全 文 ：第 7卷第 2 期
1 9 91年 4 月
生 物 化 学 杂 志
Ch in e s eB i o eh e m i e al Jo ur n al
Vol
.
7
,
N o
.
2
A P r
.
,
1 99 1
木菠萝凝集素结合部位糖的特异性 *
陈华堂` L i a o , J Z . aK b a t , E . A 2 .
e
.安徽 医科大学生物化学教研室 , 合肥 2 3 0 0 3 2 )
( 2
.
D e p a
r七m e n t s o f M ie r o b i o l o g y , G o n e 七ic s a n d D e v e l o Pm e n t , a n d N e u r o l o g y -
C o l l e g e o f P h v s i e i
a n s a n d S u
r g e o n s
,
C o l u m b i a U
n i v e r s i t y
,
N
e w Y o r k
,
1 0 0 3 2
,
U
.
S
.
A
.
)
摘要 用定圣免疫沉逮法和定量免疚沉沈抑制法研 究 了从 木 菠 萝 ( rA t h r oc ar Pus
i n t e g r i f o l i a ) 种子提取的凝某素 ( ja e a l i n ) 结合部位糖的特异性 。 J a e a l i n最强烈地
沉逮含有D c al 几~ 3 D G al N A 。 结构的无 活性抗冻格蛋白 , 不同程度昨特异地沉逮各
种血型物质 。研宪发现凝某素结合部位对 D G al 凡~ 3 D G al N A c有最高特异性 。 最强抑
刹荆是 D G a l刀1 , 3D G a l N A e a l , 功N O: , 共抑制活性介到比 D G a l N A e和 D G a l高3 8 0倍
和 10 00倍 。 对于各种甲基化或对琦基阶化的糖普以及寡糖 ,除 m et h y la D G a1 N A ct 外 ,
仪 a 一构型表现 出抑制活 性 , 所有户构型的格普均无抑制活性 , j“ ca il n 结合部位对粉
的结合是构型依赖性的 。
关祖词 : 物特异性 , 凝集素 , 结合部位
从木菠萝 ( A r t h r o c a r P u s i n t e g r i f o l i a ) 种子提取的凝集素 ( ja e a l i n ) 是一种糖蛋 白 , 其分
子由 l lk D 和 1 5 k D 的二个亚基通过非共价键联结而成 川 。 它可以凝集人 ,羊 , 鼠 , 兔和鸡等
动物红血球 【2 , 。 j“ ca l in 是非常强的 T 细胞有丝分裂素 , 并且是 T 细胞非依赖地分泌抗体 的
人 B 淋巴细胞激活剂 , 同时 , 通过抑制 C I 灭活因子 , 它还可以激活补体经典途径 a[] 。 已有
报道 , ja c a l i n 可以特异地结合单体或二聚体的人 Ig A , ,但是不结合 I g A Z、 Ig G 、 I gM和 Ig E 〔` 一 , 。
因此 , 此凝集素受到世界科学家的广泛重视 。 本文着重研究了 j a o al in 结合 部位对 糖的特异
性 。
材 料 与 方 法
一 、 材料
1
. 凝集素 : 木菠萝种子由 D r . A nt on fo aC m P os 一N e Ot (巴西 )提供 , 粗制品凝集素的提取
本文所用英文编写 :
G P
,
G l y e o p r o t e i n , D
一
G a l
,
D
一
G a la
e 七o s e , D一 F u e , D 一 F u e o s e , D 一G a l N A e , N 一 a e e t y l 一D 一 G a l a e t o 卜
a m i n e , D
一
G l e N A e
,
N
一 a e e t v l
一
D
一
G l u e o
s a m i n e , D
一
G l
e ,
D
一
G l u e o
s e 一
D
一
M a n , D
一
M a n n o s e
.
. 本课姐受到 “ 国家教委优秀年轻教师基金 , 资助
收稿 日期 . 1 0 8卜 1 0 一 2 3 , 修 回日期 . 1 。。0 一 0 1 一 0 8
滚64
DOI : 10. 13865 /j . cnki . cj bmb. 1991. 02. 007
方法如下 :将磨碎的木菠萝种籽以 /1 1 0 (w / v )悬浮子 0 .o lm o l/ L的磷酸生理盐水 (Ps B )中 ,
PH 7
.
