全 文 ：关白附毒性作用研究
中国中医研究院中药所 ( 北京 1 0 07 0 0 )一乞 ;叔杰 程 丽 萍 吴连英
关白附为毛芡科植物黄花乌头块根 , 多年来 , 我
国上海 、 杭州等南方部分省市的中医临床将关 白附用
于治疗寒湿痹痛 、 偏头痛 、 腰膝关节冷痛等 , 收到 良
好效果 。 历代文献记载关 白附有毒 L’一 3 ] 、 有大毒 [ ` ] 、
有小毒 、 毒性很小 s[J 等情况不一 。 多数没有实验研究
依据。 目前对于关 白附中有效成分生物碱等分离鉴定
及单丁成分纯品药效作用研究较多 , 已有将关白附甲
素开发成 “ 安心注射液 ” 的报道 。 但对其药材饮片毒
性研究报道较少 , 我们在进行关白附饮片系统研究 同
时 , 对关 白附不 同制法所得样品进行毒性 、 刺激性作
用探讨 , 以便给中医临床正确应用 该 药提 供科学依
据 , 为进一步炮制工艺改进工作打下基础 。
1 实验材料
1门 原料来源
关白附产 自辽宁背口 , 购自营 口市药材公司 , 经
鉴定为毛莫科植物黄花乌头 ( A c o n i tu 机 c o r e a 子了乙研 z
( L v e l ) R a p a i e s
. 的干燥块根。
1
.
2 样品制备
煎剂 : 取关 白附一定量 , 加 8 倍蒸馏水浸 1 小时
后 , 放电炉煮 , 保持沸 A c m in , 过滤 , 然后再 加 6 倍
蒸馏水煮 , 保持沸 拐 m in , 过滤后合并两次滤液 , 水
浴浓缩至 1 彭m l ( 含生药 ) , 冰箱放置备用 。
混悬 液 : 取关 白附粉碎过 10 0 目筛 , 加蒸馏水配
成知% 浓度备用 。
冷浸液 : 取关 白附粗粉 ( 过 20 目筛 ) , 精密加 4
倍蒸馏水浸 4 5小时 , 时时振摇 , 离 心 ( 3 0 0 o r / m i n )
15 ,
, 浓度为 2 5%和 10 。% , p H = 6 , 放冰 箱备 用 。
温浸 液 : 取关白附粗粉 ( 过 2 0目筛 ) , 精密加蒸
馏水 10 倍量 , 称 重 , 然后放 入 70 ℃左 右 水浴浸 6 小
时 , 拿 出放冷称 重 , 用 燕 馏 水 补 足 原 重 量 , 离心
( 忿0 0 Cr /m i n ) 2 5 ’ , ( 精密 最准体积 ) 放 7 0 ℃左右水
浴 浓缩为 5 0 %浓度 , pH = 6 ) , ( 每毫升含 生药 0 . 铭 ) ,
冰箱放置备用 。
9 5% 乙 醉提 取物 : 取关 白附 粗 粉放 入 圆底烧瓶
内 , 加 4 倍95 % 乙醇浸 一夜后 , 回流提取 4 小时 , 过
滤 , 残渣再加 3 倍量 95 % 乙醇浸 一夜后 , 再回流提取
4 小时取下 , 过滤 , 滤液合并 , 回收乙醉 , 于 60 ℃以
下低温水浴蒸干 , 用蒸馏水 ( 少加几滴吐温一 8。 ) 配
成 2 . ￡g / m l ( 含生药 ) , 冰箱放置备用 。
5 0% 乙醇提 取物提取方法同 。 5% 乙醇提取一样 。
1
.
3 实验动物
昆明种小 白鼠 , 由本院动物室提供。
2 方法与结果
2
.
