全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2010，25(3)∶365 ～ 366
基金项目:泸州市指导性项目(泸市科［2007］64 号);四川省教育厅重点项目(No. 2005A076)
作者简介:何兵(1978 ―)，男，助理研究员，从事新药质量标准研究工作。Email:lyhb2008@ 126. com
HPLC测定楤木花中的 3，5 －二咖啡酰奎宁酸
何 兵，田 吉，刘 艳，肖顺汉
(泸州医学院药物研究所，四川 泸州 646000)
摘要:目的 建立测定楤木花中 3，5 －二咖啡酰奎宁酸含量的方法。方法 采用 HPLC 法，色谱柱为 Dikma Kromasil C18柱
(250 mm ×4. 6 mm，5 μm)，流动相为乙腈– 0. 1%磷酸溶液(23∶77)，检测波长为 328 nm。结果 3，5 －二咖啡酰奎宁酸
0. 404 ～ 4. 040 μg与峰面积呈良好的线性关系(r = 0. 9999)，平均加样回收率为 98. 74%，RSD = 0. 62%(n = 9)。结论 所用方
法简便、快速、准确，可作为测定楤木花中 3，5 －二咖啡酰奎宁酸含量的方法。
关键词:楤木花;3，5 －二咖啡酰奎宁酸;高效液相色谱法
中图分类号:R917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2010)03 － 0365 － 02
Determination of 3，5 － dicaffeoylquinic acid in Aralia chinensis flower by HPLC
HE Bing，TIAN Ji，LIU Yan，XIAO Shun － han
(Institute of Materia Medica of Luzhou Medical College，Luzhou，Sichuan，646000 P. R. China)
Abstract:OBJECTIVE To establish an HPLC method for the determination of 3，5 － dicaffeoylquinic acid in Aralia chinensis
flower.METHODS The separation was carried out on a Dikma Kromasil C18 column (250 mm ×4. 6 mm，5 μm). The mobile phase
was acetonitrile － 0. 1% phosphoric acid(23∶77). The detective wavelength was set at 328 nm. RESULTS The calibration curve
showed a good linearity over the range of 0. 404 － 4. 040 μg(r = 0. 9999). The average recovery was 98. 74% with RSD of 0. 62% .
CONCLUSION This method is simple，rapid，accurate and can be used as a quantitative analysis method for Aralia chinensis flower.
Key words:Aralia chinensis flower;3，5 － dicaffeoylquinic acid;HPLC
CLC number:R917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2010)03 － 0365 － 02
楤木花为五加科楤木属植物楤木 Aralia chinen-
sis L.的干燥花，性苦、涩、平，具有止血功效，主要用
于治疗吐血［1］。国内还无文献报道楤木花相关成
分的研究及含量测定方法。作者的前期研究发现:
楤木花富含 3，5 － 二咖啡酰奎宁酸(3，5 － dicaf-
feoylquinic acid，DCQA)。研究表明:二咖啡酰奎宁
酸类物质具有促凝血、降血脂、抗炎、抗氧化、抗肝炎
及 AIDS病毒等作用［2］，因此，采用 HPLC 对楤木花
中所含的 DCQA进行了定量测定。
1 实验部分
1. 1 仪器与试药
P680A － PDA100 高效液相色谱系统(美国戴
安);CQX25 － 06 超声波清洗器(上海必能信超声有
限公司，功率 250 W，频率 25 kHz)。3，5 －二咖啡酰
奎宁酸对照品(DCQA，成都普瑞法有限公司，批号:
080530，纯度 99. 4%);乙腈为色谱纯;其余试剂为
分析纯;水为重蒸馏水;楤木花样品于 2008 年 7、8
月采自四川泸州纳溪龙车镇，鉴定为五加科楤木属
植物楤木 Aralia chinensis L.的花。
1. 2 方法与结果
1. 2. 1 色谱条件与系统适用性 色谱柱为 Dikma
Kromasil C18柱(250 mm ×4. 6 mm，5 μm)，流动相为
乙腈 － 0. 1%磷酸(23∶77)，检测波长为 328 nm，柱
温为 30 ℃，流速为 1. 0 mL·min －1，进样量为 10 μL。
在此色谱条件下，分别精密吸取 10 μL“1. 2. 2”项的
对照品溶液、供试品溶液，进样，记录色谱图(图 1)。
DCQA的保留时间约为 8. 6 min，与其前后色谱峰的
分离度分别为 4. 50、3. 45，其色谱峰对称，理论板数
以 DCQA峰计算为 1. 073 × 104，DCQA 峰的纯度因
子为 999。
t/min
0 5 10 15 20 0 5 10 15 20
3,
5-
di
