全 文 ：第17卷 第9期
Vol.17 No.9
2011年 9月
September.2011Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
不同产地南板蓝根抗病毒作用的研究*
罗霄山 1，杜铁良 2，张丹雁 3，洪笃云 1，陈玉兴 2
（1.广东省第二中医院，广东 广州 510095；2.广东省中医研究所，广东 广州 510095；
3.广州中医药大学，广东 广州 510405）
[摘要] 目的：观察不同产地南板蓝根抗病毒作用的差异。方法：分别建立流感病毒FM1株小鼠感染致死试验模型、单纯
疱疹病毒I型家兔、小鼠感染模型等，对比考察不同产地南板蓝根抗病毒药效。结果：湛江、韶关产南板蓝根能明显延长流感病
毒FM1株感染小鼠的平均存活天数，减少实验动物的死亡数；江门、湛江、韶关、梅州产南板蓝根能明显改善家兔HSV-1角膜
炎病变的第7天、第14天评分值，显著延长HSV-1感染小鼠平均存活时间，明显减轻小鼠急性感染期脑组织HSV抗原阳性表
达。结论：南板蓝根具有抗病毒作用，但不同产地有一定的差异，并以韶关产南板蓝根作用较好，湛江、江门产次之，梅州产南
板蓝根作用再次。
[关键词] 不同产地；南板蓝根；流感病毒FM1；单纯疱疹病毒
[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X（2011）09-0066-03
Study on pharmacological functions of Radix Isatidis grown in different regions
Luo Xiao-shan1, DU Tie-liang2, Hong Du Yun1, CHEN Yu-xing2
(1.The second traditional chinese medicine hospital of guangdong province, Guangdong Guangzhou 510095;
2.Guangdong, guangzhou institute of traditional chinese medicine 510095;
3.Guangzhou university of traditional chinese medicine, Guangdong Guangzhou 510405)
[Abstract] Objective To study the antiviral effect of the Baphicacanthis cusiae Rhizoma et Radix which come from differ－
ent producing areas.Methods:The animal model that the mice infected with influenza virus FM1,rabbits and mice infected with
herpes simplex virus type I(HSV-1) were established,comparing the antiviral effects of different sources of the Baphicacanthis
cusiae Rhizoma et Radix. Results:The Baphicacanthis cusiae Rhizoma et Radix which are from Zhanjiang, Shaoguan had signif－
icantly extend the mice which infected with influenza virus FM1 survival time and reduce the rate of experimental animals
dead; different sources of the Baphicacanthis cusiae Rhizoma et Radix significantly improved the scores of keratitis in rabbits
with lesions infected with HSV-1 in 7 d, 14 d, significantly prolonged the average survival time of mice infected with HSV-1,
significantly reduced brain tissue of mice infected with HSV antigen positive.Conclusion:The Baphicacanthis cusiae Rhizoma et
Radix have antiviral activity, there are some differences between different sources, and the role of Shaoguan produce the best,
Zhanjiang, Jiangmen produce better, Meizhou production followed.
