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牛大力藤叶脂溶性成分的GC-MS分析



全 文 :第 30 卷 第 5 期 热 带 作 物 学 报 Vol.30 No.5
2009 年 5 月 CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS May.2009
基金项目: 农业部热带作物资源保护项目(No. RZY-03-2008), 中国热带农业科学院品种资源研究所研究生基金项目 “牛大力的生物活性
成分研究”(No. YJS-2008-S021)资助。
作者简介: 赖富丽, 女, 1983 年生, 硕士研究生。 研究方向: 南药种质资源的开发与利用。
* 通讯作者, 王祝年, E-mail: wangzhunian@yahoo.com.cn。
收稿日期: 2009-03-06 修回日期: 2009-04-29
牛大力藤叶脂溶性成分的 GC-MS分析
赖富丽, 王祝年 *, 王建荣, 晏小霞
中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所
农业部热带作物种质资源利用重点开放实验室 海南儋州 571737
摘要 采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对牛大力藤叶片脂溶性成分进行分析测定, 并结合计算机检索技术
对其成分进行结构鉴定, 应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。 结果显示, 共鉴定了 41 个化学
成分(除豆甾醇外, 其余 40个化学成分在该植物中属首次报道), 其相对含量为 81.22%。 其中含量较高的成分依次
为维生素 E(11.52%)、 亚麻酸乙酯(10.26%)、 γ-谷甾醇(8.53%)、 棕榈酸乙酯(8.23%)、 叶绿醇(7.00%)、 亚麻酸甲酯
(5.04%)、 亚油酸乙酯(4.13%)、 亚油酸(4.09%)和植二烯(3.89%)。
关键词 牛大力藤; 气相色谱-质谱联用技术; 成分分析
中图分类号 R28
牛大力藤(Millettia speciosa Champ. ex Bentham), 又名美丽崖豆藤 [1], 为豆科(Leguminosae)崖豆藤属
(Millettia)植物。 其根为牛大力, 又叫山莲藕、 大力薯, 始载于 《生草药性备要》, 称大力牛[2], 近代本草中
多有收载。 主要用于病后体弱, 肺结核咳嗽, 腰肌劳损等 [3]。 20 世纪 70 年代开始作为壮腰健肾丸、 强力
健身胶囊等的原料用于中成药生产, 在两广地区广泛应用。 Uchiyama等[4]曾从该植物的根部, 即牛大力75%
乙醇提取物中分离得到 2 种新的齐墩果烷型三萜皂苷和 2 个已知的紫檀烷型化合物。 王春华等从牛大力
乙醇提取物的乙酸乙酯部分分离到 13个已知化合物[5]。 但对牛大力藤叶片化学成分的研究尚未见报道。 笔
者采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对其脂溶性成分进行分析测定, 以期为牛大力藤植物资源的深度
开发利用提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料采集与处理
牛大力藤样品于 2008 年 7 月采自海南省儋州市番加森林保护区, 由中国热带农业科学院热带作物品
种资源研究所王祝年研究员鉴定, 凭证标本(20071008)存放于中国热带农业科学院热带作物品种资源研
究所。 样品自然风干后称重(12.5 kg), 用 95%的乙醇室温浸提 3 次, 减压回收乙醇至无醇味。 将乙醇提取
物分散于水中成悬浊液, 经石油醚萃取后减压浓缩得到 149.0 g 墨绿色油状提取物。
1.2 仪器与实验条件
仪器: HP6890/HP5973 GC/MS 联用仪(美国惠普公司)。
气相条件: 色谱柱为 HP-5MS 5% Phenyl Methyl Siloxane (30 m × 0.25 mm × 0.25 μm) 弹性石英毛细
管柱, 柱温 50℃(保留 2 min), 以 5℃/min 升温至 300℃, 保持 15 min; 汽化室温度 250 ℃; 载气为高纯
氦气(99.999%); 柱前压 7.62 psi, 载气流量 1.0 mL/min; 进样量 1 μL; 分流比 20 ∶ 1。
质谱条件: 离子源为 EI 源; 离子源温度 230 ℃; 四极杆温度 150 ℃; 电子能量 70 eV; 发射电流
5期 赖富丽等: 牛大力藤叶脂溶性成分的 GC-MS 分析
34.6 μA; 倍增器电压 1 071 V; 接口温度 280 ℃; 质量范围 10~550 amu。 谱图检索: Nist05 谱库和
Wiley275谱库。
2 结果与分析
按上述条件对牛大力藤叶的石油醚提取物进行 GC-MS 分析, 离子流程图见图 1。 通过 HPMSD 化学
工作站, 结合 Nist05 质谱图库和 Wiley275 质谱图库进行鉴定, 按峰面积归一化法进行计算求得各化学成
分在样品中的相对含量。 确认了其中 41个化学成分, 相对总量为 81.22%。 其结果见表 1。
从表 1可见, 在已鉴定的 41个化学成分中, 相对含量大于 1%的有 16个, 其中含量较高的成分依次为
维生素 E(11.52%)、 亚麻酸乙酯(10.26%)、 γ-谷甾醇(8.53%)、 棕榈酸乙酯(8.23%)、 叶绿醇(7.00%)、
亚麻酸甲酯(5.04%)、 亚油酸乙酯(4.13%)、 亚油酸(4.09%)。 除豆甾醇外, 其余 40 个化学成分在该植物
中属首次报道。
3 讨论
分析测定结果表明, 牛大力藤叶片中维生素 E 的含量较高, 维生素 E 是目前已知的营养素中抗氧化
作用最强的一种, 在体内可以保护细胞膜中的许多不饱和脂肪酸、 细胞内的核酸和蛋白质的琉基免受自
由基的损害。 由于维生素 E 具有很强的抗氧化作用, 从而能降低体内与血管硬化有关的氧化型低密度脂
蛋白的形成, 同时能保护血管内皮细胞的完整性, 避免血小板在血管壁上聚集, 起到预防动脉粥样硬化
的作用。 维生素 E 还能阻断体内致癌的自由基反应, 抑制致癌物质的形成, 降低诱发突变物质的活性,
增强抑癌基 PS的表达, 因此维生素 E具有防癌作用, 其机理为抑制 DNA合成, 诱导肿瘤细胞发生凋亡[6~8]。
维生素 E 还能提高机体的免疫功能, 主要是增强细胞和体液的免疫作用, 促进体内与免疫有关的细胞因
子的产生及其活性。 许多实验证实, 维生素 E 是一种正向免疫调节剂, 在正常和免疫抑制的疾病状态下,
能够提高体液和细胞免疫反应, 提高 T 辅助细胞功能和 NK 细胞活性[9]。 已鉴定的化合物中不饱和脂肪酸
含量也较高。 其中的亚油酸是人体不能合成的, 亚油酸与其他维生素共同作用下, 有明显的抗癌作用,