1 关 白附急性毒性研究
口服给药 : 取 体 重 2 0 士 2 9 健 康 小白鼠 , 禁食
16 h
, 按体重和性别分组 , 每组 功只 , 雌雄各半 , 给
于关白附上述 5 种方法制备的样品 , 以最大体积最大
浓度给药一天 , 隔 3 小时灌胃一次 , 共 3 次 , 每次给
药容积为 0 . 4m l/ 10 9 , 计算 3 次累 汁给药剂量 。 对照
组给等容积常水 , 观察 7 天 内小鼠死 亡只数及体重变
化情况 , 结果列于表 1 。
另取体重 20 士 2 9小鼠切只 , 雌雄各半 , 分 4 组 ,
每组 10 只 , 停食 16 h 。 分别灌 胃给与关白附 5 0% 乙醉
提取物 o . 4m l l/ 〔 g , 对照给同容积 水 , 给 药一次。 测
表 1 关白附不同方法制备样品对小鼠体重增长和死亡率的影响
P 死亡率S重
·工
一X
体值增组 别 动物数( 只 ) 给药途径 给药剂量 相当人 给药前( g / k g / 日 ) 用量倍数 体重义 士 S 第
一七天体重又 士 S
ù日nCU10[勺阳公ǎUCVljCO门户曰n,自卜少乡\/
对照
煎剂
混悬剂
热浸剂
冷浸剂
9二%醉捉物
等容积水
1 2 0
3 6
6 0
3 0
了 Q
1 3 3 3
4 0 0
6 6 7
3 3 3
8 3 3
1 8
。
4 3 士 0 。 8 2
1 8
。
5 5 士 O。 9 4
1 8
.
7 5 士 1 。 G6
1 8
.
8 2 士 1 。 0 7
1 9
。
3 8 士 1 。 0 0
2 0
。
6 2 士 O。 5
2 7
。
2 9 土 1 。 6 2
2 7
. 名6 士 1 。 8 5
2 7
。
9 二士 竺 . 6 3
2了。 8 1 士 2 。 2 1
2 9
:
1 9 士 3 。 O忍
8
。
8 6 士 工。 7 6
9
。
3 2 士 1 。 9 2
9
, 二G 士 2 . CS
8
。
9 2 士 2 , 9 9
9
』 吕士 2 。 乙
阳四砂OroP即八曰éJ八énó日`n曰1.Jōwe一1,工1,1
P 值与对照 组比较
5夕吐 中药材第 : 吕卷第几期 ] 9 9 5年 10 月
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 1995. 10. 021
定 L 。 钾 , 按改进 寇 氏 法 计 算 , 其 I D孙为 192 . 4 4 士
0
.
0 2 9 9 / k g
。 结果见表 2 。
我们为比较全面探讨关白附的安全性 , 采用传统
临床用药煎柑 , 入 丸散所用的粉剂 ( 混悬剂 ) 和为防
止成分破坏用冷浸方法制备的样品等给与小鼠 , 从结
果可 以看出 , 手C对小 鼠体重及死亡影响不明显。
腹腔给药 : 取体重 20 士 2 9 健康小白鼠 , 按体重和
性别分组 , 每组 10 只 , 雌雄各半 , 分别一 次腹腔注射
给与冷浸剂 遭 g 、 7 9 / kg , 热浸剂 5 9 、 1{ 9 / k g , 观察
7 天内小鼠死亡只数及毒付反应 。 结果见表 3 。
本结果表明腹腔给药 , 关白 附 冷 热 浸剂均表现
一定毒性 , 但两者相 比热浸剂毒性略低 , 说明关白附
J听含毒性物质在70 ℃水浴加热提取时开始破坏 , 使毒
性降低 20 一 30 %左右。
2
.
2 关 白附时小鼠耳皮肤刺激作 用
表 2 关白附 50 % 乙醇提取物对小鼠 L O S O测定
剂量全于l ( g / k g )关
1 3 8
17 2
2 1 5
2 6 9
死亡率 ( 只 /只 )
1 / 1 0
4 / 1 0
6 / 1 0
9 /
,工0
取体重 20 士龙健康小白鼠 , 随机按性别分组 , 每
组 10 只 , 雌雄各半 , 小鼠右耳涂药 , 左耳 自身对照 ,
每只小鼠耳涂冷浸剂 ( 1 0 % ) o . o s m l /只 , 和% % 乙
醇提取物 ( 2 . 三g / m l 含生药 ) o . 05 m l/ 只 , 2 小时后 ,
用铜冲砸下小鼠耳相同面积 , 组织天平称重 , 比较小
鼠耳肿胀程度 。 结果见表 4 。
结果表明在木实验条件下 , 两种样品对小鼠耳皮
肤刺激作用不明显 。
3 讨论与小结
3
.
