全 文 ：量达 65 写一70 肠 ,冷藏 、 静置 48 h , 滤过 , 回收
乙醇 ,加入适量活性炭 ,加热 30 m in , 滤过 , 加
入调味剂 ,加蒸馏水至规定量 ,滤过 ,分装 , 灭
菌 ,即得 ,
2
.
2 高速离 .讼法工 艺流程 : 按 照处方 , 称取
一定量药材 ,加水煎煮 2 次 (沸后 Z o m in 加入
二花 、黄岑 ) , 第 1 次 l h , 第 2 次 4 o m i n ,滤过 ,
合并滤液 , 浓缩至规定量 , 冷藏 ,静置 48 h , 加
入调味剂 ,调 p H 值 , 高速离心 , 分装 , 灭菌 ,
即得 。
2
.
3 取样 :分别取二种工艺制得的样品若干
批 。
样品 I (水醇法 ) 9 7 0 2 1 3 9 7 0 3 1 9 9 7 0 3 2 7
9 7 0 7 2 4 9 7 0 8 2 5
样 品 l (高 速 离心 法 ) 9 7 10 1 3 9 7 10 1 9
9 7 1 0 2 0 9 7 1 1 2 5 9 7 1 2 1 0
2
.
4 含重 测定 : 用 日本岛津 C S一 930 型薄
层扫描仪对 以上各批药所含黄荃贰进行测
定 , 结果见表 :
两样品黄等试含工测定结果 (单位 m g / m D
样品 I 批号 含量 样品 I 批号 含量
9 7 0 2 1 3
9 7 0 3 1 9
9 7 0 3 2 7
9 7 0 7 2 4
9 7 0 8 2 5
9 7 1 0 1 3
9 7 1 0 1 9
9 7 10 2 0
97 1 12 5
9 7 12 1 0
个月 , 观察其变化 。
3 结果比较
3
.
1 色泽 样品 I 为淡黄色 , 样品 I 为棕红
色 。
3
.
2 澄明度 样品 I 、 I 均澄清无沉淀 。
3
.
3 含量 样 品 I 所含黄岑贰明显高于样
品 I , P < 0 . 0 1 。
3
.
4 原料成本 高速离心法比水醇法节省
了大量的酒精 、 活性炭 、 蒸馏水 , 降低了原料
成本 。
4 讨论
4
.
1 口服液是一种易为患者接受的剂型 ,但
目前水醇法制备 口服液的工艺成本较高 , 有
效成分损失很大 , 高速离心法减 .少了有效成
分的损失和破坏 ,提高了有效成分含量 ,增强
疗效 ;节省了大量的物料 ,也降低 了药品的成
本 。
4
.
2 高速离心法是一种物理分离法 , 它主要
是通过高速离心将大分子的杂质从小分子的
有效成分中分离出去的 。 如果杂质也是小分
子或杂质和有效成分的分子量相差 不大 , 单
纯靠高速离心法是很难分离的 ,这就要求我
们在运用高速离心法制备 口服液时 ,灵活运
用 。
UQOó,人7
.几b
.…,ú,丈ùO山`ù .上,二.人`五,立9 . 0
8
.
9
R S D ( % ) ~ 4
.
7 R S D (% ) = 3
.
1 9
2
.
5 分别取上述各批号的药液室温放置 3
( 收稿 日期 : 1 9 9 8 年 3 月 )
壳聚糖用于大青叶等中药浸提液澄清效果的研究
上海 中医药大学 (2 0 0 0 3 2) 张 彤 徐莲英 李海燕
上海市药材有 限公 司 唐青华
提要 探讨了壳聚糖絮凝澄清剂用于精制大青叶等中药浸提液的澄清效果 ,并与水煎液 、 醇沉
液作比较 。 结果表明 : 壳聚搪絮凝澄清剂用于所选单味中药浸提液均有一定的澄清范围 ,能起
一定的澄清作用 。 但对紫莞石油醚提取物中某些成分 ,大青叶中靛玉红等脂溶性成分有所影
响 . 提示当药液中指标成分水溶性较小时 ,使用壳聚糖作为澄清剂应当慎重 。
关健词 壳聚搪 絮凝澄清剂 大青叶 靛玉红
中药浸提液的精制过程主要 目的是去除 杂质 ,保留药材中具有生理活性的有效成分
1 9 9 8 年第 2 0卷第 一0 期
水提醇沉法仍是中药制药工艺中广泛应用的
精制方法 。 但水醇法生产成本高 、 安全性差 ,
且在保留有效成分方面有一定局限性 lj[ 。 絮
凝澄清剂壳聚糖在中药浸提液精制中的应用
已有了一些报道 , 澄清效果肯定 : 应用壳聚糖
澄清后的提取液中芍药贰的含量无明显变
化 z[] , 原儿茶醛及多糖有了一定增加阁 。 本文
研究壳聚糖澄清剂用于精制大青叶等中药浸
提液的澄清效果 , 并作 T L C 鉴别比较 。 对
T L C 提示受壳聚糖影响较大的大青叶中指
标成分成靛玉红作了澄清条件正交优选 , 并
与水煎液 ,醉沉液作了比较 。 结果表明 , 壳聚
糖絮凝澄清剂用于精制单味中药浸提液时有
一定的适用范围 。
1 材料与仪器
1
.
