全 文 ：蒙药广枣 、麻黄 、锦草中
总黄酮的提取及含量的测定
孙占才 ,赵丹庆 ,刘 鑫
(内蒙古民族大学化学学院 ,内蒙古 通辽 028043)
〔摘 要〕本实验以乙醇为溶剂 ,超声波辅助提取广枣 、麻黄 、锦草中总黄酮 , 利用分光光度法测定总黄酮的含
量 ,并测定其回收率.结果表明:广枣黄酮含量为 11.6 mg/g , RSD:0.89% ;麻黄黄酮含量为 37.3 mg/ g , RSD:
0.97%;锦草黄酮含量为 15.4 mg/ g , RSD:1.23%.三种样品的回收率在 94.1%～ 96.35%之间.
〔关键词〕分光光度法;广枣;麻黄;锦草;总黄酮
〔中图分类号〕TQ028 〔文献标识码〕A 〔文章编号〕1671-0185(2008)01-0019-03
Extraction and Determination of Content of Total
Flavanone of Guangzao ,Ephedra ,Kam grass
SUN Zhan-cai ,ZHAO Dan-qing ,LIU Xin
(College of Chemistry , Inner Mongolia University for Nationalities , Tongliao 028043 , China)
Abstract:In this experiment , total f lavonoids of Guangzao , Ephedra , Kam grass were ex tracted
by ethanol as solvent and ult rasonic aided , spect rophotometry w as used to determine the content
of f lavonoids and recovery rate.The results show ed:Guangzao in C =11.6 mg/g , RSD:0.89%;
Ephedra C content=37.3 mg/g , RSD:0.97%;Gallic C content=15.4mg/g , RSD:1.23%.
Three samples of the recovery 94.1%～ 96.35%.
Key words:Spectrophotometry;Guangzao;Ephedra;Kam grass;Flavonoids
广枣:漆树科植物南酸枣[ Choerospondias ax illaris(Roxb.)Burtt et Hill]的干燥成熟果实.甘 、酸 ,平.含有胡萝卜甾醇 、早
谷甾醇 、水杨酸 、山奈酚-7-O-葡萄糖苷 、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯 、多种氨基酸 、无机元素硅 、钙 、钾 、钠等化学成
分.具有行气活血 , 养心安神 ,抗心肌缺血 , 保护心功能等作用.用于气滞血瘀 ,胸痹作痛 , 心悸气短 ,心神不安.麻黄素:天然
存在于麻黄科植物和盘托出草麻黄(Ephedra sinica Stapf)、木贼麻黄(E.equisetina Bge)的茎等中 , 也可化学合成制得.用于
防治慢性轻症支气管哮喘 ,对重症较差.用于治疗蛛网膜下腔麻醉或硬膜外麻引起的低血压及慢性低血压等.治疗各种原
因引起的鼻黏膜充血 、肿胀引起的鼻塞.也可治疗催眠药中毒.近年又新用于治疗遗尿症 、糖尿病神经性水肿 、三叉神经痛 、
顽固性呃逆 、性交不射精均取得较好疗效.锦草:大戟科植物地锦(Euphorbia humifusa Willd)或斑地锦(E.Supina Raf.)的干
燥全草.辛 , 平.主要含鞣质 、没食子酸甲酯 、槲皮素等成分.具有清热解毒 , 凉血止血 ,抑菌作用.
黄酮类化合物是一大类天然产物 ,广泛存在于植物界 , 是许多中草药的有效成分.黄酮类化合物具有抗癌 , 抗肿瘤 , 抗
心脑血管疾病 ,抗炎镇痛 , 免疫调节 ,降血糖 , 治疗骨质疏松 , 抑菌抗病毒 , 抗氧化 , 抗衰老 , 抗辐射等作用 ,所以研究蒙药中
黄酮含量意义重大.本文旨在通过研究广枣 、麻黄 、锦草中的总黄酮含量 ,为其药理研究提供信息和依据.
收稿日期:2007-09-26
基金项目:内蒙古民族大学自然科学基金项目(MDX2007037)
作者简介:孙占才(1953-),男 ,内蒙古通辽市人 ,高级实验师 ,主要从事化学基础理论与实验教学的研究.
