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高效液相色谱法测定泰脂安胶囊中熊果酸和齐墩果酸的含量



全 文 :表 2 不同炮制方法淫羊藿对巴豆油致小鼠耳壳肿胀的影响( x±s) mg
组 别 致炎前与致炎 4h后耳重之差
生理盐水  18.89±2.61
生淫羊藿 13.49±1.51
制淫羊藿Ⅰ 20.09±1.61
制淫羊藿Ⅱ 13.21±2.32*
制淫羊藿Ⅲ 13.47±1.60
消炎痛 12.91±2.07*
  与生理盐水组比较 , *P<0.05, n=10
3 讨论
二甲苯和巴豆油诱发小鼠耳壳水肿主要是某些炎症介质如
组胺 、激肽和纤维蛋白溶解释放 ,引起局部毛细血管通透性增加 ,
炎症细胞浸润 , 造成耳部急性渗出性炎症水肿。制淫羊藿Ⅱ明显
减轻二甲苯和巴豆油所致小鼠耳壳红 、肿症状 , 与生理盐水组比
较有显著性差异(P<0.05), 且抗炎强度与消炎痛相当。综上所
述 , 制淫羊藿Ⅱ这种炮制方法具有抗炎作用 , 而另外二种方法炮
制的制淫羊藿Ⅰ和制淫羊藿Ⅲ无抗炎作用 , 其机理有待进一步
探讨。
参考文献:
[ 1 ]  王 访 ,张有权.抗衰老中药的药理研究近况 [ J] .时珍国医国药 ,
2002, 13(4):236.
[ 2 ]  沈雅琴.苦刺总生物碱的抗炎作用 [ J] .中国药理学通报 , 1990, 6
(1):685.
[ 3 ]  朱秀媛 ,徐桂芳 ,张祖济.麝香的药理研究I[ J] .药学学报 , 1979, 14
(14):685.
收稿日期:2005-03-24; 修订日期:2005-11-20
作者简介:姜从良(1966-),男(汉族),湖北秭归人 ,现任湖北省秭归县医
疗中心副主任药师 ,学士学位 ,主要从事药品质量管理工作.
高效液相色谱法测定
泰脂安胶囊中熊果酸和齐墩果酸的含量
姜从良 1 , 黎 翩 2
(1.湖北省秭归县医疗中心 443000; 2.三九黄石制药厂 ,湖北 黄石 435002)
摘要:目的 采用高效液相色谱法(HPLC)测定泰脂安胶囊中熊果酸和齐墩果酸的含量。方法 流动相:乙醇-磷酸盐缓冲
液(87∶13);流速 0.6ml/min;检测波长为 220 nm。熊果酸线性范围 0.976 ~ 4.88 μg, r=0.999 0(n=5)。结果 平均回
收率为 100.9%, RSD为 1.3%(n=5)。齐墩果酸线性范围 0.36 ~ 1.80 μg, r=0.999 8(n=5)。平均回收率为 99.0%,
RSD为 1.52%(n=5)。结论 该法分析简便 、灵敏 、迅速 、准确。
关键词:泰脂安胶囊; 熊果酸; 齐墩果酸; 高效液相色谱法
中图分类号:R284.2  文献标识码:B  文章编号:1008-0805(2006)01-0049-01
  泰脂安胶囊是从木樨科植物女贞叶中提取总三萜类物质加
适宜辅料精制而成 , 其主要成分为熊果酸和齐墩果酸 ,用于肝肾
阴虚 、阴虚阳亢证所致的原发性高脂血症。由于熊果酸和齐墩果
酸结构极相似 , 两者分离较困难 ,在薄层板上不易分离 ,且操作繁
琐 , 重现性差。本实验参考有关文献 [ 1 , 2] , 采用 HPLC法 , 对泰脂
安胶囊中熊果酸和齐墩果酸的含量测定进行了研究。
1 仪器与试剂
LabAlliance高效液相色谱仪 , Alliance检测器。甲醇为色谱
纯 , 其余均为分析纯 ,水为双蒸水 , 熊果酸和齐墩果酸均为中国药
品生物制品检定所提供。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱 pelcosilLC-18(250 mm×4.6 mm), 流动
相:甲醇-磷酸盐缓冲液(87∶13), 临用前超声脱气处理 , 检测波
长 220 nm,灵敏度:0.05 AUFS, 柱温:室温 , 流速:0.6ml/min。
2.2 对照品溶液的配制 精密称取齐墩果酸和熊果酸对照品 ,用
甲醇配制成 0.18mg/ml(齐墩果酸)和 0.488 mg/ml(熊果酸)的
混合对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备 精密称取泰脂安胶囊(040901)50 mg
置 25ml容量瓶中 ,加适量甲醇 , 超声提取(30Hz, 250W)10 min,
放置室温 , 加甲醇定容至 25 ml,滤过 ,取续滤液用 0.45 μm微孔
滤膜滤过备用。
2.4 线性实验 分别吸取齐墩果酸和熊果酸混合对照品溶液
1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0 ml分别加甲醇定容至 5 ml, 各进样 10 μl,
测定峰面积值 , 以峰面积对浓度进行线性回归 , 得齐墩果酸和熊
果酸回归方程分别为:A=2 892.8+2.19 ×106 C, r=0.999 8,
n=5;A=20 814.7+2.38×106C, r=0.999 0, n=5。
2.5 精密度实验 取供试品(040901)溶液 , 重复进样 5次 , 按齐
墩果酸和熊果酸的峰面积分别计算得齐墩果酸 RSD为 1.3%, 熊
果酸 RSD为 1.7%。
2.6 重现性实验 精密称取批号为 040901的供试品 , 照上述供
试品溶液制备方法制备 5份供试品溶液 ,依法测定 , 结果齐墩果
酸和熊果酸 RSD分别为 1.62%和 2.03%。
2.7 回收率实验 取已测定含量的供试品 5份 , 每份 50 mg(批
号为 040901), 精密称定 , 分别精密加入齐墩果酸和熊果酸对照
品各 1.0 mg, 照含量测定方法测定含量 ,计算加样回收率。结果
齐墩果酸和熊果酸平均回收率分别为 101.7%, 100.9%。
2.8 样品测定结果及含量限度 取泰脂安胶囊 5批 , 照含量测定
方法依法测定 , 按标准曲线法计算样品中齐墩果酸和熊果酸含
量 , 测定结果见表 1。
表 1 样品测定结果 %
批号 熊果酸含量 齐墩果酸含量
041201 7.54 3.05
041202 7.81 3.0
050101 9.93 4.33
050102 9.68 4.53
050103 8.15 3.33
3 讨论
在本实验中发现甲醇比例的增减对两者的分离与保留影响
较大 , 采用磷酸盐缓冲液使流动相显弱酸性 ,有利于此两种三萜
酸的分离 ,并为泰脂安胶囊的定量分析提供了准确的测定方法 ,
泰脂安胶囊中两酸的平均含量达 12.27%。
参考文献:
[ 1 ]  皮文霞 ,蔡宝昌 ,邱建红.HPLC法测定山茱萸中熊果酸和齐墩果酸
含量 [ J] .中草药 , 2003, 34(12):1103.
[ 2 ]  谢 莹 ,杭太俊 ,程 赞 ,等.高效液相色谱法测定中药中齐墩果酸
和熊果酸含量 [ J] .中国中药杂志 , 2001, 26(9):615.
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2006VOL.17NO.1 时珍国医国药 2006年第 17卷第 1期