10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.0 45.00 50.00 55.00 60.00
TIC: 81203-08.D
6 000 000
5 800 000
5 600 000
5 400 000
5 200 000
5 000 000
4 800 000
4 600 000
4 400 000
4 200 000
4 000 000
3 800 000
3 600 000
3 400 000
3 200 000
3 000 000
2 800 000
2 600 000
2 400 000
2 200 000
2 000 000
1 800 000
1 600 000
1 400 000
1 200 000
1 000 000
800 000
600 000
400 000
200 000
Ab
un
da
nc
e
时间/min
图 1 牛大力藤叶片脂溶性成分的气相色谱-质谱总离子流图
715
热 带 作 物 学 报 30 卷
  
 /min    /
1 17.10 -N- Methyl ethylmaleimide C

H

NO 139 0.08
2 22.13 - -Ionone C

H

O 192 0.06
3 22.72 ! Geranyl acetone C H O 194 0.15
4 24.73 #$%&’( Dihydroactinidiolide C H

O 180 0.51
5 25.51 )*+ Dodecanoic acid C

H

O 200 0.30
6 29.92 ,-.+ Myristic acid C H

O 228 0.31
7 30.17 /01’( Loliolide C H O 196 0.11
8 30.50 ,-.+2( Ethyl myristate C

H

O 256 0.108
9 31.46 3 Phytadiene C

H 278 3.89
10 31.58 6,10,14-4-2-567 6,10,14-Trimethyl-2-pentadecanone C H O 268 0.45
11 32.09 89+( Butyl phthalate C

H O 278 0.30
12 32.32 :3 Neophytadiene C

H

278 1.44
13 32.56 56+2( Ethyl pentadecanoate C

H

O 270 0.13
14 33.07 (E,E)-;<=> (E,E)-Farnesylacetone C H O 262 0.26
15 33.97 ?@+ Palmitic acid C

H

O 256 0.42
16 34.56 AB+2( Ethyl Palmitate C H O 284 8.23
17 35.88 5C(7)+ Margaric acid C H O 270 0.15
18 36.39 5C7+2( Ethyl Heptadecanoate C