2
。
4℃过夜并不停地温和搅拌 , 2 0 0 0 9 4℃ 离心 30 分钟 , 取上清液在 P B s 中透析 24 小
时 , 即得凝集素粗制品 。 一 20 ℃贮存备用 。 亲和层析纯化的凝集素由 rD . A . L un d bl a d( 瑞典 )
赠送 。
2
. 纯化的血型物质和糖蛋白 : 所用血型物质由人卵巢囊肿或唾液以及猪 , 牛 , 马胃粘
膜中分离纯化制得 10[ “ ’ J 。 A , B 血型物质的 P : 组分以及 iF sr t S m iht 降解产物 的 制 备 如 前
述 【” , ” , · 含有重复二 , 基三 ,
(
一 A l a一 A l a一 Th r一
t
a l
D G a l刀1~ 3 D G a lN A e )
。结构 【! · ,的活性 , 蛋白和失 活 抗 冻
糖蛋白 (失活抗冻糖蛋白结构与活性抗冻糖蛋 白相似 , 仅 rP 。 代替 lA 。 ) 来自 D r . R . E . eF en “ y 。
a g a l a e t o o r o s o m u e o i d ( A G o R )和 a 3 i a l o o r o s o m u e o i d ( A s o R )糖蛋 白由 D r . G . A s h w e l l 赠送 。
3
. 糖抑制剂 : 各种单糖 , 二糖购自 S i g m a 和 E a s t m a n o r g a n i e C h e m i c a l Co m P a n v 。 甲
基化和对硝基酚化的各种糖普在实验 室 自制 [` , 1 。 D G al 刀1、 3D C a lN A ca l , 价N o : 来 自 D r .
K h u s h i L
.
M a t ta
。
二 、 方法
血凝试验按 T a ak st y微量滴定法进行 。 免疫扩散按 O cu ht er lon y法 let J用 1 %琼脂溶于生
理盐水中 。 定量免疫沉淀和沉淀抑制试验采用微量沉淀技术 〔` .】 , 沉淀物氮的测定用荀三酮
法 [ ’ 8 ] 。
结 果
木菠萝凝集素粗提液非特异地凝集人 A 、 B 、 0 红血球到相同程度 , 呈阳性凝集反应的最小
剂量为 0 . 2“ g / m L , 此时粗提液稀释倍数为 5 0 0 0 。
_ _
二一奋一~ 一- ,
1 0 2 0
M i以 o g r a m s lB o do G r o u P
On
7
八Dl从口d孟U`,上U
P。州目1ō县ódu品兰Z暇习备0层
S u b s t a n e e s an d G P A dd e d
F 10
.
1 Q u a n t i七a t i v e p r e c i p i t i n o u r v e s o f j a e a l i n w i t h
v a r i o u s b l o o d g
r o u P s u b s t a n e
e s a n d G P
.
S y m b o l s
a r e 日h o w n i n T a b l e l
枪蛋白。 活性抗冻糖蛋 白结构与失活抗冻糖蛋白十分相似 ,
在双向琼脂扩散试验时 , 凝
集素沉淀各种 A 、 B 、 0 血型 物 质
形成十分鲜明的单一沉淀线 , 但
是 0 血型物质 T i g h e Ph e n o l i n s -
o l u b l e 沉淀线较弱 。 糖蛋白 A S O R
和 A G O R 与凝集素不形 成 沉 淀
线 。
F i g
.
