全 文 ：HPLC法同时测定茅苍术中 3种聚乙烯炔成分的含量
方成武1 ,樊　敏 1, 2 ,刘守金 1 ,潘立兵 1
(1.安徽中医学院 /现代中药安徽省重点实验室 ,安徽 合肥 230031;2.平凉医学高等专科学校 ,甘肃 平凉
744000)
　　摘要　目的:建立同时测定茅苍术中苍术素醇 、(4E, 6E, 12E)十四癸三炔 8, 10-二烯 1, 3-二乙酸酯和苍术素
含量的 RP-HPLC方法。方法:色谱柱 AgilentTC-C18(250 mm×4.6mm, 5 μm);流速 1.0 mL/min;柱温 30℃;检测
波长 337 nm。结果:苍术素醇 、(4E, 6E, 12E)十四癸三炔 8, 10-二烯 1, 3-二乙酸酯和苍术素分别在 0.05 ～ 18.24
μg/mL(r=0.9999)、1.13 ～ 18.18 μg/mL(r=0.9997)、 0.04 ～ 94.40 μg/mL(r=0.9999)呈良好的线性关系;平均加
样回收率分别为 97.15%、99.65%、99.14%;RSD分别为 1.5%、1.0%、1.5%。结论:该方法可同时测定茅苍术中 3
种聚乙烯炔成分含量 , 分离度好 , 快速 、简便 、重现性好。
　　关键词　茅苍术;高效液相色谱法;苍术素醇;(4E, 6E, 12E)十四癸三炔 8, 10-二烯 1, 3-二乙酸酯;苍术素
　　中图分类号:R284.2 　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2010)06-0932-03
收稿日期:2010-02-23基金项目:安徽省教育厅自然基金重点项目(2005KJ046ZD)作者简介:方成武(1961-),男,副教授 ,硕士生导师 ,研究方向:中药资源与质量研究;Tel:0551-5169220, E-mail:cwfang1961@sina.com。
　　苍术为菊科植物茅苍术 Ateractylodeslancea
(Thunb.)DC.或北苍术 A.chinensis(DC.)Koidz.
的干燥根茎 ,具燥湿健脾 、祛风散寒 、明目之功;主要
用于脘腹胀痛 、泄泻 、水肿 、脚气痿躄 、风湿痹痛 、风
寒感冒 、夜盲等证〔1〕。江苏和安徽是茅苍术药材的
道地产区 ,主要分布于安徽大别山区和皖中沿江一
带丘陵山区。聚乙炔类化合物是苍术的特征性成
分 〔2〕。本研究首次建立同时测定茅苍术中 3种聚乙
烯炔类化合物含量的 HPLC方法 ,以期为客观评价
苍术药材质量提供科学依据。
1 　仪器与材料
　　岛津 LC-20AB高效液相色谱仪 , SPD-M20A型
紫外检测器 , CBM-20A型色谱数据处理仪(日本),
AG285型电子分析天平 , HS3120型超声提取仪 。乙
腈(SIGMA),甲醇为色谱纯 ,水为娃哈哈纯净水 ,其
他试剂均为分析醇 。苍术素醇 、(4E, 6E, 12E)十四
癸三炔 8 , 10-二烯 1, 3-二乙酸酯 、苍术素 3个对照
品由上海中药标准化研究中心提供 ,纯度均在 98%
以上。
　　苍术药材来源见表 1 ,原植物经安徽中医学院
药学院刘守金教授鉴定为菊科植物茅苍术 Aterac-
tylodeslancea(Thunb.)DC.,凭证标本存于安徽中
医学院标本中心(ACM)。
2 　方法与结果
2.1 　对照品溶液的制备 　精密称取苍术素醇 、
(4E, 6E, 12E)十四癸三炔 8, 10-二烯 1, 3-二乙酸
酯和苍术素对照品适量 ,加甲醇分别制成含苍术素
94.4 mg/L、(4E, 6E, 12E)十四癸三炔 8, 10-二烯
　表 1　 茅苍术样品来源
编号 采集时间 采集地点 海拔 /m
1 2006-10 皖舒城县大徽尖 880