H

O

298 0.51
19 36.79 !D> Phytol C

H

O 296 7.00
20 37.36 E+ Linoleic acid C H O 280 4.09
21 37.42 F+( Methyl linolenate C H O 292 5.04
22 37.64 E+2( Ethyl Linoleate C H

O 308 4.13
23 37.77 F+2( Ethyl Linolenate C H O 306 10.26
24 38.21 G@+2( Ethyl Stearate C H O 312 1.07
25 40.92 4,8,12,16-H5C7-4-’( 4,8,12,16-Teramethylheptadecan-4-olide C

H O 324 0.36
26 41.56 IJ+2( Ethyl ester of Eicosanoic acid C H

O 340 0.47
27 43.99 89+KL( Di-(2-ethylhexyl)-phthalate C H

O 390 0.06
28 44.68 MN+2( Ethyl ester of docosanoic acid C H O 368 0.16
29 47.59 5H7+2( Ethyl Teracosanoate C

H

O 396 0.29
30 47.59
2,2--3-(3,7,12,16,20-6-3,7,11,15,19-6-5O7)PQ27
2,2-Dimethyl-3-(3,7,12,16,20-pentamethyl-3,7-11,15,19-Heneicosapentaenyl)-oxirane CH O 426 0.19
31 47.59 RS Spualene C H 410 2.11
32 49.73 -TJU E -Tocopherol C

H

O 402 0.40
33 50.95 -TJU E -Tocopherol C

H O 416 2.01
34 52.25 TJU E Vitamin E C

H O 430 11.52
35 53.41 -5-1RV> -5-Ergostenol C H O 400 0.70
36 53.84 -V> Stigmasterol C H O 412 1.12
37 54.73 -WV> Clionasterol C H

O 414 8.53
38 55.54 XY-20(29)-3- Lup-20(29)-en-3-one C

H

O 424 0.64
39 55.83 PZ[> Cycloartenol C H O 426 1.23
40 55.93 \]^V> Taraxasterol C H O 426 1.67
41 56.81 -V-4--3- Stigmast-4-en-3-one C

H

O 412 0.75

γ
γ γ
δ δ
δ
α α
δ
716
5期
能明显抑制淋巴癌、 腹水癌、 乳腺癌的生长; 降低血液和肝脏胆固醇的浓度, 抑制动脉粥样硬化; 预防
高血压; 抗氧化和改善肉品质; 强化免疫功能; 抑制脂肪沉积, 减肥增肌等作用[10]。 可见, 牛大力藤叶片
脂溶性成分的分析鉴定及相对含量测定, 为其深度开发利用提供了科学依据, 但其生理活性还有待进一
步研究。
参 考 文 献
[1] 中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志(40 卷). 北京: Science Press. 1994. 136~138.
[2] 广西壮族自治区卫生厅. 广西中药材标准(1990 年版)[S]. 南宁: 广西科学技术出版社, 1992. 31~32
[3] 国家中药管理局 《中华本草》 编委会. 中华本草(第十一卷)[M]. 上海: 上海科学技术出版社, 1999. 571~572.
[4] Uchiyama T, Furukawa M, Isobe S, et al. New oleanane-type triterpene saponins fromMillettia speciosa[J]. Heterocycles, 2003, 60(3): 655~661.
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Cancer. 1996, 25(1): 9~26.
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Analysis of Liposoluble Components of the Leaves
from Millettia speciosa by GC-MS
Lai Fuli, Wang Zhunian, Wang Jianrong, Yan Xiaoxia
Institute of Tropic Crops Genetic Resources, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences/ Ministry of
Agriculture Key Laboratory for Tropical Crops Germplasm Resources Utilization, Danzhou, Hainan 571737
Abstract Chemical constituents of the liposoluble fraction of the leaves from Millettia speciosa Champ.
were analyzed by using the gas chromatography-mass spectrometry (GC-MC), and identified by their mass
spectra, and their relative percentage was calculated from the GC peak areas. Forty-one compounds were
identified, accounting for 81.22% of the total detected constituents. The major constituents identified
include Vitamin E (11.52%), ethyl linolenate (10.26%), clionasterol (8.53%), ethyl palmitate (8.23), phytol
(7.00%), methyl linolenate (5.04%), ethyl linoleate(4.13%), linoleic acid(4.09%), phytadiene(3.89%), etc. Of
all the constituents 40 liposoluble components except stigmasterol were first reported in the leaves of M.
speciosa Champ.
Key words Millettia speciosa; GC-MS; constituent analysis
(责任编辑: 沈德发)
赖富丽等: 牛大力藤叶脂溶性成分的 GC-MS 分析 717