[Keywords] Baphicacanthis cusiae Rhizoma et Radix;influenza virus FM1; herpes simplex virus
南板蓝根来源于爵床科植物马蓝 [Baphicacanthus cusia
(Nees) Bremek.]的干燥根茎及根，主产于我国西南、华南及华
东地区，具有清热解毒、凉血消斑的功效，临床上多用于瘟疫
时毒，发热咽痛，温毒发斑，丹毒等症[1]，在我国南方地区应用
十分广泛，是著名的南药之一。当前，随着南板蓝根抗病毒有
效成分腺苷、喹唑酮[2-3]等化合物的相继发现，使得该药更是
成为抗病毒的焦点南药，其在SARS、H1N1等病毒性疾病的临
床治疗方面正发挥着重要作用。国内已有学者研究南板蓝根
的抗病毒作用[4-5]，但多为体外实验，目前尚无进一步的体内
试验。本文探究不同产地南板蓝根的体内抗病毒作用，现总
结如下。
1 材 料
1.1 药品与试剂 南板蓝根制剂（分别采自韶关、湛江、江
门、梅州），由广东省中医研究所提供，批号20091210；DMSO
（TEDIA）、胎牛血清、RPMI1640培养基、非必需氨基酸（Gib－
co）、L-谷氨酰胺、异氮唑蓝、台盼蓝（北京鼎国生物技术有限
公司）；乌拉坦（国药集团化学试剂有限公司）；SP试剂盒和单
克隆抗体CK-19（武汉意德产品）；消化酶为Ⅰ、Ⅳ型胶原酶和
透明质酸酶（Sigma）混合配制而成，终浓度为0.1%，现用现
配。
*基金项目：广东省科技厅资助项目（83104）；广东省中医药
局资助项目（2008223）
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DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2011.09.046
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1.2 细胞及病毒株标准品 流感病毒FM1鼠肺适应株，由广
州中医药大学热带病研究所病毒室提供。单纯疱疹病毒1型
（HSV-1）SM44株，由武汉大学病毒研究所提供；Vero细胞，购
自美国ATCC公司。
1.3 仪器 BX51显微镜（日本奥林巴斯）、JJ3000动物电子秤
（G&G公司）、AB2-4S1型生物安全柜（新加坡ESCO）、CO2培养
箱（美国Thermo）、680型酶标仪（美国伯乐）、YDS-6液氮罐（四
川东亚机电）；-80℃低温冰箱（美国Thermo）、万分之一电子
分析天平（德国赛多利斯）、LDZX-40AZ立式自动电热压力蒸
汽灭菌器（上海申安）。
1.4 实验动物 SPF级NIH小鼠，雌雄各半，体重18-22 g；普
通级健康新西兰兔，雌雄各半，体重2.0-3.0 kg，裂隙灯显微镜
下检查双眼无疾病；SPF级KM小鼠，雌雄各半，体重18-22 g。
均购自广东省医学实验动物中心。
2 方法与结果
2.1 南板蓝根对流感病毒FM1株致小鼠死亡的影响 取SPF
级NIH小鼠100只，体重18-22 g，雌雄各半。于实验条件下适
应环境后，随机分为10组，分别为正常对照组，模型对照组，
江门产南板蓝根（JMBLG）3.90 g生药·kg-1组、1.95 g生药·kg-1
组，湛江产南板蓝根（ZJBLG）3.90 g生药·kg-1组、1.95 g生药·
kg-1组，梅州产南板蓝根（MZBLG）3.90 g生药·kg-1组、1.95 g生
药·kg-1组，韶关产南板蓝根（SGBLG）3.90 g生药·kg-1组、1.95 g
生药·kg-1组，每组10只。各组小鼠按剂量灌胃给药，正常对照
组和模型对照组给予等剂量的蒸馏水，给药体积为20 mL·kg-1，
1次/天，连续7天。除正常对照组外，其余各组小鼠乙醚轻度麻
醉，以15个LD50流感病毒液（FM1株和PR8株）滴鼻感染，35
μL/只，继续3天。观察各组动物在给予菌液后3 d内的死亡数、
存活数以及存活天数。计算小鼠的死亡率和保护率，比较各
组差异。（见表1）
表1 板蓝根对流感病毒FM1株致小鼠死亡的影响
（x±s，n=10）
组别 给药剂量 死亡数 保护率 平均存活
g生药·kg-1 (只) (%) 天数
正常对照组 - 0 - 3.0±0d
