
温水浴锅(金坛市大地自动化仪器厂);ZRS-8L智能溶出实
验仪(天津市盛鑫通达科技有限公司);黏附力测定仪(自
制);聚乙烯醇 PVA(型号 1750、 0588), 羧甲基纤维素钠
CMC-Na,羟丙甲基纤维素 HPMC(型号 90SH-4000), 聚羧乙
烯 CP(型号 934P)均购自上海运宏化工有限公司;青黛等中
药均购自本校附属饮片厂 ,试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2.1　制备工艺
取青黛等七味药材 , 除牛黄 、冰片外 , 珍珠研成极细粉 ,
其余四味研成细粉 , 过筛 , 与上述牛黄等粉末配研 , 过筛 , 混
匀 ,备用;取成膜材料 ,加水适量浸泡 , 加热溶解 ,混入上述药
物细粉 ,加辅料适量 , 搅匀 ,除气泡 ,涂膜 ,干燥 ,铺隔离膜 ,低
温干燥 ,启膜 , 即得。
2.2　指标成分测定方法
2.2.1　黏附力的测定 [ 2]
将两块平板中的一块平板垂直固定 , 用双面胶将贴膜的
覆盖层黏附其上 , 再将贴膜表面用 30μL蒸馏水润湿 30 s后
置于两平板中间压紧 2 min,然后在另一块平板上悬挂砝码 ,
记录贴膜剂开始移动或脱落所需的砝码质量。
2.2.2　口腔溶解时间的测定
取各贴膜剂 ,贴入自愿者口腔中后计时 , 记录贴膜剂在
口腔中完全溶解所需的时间。
2.3　正交试验
在单因素预试验考察的基础上 , 确定锡类缓释贴膜的成
膜材料为 HPMC、卡波姆。以黏附力 、口腔溶解时间为指标 ,
采用正交表 L9(34)安排实验 , 对锡粉与成膜材料比例 、
HPMC用量 、卡波姆用量等三个主要影响因素进行考察。实
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