全 文 ：收稿日期:2007-07-27
文章编号:1002-2724(2007)05-0056-03
球根秋海棠“金正日花”的微体快速繁殖试验
宋仪农
(临沂师范学院 , 276000)
摘要:试验表明:球根秋海棠在诱导外植体分化形成愈伤组织的过程中以 BA 、NAA 较为适宜;经 M S+6-BA(0.8 ～
1.2)mg/ L+NAA0.1mg/ L+糖 30mg/ L+琼 7g/ L 为增殖培养基 , 有利于提高球根秋海棠的分生倍数;以 1/2MS +
IAA0.5mg/ L+糖 20g/ L+琼脂 7g/ L为根培养基 , 则有利于提高生根率。
关键词:球根秋海棠;大量元素;植物激素;分生倍数
中图分类号:S722.3+7　　　　　　　　　　文献标识码:A
Fast Micro-propagation of Begonia Tuberhybrida
Song Yinong
(L inyi No rmal Univer sity , Liny i 276000)
Abstract:The Study on the on quick reproduction o f Begonia Tuberhybrida leaf is show ed:Begonia Tuberhybrida process
China-I sr ael BA , NAA establishing the body becoming diuided taking form the mo re hurting or ganization in the guidance
outside is comparatively pro re r;7 g/ L are to prolifera te a culture medium , mito genic beneficial to improv ing the corm begonia
times with MS +6 BA(0.8～ 1.2)mg/ L + NAA0.1 mg/ L+ candy 30 g/ L + agar s;7 g/ L are culture mediums w ith 1/2 M S
+ IAA0.5mg/ L + candy 30 g/ L + agar s;7 g/ L a re culture mediums with 1/2 MS + IAA0.5 mg/ L + candy 20 g/ L+agar s
take roo t , then beneficial to improving take roo t ra te.
Key words:Begonia Tube rhybrida;M acro-element;Phy tohormones;Gene ration multiple
　　球根秋海棠“金正日花”(Begonia tuberhybrida Vosa)又
名球根海棠 、茶花海棠 , 为秋海棠科秋棠属多年生草本植物 ,
球根秋海棠花大色艳 ,兼具茶花 、牡丹 、月季 、香石竹等的姿 、
色 、香 ,是秋海棠之冠 ,也是世界重要盆栽花卉之一。球根秋
海棠的繁殖方式主要靠扦插 、分株 , 繁殖系数低且速度慢 ,不
能满足市场的需求 , 而微体快速繁殖却能解决这一矛盾 ,为
此 ,以温室内培养的球根秋海棠为材料 , 对影响球根秋海棠
微体快繁的培养基种类 、大量元素及植物激素等进行了研
究 ,并将其快繁程序总结如下。
1　材料与方法
1.1　材料
从温室内培养的球根秋海棠植株上选取嫩叶 , 先用洗衣
粉刷洗表面 ,再用自来水冲洗 0.5h ,放入广口瓶内再用 75%
的乙醇浸泡 3 ～ 4s , 然后放入 0.1%的升汞溶液中杀菌 6 ～
7min ,再用无菌水冲洗 5～ 6 次 ,在以上的过程中要不断的摇
动 ,最后用无菌滤纸吸干。然后在无菌的条件下将材料分割
成 1cm2 左右 的小块 , 接种于配置好的培养基中。
1.2 培养基试验
1.2.1　诱导试验　设置 MS+(BA0.5mg/ L+NAA0.1mg/ L)、