模型对照组 - 10 0 0.66±0.44b
JMBLG 3.90 10 0 1.04±0.34b
JMBLG 1.95 10 0 0.99±0.46b
ZJBLG 3.90 6 40 2.10±0.96a b
ZJBLG 1.95 7 30 1.79±0.91b d
MZBLG 3.90 10 0 0.71±0.45b
MZBLG 1.95 10 0 0.69±0.41b
SGBLG 3.90 5 50 2.38±0.68d
SGBLG 1.95 6 40 2.15±0.83a d
注：与正常对照组比较，aP<0.05，bP<0.01；与模型组相比
较，cP<0.05，dP<0.01。
2.2 不同产地南板蓝根抗单纯疱疹病毒I型作用的比较研究
2.2.1 病毒扩增 单纯疱疹病毒I（HSV-1 SM44）毒株接种
在传代Vero单层细胞上，于第2天开始在倒置显微镜下观察细
胞病变效应。第3天吹打细胞使从细胞瓶壁上脱落，得病毒原
液。细胞培养液调整TCID50（半数组织培养感染量）为10-7-
10-8，-20℃保存备用。
2.2.2 不同产地板蓝根对家兔HSV-1角膜炎的影响 取普
通级健康新西兰兔36只，体重2.0-3.0 g，雌雄各半。随机分为
正常对照组、模型对照组、JMBLG1.40 g生药·kg -1组、
ZJBLG1.40 g生药·kg -1组、MZBLG1.40 g生药·kg -1组、SG －
BLG1.40 g生药·kg-1组。除正常对照组外，参照文献方法造模[6]，
接种病毒24 h后在裂隙灯下家兔兔眼出现畏光、流泪，提示造
模成功。接种病毒24 h开始按剂量灌胃给药，给药体积为10
mL·kg-1，1次/日，连续14 d，正常对照组和模型对照组给予等
体积的蒸馏水。每天在裂隙灯下观察病变程度并评分。与正
常对照组比较，模型对照组家兔眼病变第7天、第14天评分值
均显著升高（P<0.01），提示实验造模成功。与模型对照组比
较，SGBLG、ZJBLG组家兔眼病变第7天、第14天评分值均明显
减小（P<0.01），JMBLG组家兔眼病变第7天、第14天评分值也
明显减小（P<0.05），PYBLG组家兔眼病变第7天、第14天评分
值只是程度上减轻，但差异无统计学意义（P>0.05）。等剂量南
板蓝根相比，其抑制家兔HSV-1型角膜炎效应具有SGBLG>
ZJBLG>JMBLG>MZBLG。（见表2-3）
表2 家兔HSV-1角膜炎的评分标准
评分标准 特征
0 正常
0.5-0.9 上皮非弥漫性轻度水肿，角膜透明
1.0-1.9 明显水肿，角膜轻度混浊，虹膜清晰可见
2.0-2.9 上皮严重水肿伴基质水肿，角膜弥散性混浊可见
前房和虹膜
3 严重基质水肿，角膜混浊增厚，前房模糊，瞳孔大
小勉强可见
4 混浊，前房结构无法辨认
表3 不同时间各组间HSK兔眼病变综合疗效评分均数比较
（x±s，n=6）
组别 剂量/g生 第7天评 第14天评 14 d抑制率
药·kg-1 分值 分值 (％)
正常对照组 - 0.00±0.00 0.00±0.00 -
模型对照组 - 3.77±0.32b 2.68±0.24b -
SGBLG 1.40 1.82±0.22d 1.66±0.23d 38.06
ZJBLG 1.40 2.31±0.33d 2.18±0.26d 18.66
JMBLG 1.40 3.24±0.39c 2.35±0.37c 12.31
MZBLG 1.40 3.48±0.32 2.49±0.28 7.09
注：与正常对照组比较，aP<0.05，bP<0.01；与模型组相比
较，cP<0.05，dP<0.01。
2.2.3 不同产地南板蓝根对感染HSV-1小鼠死亡率和存活
时间的影响 取SPF级小鼠100只，体重18-22 g，雌雄各半。随
机分10组，分组分组方法同“2.1”。各组小鼠按剂量灌胃给药，
正常对照组和模型对照组给予等剂量的蒸馏水，给药体积为
20 ml·kg-1，1次/天，连续7 d。于实验第7天除正常对照组外其
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余各组小鼠均腹腔注射0.2 mL HSV-1，1次/天，连续8 d。每天
观察记录小鼠反应情况，记录病毒感染小鼠的死亡率和存活
时间，8 d后仍未死亡者按8 d计。计算各组小鼠生存时间延长