l 表明 j a e a l i n 沉淀各种
血型物质和搪蛋白所给出的沉淀
曲线 , T汕 l “ l 给出被沉淀的凝集
素所含氮的量 。 j“ “ al in 沉淀无活
抗冻糖蛋白最强烈 , 被 沉 淀 的
j a e a l i n 氮最大量为 7 . 0拼g , 沉淀
5 0 %最大凝集素氮仅需要 0 . 8昭
也沉淀 7 . 0拼g 最大凝集素氮 , 但
1 65
是为了沉淀 5 0% 最大凝集素氮需要活性抗冻枪蛋白 1 .9拼g 。 这表明 ja c oi ln对无活抗冻精蛋
白有较大亲和力 。
凝集素非特异地沉淀各种血型物质和相应衍生物表现出不同反应时 , 它们的沉淀曲线可
大致分为五组 。 第一组包括 B e a c h P五e n o l i n s o l u b l e p : , M e D o n 1 5 % P : , M s s 1 0% Z x l s t
s o it h 降解产物和 o G 10 % fr o m 20 写 (I i) , 它们沉淀最大凝集素氮为 6 . 8一 7 . 0拼g 。 为了沉
淀 5 0 %最大凝集素氮 , 需要 2 . 7一 3 . 8拌g 物质 。 J s Ph e n o l i n s o l u b l e l s t s m i t h 降解 产 物 -
H o g 7 5 1 0% ( A )和 p M 1 0 % ( B )给出同一条沉淀曲线 , 沉淀 6 . 5拼g 凝集素氮 , 9 . 4料g 物质沉
淀 5 0% 最大凝集素氮 , 它们分在第二组。 第三组内含有 B e a e h Ph e n o l i n s o l u b l e ( B ) , M c D o n
15 % (A D 和 iT j 1 20 % 2 : ( BI )三种血型物质 , 沉淀最大凝集素氮为 6 . 5铭 , 为沉淀 5 0 %凝
集素氮需要 13 . 0拼g 血型物质。 分在第四组的有 : H o g 5 9 一0写 ( H ) , p M P h e n o l i n “ o l u b l e p l ,
M S M 1 0% ( A I )
,
J s P h e n o l i n s o l u b l e ( L e b )
, N一 1 1 0% Z x ( L e . ) , c v s t 1 4 P h e n o l i n s o l u b l e
( A 2) 和 M s s 10 % 2 : ( A D , 它们沉淀最大凝集素氮为 6 . 1拼g , 为沉淀 50 % 凝 集 素 氮 需 要
1 9
.
2拼g血型物质 。 T i g h e Ph e n o l i n s o l u b l e ( H ) 仅沉淀 1 . 0拼g 最大凝集素氮 , 独自被列人第五
组 。 A SO R 和 A G O R 不沉淀任何 j a e a l i n 。
T a b l e 1 C o m P a r i s o n o f P r e e i P i t i n g a e t i v i t i e s o f j
a e a l i n w i t h v a r i o u s b l o o d g r o u P
s u b s t a n c e s a n d G P
S y m b o l s
B l o o d g r o u P 日 u b s七a n c e s
扭n d G P
M a x i m u m N (产 g ) B l o o d g r o u P s u b s t a n c e s
P r e c i P i七a t e d a n d G P (产 g ) f o r 5 0%
P r e e i P it a t i o n
口曰O即ù匕7几几甘石4.…ùU,二口,曰叨内OQ甘n仙介U几甘0QUól勺.…曰`.百`月01才魂O
5
工b10ó1
1.几,1.1ùU
...…6e。671
I n a c 七iv e a n t i fr e e 吕 e G P
A e t i V e 扭n t i fr s e z e G P
B e a o h P h e n o l i n s o l u b l e P l
M o D o n 1 5% P l
M S S 1 0% l a t S m i t h d e g r a 七e d
O G 10% f r o m 2 0% ( 11)
J S Ph e n o l i n s o l u b l e
l s t S m i t h d e g r a t e d
H o g 7 5 1 0% ( A )
P M 1 0% ( B )
B e a e h P h
e n o l i n 日o l u b l e ( B )
M o D o n 1 6% ( A
: )
T ij 1 2 0% z x ( B l )
H o g s e 1 0% (H )
P M P h e n o l i n s o l u b l o P l
N
一 1 1 0% Z x ( L e . )
M S M 1 0% ( A
:
)
J S P h e n o l i n a o l u b l e ( L e b )
C y
s
t 14 P h e n o l i n . o l u b l e ( A Z )
M S S 10% Z x ( A : )
-
T ig h e P h e n o l i n 日o l u b l e (H )
A S O R
A O O R
9
.
4
9
。
4
1 3
。
0
1 3
。
0
1 3
。
0
1 9
.
2
1 9
。
2
1 9
.
2
19
.
2
1 9
。
2
1 9
。
2
1 9
.
2
口冈
:
击▲曰团令0O甲日奋△
166
一 2马份一出犷一嗡广 ~责一一奋
一 2 0`
1 0
1
No a nm o le s in hlb红 o ra dde d
F1 0
.