1 药材 葛根 、 大青叶 、 紫苑 、 补骨脂 、槐
米 、 降香 、 扁蓄 、 陈皮 、 红花 、 板蓝根 、 菊花 、 忍
冬藤 、 石韦 、 桑枝 、 桑 白皮 、 车前草 、 木瓜 、 白
蔽 、积雪草 、 黄荃均购于上海徐汇饮片厂 ,并
经鉴定符合《中国药典 》 1 9 9 5 版有关标准 。
1
.
2 对照品和 对照 药材 补骨脂素 、 芦丁 、
葛根素 、 靛玉红 、 紫莞对照药材 、 降香对照药
材均购于中国生物制 品检验所 ;
1
.
3 试 剂 壳聚糖 购于华东理工大学华
凯科技贸易公司 ,用 1 %醋酸配成 1%溶液后
使用 ;硅胶 G F 25 ; 购于青岛海洋化工厂 ; 其余
试剂均为分析纯 。
1
.
4 主 要仅 器 海欧 照相机 D F一 1 , 上海
照相机厂 ;紫外透射反射仪 , 上海长明光学 电
子仪器厂 ; H P l l o 液相色谱仪 ,美国惠普公
司 。
2 部分单味中药浸提液澄清效果的考察
称取葛根等 20 味中药各 6鲍 , 以 10 倍
量水 , 8 倍量水 , 煎煮 2 次 , 每次 hl , 合并煎
液 , 滤过 。分别浓缩至药液体积 : 生药体积克
数为 6 : 1 , 4 : 1 , 2 : l , 一 1 时 , 按 1 9 9 5 版
《中国药典 》一部附录中所载方法测 p H 值 、
相对密度 。 取不 同浓缩 比例的药液 (各含 19
生药 ) , 依次 加 入 0 . 0 5 , 0 . 1 , 0 . 2 , 0 . 4 , 0 . 6 ,
0
·
8
, l
·
0 , l
·
2
,
l
·
6 , 2
.
o m l 的壳聚糖溶液 。 摇
匀 、室温放置 , 肉眼观察 。 以醇沉上清液为阳
性对照 、 水煎液为阴性对照 。 “ + ” 表示澄清 ,
“ 一 ” 表示浑浊 , “ 士 ” 表示介于两者之间 。部分
结果见表 1 。
表 1 单味中药浸提液澄清效果考察表
药材
1 %壳聚糖加入量 ( m l)
0
.
0 5 0
.
2 0
.
6 1
.
0 1
.
6 2
.
d
p n 相对密度
陈皮 一 一 士 十 + + 4 . 3 1 . 0 39
红花 一 士 士 + + + 4 . 9 1 . 0 42
扁蓄 一 一 + + 十 十 5 . 0 1 . 02 。
菊花 士 士 + + 十 + 6 . 4 1 . 0 29
木瓜 一 一 士 + + + 3 . 3 1 . 0 3 4
白蔽 一 一 十 十 + 十 5 . 0 1 . 0 2 1
车前草 一 士 士 士 + + 4 . 9 1 . 03 8
积雪草 十 + + + + 士 5 . 2 1 . 0 46
大青叶 一 一 士 士 + + 5 . 1 1 . 0 39
黄芬 一 一 一 一 士 十 5 . 4 1 . 0 42
紫莞 一 士 + + 十 士 4 . 4 1 . 0 57
补骨脂 一 士 十 一 一 一 5 . 7 1 . 0 2
槐米 + 十 士 一 一 一 5 . 4 1 . 0 15
降香 十 十 一 一 一 一 5 . 5 1 . 002
桑枝 十 十 一 一 一 一 5 . 6 1 . 009
板蓝根 十 + + + 士 士 5 . 0 1 . 0 4 1
忍冬藤 一 + + 士 一 一 5 . 4 1 . 0 12
石韦 + 十 + + 一 一 4 . 8 1 . 0 2 1
葛根 士 + 十 士 一 一 5 . 8 1 . 0 28
桑白皮 士 十 + 一 一 一 5 . 4 1 . 0 13
, 注 : 表 中药液体积 : 生药为 4 : 1 ( m l / g ) . 观察时间为
3
.