第 23 卷 第 1 期 内蒙古民族大学学报(自然科学版) Vol.23 No.1
2008年 1 月 Journal of Inner Mongolia University for Nationalities Jan.2008
DOI :10.14045/j.cnki.15-1220.2008.01.021
1 实验部分
1.1 仪器 、试剂与实验用药 仪器:KQ3200V 型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);分光光度计(上海第三分析仪
器厂);FA2104N 电子天平(上海民桥精密科学仪器有限公司).
试剂和药品:芦丁(中国药品生物制品检定所 ,批号:100080-200306)成都欧康植化科技有限公司;80%乙醇;5%亚硝
酸钠和硝酸铝;4.3%氢氧化钠;实验用水为二次石英亚沸蒸馏水.
1.2 标准品溶液的制备 准确称取芦丁标准品 25.00 mg 于 100 mL 容量瓶中 , 加入少量 80%乙醇 ,超声溶解 , 定容至刻
度 ,摇匀 , 得芦丁标准溶液 ,浓度为 0.25 mg/ mL.
1.3 标准曲线的绘制 精确量取芦丁标准品溶液 0.00、0.5、1.0、2.0 、3.0 ml分别置于 10 mL 的比色管中 , 均用水稀释至
2.40 m L ,各加 5%亚硝酸钠 0.40 mL ,混匀 , 放置 6 min ,加 10%硝酸铝 0.40 m L混匀 , 放置 6 min , 加 4.3%氢氧化纳 4.0
m L ,最后用水稀释至刻度 ,混匀 , 放置 15 min.以试剂空白为参比 , 在 506 nm 处测定吸光度值(A).以吸光度(A)为纵坐标 ,
浓度(C)为横坐标绘制标准曲线 , 得回归方程:A=0.9269C+0.0035(mg/ 10mL), R=0.99955.
1.4 提取方法 准确称取样品 1.00 g 于 100 mL 锥形瓶中 ,加入一定浓度乙醇 30 mL , 浸泡 24 h , 超声提取 ,过滤 , 洗涤 ,滤
液用该浓度的乙醇定容于 50 mL 容量瓶 ,得到黄酮类化合物的提取液 ,待测.
1.5 含量的测定方法及结果 精确量取提取液适量于 10 mL比色管中 , 加水至 2.40 mL , 加 5%亚硝酸钠 0.40 mL , 混匀 ,
放置6 min , 加10%硝酸铝 0.40 mL 混匀 ,放置 6 min ,加 4.3%氢氧化纳 4 mL , 最后用水稀释至刻度 ,混匀 , 放置15 min.以
试剂空白为参比 ,在 506 nm 处测定吸光度值(A)代入回归方程 ,计算结果见表 1、表 2、表 3.
表 1 广枣中总黄酮的含量
Table1 Total flavonoid content of guangzao (n=5)
编号 样品加入量(m L) 总黄酮含量(%) 平均含量(mg/ g) RSD(%)
1
2
3
4
5
1.00
1.00
1.00
1.00
1.00
1.18%
1.185%
1.12%
1.156%
1.16%
1.16% 0.89%
表 2 麻黄中总黄酮的含量
Table 2 Total flavonoid content of ephedra (n=5)
编号 样品加入量(m L) 总黄酮含量(%) 平均含量(mg/ g) RSD(%)
1
2
3
4
5
1.00
1.00
1.00
1.00
1.11
3.82%
3.58%
3.62%
3.78%
3.80%
3.73% 0.97%
表 3 锦草中总黄酮的含量
Table 3 Total flavonoid content of gallic (n=5)
编号 样品加入量(m L) 总黄酮含量(%) 平均含量(mg/ g) RSD(%)
1
2
3
4
5
1.00
1.00
1.00
1.00
1.00
1.62%
1.49%
1.51%
1.56%
1.52%
1.54% 1.23%
1.6 回收率的测定方法 精确量取提取液适量于 10 m L比色管中 , 加芦丁标准液 1.00 mL , 按 1.5 测定含量步骤操作 ,得
加入芦丁标准液样品的吸光度值 ,根据公式计算回收率.结果见表 4 、表 5 、表 6.