2I n h ib i乞 io n by m o o n一 a n d 0119 0-
` ae e ha r ide s o f P re e iP i七 a t io o n fe u r de
( Za) o r pu r if ie d ( Zb) je a a l inw it h
Bec a h P he no l is no lu b le P i
.
S y m bo ls
a ro日 hO W n in Ta b le Z
Ta b le A 2e 七 iv i七 ie s o fM o no一 a n d
r ig
.
2给出各种糖抑制 Be ae h P he no l io no l-
u be l P l沉淀凝集素的能力 , 糖的分子 结构及产
生 50 % 抑制作用时糖的用量总结于 T ab leZ 。
对于凝 集 素 粗 制 品 , D G a l刀1` 3 D G a l N A -
e a l ” 叻N O : 是最强 抑 制 剂 ( L i n e l ) , 在 6 6 n m o l
时 , 产生 5 0肠抑制作用 , D C a l刀1 , 3 D G a lN A e a -
P五e n o l次之 ( L i n e Z ) , 需要 3 4 0 n ut o l 产生 5 0%抑
制作用 , 抑 制 活 性 较 D C a l刀1” 3 D G a l N A e a l `
功N O : 低 5 . 2 倍 。
在所试验的对硝基酚糖昔中 , P一 ia t Or P h en ol -
a D G a lN A e ( L i
n e 3 )是最强者 , 在 5 6 0 n m o l时产生
5 0肠 抑 制 作 用 , P一 n i t r o Ph e n o l a D G a l ( L i n e s )
抑制活 性 较 P一 n i t r o Ph e n o l a D G a l N A e 低 一 倍 ,
1 0 0 0 n m o l 产生 5 0 % 抑 制作 用 ; P一 n i t r o Ph e n o l口-
D G al N A 。 在 8 00n m ol 时则完全无抑制活性 。
在所试验的甲基化糖昔中 , 有一 些 表 现 出
抑制活性 , 按照产生 50 % 抑制 作 用 时 的需 要
O l i g o s a e e h a r i d e s I n h i b i t i n g P r e e i P i t a t i o n o f
`U八.nnUnnU内石成OJ口ó,一`.孟
nóU八甘n八U己ōbd`O`, .ù
已。只左二`一芒牡台山
L in e N o
.
S y m b o l I d h i b i t o r Q u
a n t i t y g i v in g 5 0%
I n h i b i七: o n ( n m o l )
C
r u d e P u r i f i e d
D G a l夕1 , s G a lN A c o i , o价N O :
D G a l声1 , 3G a l N A e a Ph e n o l
P
一
N i t r o Ph e n o l o
一
D G a 1N A e
M e t h y l a
一
D G a l N A c P
P
一
N i无r o P h e n o l o 一 D G a l
M e t h y l a D G a l
D G a l
a l , 6 D G l e ( M e li b i o s e )
D G a l N A e
D G a l a l , 6D G a l
a l ,
6 6
3 4 0
5 6 0
8 0 0
1 0 0 0
5 0 0 0
8 50 0
2 5 00 0
3 4 0 0 0
4 1
3 1 0
2 5 0
7 0 0
4 4 0
2 8 0 0
7 6 0 0
2 4 0 0 0
2 4 0 0 0
123`
:
曰勺09
ZD F r u 口
D O a l
6 D G l e声1`
( S t a e h y o日 e )
8 0 0 0 0
D e t h y la D M a n
6 6 0 0 0
6 6 0 0 0
t e a七e d
8 0 0
8 7 6
2 5 0 0
4 2 0 0
6 0 0 0
1 0 00 0
1 3 00 0
8 0 0 0 0
9 0 0 0
4 3 6 0 0
@▲日e7山.曰令O
10U
T h e f o l l o w i n g a w e r e n o t a e t i v e a t t h e a m o u n t
