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赶黄草不同生育时期植株重量及有效成分含量变化研究



全 文 :文章编号:1001 - 4829(2013)06 - 2666 - 03
收稿日期:2013 - 04 - 20
基金项目:四川省“十二五”财政(基因)育种工程“红花、赶黄草
等分子标记辅助培育新品种”(2011JYGC02-006)
作者简介:孙 佩(1983 -) ,女,四川德阳人,助理研究员,研究
方向:中药材品种鉴定与品质评价,E-mail:sunpei210 @ 163.
com,电话:18628342210;* 为通讯作者:杨 晓(1966 -) ,男,
四川乐至人,副研究员,主要从事中药材品种选育及栽培技术研
究,Tel:13982918090,E-mail:sctcm@ sina. com。
赶黄草不同生育时期植株重量及
有效成分含量变化研究
孙 佩,童 文,杨 晓* ,黄璐琳,胡尚钦
(四川省农业科学院经济作物育种栽培研究所,四川 简阳 641400)
摘 要:为建立赶黄草适宜采收期提供依据。在赶黄草不同生育时期采样,进行株高、植株重量、分部位重量、总黄酮和槲皮素含
量测定。结果表明,赶黄草植株重量在花期达到最大,其中叶片和茎的增长是产量形成的主要部位;总黄酮和槲皮素含量随赶黄
草植株的生长整体呈下降趋势;槲皮素主要分布在赶黄草的叶和花中,在茎和分枝的含量极少。建议赶黄草药材和叶片的适宜采
收期为花期。
关键词:赶黄草;总黄酮;槲皮素;采收期
中图分类号:S567. 2 文献标识码:A
Study on Variation of Plant Weight and Active Component
Contents in Herba Penthori at Different Growth Stages
SUN Pei,TONG Wen,YANG Xiao* ,HUANG Lu-lin,HU Shang-qin
(Industry Crop Institute,Sichuan Academy of Agriculture Sciences,Sichuan Jianyang 641400,China)
Abstract:To provide basis for selecting best harvest time of Herba Penthori,the plant height,plant weight,part weight,total flavonoids and
quercetin content of Penthorum plants which were taken at different growth stages were determined. The result showed that plant weight
reached the maximum at anthesis,of which the leaf and stem growth were the main parts of its yield. The content of total flavonoids and
quercetin decreased with the overall growth of Penthorum plants. Quercetin was mainly distributed in Penthorum leaves and flowers and with
little content of stem and branches. It was concluded that the best harvest time of Penthorum plants and Penthorum leaves was anthesis.
Key words:Herba penthori;Total flavonoids;quercetin;Harvest time
赶黄草来源于虎耳草科植物扯根菜[1],具有降
酶、保肝、退黄、健脾的功能,未见临床配方使用,主
要作为中成药“肝苏颗粒”、“肝苏胶囊”的原料药
材,目前也多见于赶黄草茶等食品应用。笔者所在
课题组在赶黄草品种选育和田间生产过程中,对赶
黄草进行了生长观测和有效成分含量测定,为建立
适宜采收期提供依据。赶黄草中有效成分为黄酮类
化合物[2],以总黄酮或槲皮素为目标提取物进行提
取工艺的研究较多[3 ~ 4],因此,笔者选择总黄酮和槲
皮素为有效成分测定指标。
1 材料与方法
Agilent 1200 高效液相色谱仪,G1314B VWD检
测器,Agilent Chemstation 化学工作站,TU-1801 紫
外 -可见分光光度计,槲皮素对照品(中国药品生
物制品检定所,批号 100081-200406)芦丁对照品
(中国药品生物制品检定所,批号 100080-200707) ,
甲醇、磷酸为色谱纯,超纯水(Milli-Q纯化系统) ,其
他试剂均为分析纯。实验所用赶黄草经四川大学张
浩教授鉴定为虎耳草科植物扯根菜 Penthorum
chinense Pursh.。赶黄草样品分别于 6 - 9 月间采自
四川省农业科学院经济作物研究所种植基地,干燥
粉碎过 3 号筛,作为含量测定供试品。
2 结果与分析
2. 1 生长观测
赶黄草生育时期包括种子育苗,移栽定植后进