2 2006-8 皖舒城县万佛山 900
3 2006-8 皖霍山县 550
4 2007-9 皖金寨县 600
5 2006-10 皖潜山县 530
6 2006-10 皖岳西县 620
7 2006-8 鄂罗田县 520
8 2006-10 苏茅山 120
9 2006-10 苏南京东横山 80
10 2006-9 皖宁国县 180
1, 3-二乙酸酯 45.2 mg/L和苍术素醇 45.6 mg/L的
对照品溶液 。在避光条件下进行对照品制备与保
存。
2.2　供试品溶液的制备　精密称定干燥的茅苍术
样品粉末(过 40目)0.25 g,置具塞锥形瓶中 ,精密
加入甲醇 50 mL,称重 , 超声提取 60 min,放冷 ,称
重 ,用甲醇补足失重 , 静置;取上清液用微孔滤膜
(0.45 μm)滤过 ,取续滤液作为供试品备用 ,在避光
条件下进行溶液制备和保存 。
2.3　色谱条件　AgilentTC-C18色谱柱(250 mm×
4.6 mm, 5 μm);流动相:乙腈 -水 ,梯度洗脱 , 0 ～ 40
min,乙腈 45% ～ 85%保持 5 min;流速:1.0 mL/
min;柱温:30℃;检测波长:337 nm;进样量:20 μL。
在此条件下 ,分别对供试液 、对照品溶液进行分析 ,
并对系统适用性参数进行考察 ,结果 3种聚乙烯炔
类化合物的理论塔板数均高于 3 000,分离度均大于
·932· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 33卷第 6期 2010年 6月DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2010.06.034
1.5。色谱图见图 1。
图 1　对照品(A)与茅苍术样品(B)的 HPLC色谱图
1.苍术素醇　2.(4E, 6E, 12E)十四癸三炔 8, 10-二烯 1, 3-
二乙酸酯　3.苍术素
2.4 　线性关系考察　精密吸取苍术素醇 、(4E,
6E, 12E)十四癸三炔 8, 10-二烯 1, 3-二乙酸酯和苍
术素对照品溶液适量 ,加甲醇配制成不同浓度的溶
液 ,进样量 20 μL,注入高效液相色谱仪 ,以进样量
(X)为横坐标 ,峰面积(Y)为纵坐标绘制标准曲线 ,
所得到的线形回归方程及相关参数见表 2。
　表 2　　　　茅苍术中 3种成分的线
形回归方程 、相关系数 、线形范围
对照品 回归方程 r 线形范围 /(μg/mL)
1 Y1 =197106X1 -3491.2 0.9999 0.05 ～ 18.24
2 Y2 =98436X2 -12004 0.9997 1.13 ～ 18.18
3 Y3 =268588X3 -105849 0.9999 0.04 ～ 94.40
　　注:1为苍术素醇;2为(4E, 6E, 1 2E)十四癸三炔 8, 10-二烯 1,
3二乙酸酯;3为苍术素
2.5 　精密度试验　精密吸取同一供试品溶液 20
μL,按 “2.3”项下色谱条件重复进样 6次 ,测定各自
的吸收峰面积 ,计算苍术素醇 、(4E, 6E, 12E)十四
癸三炔 8, 10-二烯 1, 3-二乙酸酯和苍术素的 RSD
值 ,分别为 1.7%、0.3%和 0.4%,表明仪器精密度
良好。
2.6 　稳定性试验　精密吸取同一供试品溶液 ,依
“ 2.3”项下色谱条件 ,分别在 0、4、8、12、24、48 h注
入液相色谱仪测定 ,测定峰面积并计算含量 ,结果苍
术素醇 、(4E, 6E, 12E)十四癸三炔 8, 10-二烯 1,
3-二乙酸酯和苍术素的 RSD分别为 1.4%、2.5%和
2.4%,表明供试品溶液在 48 h内稳定 。
2.7　重复性试验　精密称取同一批号的适量苍术