田 p一 N i t r o p h e n y l尹D O a l N A e
因 D G a l a i , s D G a l
山 M e t h y l声D G a l N A e
态 M e毛h y l o D G l e N A b P
0 D G a l夕i , 一D G l a ( L a e t o a e )
口 M e t h y l夕D G l c N A c
▲ D F u c
0 M e t h y l声D G a l
态 D G l e N A e
田 D M a n
甲 M e t h y l o D G a lN A e f
V M e乞h y l夕D G a l N A e f
量 , 依次为: m e t hy l a n C a l N A e P ( L i n o 4 ) , 启o o n 血 0 1, m e t h y l a D c a l ( L i n e 6 ) , s 0 0 0 n m o l ,
m e th y l a D M a n m ( L i n e 2 1 )
,
6 6 0 0 o n o o l
。 其他的 : m e t h y l刀D O a lN A e f , m e t h y l a D G a l N A e f ,
M e t h y l刀D G a l , m e t h y l a D G l e N A e 和 m e h t y l刀D G l e N A e 在试验的最大剂量范围内表现均无抑制
活性 。
D G a l a l , 6 D G
a l a i , 6D G l
c刀i~ ZD F r u , 在 3 4 0 0 o n m o l时产生 5 0%抑制作用 ( L i n e g ) 。
在试验的二搪中 , D G a l a l , 6D G Ie (M e l i b i o s e )表现出抑制活性 , 并且在 8 5 o o n o o l 时产生
5 0` 抑制作用 ( L i n 。 7 ) 。 D e a , a i 、 3 n e “ 和 D e a l刀一, 4 n e l。 (: a e t。。 e )分别在 a 7 6 n m o l和 6 0 0 0
n m ol 无抑制作用 。
在试验的单糖中 , D G a l N A e 和 D G a l 分别在 2 5 0 0 0 n m o l 、 6 6 0 0 o n m o l 产生 5 0%抑制作用 ,
D G a l N A e 比 D G a l 活泼 1 . 6 倍 ( L i n e s , L i n e 1 0 ) 。 D G a l 和 m e t h y l a D M a n 表现出相同的抑制活
性 。 D G l e N A e , D M a n 和 D F u e 在试验范围内无抑制活性 。
纯化的 l ac “ h n 在定量免疫沉淀抑制试验中与凝集素粗制品所得到的结果相 当 , 只 不 过
P一 n i t r o P h e n o l a D G a l N A。 表现比 D G a l刀1~ 3 D G a lN A e a Ph e n o l 稍微活泼 ; P一 n i t r o Ph e n o l a D G a l比
“ e t h y l a D G a lN A c P 表现出稍强的抑制能力 , D G a l N A e 和 D G a l a 一` 6 D G a l` 6 D G l e刀1` ZD F r u r
表现出相同的抑制活性 ( iF g . Zb) , 这些细微差别是在试验误差范围内。
讨 论
为了确定木菠萝凝集素结合部位对搪的特异性 , 我们完成了凝集素对各种血型物质和褚
蛋白的定量沉淀试验 , 通过此项试验可以确定凝集素与各种搪蛋白间亲和力的大小 , 亲和力
越大 , 则沉淀 50 %最大凝集素氮所需糖蛋白量越少 。 我们还完成了多种糖对凝集素沉淀 eB 卜
hc Phe on l in so hi lb
“ P I 的抑制试验 , 以确定凝集素结合部位对糖的特异性 , 糖抑制剂 用量
越少 , 而抑制作用越强 , 则认为此种搪抑制剂的结构最互补于凝集素结合部位的结构 , 从而
确定出凝集素结合部位对糖的特异性 。 这是直接证明 ja o ial n结合部位对 D G al 赶 , 3 D G a lN A。
具有最大特异性的第一篇报道 。 在所有试验的血型物质和糖蛋自中 , 凝集素沉淀含有 D G a切 1
~ 3 D G al N A
。 一结构的活性及无活抗冻糖蛋白最为强烈 , 表现出极高的亲和力 。 与此相一致的