6662
西 南 农 业 学 报
Southwest China Journal of Agricultural Sciences
2013 年 26 卷 6 期
Vol. 26 No. 6
DOI:10.16213/j.cnki.scjas.2013.06.069
表 1 不同生育时期赶黄草株高和植株重量
Table 1 Plant height and plant weight of Penthorum plants at differ-
ent growth stages
生育时期
Growth stages
株高(cm)
Plant
height
植株重量(g)
Plant
weight
苗期 Seedling stage 20. 5 1. 1
分枝期 Branching stage 34. 8 4. 1
分枝生长期 Branching growth stage 50. 9 7. 2
现蕾期 Squaring stage 86. 0 19. 3
花期 Flowering stage 125. 2 32. 7
果期 Fruit stage 130. 0 32. 3
行直立生长,从茎部叶片叶腋处萌发分枝,分枝和主
茎持续向上生长,主茎和分枝顶部依次出现花蕾,开
花,结果。生长观测分别于苗期、分枝期、分枝生长
期、现蕾期、花期、果期,在田间采用 5 点取样法,每
点采集 2 株赶黄草,共 10 个样品用于测定株高、分
部位重量、植株重量,并取平均值,测定结果见表 1,
图 1。
由表 1 可知,赶黄草整个生育时期株高持续增
长,植株重量至花期持续增长,果期略下降。由图 1
可知,叶片和茎增长幅度最大,是赶黄草产量形成的
主要部位。其中叶片重量在花期增加最多,果期由
于茎下部叶片脱落较多,叶片重量减少,导致果期植
株重量下降。分枝、花转化为果、重量均持续增加,
但对产量贡献有限。
2. 2 总黄酮含量测定
2. 2. 1 对照品溶液的制备 精密称取芦丁对照品
24. 8 mg,置 50 mL容量瓶中,加 60 %乙醇适量使溶
解并稀释至刻度,摇匀。精密量取 5 mL,置 50 mL
量瓶中,加 60 %乙醇至刻度,摇匀,即得 49. 6 μg /
mL芦丁对照品溶液。
2. 2. 2 标准曲线的制备 精密量取对照品溶液 1.
0、2. 0、3. 0、4. 0 与 5. 0 mL,分别置 10 mL量瓶中,各
加 0. 1 mol /L三氯化铝溶液 2 mL、1 mol /L醋酸钾
图 1 不同生育时期赶黄草各部位重量变化
Fig. 1 Weight variation of Penthorum part at different growth stages
溶液 3 mL,加 60 %乙醇至刻度,摇匀,放置 30min;
以相应的溶液为空白。在 420 nm 波长处测定吸收
度,以吸收度为纵坐标、浓度为横坐标、绘制标准曲
线 Y = 0. 023X - 0. 062,r = 0. 9995。
2. 2. 3 供试品溶液制备 取本品粉末约 0. 1 g,滤
纸包裹置索氏提取器中,加三氯甲烷加热回流 4 h,
弃去三氯甲烷液,药渣挥干溶剂,置 50 mL 烧瓶中,
精密加入 60 %乙醇溶液 20 mL,称定重量,置水浴
锅中加热回流 30 min,放置至室温,再称定重量,用
60 %乙醇补足减失的重量,过滤,取滤液 2 mL,置
10 mL 量瓶中,照标准曲线的制备项下的方法,自
“加 0. 1 mol /L三氯化铝溶液”起依法测定吸收度,
测定结果见表 2。
2. 2. 4 方法学考察 稳定性试验:取同一供试品,
在 30,35,40,45,50 min检测,其吸光度 RSD < 3 %,
表明供试品溶液在 50 min 内稳定。精密度试验:取
同一供试品,连测定 5 次,其吸光度 RSD < 3 %,表
明仪器精密度良好。重现性试验:取同一供试品 5
份,按照供试品的制备和检测方法制备并检测,其吸
光度 RSD < 3 %,表明重现性良好。
2. 3 槲皮素含量测定
按照《四川省中药材标准》2010 年版赶黄草项
下【含量测定】规定的高效液相色谱法[1],测定样品
中槲皮素含量,结果见表 2。
表 2 不同生育时期赶黄草含量测定结果(n =3)
Table 2 The active component content of Penthorum plants at different growth stages
生育时期
Growth stages
叶片比重(%)
Leaf weight proportion
总黄酮含量(%)
Total flavonoids
content
槲皮素含量(%)
Quercetin content
苗期 Seedling stage 58 4. 3 0. 58
分枝期 Branching stage 67 4. 5 0. 49
分枝生长期 Branching growth stage 54 4. 3 0. 47
现蕾期 Squaring stage 50 3. 9 0. 41
花期 Flowering stage 41 3. 6 0. 39
果期 Fruit stage 33 3. 5 0. 37
注:叶片比重为生长观测数据中叶片重量与植株重量之比。
Note:Leaf weight proportion divide leaf weight by plant weight.