药材粉末 6份 ,分别按 “ 2.2”项下方法制备供试品
溶液 6份 ,每份精密吸取 20 μL,按 “ 2.3”项下色谱
条件进样 ,测定峰面积并计算含量 ,结果苍术素醇 、
(4E, 6E, 12E)十四癸三炔 8, 10-二烯 1, 3-二乙酸
酯和苍术素的 RSD值分别为 1.9%、 2.2%和
1.7%,表明该方法重复性较好 。
2.8　加样回收率试验　精密称定已知含量的苍术
药材粉末 0.125 g,共 5份 ,分别精密加入适量的对
照品 ,按 “ 2.2”项下方法制备供试液 ,测定峰面积并
计算含量 , 并计算回收率及 RSD, 结果苍术素醇 、
(4E, 6E, 12E)十四癸三炔 8, 10-二烯 1, 3-二乙酸
酯和苍术素的平均回收率分别为 97.15%、99.65%
和 99.14%;RSD分别为 1.5%、1.0%和 1.5%。
2.9　样品含量测定　精密称取不同产地茅苍术样
品适量 , 分别按 “ 2.2”项下方法制备供试液 , 按
“2.3”项下色谱条件进样测定 ,计算苍术素醇 、(4E,
6E, 12E)十四癸三炔 8, 10-二烯 1, 3-二乙酸酯和
苍术素的含量 ,结果见表 3。
　表 3　　　　不同产地茅苍术中 3种聚乙烯炔
类成分的含量(mg/g, n=3)
编号 1 2 3
1 1.14 0.81 0.30
2 1.20 0.77 0.54
3 1.35 0.62 0.60
4 0.91 0.74 0.30
5 0.93 0.66 0.52
6 1.17 0.54 0.56
7 1.31 0.61 0.75
8 0.20 1.73 8.68
9 0.17 1.76 9.99
10 0.11 1.52 9.58
　　注:1为苍术素醇;2为(4E, 6E, 12E)十四癸三炔 8, 10-二烯 1,
3-二乙酸酯;3为苍术素
3　讨论
　　苍术根茎主要含倍半萜类和聚乙烯炔类化合
物〔2〕 ,现代药理研究表明 ,聚乙烯炔类成分在抗炎 、
利胆及黄嘌呤氧化酶等方面均有良好的活性 ,其活
性与苍术的功效接近;该类成分在苍术药材中含量
高 ,且为苍术的特征成分 ,同属近缘种植物白术的根
茎中没有发现该类成分 ,因此以聚乙烯炔类化合物
苍术素醇 、(4E, 6E, 12E)十四癸三炔 8 , 10-二烯 1,
·933·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 33卷第 6期 2010年 6月
3-二乙酸酯和苍术素为指标 ,考察苍术药材的质量
更为合理 ,专属性强 。本研究首次建立的 HPLC同
时测定苍术药材中 3种聚乙烯炔类成分的含量的方
法 ,具有快速 、准确 、易行特点 ,为科学评价苍术药材
质量提供依据。
　　本实验研究结果表明 ,不同产地茅苍术中 3种
聚乙烯炔类成分含量存在着差异 ,并呈现一定的规
律 。根据茅苍术中 3种聚乙烯炔类成分含量可将
10批不同产地的茅苍术划分两个组:安徽霍山 、金
寨 、岳西 、潜山和舒城 ,湖北罗田产的茅苍术为长江
以北的大别山组;安徽宁国 、江苏茅山 、南京东横山
为长江以南低山组。各组内茅苍术中 3种聚乙烯炔
类成分含量无明显差异 ,而两个组间 3种聚乙烯炔
类成分含量均存在明显差异。大别山区与长江以南
低山产的茅苍术相比 ,苍术素醇含量高 5 ～ 10倍;而
(4E, 6E, 12E)十四癸三炔 8 , 10-二烯 1, 3-二乙酸
酯低 2 ～ 3倍;苍术素含量低 15 ～ 30倍 。本研究与
任冰如等 〔3〕用 RAPD技术分析不同居群苍术的亲
缘关系研究结果是一致的。
参 考 文 献
[ 1] 国家药典委员 .中华人民共和国药典 [ S] .一部 .北
京:化学工业出版社 , 2005:111.