是在定量沉淀抑制试验中 , D G a l刀1~ 3 D G a l N A e a 一、 价N o Z以及 D G a l刀i , 3 D G a lN A e a Pb e o o l为
最强的抑制剂 。
前些年 , 人们广泛研究了木菠萝凝集素对免疫球蛋白的结合 , 发现 j a o ial 。 可 以 结 合人
的 坛A I , 但是不能结合 Ig A : , I g G , Ig M和 Ig E 〔“ ’ 名’ ` . ] 。 对这一发现的解释是 在 人 lg A I 重链
的铰链区存在着 0 一D G al N A 。 和 D G al 刀l ` 3 D G al N A c 一单位 〔2 “ , 。 这一预见与我们现在的发现
完全一致 。
我们发现搪在 j a e a l i n 一 B e a c h Ph e n o l i n s o l u b l e p i 沉淀反应中的抑制活性是构型 依 赖 性
的 , 这与 H o g iw ar a 等发表的资料相符 〔2 ” , 不过他们用的是 j。 。 a h n 一 I g A I 反应系统 。 在所有
试验的甲基化和对硝基酚化的糖普中 , 除 m et h y la D G “ NI A o f 到 , 所有 a 一构型的糖昔 均 表现
出相当的抑制活性 , 而所有 户构型的糖昔则无活性 。 同时在所试验的单糖中 , 仅 D G a l N A 。
和 D G a l 表现出抑制活性 , 并且 D G a l N A e 的活性是 D G a l 的 2 . 6 倍 , 而 D M a 。 , D G l e N A e 和
D F u c 则无活性 , 表明 N一 。 cy la o i n e 基和经基在单糖环碳原子上的位置也极大地影响 着 糖 的
抑制活性 。
16 8
纯化的凝集素与凝集素粗制品在定量免疫沉淀抑制试验中所得结果相当 , 说明在凝集素
粗制品中存在的杂蛋白等物质并不影响凝集素与糖蛋 白的结合 , 亦不影响凝集素结合部位对
糖的特异性 。
我们现在的工作为应用此凝集素分离纯化各种多糖和糖蛋白以及研究此凝集素与配体相
互作用的机制奠定了基础 。
参 考 文 献
[ 1 〕 s k e a D L , e七 a l . 皿 o l e c 1 . 价二 o 忍, 1 98 8 , 2 5 . 1一 6
〔 2 〕 B u n n 一 M o r e n o M M , C a m P o s 一N e七0 A . J I 娜价“ 招 0 1 , 1 9 5 2 , 1 27 : 42 7一魂2 9
[ 3 〕 K o n d o h H , e t a l . J l 琳饥 “ . 万 . `无, 1 9 8 6 , 8 8 一1 7 1一1 7 3
[ 4 1 R o q u e
一
B a r r e i r a P
,
C a tn P o s
一
N e t o A
.
J 饥 e 止 吞`o 乙 R e . , 1 98 ` , 17 : 35 4一 3 3 7
〔 5 〕 R o q u e 一 B a r r e i r a F , C a m P o s 一N e t o A . J I m m “ . 0 1 , 1 0 8 5 , 1石4 t 1 7` 0一 i了毛3
[ 6 〕 S a x o n A , e 七 a l . C e l l l 价勿 “ . 0 1, 1 9 8 7 , 10 4 一1 34一1 4 1
[ 7 〕 H i e m s t r a P S , e 七 a l . S c a . 心 J l仍 用 “ . 0王, 1 9 5 7 , 2 6一 11 1一2 2 7
[ 8 」 A u e o u 七r i e r P , e乞 a l . 对 0 1口 c I m . “ . 0 1 , 1 9 8 7 , 2 4 * 5 0 3一 5 1 1
[ 9 〕 Z e h r B D , L i七w i n 5 D S e a n d . J I m m “ . 0 1 , 1 98 7 , 2 6 一2 2 9一 2 3 6
[ 1 0〕 L l o y d K O , e t a l . B ` 0 0 而e m ` a ` r 梦, 1 9 6 5 , 7 . 2 9 7 6一 2 09 0
[ 1 1〕 N e w m a n W , K a b a t E A . A r o几 B i o c 汤e仍 B ` o夕五梦s , 1 0 7 6 , 1 7 2 * 5 2 0一 6 2 3
[ 1 2 1 A l l e n P Z
,
K a b a t E A
.