ca
ffe
oy
lq
ui
ni
c
ac
id
3,
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idA B
图 1 对照品(A)、样品(B)溶液的 HPLC色谱图
Fig 1 HPLC chromatograms of control solution(A)and sample
solution(B)
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2010.03.033
1. 2. 2 溶液的制备 精密称取 10. 1 mg DCQA对照
品，置50 mL棕色量瓶中，加50%甲醇溶解定容，即得
0. 202 mg·mL －1对照品溶液。取约 0. 5 g 样品细粉，
精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 50 mL 50%甲
醇，称定重量，超声处理 45 min，取出，放冷，再称定重
量，用 50%甲醇补足减失的重量，摇匀，进样前用
0. 45 μm的微孔滤膜过滤，滤液即为供试品溶液。
1. 2. 3 线性关系的考察 分别精密吸取 2、4、6、8、
10、15、20 μL对照品溶液，按“1. 2. 1”项条件测定。
以峰面积对进样量进行线性回归，DCQA 的回归方
程为:Y = 52. 83X + 0. 20(r = 0. 9999)。结果表明:
DCQA进样量 0. 404 ～ 4. 040 μg 与峰面积的线性关
系良好。
1. 2. 4 精密度试验 取“1. 2. 2”项的对照品溶液，
连续重复进样 6 次，测定峰面积。计算其 RSD =
0. 28%，表明仪器精密度良好。
1. 2. 5 稳定性试验 取“1. 2. 2”项的供试品溶液，
分别于制备后 0、4、8、12、24、48 h 时进样，测定峰面
积。计算其 RSD = 1. 03%，表明供试品溶液在 48 h
内稳定。
1. 2. 6 重复性试验 取同一批楤木花样品 6 份，按
“1. 2. 2”项的方法制备供试品溶液，分别进样测定，
计算得 DCQA 的平均含量为 18. 2156 mg·g －1，
RSD = 0. 57%。表明方法的重复性良好。
1. 2. 7 加样回收试验 分别精密称取 0. 25 g 已知
含量(18. 2156 mg·g －1)的样品细粉 9 份，均分为 3
组，分别精密添加 2、3、4 mL 1. 536 mg·mL －1对照品
溶液，按“1. 2. 2”项的方法制备供试品溶液，再按
“1. 2. 1”项的条件测定，计算回收率，结果见表 1。
所用方法具有良好的回收率。
1. 2. 8 样品的测定 取对照品溶液和供试品溶液，
按“1. 2. 1”项的色谱条件进样测定，并以峰面积按
外标法计算 DCQA的含量，结果见表 2。
2 讨论
曾分别考察了制备供试品溶液时不同提取方法
(超声、回流)，提取溶剂(甲醇、75%甲醇、50%甲
醇、25%甲醇、水和流动相)，溶剂体积(10、25、50、
表 1 加样回收率的测定结果(mg，n =9)
Table 1 Results of recovery test(mg，n =9)
Original Added Detected Recovery /% 珔X /% RSD /%
4. 5703 3. 0720 7. 5787 97. 93 98. 74 0. 62
4. 5830 3. 0720 7. 6200 98. 86
4. 5922 3. 0720 7. 6497 99. 53
4. 5575 4. 6080 9. 1241 99. 10
4. 5794 4. 6080 9. 1556 99. 31
4. 6140 4. 6080 9. 1381 98. 18
4. 6031 6. 1440 10. 7071 99. 35
4. 5667 6. 1440 10. 6031 98. 25
4. 5812 6. 1440 10. 6122 98. 16
表 2 楤木花中 DCQA含量的测定结果(n =3)
Table 2 Determination of Aralia chinensis flower(n =3)
Batch No. DCQA /% RSD /%
20080705 1. 82 0. 55
20080719 2. 36 0. 47
20080726 2. 05 0. 39
20080802 1. 53 0. 36
20080809 2. 17 0. 51
75、100 mL)及提取时间(15、30、45、60 min)等条件。
结果表明:样品以 50 mL 50%甲醇超声提取 45 min
所得含量最高，杂质峰较少。
采用二极管阵列检测器在 190 ～ 380 nm范围内
分别扫描 DCQA对照品、供试品溶液中 DCQA 峰的
紫外吸收，两溶液中 DCQA 的最大吸收峰分别为
327. 5、327. 6 nm，故选用 328 nm作为测定波长。
DCQA是绿原酸的异构体，故参考文献［3］测定
金银花中绿原酸的流动相体系即乙腈 － 0. 4%磷酸
溶液(13∶87)，由于二者极性有一定差异，故调整
流动相比例，当乙腈 － 0. 1%磷酸溶液比例为 23∶
77 时，分离效果最佳，保留时间适宜，故采用此
条件。
参考文献:
［1］ 南京中医药大学.中药大辞典 ［M］. 2 版. 上海:上海科学技
术出版社，2006:3449.
［2］ 李祖晟，朱志安.二咖啡酰奎宁酸药理实验研究进展［J］. 医
学综述，2004，10(4):249 － 251.
［3］ 中华人民共和国国家药典委员会. 中国药典 ［S］. 一部. 北
京:化学工业出版社，2005:152.
收稿日期:2009 － 06 － 29
663 华 西 药 学 杂 志 第 25 卷