[ 2] ReschM, HeilmannJ, SteigelA, etal.Furtherphenols
andpolyacetylenesfromtherhizomesofatractylodeslancea
andtheiranti-inflammatoryactivity[ J] .PlantaMed.,
2001, 67(5):437-439.
[ 3] 任冰如 , 贺善安 , 於虹 , 等 .用 RAPD技术评估苍术居
群间的亲缘关系 [ J] .中草药 , 2000, 31(6):458-461.
HPLC法测定伸筋草中 α-玉柏碱含量
邹桂欣 ,尤献民 ,王光函
(辽宁省中医药研究院 ,辽宁 沈阳 110034)
　　摘要　目的:建立 HPLC法测定伸筋草药材中 α-玉柏碱的含量。方法:采用 HPLC法对 10批不同海拔高度的
伸筋草药材及 2个伸筋草伪品中的 α-玉柏碱进行含量测定。结果:本方法中 α-玉柏碱在 0.164 ～ 1.312 μg范围内
线性关系良好 , r=0.9991, 平均加样回收率为 97.70%, RSD为 1.2%。 10批样品中 α-玉柏碱的含量在 0.083% ～
0.215%之间 , 其含量与产地有关而与海拔高度无明显关联 , 2批伪品中均未检出 α-玉柏碱。结论:首次建立了伸筋
草药材中 α-玉柏碱的含量测定方法 , 可以用于伸筋草药材的质量控制。
　　关健词　伸筋草;α-玉柏碱;HPLC;含量测定
　　中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2010)06-0934-03
收稿日期:2009-09-18基金项目:国家 863课题子课题(2004AA2Z3730-13)作者简介:邹桂欣(1965-),女,硕士 ,研究员 ,主要从事中药新药的质量控制研究;Tel:024-86803173, E-mail:yying 65@126.com。
　　伸筋草为石松科石松属植物石松 Lycopodium
japonicumThunb.的干燥全草 ,性温 ,味微苦 、辛。具
有祛风除湿 、舒筋活络的功效。用于治疗关节酸痛 、
屈伸不利等 〔1〕。中国药典 2005年版一部伸筋草药
材项下 ,只有对药材中的三萜类化合物的定性鉴别
及生物碱的薄层定性鉴别 。伸筋草所含 α-玉柏碱
的含量研究尚未见报道。本文首次建立 HPLC法测
定伸筋草中 α-玉柏碱的含量 ,并对 10批不同海拔
高度和产地的伸筋草药材及伸筋草药材的伪品垂穗
石松和舒筋草进行测定 ,以期为伸筋草药材的质量
控制提供参考依据。
1 　仪器与材料
1.1 　仪器　LC-10ATVP液相泵 、SPD-10AT紫外检
测器(日本岛津)。
1.2　材料　实验用伸筋草药材来源见表 1。上述
各批次药材经辽宁中医药大学鉴定教研室李峰教授
鉴定为石松科石松属植物石松 Lycopodiumjaponicum
Thunb.的干燥全草 。 α-玉柏碱对照品 (自制 ,纯度
95.18%)。甲醇为色谱纯 ,水为超纯水 ,其他试剂
为分析纯 。
2　方法与结果
2.1　色谱条件　色谱柱:ODSHYPERSIL(200 mm
×4.6 mm, 5 μm)(北京八方公司 ), SpherigelC18
(200 mm ×4.6 mm, 5 μm)(大连江申分离科学技
术公司提供 );流动相:甲醇-水 (65 ∶35);柱温:
25℃;流速:1.0 mL/min;检测波长:248 nm。理论板
·934· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 33卷第 6期 2010年 6月