(BA0.5mg/ L+2 , 4-D1mg/ L)、(BA2mg/ L+NAA0.5mg/ L)、
(KT2mg/ L+NAA0.5mg/ L)+糖30g/ L+琼脂 7g/ L4个处理。
1.2.2　大量元素试验　设置 2MS 、MS 、1/2MS 、1/ 4MS(附
加 BA0.8mg/ L+NAA0.1mg/ L+糖 30g/ L+琼脂 7g/ L)4
个处理。
1.2.3　分生试验　设置 MS+BA0.4、0.8 、1.2 、1.6mg/ L+
NAA0.05 、0.10 、0.15、0.20mg/ L+糖 30g/ L+琼脂 7g/ L共
16 个处理。
1.2.4　生根试验　设置 1/ 2MS +IAA0.1、0.3 、0.5 、0.7 、
0.9mg/ L+糖 20g/ L+琼脂 7g/ L共 5个处理。
1.3　培养条件
培养温度 22±2℃, 光照 1600Lx 左右 , 每天光照 10 ～
12h。
2　结果与分析
2.1　无菌苗的建立
表1　激素种类及浓度对球根秋海棠愈伤组织诱导的影响
处理 附加激素(m g/ L) 外 植 体数
产 生愈
伤组织
愈伤组织诱
导率(%)
Ⅰ BA0.5+NAA0.1 20 9 45.0
Ⅱ BA0.5+2 , 4-D1 32 12 37.5
Ⅲ KT2+NAA0.5 20 7 35.0
Ⅳ BA2+NA A0.5 42 20 47.6
　　将处理好的球根秋海棠接种于不同培养基内(表 1),经
过 14d 的培养后 , 外植体明显膨大 , 26d 后相继出现愈伤组
织。由表 1可知 ,附加不同的激素的培养基 , 外植体的反应
不同。细胞分裂素 BA(0.5mg/ L)浓度相同时 , 附加 NAA 的
诱导率要高于附加 2 , 4-D的诱导率;NAA(0.5mg/ L)浓度
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山东林业科技　　2007 年第 5期　　总 172 期　　SHANDONG FORESTRY SCIENCE AND TECHNOLOGY　　2007.No.5
相同时 ,附加 BA 的诱导率要高于附加 KT 的诱导率。结果
表明 , BA与 NAA 诱导球根秋海棠外植体形成愈伤组织较
为适宜。同时在芽的诱导和增殖时 , 加入适量(1mg/ L)间苯
三酚 ,可提高芽的分化率。
2.2　大量元素对球根秋海棠分生倍数及萌芽率的影响
大量元素是基本培养基的重要组成部分。 大多数培养
基的差异体现在大量元素的浓度上。 该试验以 MS 培养基
中的大量元素为基础 , 设置 2MS 、MS 、1/ 2MS 、1/4MS4 个处
理。其它成分相同。试验结果见表 2。
F值测定结果表明:各处理间差异显著。分生倍数随大
量元素增加而增加。其中以 2MS 、MS 培养基的分生倍数比
较高。分别达到 7.3及 7.0。而萌芽率则随大量元素增加而
降低 ,其中以 2MS 培养基的萌芽率为最低(18.6%), 且与
MS1/2 、MS 、1/ 4MS 培养基的萌芽率差异比较显著。综合以
上分析可知球根秋海棠分生培养基中的大量元素以 MS 最
好。另外 ,从试验中还可以看出 , 提高无机盐的浓度 , 可防止
培养基的褐变。
表 2　大量元素对球根秋海棠微体快繁分生倍数及萌芽率的影响
处理 分生倍数 萌芽率(%)
2M S 7.3 18.6
MS 7.0 40.4
1/2M S 5.2 42.8
1/4M S 3.8 44.1
2.3　球根秋海棠微体快繁时植物激素对分生倍数的影响
植物激素对植物微体快繁时分生分化具有重要的作用。
以激素 BA 和 NAA 作为供试因子 , 研究了二者的结合效应 ,
结果见表 3。
表 3　BA、NAA 不同浓度的配比对球根秋海棠微体快繁分
生倍数的影响
NAA(mg/ L) BA(mg/ L)
0.4 0.8 1.2 1.6
0.05 3.38 7.00 6.80 4.50
0.10 6.40 7.22 7.15 5.27
0.15 5.34 6.95 6.78 4.42
0.20 3.05 4.93 5.67 3.62