率。（见表4）
表4 对病毒感染小鼠死亡率及存活时间的影响
（x±s，n=11）
组别 剂量g生 平均存活 延长率 死亡率
药·kg-1 时间(d) (％) (％)
正常对照组 - 8.00±0.00 - -
模型对照组 - 4.67±0.64b - 90.0
SGBLG 3.90 7.86±0.51d 68.31 10.0
SGBLG 1.95 6.62±0.69d 41.76 20.0
ZJBLG 3.90 6.94±0.67d 48.61 20.0
ZJBLG 1.95 6.04±0.55d 29.34 40.0
JMBLG 3.90 5.95±0.81a c 27.41 40.0
JMBLG 1.95 5.13±0.77a 9.85 60.0
MZBLG 3.90 5.96±0.72a c 27.62 40.0
MZBLG 1.95 5.05±0.76a 8.14 70.0
注：与正常对照组比较，aP<0.05，bP<0.01；与模型组相比
较，cP<0.05，cP<0.01。
2.2.4 不同产地南板蓝根对小鼠单纯疱疹病毒I型（HSV-1）
脑内感染的影响 取SPF级KM小鼠70只，体重18-22g，雌雄
各半。随机分正常对照组，模型对照组，SGBLG3.90 g生药·kg-1
组、ZJBLG 3.90 g生药·kg -1组、JMBLG3.90 g生药·kg -1组、
MZBLG3.90 g生药·kg-1组。各给药组均按剂量灌胃给药，正常
对照组和模型对照组同法灌胃给予等体积蒸馏水，给药体积
为20 ml·kg-1，每天1次，连续7 d。第5天，正常对照组小鼠乙醚
吸入麻醉后右眼角膜表面“#”划痕，滴入生理盐水10 μL。其
余各给药组小鼠同法麻醉后右眼角膜划痕滴入HSV-1病毒
悬液10 μL，闭合眼睑保留30 s。病毒接种48 h后各组小鼠按下
法制备标本。小鼠冰浴上迅速断头取出整个脑组织，用3%
PBS多聚甲醛灌注内固定，然后部分留取标本，石蜡包埋。免
疫组化SABC法进行HSV-1病毒抗原检测，用HSV-1急性感染
模型小鼠脑组织为阳性对照，PBS代替一抗做为阴性对照；以
光镜下细胞核/质中出现粗细一致的棕黄色颗粒为阳性染色。
HSV-1抗原的检测中，急性感染期脑组织可出现片状HSV抗
原阳性表达细胞，或散在分布的阳性表达细胞，以胞质和胞
核区染色较深。SGBLG、ZJBLG、JMBLG、MZBLG组小鼠用药后
HSV抗原阳性表达均明显减弱。（见图1）
a-正常对照组 b-模型对照组 c-SGBLG组
d-ZJBLG组 e-JMBLG组 f-MZBLG组
图1 HSV-1感染小鼠脑组织切片（×400）
3 讨 论
流感病毒（influenza virus）是一种负螺旋的单链片段
RNA病毒，按照病毒核蛋白和基质蛋白的不同可分为甲、乙、
丙三型[7]。流感病毒主要在呼吸道中增殖，一般患者会有发热
与寒战，伴随头痛，喉部溃疡等临床表现。少数患者病毒可蔓
延至细支气管和肺泡，引起间质性肺炎并可致死。流感病毒
的亚型变异速度很快、传染性强，全球多个地区都曾局部爆
发大规模流感。
单纯疱疹病毒（herpes simplex virus，HSV） 分为 I型
（HSV-1）和II型（HSV-2），无论是发展中国家还是发达国家，
HSV的自然感染率都相当高，I型主要感染皮肤黏膜及中枢神
经系统，造成各种炎症疾病[8]。其中单纯疱疹病毒性脑炎病势
凶险，预后较差；而II型感染与生殖道炎症及胎儿崎形有关[9]。
以上两类病毒都严重威胁着人类健康。
南板蓝根具有抗病毒作用，一方面能针对病毒代谢及复
制环节的靶蛋白起相关作用；另一方面，通过提高感染病毒
机体的免疫力，对机体起到一定的保护作用。本实验研究证
明，不同产地的南板蓝根对流感病毒、单纯疱疹病毒均具有
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具有明显的抑杀作用，其中尤以韶关产南板蓝根效果最佳。
因此南板蓝根在抗病毒药物筛选与开发方面具有广阔的前
景，但是南板蓝根抗病毒的药效物质基础及其作用机制将是
未来研究的重点、难点。
参考文献
[1] 国家药典委员会.中国药典[S].北京:中国医药科技出版社,
2010：229
[2] 李玲,董同义.大青叶类药材及其制剂质量控制的研究[J].