1 历代文献和药典将关白附列 为 毒性药材 , 并记
载口尝有麻辣感 。 我们将关白附 药 材 饮 片制备成煎
剂 、 混悬剂 、 70 ℃水浴热浸剂 、 提取物 、 冷浸剂等 6
种样品进行对小鼠死亡率及体重等方面影响研究 , 进
行对小白鼠耳皮肤刺激作用探讨等 , 其结果毒性 、 刺
激性表现都不明显 。 我们在 似年曾报道闭 ( 辽宁朝阳
产关白附 ) 连续给与关白附混悬液高 达 15 9 /k g / 日 ,
共给28 天 , 结果显 示对小鼠生长及血像未见有明显影
响 , 其测得值均在正常范围之内 。 观察混悬液对家兔
眼结膜刺激作用及对家鸽催吐作 用 结 果反 应均不明
显 。 综上所有实验结果 , 我们认为关白附口服给药 ,
毒性极小 , 其麻辣刺激作用也不明显 。 因此将关白附
列为毒性药材 , 并 口尝有麻辣感的说法 , 应做重新考
虑 。
3
.
2 腹腔给与小鼠冷浸剂 7 . s g/ kg , ( 相当人 口服用
荟 g / k g 相当于原 生药
表3
量 8 3 倍 ) 热浸 剂 1〔 g / k g ( 相当人 口服 1 1 倍 ) , 显
关白附冷热浸剂对小鼠死亡率影响及毒付反应
乡「i 别 动物数
( 只 )
给药
途径
给药剂量
( g / k g )
死亡率
( % ) 毒付反应
对 只{!
乡 小刊星
l P
1 p
等容积水 无
) O
。
0 5 未死动 物精神不好 、
no,11
`
1
< 0
,
0 0 1
竖毛 、 活动迟缓 , 3 天
后逐渐恢复。
小剂么
大 刊员
1 0
直O
1 p
扣
5
」O
(、 > 0 。 0 5
I Q O < 0
。
0 0 1
热浸刹
P 与对 ;,飞组相比
表4 关白附对小鼠耳皮肤刺激作用
组 另}1 动物数( 只 ) 剂 址( m l /只 ) 右月二重 左耳重 右一左差 位
( m g
, 又 士 S )
月中胀率
( % )
八匕nJ,山1上冷长液
妇亡止次物
O
。
C S
O
。
0 5
1 0
。
1 土 2 。 CZ
9
。 了士 O。 6 7
8
。
5 士 1 。 5 8 1 。 6
8
。
7 士 O 。 8 2 1 。 0
> O
。 了5
> O
。
0 5
八口n甘1土J .上
中劲材第招卷第土。期 1 9 9 5年 1。月 · 5 2 5 ·
示毒性 。 小鼠分别死亡 的一10 。% , 其作 用发生几 分
钟之内呈惊厥状态下 死亡 。 未死动物也有毒性反应 ,
其体重 、 精神都出现异常 。 提 示 : 关白附如果考虑 这
方面给药途径 , 应注意去掉其中极少量的毒性物质 ;
冷热浸剂毒性 比较我们可以看出 , 加热可以破坏其中
毒性成分 。
关白附系统研 究其它方面 的结果 我们将陆续进行
报道 。
致谢 : 本实 验所用样品 由本所李先 端同志提取 。
参 考 文 献
中国药典 ( 一部 ) 。 北京 : 人 民 _ J立生 出版
社 , 1 9 7 7 : 2 4 3
全国中草药汇编 . 北京 : 人民卫生 出版社 ,
1 9 7 5 : 3生8
全国中药炮制规范 . 北京 : 人 民卫生出版社
1 9 8 8 : 5 5~ 5 6
马兴 民 . 新编中药炮制法 . 增 汀本 . 西安 :
陕西科技出版让 1怜 吐: 93
肖培 根 , 等 . 中国盯种乌头 属植物的根部形
态与亲缘成分和毒性间的相关系 . 药物分析