　　F值测定结果表明:各处理间差异极显著 , 从试验结果
可看出:当 NAA 浓度为 0.1 mg/ L 时 , BA 浓度为 0.8 mg/ L
时 ,繁殖系数达到 7.2。当 NAA 浓度超过 0.10 mg/ L 时 ,繁
殖系数有下降趋势 ,即繁殖系数随 NAA 浓度的增加而下降 ,
呈现极显著负相关。同时还可看出:当 BA 浓度为 0.8 ～
1.2 mg/ L时球根秋海棠的分生倍数最高。关于丛芽的长度 ,
若培养基只加 NAA , 则有利于提高丛芽长度 , 但易全部生
根。因此 ,为提高繁殖系数和丛生芽的高度 , 本试验认为以
MS+BA0.80 mg/ L+ NAA0.10 mg/ L+糖 30 mg/ L+琼脂
7g/ L 为增殖培养基比较理想 。同时发现 , 继代培养的时间
一般 30 d 左右为宜 , 时间过短 , 能生根的苗太少 , 时间超过
40 d , 愈伤组织易变褐死亡 ,并且培养基易变干。
2.4　生根培养基的筛选
植物激素对植物微体快繁生根的影响也比较大。本试
验生根培养基用 1/2MS+糖 20 g/ L+琼脂 7g/ L ,附加不同
浓度的 IAA 。表 4显示 , IAA 浓度在 0.1 ～ 0.9 mg/ L 之间 ,
随着 IAA 浓度的增加 , 生根率也随之增加 , 当 IAA 浓度为
0.5mg/ L时 , 生根率最高 , 为 92.2%;平均根长最长为
2.4 cm。当 IAA 浓度超过 0.5 mg/ L 时 , 生根率有所下降。
研究还发现:IAA 浓度在 0.1 ～ 0.9 mg/ L 范围内 ,随着浓度
的提高 ,生根所用的时间愈短 , 根的生长也逐渐变粗。在
IAA浓度为 0.5mg/ L时 , 生根率最高 , 平均根长最长 , 粗细
也正常 ,生根时间也比较短。所以认为该浓度为球根秋海棠
生根较理想的浓度。
表 4　不同浓度 IAA对球根秋海棠微体快繁生根的影响
IAA(mg/ L) 生根率(%)平均根长(cm) 开始生根天数(天)
0.1 18.6 0.9 12
0.3 72.8 1.0 9
0.5 92.2 2.4 8
0.7 90.0 1.4 8
0.9 90.0 1.0 7
2.5 试管苗的移栽
当试管苗高约 3cm 并生有 3 ～ 4 条 1cm 左右长的新根
时 ,即可进行移栽 , 把已生根的植株在温室内打开三角瓶盖 ,
炼苗 5～ 6d 后 ,取出试管苗 , 要小心的洗净根际的营养液 ,然
后移至用 1/ 2MS 大量元素营养液浸好的蛭石或配制好的营
养土中。并放于温室中 , 保持温度 20℃～ 22℃, 移栽初期要
保持较高湿度 ,最好用青霉素等杀菌剂喷雾来保持湿度 , 以
2 ～ 3周后 , 移至散射的自然光下炼苗 1～ 2 周 ,再移到花盆中
进行正常管理即可 ,其成活率可达 86%以上。
3　小结
3.1　进行球根秋海棠的微体快繁时 , 植物激素的种类及浓
度的 影 响 比 较 显 著 , 诱 导 时 以 MS + BA1mg/ L +
NAA0.5 mg/ L+糖 30 g/ L+琼脂 7g/ L 为培养基 ,有利于提
高愈伤组织的分化率。
3.2　以 MS +BA0.8mg/ L+NAA0.10mg/ L+糖 30g/ L+
琼脂 7g/ L为分生培养基 , 分生倍数可达 7 以上。
3.3　以 1/ 2MS+IAA0.5 mg/ L+糖 20 g/ L+琼脂 7g/ L为
生根培养基 , 生根率达 90%以上。且培养 20 d 后 , 根长达
2 cm以上 ,植株生长旺盛。另外 , 进行球根秋海的初代诱导
培养时 ,以叶柄作为外植体最好。
参考文献:
[ 1] 裘文达.园艺植物组织培养.上海科学技术出版社 , 1986
[ 2] 谭文澄.观赏植物组织培养技术.中国林业出版社 , 1991
[ 3] 韦三立.花卉组织培养.中国林业出版社 , 2001
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山东林业科技　　　　　　　　宋仪农:球根秋海棠“金正日花”的微体快速繁殖试验　　　　　　　　2007 年第 5 期