J l 仍 m . , 0 1, 1 0 5 9 , 8 2 . 3` 0一 3 5了
[ 1 3〕 F e i z i T , e 七 a l . J 百牛尹 对 e d , 1 9了1 , 1 3 3 * 3 9一 5 2
[ 1 4〕 D e V r i e s A L , e t a l . J B` o l C 而e价 , 1 9了0 , 2 5 4 * 2 9 0 1一 2 0 0 8
[ 1 5〕 s h a r k a r M , K a b a t E A . C a , b o 几犷d , R . a , 1 9 7。 , 6 9 * 14 8一1 ` 9
〔1 6 1 o u e h t e r l o n g 0 . A c ` a p a `人 仍` c , o b` o 王习 c o . d , 1 9 4 9 , 2 5 * 1 8 6一 1 9 1
仁1 7〕 K a b a 七 E A . J B ` o 王 C而e仍 , 1 9 7 6 , 25 1* 12 9 6一1 30 2
1 1 8 1 S e h i f f rn a n G
, e 七 a l . B` 0 0而. m 玄s ` r 梦, 1仑6` , 3 * 1 1 3一1 2 0
[ 1。〕 B ie w e n g a J , e t a l . 对 o l e c l 协饥二 0 1 , i g a o , Ze 一 z 7 5 e Z已1
[ 2 0〕 B a e n z i g e r J , K o r n f e l d 5 . J B ` o l C而e m , 1 07 4 , 2 4 9一7 2 6 0一 7 2 6 9
[ 2 1〕 H a g i w a r a K , e乞 a l . 对 o l e c l 加仍 “ . 0 1 , 1 98 8 , 2 5 . 6 9一 8 3
S P e e i f i e i t y o f C a r b o h y d r a t e a t t h e B l n d i n g S i t e o f J a e k f r u i t
L e e t i n J a e a li n
C h e n
,
H u a一 t a n g l L i a o , J Z
.
K a七a t , E . A 2 .
( 1
.
D e夕a , t , e : t o f B葱o c h e 仍云夕` , 梦, A . h “ ` 万 e“ c a l U : `砂 e , 。 “ 夕 H e f e ` , 2 3 0 03 2 )
( 2
.
D e 夕a , ` m e n t s o f 卫 ` o 护 o b` 0 10 9夕, G e o e 名` 0 5 a o j D e o e l o 尹哪 e 。 心, 。 : J N e : , 0 1 0 9李,
C o l l e g e o f P h夕s i c i a 。 忍 a : J S o r g e o o s , C o l 。 。 b落a U 。 ` , e , s “ 梦, N e 叨 Y o , 圣, N . Y . 1 00 32 ,
U
.
S
.
A
.
)
A b s t r a e t s P e e i f i e i t y o f C a r b o h y d r a t e a t t h e b i n d i n g s i t e o f l e e t i n j
a e a l i n f r o m t h e
s e e d s o f ja e k f r u i t ( A r t h r o e a r P u s i n t e g r i f o l i a ) 15 s t u d i e d b y 任u a n t i t a t i v e P r e e i P i t i n
P r e e i P i t i n 一 i n h i b i t i o n a s o a y ,
.
J a e a l i n o P e e i f i e a l l y P r e e i P i t a t e s t h e D G a l刀1 , 3 D G a lN A e
e o n t a i n i n g i n a o t i v e a n t i f r e e z o g l y e o Pr o t e i n
.
T h e l e e t i n n o n s P e e i f i e a l l y P r e e i P i t a t e s v a -
169
r 主 o u sb l o od gr o uP s ub st an e e st od if f er en t ex t en t s. Th eb in d 主n g s it e of ia e al in 15f o un d
t ob e m o st sP e e if i efr oD G al刀 1, 3 D G a lN A e . T h e b e s t i n h i b i t o r 15 D G a l刀1` 3 D G a lN -
A e a l` 必N 0 2, w h i e h 15 a b o u t 3 8 0 t i m e s a n d 1 0 0 0 t i m e s m o r e a e t i v e t h a n D G a lN A c
a n d D G a l一 r e s P e e t i v e l y . I n h i b i t i o n s t u d i e s s il o w e d t h a t o n l y a 一 a n o m e r s o f nI e t h y一 ,
P一 n i t r o P五e n o l一 g l y c o s i d e s a n d o l i g o s a e e h a r i d e s , a r e a e t i v e e x e e P t f o r 功 e t h y l a ` D G a l -
N A o r
, a l l 刀一 a o o m e r s s h o w n o t a e t i v e , i n d i e a t i n g ja c a l i n P r e f e r s a 一 a n o m e r s t o 刀-
a n o m e r s a n d b i n d s t o t h e e a r b o h y d r a t e e o n f i g u r a t i o n 一 d e P e d e n t l y
.
K e y w o r d s
: C a r b o h y d r a t e s P e e i f i e i t v , B i n d i n g s i t e