杂志 , 1 9 8 3 , 3 ( 5 ) : 9 3
吴连英 , 等 . 关 的附 , 高 白附抗炙及毒性比
较研究 . 中国中药杂志 , 1 9 9 1 , 1 6 ( 1 0 ) : 5 9 5
( 1 9 9 5一 0 2一 2 3收稿 1 9 9 5一 0 4一 2 8修回 )
· 制剂与质量 ·
树脂法生产龟鹿补肾液的工艺研究
广东华天 宝药厂 ( 顺德市 5 2 8 3 2 3 ) 钟 国华
摘要 对龟鹿补肾液的生产工艺进行了改进研究 , 山原来的酒沉法改为树脂 法。 对两种 工 艺试制
的 口服液成品 , 通过淫 羊茬贰 、 蛋 白质 、 多糖等成分的含量 比较 , 表明树脂法工艺试制 1 服液 成 品的
各项指标有明显提高 , 并保存了原有较佳的外观质量。
关键词 龟鹿补肾液 酒沉法 树脂法
龟鹿补肾液 由龟板胶 、 鹿角胶 、 黄茂 、 冤丝子 、
淫羊霍 、 炙 l「草、 山药 、 锁阳 、 续断 、 酸枣仁 、 覆盆
子 、 何首乌 、 狗脊 、 陈皮 、 熟地黄 、 金樱子等十六味
中药制成 , 具有补肾壮阳 、 益气养血 、 宁心安神 、 调
摄 阴阳之功效。
龟鹿补肾液处方的 中药组 成 , 品种多 , 成分复
杂 , 各种有效成分多达儿十余种 。 其现在的生产工艺
采用传统的水提酒沉法 , 为进一步提高龟鹿补肾液的
反量 , 及缩短生产周期 , 降低生产 成本 , 提高生产效
率 。 本文对龟鹿补肾液的制作工艺进行了改进探讨 ,
采用吸附树脂法生产工艺 , 通过一系列 的反复实验 、
比较 , 筛选了壳聚糖为絮凝剂 , 树脂M 为吸附剂 , 初
步确定 了试剂的工艺路线 。 同时 , 选择 了淫羊羞贰 、
蛋白质 、 多糖的含量 , 以及 相对密度 、 为内在质量指
标 , l一!服液的外观色泽 、 澄明 度 等 作 为外观质量指
标 , 对两种工艺制备的 口服液成品进行比较 , 结果报
道如下 。
1 材料与仪器
材料 龟板胶 、 鹿角胶 、 黄茂等十六味中药 ,
由广 东华 天宝药厂提供 。 吸附树脂 M , 吸附树脂X , ,
壳聚糖 ; 由夫津南开大学提供 。
仪器 高效液相色谱 仪 W at er s s功 型 , 数 据处
理机 W a t e r s 8 1 0型 ; 7 2 1分光光度计 。
2 方法和结果
2
,
1 工艺比较
酒沉法工艺 口服液的制备 : 按照龟鹿补肾液的处
方组 成 , 称取 I O o Cm l 口 服液 flJ 量的 药材 共 5 份 , 分
别如下操作 : 龟板胶 、 鹿角胶用水溶解 ; 淫羊蕾 、 陈
皮水蒸汽蒸馏 , 收集馏液 , 药渣与芜 丝子 等十二味加
水煎煮 2 次 , 滤过 , 合并滤液 , 浓缩至流浸膏状 , 加
入乙醉适量 , 静置 , 滤过 , 回收 乙醇 , 浓缩至适量 ,
加入龟板胶 、 鹿角胶溶液 , ;孚羊茬 、 陈皮蒸馏液及蔗
糖20 Cg , 炼蜜 10 馆 , 防腐剂等 , 摇 匀 , 滤过 , 加蒸馏
水至 l o 0Om l , 摇匀 , 分装 , 灭菌 , 检查 , 即得 。
树脂法工艺 口服液的制备 : 同 上 法 称 取 5 份药
材 , 制得蒸馏液 , 龟板胶及鹿角 胶 溶 液 , 药材水提
液。 然后分别按如下操作 : 在药材水捉 液巾 , 边搅拌
边加入壳聚糖絮凝溶液适量 , 静置 , 取上层清液 , 加
5忿6 · 中药材第 2 8卷第 2 0期 2 9 9 5年1 0月