76626 期 孙 佩等:赶黄草不同生育时期植株重量及有效成分含量变化研究
表 3 赶黄草不同部位槲皮素的含量(n =3)
Table 3 Quercetin content of Penthorum part
部位
Part
含量(%)
Quercetin content
茎生叶 Cauline leaf 0. 50
分枝叶 Leaf grow on the branch 0. 75
分枝 Branch 0. 06
茎 Stem 0. 04
花 Flower 0. 34
由表 2 可知,总黄酮和槲皮素含量随赶黄草植
株的生长整体呈下降趋势,其中总黄酮含量与叶片
比重呈正相关(r = 0. 9655,n = 6) ,在叶片比例最高
的分枝期含量最高。
2. 4 赶黄草不同部位槲皮素含量测定
将赶黄草花期样品分部位进行测定,测定结果
见表 3。由表 3 可知,赶黄草的槲皮素主要分布在
叶和花中,后萌发的分枝叶含量最高,在茎和分枝的
含量极少。
3 讨 论
3. 1 总黄酮和槲皮素的含量测定
赶黄草是全草入药,参考《中国药典》山楂叶[5]
项下总黄酮含量测定样品前处理用氯仿索氏回流至
无色,可以除去叶绿素对吸光度的影响。笔者摸索
赶黄草总黄酮测定方法发现,经典的亚硝酸钠 -硝
酸铝 -氢氧化钠显色法,样品溶液加入氢氧化钠会
产生沉淀,影响吸光度,不宜采用。笔者进行方法学
考察,采用三氯化铝溶液 -醋酸钾显色法,样品在显
色后 50 min 内稳定,显色时间再延长则溶液变浑
浊,导致吸光度增加,应在显色后 50 min 内完成测
定。
高效液相色谱法测定槲皮素,能更准确反映赶
黄草不同生育时期、不同部位中以槲皮素为苷元的
黄酮类成分含量变化。
3. 2 赶黄草的采收建议
赶黄草槲皮素含量高峰期为苗期,总黄酮含量
高峰期为分枝期,产量高峰期为花期,含量高峰期与
产量高峰期不一致,要考虑有效成分的总含量达最
大值时为适宜采收期。由表 1 植株重量分别与表 2
槲皮素含量、总黄酮含量相乘,可得到不同生育时期
单株有效成分总含量,计算得知花期有效成分的总
含量最大。由表 3 可知,赶黄草的槲皮素主要分布
在叶和花中,在采收过程中,应考虑以叶为主要部位
进行收集。因此,赶黄草药材的采收期建议在花期,
此时产量最高,有效成分的总含量最大,且采收后叶
片也不易脱落。笔者观察到赶黄草进入果期后,由
于生殖生长争夺营养,叶片容易脱落,在晾晒搬运过
程中叶片损失很大,直接影响药材的有效成分含量。
若以赶黄草叶片做制茶用,也建议在花期采收,此时
叶片产量最大。对于赶黄草提取物的生产,以节约
提取溶剂,提高提取率为目的,建议采集叶片为提取
原料。
参考文献:
[1]四川省中药材标准编委员会. 四川省中药材标准(2010 年版)
[S].成都:四川科学技术出版社,2011. 526 - 530.
[2]姜明华. 赶黄草有效成分的分离鉴定及其活性与提取工艺研究
[D].广州:华南理工大学,2012.
[3]汪洪武,任启生,冯长根,等. 赶黄草中黄酮提取方法的研究
[J]. 中国药学杂志,2002,37(7) :551.
[4]程贺军,罗红艳,冯 超. 正交试验法研究赶黄草中槲皮素的提
取工艺[J]. 西南民族大学学报·自然科学版,2009,35(1) :104
- 107.
[5]国家药典委员会.中国药典[S]. 一部.北京:2010.
( 责任编辑 陈 虹)
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