1.7 重复性试验 取 5份供试品溶液, 按 1.3 标准曲线绘制项下的方法测定总黄酮含量 , 结果 RSD分别为:广枣为 0.89%;
麻黄为 0.97%;锦草为 1.23%.
1.8 稳定性试验 取供试品溶液 , 按 1.3 标准曲线项下方法操作 ,并每隔 5min 测定一次吸光度 , 结果表明;广枣 20min 以
内测定吸光度<2%;麻黄 20min 以内测定吸光度<5%;锦草 20min 以内测定吸光度<6;建议定溶后立即测定.
20 内 蒙 古 民 族 大 学 学 报 2008年
表 4 广枣回收率
Table 4 Recovery rate of guangzao (n=5)
编号 样品黄酮加入量(mg)
芦丁标样黄酮
加入量(mg) 吸光度值 平均吸光度值 平均回收率(%)
1
2
3
4
5
1.00
1.00
1.00
1.00
1.00
0.250
0.250
0.250
0.250
0.250
0.236
0.241
0.228
0.236
0.236
0.236 96.35%
表 5 麻黄回收率
Table 5 Recovery rate of ephedra (n=5)
编号 样品黄酮加入量(mg)
芦丁标样黄酮
加入量(mg) 吸光度值 平均吸光度值 平均回收率(%)
1
2
3
4
5
1.00
1.00
1.00
1.00
1.00
0.250
0.250
0.250
0.250
0.250
0.767
0.720
0.727
0.769
0.764
0.747 94.1%
表 6 锦草回收率
Table 6 Recovery rate of gallic (n=5)
编号 样品黄酮加入量(mg)
芦丁标样黄酮
加入量(mg) 吸光度值 平均吸光度值 平均回收率(%)
1
2
3
4
5
1.00
1.00
1.00
1.00
1.00
0.250
0.250
0.250
0.250
0.250
0.339
0.310
0.315
0.327
0.307
0.319 95.5%
2 结果与讨论
2.1 结果 用超声波法提取蒙药广枣 、麻黄 、锦草中的总黄酮 , 用分光光度法测定总黄酮的含量.其结果分别为;广枣含量
为 11.6 mg/g;麻黄含量为 37.3 mg/ g;锦草含量为 15.4 mg/g.三种样品的回收率在 94.1%～ 96.35%之间.对三者黄酮含
量的比较:麻黄>锦草>广枣.
2.2 讨论 植物中黄酮类化合物含量的测定常采用硝酸铝比色法和高效液相色谱法.高效液相色谱法测定精度高 , 仪器
昂贵 ,操作繁琐;硝酸铝比色法专一性较差.本实验所用方法比以上方法更为简洁明了.
参 考 文 献
〔1〕江苏新医学院.中药大词典〔M〕.上海:上海科学技术出版社 , 1995.1595-1596.
〔2〕李民 , 甘卉芳 ,吴坤.芹汁对四氯化碳致肝脏脂质过氧化的保护作用〔J〕.卫生毒理学杂志 , 1996 , 10(4):220-227.
〔3〕应森林 , 李彦.芹菜的药理研究和应用〔J〕.天津中医学院学报 , 2000 , 19(4):45-46.
〔4〕刘仲则.中草药黄酮类化合物心血管活性成分概述〔J〕.中草药 , 1987 , 18(3):37-60.
〔5〕杨立红.芹菜叶柄与叶片中总黄酮含量的研究〔J〕.山东师范大学学报(自然科学版), 1998 , 13(4):434-436.
〔6〕严建刚 ,张名位 , 杨公明 ,等.芹菜黄酮的提取条件及其抗氧化活性研究〔J〕.西北农林科技大学学报(自然科学版),
2005 , 33(1):131-135.
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282.
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〔责任编辑 郑 瑛〕
21第 1期 孙占才等:蒙药广枣 、麻黄 、锦草中总黄酮的提取及含量的测定