全 文 ：湖南医科大学学报
B U L L
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O F H U N A N ME D
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U NI V
.
1 9 9 5 ; 20 ( 2)
山苍子油抗白色念珠菌的机制研究①
微 生物学教研 室
:晦床微生物学教研室
夏忠弟 杨军祥
李沛涛
提要 用同位素掺 入试验研 究山 苍子 油 对 白色念珠 菌的才元菌机制 。 结果发现 : 山苍子 油 能 明 显
抑制 U R , 醋酸钠 , T d R 和亮氛酸 4 种标记前体的掺入 。 提 示山 苍子 油 杭 白色念珠菌的机制可 能是
通过抑 制白色念珠菌的 D N A , R N A 和 细胞壁与细胞膜 中多糖的合成 。
关键词 山 苍子 油 ; 白色念珠 菌 ; 抗生 ; 药物作用 ; 同位素标记
山苍子油系樟科木姜子属植物 山苍子
〔L i t s e a 。 u b e ba ( I J o u r S ) p e r s 〕 果实中提取 的
挥发油 , 内含化学活性物质超过 26 种 , 具有
广谱抗菌作用 〔` , 2〕 。 国内文献报道 , 山苍子油
能 明显抑制金黄色葡萄球菌和绿脓 杆菌细
胞壁肤聚糖的合成 , 导致细菌胞壁缺损而抗
菌〔 3〕 。 本室 曾研 究山苍子 油对 白色念珠 菌
( C
.
al 压 ca n ; ) 超微结构的影响 ; 电子显微镜
下发现其对 白色念珠 菌的细胞 壁和 细胞膜
均有破坏作用 〔` 〕 。 据此认为 , 山苍子油可能
导致 白色 念珠菌菌体破裂和菌体 内容物外
漏从而具有抗菌作用 。 本文采用同位素标记
技术 , 探讨 山苍子油对白色念珠菌生物合成
的影响 ; 进一步研究山苍子油抗 白色念珠菌
的机制 。
) T dR
,
( 5
一 ,
H ) U R 和 ( ’ 4 C 一 N a A C ) 分别作掺入前
体进行同位素掺入试验 , 以观察山苍子油对白色念
珠菌的 D N A 和 R N A , 蛋白质及细胞壁中多糖成分
合成的影响 。 同位素标记前体的最终浓度为 0 . SiC /
m l〔 5
’
6 〕 。 取 1 / ZM IC , M l e , ZM I e 的山苍子油作用于
对 数生长期 的白色念珠菌 , 置 2 8 C下振荡培养
3 o nr
l n
, 然后取各样品 l m l , 分别加 s m l l o %三氯醋
酸 ( T C A ) 作用 s o m in , 再通过 W h a t m a n 玻璃纤维
滤纸过滤 , 用 5% 的 T C A 10 m l 和蒸馏水 I Om l各洗
3 次 。 滤纸在 37 C烤干后置闪烁液中用 B ec k m e n
L S 3 O01 液体 闪烁计数 器检测其 每分 钟计 数值
(C P M )
。 试验中同时用生理盐水作对照组 。 计数实
验组与对照组的 C P M , 再求出掺入抑制率 。 掺入抑
制率 = (对 照组 C P M 一药物组 C P M /对照组 C P M
X 1 0 0%
。
2 结 果
材料与方法
1
.
1 材料 ( ” 试剂 : 山苍子油由湖南省轻工业
研究所提供 。 ( 2) 菌种 : 白色念珠菌 I D 16 U I ) 由中
国医学科学院真菌保存中心提供 。 ( 3) 同位素 : D L -
( 4
,
5
一 3 H ) 亮氨酸 ( l m C i / m l , 放射比强度 : 1 9 C i /
m m
o
l )
; ( m e t h y l
一 3
H ) T d R ( l m C i /m l
, 放射 比强度
:
4 0
.
SC
I
/ m m
o
l ) ; ( 5
一 3 H ) U R ( 0
.
g m C i / m l
, 放
射比强度 : 2 . 6iC / m m ol ) 。 以 上同位素均由中国
科学院上海核技 术开发 公 司提供 。 ( ’ 4 C 一 N a A C )
(2
· 。m iC / m l , 放射比强度 : 65 iC / m m ol ) , 由中国科
学院原子能研究所提供 。
1
.
2 方法 以 D工_ 一 ( 4 , 5 一 3 H ) 亮氨酸 , ( m e t h y l一 , H
1 / ZM IC
,
M I C 和 ZM IC 三个 药物作 用组对
U R
, 亮氨酸 , T dR 及 N a A C 4 种标记前体的掺入均
有明显抑制作用 ; 掺入抑制率均高 , 且随药物浓度
的增加而增加 (附表 ) 。
附表 山苍子油乳剂对同位素标记物掺入
白色念珠菌菌体的影响
( x 士 s , , , = 1 0 )
药物浓度 掺 入 抑 制 率
(M IC) TdR UR 亮氨酸 N a AC
1了2 42
.
86士 2. 92 42. 9异二 生. n O 25 . 16二 3 . 44 70 . 48二 4 . 33
1 49
.
24士 2
.
63 52
.
83土 4 . 73 厂夕. 8已了 只 89 75 . 连6二 4 . 己9
2 62
.
04士4 . 56 74 . 22二 5 . 14 于代 . 2三二 3 . 80 80 . 28士 4. 10
19 94
一。 3一 14 收 稿 工国家 目然科学基金资助顶 目
10 8 湖南医科大学学报 9 9 1 5 ; 20 ( 2 )
2讨 论
本资料显示 , 山苍子油能明显抑制 4 种
标记前体对白色念珠菌菌体的掺入 ; 掺入抑
制率均较高 。 表明 4 种标记前体的摄入同时
受抑 . 尤其以 U R 和 N a A C 的摄入受阻更为
明显 , 导致白色念珠 菌细胞膜生物合成明显
抑制
真菌的结构极 为复杂 , 根据种类不同 ,
其结构和化学组成也有差别 。 但核酸的主要
成分 为 D N A , R N A 含量极少 : 而细胞壁的
主 要 成 分 为 几 丁 质 ( c hi it n ) 、 葡 萄 糖
(oP lyg l
u c a n) 和甘露聚糖组成的多糖胞壁骨
架 。 细胞壁是真菌最外层结构 , 在维持真菌
形态 , 胞 内高渗状态和与胞外物质进行交换
方面起着重要作用 。 当真菌胞膜与胞壁成分
的合成一旦受抑 , 必将引起菌体破裂 , 菌体
内容物漏 出而以真菌死亡告终 。
根据本试验结果推测 , 山苍子油可能通
过抑制 白色念珠菌的 D N A 与 R N A 合成和
抑制 细胞壁中多糖 成分 的合成而发挥抗菌
作用 。
参 考 文 献
周勇 . 山 苍子挥 发油及其主要成分柠檬醛抗真菌 作用
的研究 . 中西医结合杂志 , 1 98 4 ; 4 (9 ) : 5 58 一筋 9
李 开泉 , 唐陶 . 山苍子 油抗真 菌有效成分的研究 . 中
国民院药学杂志 , 19 8 6 ; 6 ( 1 1 ) : 3一 4
周坚 . 李沛涛 . 山苍子油抗绿脓假单胞菌的机理研究 .
宁胡!有医科大学学报 , 19 9 3 ; 1 5 ( z ) : 3 3一 3 5
夏忠弟 , 李 沛涛 . 山苍子油乳剂对 白色念珠菌超微结
构的影响 . 湖南医科大学学报 , 1 9 92 ; l 7( 增刊 ) : 2。 -
2 2
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