药学学报,1994,29(2):128-131
[3] 郭力,梁恒兴,赵斌,等.板蓝根和大青叶类药材腺苷含量的
测定[J].中成药,2006,28(7):1064-1066
[4] 胡兴昌,程佳蔚,刘士庄,等.板蓝根凝集素效价与抑制感冒
病毒作用关系的实验研究[J].上海中医药大学学报,2001,
15(3):56-57
[5] 秦华珍,时博,李世阳,等.南板蓝根和北板蓝根抗甲型流感
病毒作用的比较研究[J].中华中医药学刊,2009,27(1):168-
169
[6] 孟胜男,王欣,邢俊家,等.夏枯草提取物对HSV-Ⅰ及单纯
疱疹病毒性角膜炎的作用[J].沈阳药科大学学报,2010,27
(3):236-240
[7] 张强,赵庆杰,熊瑞生,等.抗流感病毒药物研究进展[J].药学
学报,2010,45(3):289-299
[8] 赖志才,瞿畅,曾恕芬,等.川楝子提取物体外抗单纯疱疹病
毒1型活性的实验研究[J].中药新药与临床药理,2010(1):7-10
[9] 王洁.单纯疱疹病毒糖蛋白G重组基因片段的克隆表达、
纯化及其检测试剂的初步应用[D].2004
（收稿日期：2011-06-16 编辑：李海洋）
TLC法定性鉴别孕坤通胶囊中4味中药*
孙 翠，文志云，宋志钊，李星宇，刘 元（通讯作者）
（广西中医药研究院，广西 南宁 5300222）
[摘要] 目的：完善孕坤通胶囊的质量标准。方法：采用TLC法分别鉴别孕坤通胶囊中千斤拔、赤芍、枳实、泽泻。结果：各供
试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，色谱清晰，附近无杂质斑点干扰。结论：本方法专
属行强，可更好地控制本品质量，确保其疗效。
[关键词] TLC法；孕坤通胶囊；千斤拔；赤芍；枳实；泽泻
[中图分类号] R284.1 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X（2011）09-0069-03
TLC identification at the capsule of 4 kun taste Chinese traditional medicine
Sun Cui, Wen Zhiyun，Song Zhizhao, Li Xingyu, Liu yuan (Corresponding author)
(Chinese medicine research institute in guangxi nanning Guangxi, 5300222)
[Abstract] Objective: To improve the quality of the capsule at kun standard. Methods: the TLC identification method, the
child of the capsule one thousand jin kun pull out, root, acid-insoluble ash, alisma. Results: all of the product, and by refer－
ence substance and the position of the corresponding control medicinal materials chromatography on show the same color of
the spots, chromatography is clear, without foreign interference spots nearby. Conclusion: the method is strong, can do exclu－
sive better control the product quality, ensure its curative effect.
[Key words] TLC method; The child kun capsule; One thousand jins pull out; Root; Of frutus aurantii immaturus were;
Alisma
孕坤通胶囊为南宁协和医院协定处方，主要由千斤拔、
赤芍、枳实、泽泻等中药组成，具有活血化瘀，通经活络之功
效，用于女性不孕血瘀证。为了更好地控制本品质量，确保其
疗效，笔者采用TLC法鉴别了处方中的千斤拔、赤芍、枳实、泽
泻。现报告如下。
1 仪器与试药
1.1 仪器 YOKO-ZS紫外分析摄影仪；YOKO-BD薄层电动
点样仪，武汉药科新技术开发公司。
*基金项目：广西壮族自治区卫生厅自筹经费科研课题
（Z20110522）
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