o h
。
实验结果表明 , 壳聚糖对所选取 的单味
中药浸提液均有一定的澄清作用 , 影响因素
中壳聚糖加入量为主要因素 , 加入太多或太
少均不澄清 。浓缩比别 、 放置时间也有一定影
响 。 所选中药水煎液 p H 均小于 7 。
3 T L C 定性比较
提取方法流程图 :
水煎液塑叶“
。入 `%壳聚糖乡量
}一加入 乙酷含醇鱼 “ 5%
L~ 自然冷却
~ 放置过夜
~ 滤过~ 上清液
按流程图方法取得上清液 ,再用有机溶
剂萃取或水浴蒸干后超声提取得供试液 。 按
1 9 9 5 版 《中国药典 》一部相应单味药材 “ 鉴
中 成 药
别” 条目下所载方法选择对照品 (对照药材) ,
按其层析条件点样 ,展开 ,拍照 ,结果见图 1 。
. . . 曰. . . 曰 . 知. , . . , . . . ~
0 0 二 今 毛》 心 O 合
. ,`0no
;
臼
1 2 3 4
葛根 补骨脂
O 口 口
. 夕 口…今 户 O 二
1 2 3 4 2 3 4
槐米 降香
… ,1 2 3 4 宜 愁百 4大育叶 1
(点样 2 0拼l )
大青叶 2
(点样为 5闪 )
一「 一
劝 n o
. 对照品或对照药材
2
. 絮凝供试液
3
. 醇沉供试液
1
. 水煎供试液
f 2 3 4
紫莞
图 1
结果表明 : 葛根 、 降香 、 补骨脂 、槐米等经
T L C 鉴别表明 : 絮凝 、 醇沉 、 水煎三者供试液
斑点基本一致 , 在对照品位置上均显示相同
颜色的斑点 。 紫苑 T L C 供试液 1 为对照药材
1 9 9 8 年第 2 0 卷第 1 0 期
的石油醚提取物 , 其絮凝供试液在相应位置
无斑点 。大青叶絮凝供试液如点样量少时 ,结
果也为阴性 。
4 大青叶供试液中靛玉红含量定量研究
4
.
1 色谱条件 色谱柱 C , 。 , ( 5拌m , 4 . 6m m
X 2 5 o m m 大连化 物所 ) , 流动相为 甲醇一水
一甲醇 ( 8 0 : 2 0 : 1 ) , 流速 1 . o m l /m i n , 检 测
波长 5 4 o n m ,进样量 2 0拜l 。
4
.
2 标 准 曲线 精密称取靛玉红对照品适
量 , 以无水乙醇 , 溶解 。 精密吸取 l m l , Zm l ,
3m l
,
4m l
,
s m l 分别 置 l o m l 量瓶中 , 加无 水
乙醇至刻度 ,分别注入液相色谱仪 , 以峰面积
为 纵坐标 , 浓度 ( m g / m l) 为横坐标绘制 标准
曲线 。 得 回归方程 A 一 7 8 2 85 . 7 C 一 0 . 74 , r -
0
.
9 9 9 7
。 在 0 . 2 8一 1 . 4 2拌g / m l 范围内线性关
系 良好 。 精密度 R S D 一 1 . 6肠 , 重复性试验
R S D = 2
.
1%
。
4
.
3 供试液含量浏定 方法及加样回 收率
按流程图方法取得上清液 (含 5 9 生药量 ) , 乙
醚萃取 ,定容 s m l 。 吸取一定量供试液 (絮凝
液 8 0 0拜l ,其余 2 0 0拌l )点样 , 以苯一丙酮 ( 4 ,
1) 为展开剂 。 取 出晾干 ,刮取紫红色带 , 以无
水乙 醇洗脱 ,定容 I Om l 为供试液 ,注入液相
色谱仪 。 加样回收率 9 0 . 7 2% , R SD = 4 . 7 % ,
n = 5
。
.4 4 正交设计优选壳聚糖最佳澄清条件
根据表 2 所设水平因素进行正交试验 , 结果
见表 3 ,表 4 。
经直观分析和 方差分析可知 B 3 A ZC , 为
最佳絮凝澄清条件 , 即浓缩比例为 4 : 1 , 壳
聚糖加入是为 1 . Zm l / g 生药 , p H 值 4 . 2 。 3
个因素中 ,壳聚糖加入是为显著性因素 。
4
.
5 3 种提取工艺的 比较 按 4 . 4 选取 的
最佳澄清条件 ,制备絮凝供试液 , 醇沉浓度为
6 5%
。 结果见表 5 。
表 2 水平因素表
浓缩比例
( m l / g 生药 ) 壳
聚搪加入量
( m l / g 生药 ) p H 值
1 2
:
1 2
.
0 4
,
2
2 4
:
1 1
.
6 5
.
2
3 6 : 1 1
.
2 6
.
2
表 3正交试验结果
试验号 试验条件
A B C D
峰面积 靛玉红含量年 g / g )
1 1 1 1 1 4 0
.
0 6
.
5
2 1 2 2 2 4 4
.
7 7
.
2
1 3 3 3 34 6
.
2 7
.
5
4 2 1 2 4 3 3
.
1 7
.
0
5 2 2 3飞 4 9.4 8 .0
6 2 31 2 5 5
.
6 9
.
0
7 1 3 32 4 1
.
5 6
.
8
8 2 31 4 7 3
.
8 7
.
8
2 1 5 9 3 32
.
5 8
.
5
1 2 1
.
2 2 0
.
32 3
.
32 3
.
0
1 2 4
.
0 2 3
.
0 2 2
.
7 2 3
.
0
1 2 3
.
1 2 5
.
0 2 2
.
2 2 3
.
3
表 4 方差分析表 ( Fo.。 5 ( 2 .2 , = 19 . 0 )
1 u M S F
0
.
6 8
1
.
8 6
0
.
0 8 5
0
.
0 5 5
1 2
.
3 6
3 3
.
8 2
1
.
5 5
宁白,自9éQ8一O
, .1门11.匕,é件了111`,J
.…1no00已」ABc误总
表 5 大资叶中靛玉红的含 t 比较 (n ~ 3)
水煎液 水煎醉沉液 絮凝液
st’l
水 , 在水煎液中仍有一定含量 ;醇沉液中靛玉
红含量高于水煎液的可能原因是 : 在本实验
条件下 ,水煎液在冷却静置过程中 ,靛玉红可
能因温度降低而部分析出 , 随小颗粒沉降于
容器底部被过滤除去而使含量减少 。 但醇沉
时未经充分静置 ,增加了新的溶剂 ,改变了溶
剂系统 。而靛玉红 在醇中溶解度大于水中 (不
溶于水 ,微溶于乙醇闭 ) 。 因此醇沉液中靛玉
红含量较水煎液高 。絮凝液中 , 除去了蛋白质
等起助溶作用 的组份 ,使靛玉红溶解度降低
而析出 ,被沉淀吸附包裹而损失 , 含量偏低 。
5 讨论
5
.
1 壳聚糖絮凝澄清剂用于大多数单味中
药浸提液均有一定的澄清范围 , 能起一定的
澄清作用 。 与醇沉相 比 ,不影响甚至能提高某
些成分的含量 2[, “〕。
5
.
2 本实验表明 , 大青叶中的靛玉红 , 紫苑
石油醚提取物中某些成分 , 在絮凝液中含量
偏低 。 提示我们当药液中有效成分水溶性较
小时 , 使用壳聚糖作为澄清剂时应慎重 。
5
.
3 本文仅探讨了壳聚糖用于精制部分单
味中药浸提液的澄清效果 , 其在中药复方中
的应用 ,还需进一步研究 ,找出其中普遍性规
律 , 合理应用 , 使该项技术早 日转化为生产
力 。
参 考 文 献
1 王燕伟 . 等 . 浙江中医学院学报 , 1 9 95 , 1 9 (2 ) : 30
2 倪建 ,等 . 中草药 , 29 9 5 , 2 6 ( 1 2 ) : 6 3 7
s 张文清 , 等 . 华东理工大学学报 , 2 99 6 , 2 2 ( 1 ) : 10 5
4 海氏有机化合物辞典 , 第三册 , 科学出版社 , 1 96 5 : 14
( 收稿 日期 : 1 9 9 7 年 2 月 )
一峰面积含量 (四 / g )点样量 (私l) 2 0 0 8 0 0结果表明 : 大青叶提取液不同澄清工艺中靛玉红含量高低如下 : 水提醇沉 > 水提液
> 絮凝液 。 可能原 因为 : 中药水煎液成分复
杂 , 其中皂贰 , 蛋 白质等能降低溶液 表面活
性 ,起到增溶和助溶的作用 。同时中药水煎液
为粗分散体系 , 混悬于其中的微粒可能包含
有一些难溶性组分 。 因此 , 靛玉红等虽不溶于
中国非处方药物协会发展会员
中国非处方药物协会既是全 国性的 、 民间的社会团体 , 又是世界大众药生产者联合会的理事
会成员 。 为了更好地贯彻协会宗旨 , 即 :面向企业 , 为会员服务 , 沟通与政府部门以及会员之间的联
系 ,建立与世界大众药生产者联合会及其他国际组织的交流与合作 ,拟在原有协会会员的基础上
发展一批新会员 。 愿意参加中国非处方药物协会作为团体会员的单位 ,请与中国非处方药物协会
秘书处联系 ,地址 :北京北礼士路 3 8 号 ,邮编 : 1 0 0 8 1 0 , 电话 : 0 1 0一 6 8 3 4 3 8 5 6 。
中 成 药