全 文 ：收稿日期: 2006 - 12 - 02
作者简介:周玖瑶 ( 1970 - ),男,广东广州人,副教授,博士,研究方
向:中药作用机理研究。
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第 25卷 第 5期
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中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 25 No. 5
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药
效
学
研
究
盘
点
中华中医药
1005
学刊
葫芦巴对链佐霉素诱导糖尿病模型大鼠药理研究
周玖瑶,邓素坚,黄桂英,谭永恒
(广州中医药大学药理学教研室,广东 广州 510405)
摘 要:目的:观察葫芦巴对链佐霉素 ( S treptozo tocin. STZ )所致 1型糖尿病 ( Insulin - dependent diabe tes m elli-
tus, IDDM ) 大鼠的药理作用。方法: 一次性腹腔注射 50mg /kgSTZ溶液, 建立大鼠 IDDM模型。分别灌胃给予葫
芦巴煎液和格列齐特溶液作为治疗组和阳性对照组, 连续给药 20天; 以大鼠血糖值、血脂、血清 SOD和 NO含量、
肝组织 GSH为观察指标。结果: 葫芦巴明显降低 IDDN大鼠血糖水平, 水平明显降低 TG、HDL -C、TC,血清明显
升高 SOD、NO水平。结论:葫芦巴给药对 STZ所致大鼠 IDDM有明显降低血糖作用, 对 STZ引起的 1型糖尿病大
鼠有明显的治疗作用。
关键词:葫芦巴;链佐霉素; 糖尿病模型
中图分类号: R285. 5 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2007) 05 -1005 - 03
S tudy the Effec ts of F renugreek on D iabetesMellitus RatModel Induced by S treptozotoc in
ZHOU Jiu-yao, DENG Su-jian, HUANG Gui-y ina, TAN Yong-heng
( Departm ent o f Pharm acology, Guangzhou Un ive rsity o f T rad itional ChineseM ed ine, Guangzhou 510006, Guangdong, China)
Abstrac:t Ob jective: To study the e ffec ts of F renug reek in Insu lin dependent d iabetes me llitus an im als mode l in-
duced by S treptozo toc in; Me thods: Intraperitonea l injection 50mg# kg -1 solution o f STZ at one time to se t up the Insu lin
dependent diabe te s me llitus rat mode;l to observe index o f b lood g luco se, b lood fa,t blood serum SOD and the con tent of
NO, liver GSH. Results: F renug reek lowe red the b lood g lucose level o f IDDM ra tm ode ,l TG, HDL -C, TC obv iously; the
blood serum SOD and the content o f NO to he igh ten obviously. Conc lus ion: F renugreek has e ffec ts of low ering blood g lu-
cose, and has conspicuou s therapeu tic effe ct on Insulin dependent diabe tes m e llitus rat model induced by Streptozo toc in.
Keywords: frenugreek; STZ; diabe tes me llitus model
葫芦巴 ( T rigonella foenum - graecum L. ), 又名芸香
草、香苜蓿, 系豆科蝶形花亚科一年生草本植物, 目前我国
不少省区均有栽培或野生资源分布。我国历代编修的本草
著作均收载有葫芦巴条目, 以种子入药, 入肝、肾二经, 味
苦,性温, 无毒,补肾阳, 祛寒湿,属于常用中药材之一,目前
我国中医常将其用来补肾、祛 (肠 )风和健胃, 临床主治肠
道疾病、痛风、外伤及炎症、高血脂和糖尿病。其在临床中
的降血糖作用可能源于胶黏性纤维对葡萄糖吸收的抑制作
用,文献报道, 接受葫芦巴的患者每天摄取约 80g纤维, 也
观察到葫芦巴在外周组织中对葡萄糖吸收和利用的影
响 [1 ]。本课题曾观察了葫芦巴对四氧嘧啶复制的大白鼠
糖尿病模型的作用 [2], 其有明显的降血糖作用, 但未作过
链佐霉素 ( STZ )复制的 1型糖尿病模型试验。为进一步探
索和证实葫芦巴降血糖药理作用, 本文用 STZ作大鼠腹腔
注射,建立链佐霉素 ( STZ )诱导的大鼠 IDDM 模型的基础
上,用葫芦巴煎液灌胃治疗, 测定实验前后血糖、实验结束
血脂、SOD、肝 GSH等指标, 探讨葫芦巴对 IDDM 的防治作
用及其机制。现将结果报道如下。
1 材 料
1. 1 药物 葫芦巴: 购自广州清平药材市场,经广州中医
药大学中药学院中药标本中心张秋镇老师鉴定为系豆科蝶
形花亚科葫芦巴 ( T rigonella fo enum - graecum L. )的种子
干品。取葫芦巴打碎加水煎煮 3次, 合并煎液,过滤, 滤液
浓缩至每 100 mL相当于原生药 50g, 置于冰箱备用, 临用
时稀释成所需浓度。D IAM ICRON 达美康 ( g lic la zide, 格列
齐特片 ),法国施维雅药厂 ) 天津华津制药厂合作生产, 产
1005
DOI：10.13193/j.archtcm.2007.05.142.zhoujy.062
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中 华 中 医 药 学 刊
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中医药
1006
学刊
品批号: 030232。
1. 2 试剂和仪器 链佐霉素,美国 S igm a产品, 实验前用
生理盐水新鲜配制浓度为 1. 5%。美国雅培 P recision Q. I.
DTM型血糖仪 ,型号: Q7708 - 0119; P recision P lus TM E lec tro-
de s B lood G luco se E le ctrodes(血糖试纸 ), 美国雅培制药有
限公司,注册号:国药管械 (进 ) 2001第 2400934号。GSH、
SOD、NO; TG、TC、HDLC试剂测试盒, 购自南京建成生物工
程研究所。 722可见分光光度计 (上海第二分析仪器厂 )。
1. 3 动物 Sprague -Daw ley ( SD )大鼠, 雄性, 体重 150 ~
200g,购自广东省医学实验动物中心,合格证号: 2002A024。
2 方 法
2. 1 动物分组与给药 取雄性 150~ 200g SD大鼠 70只,
链佐霉素按 50mg /kg体重剂量,用 0. 1mm o l pH4. 5的柠檬
酸缓冲液溶解后作一次性腹腔注射。注射 4天后, 禁食 8h
后检测血糖 (注, 以下实验中测定动物血糖前, 动物均禁食
8h) [2 ],选取高血糖合格模型大鼠 (血糖大于 8. 0mm o l /L )
50只进行随机分为: 模型对照组、葫芦巴高剂量组 ( 8. 4g /
kg)、葫芦巴中剂量组 ( 4. 2g /kg )、葫芦巴低剂量组 ( 2. 1g /
kg)、G liclazide组 ( 30m g /kg)。另取 10只未造模的同批大
鼠作正常对照组。连续灌胃给药 20天, 正常对照组、模型
对照组动物给予等容积 20m L /kg生理盐水。
2. 2 观察指标 于给药 7、14、20天分别取血测定空腹血
糖。实验结束,从眼球取血. 分离血清, 测定 SOD、NO、TG、
TC、HDL -C。处死动物, 测定肝 GSH含量。
2. 3 数据处理 实验数据以 €x ? s表示, 数据用统计
SPSS13. 0软件处理,组间用 t检验。
3 结 果
3. 1 葫芦巴对糖尿病模型大鼠血糖的作用 大鼠注射
STZ 50m g /kg 4天后, 血糖含量显著升高,于药后 7天、药后
14天、药后 20天模型组大鼠血糖明显升高, 与正常组比
较, P < 0. 01,有显著性差异,说明 STZ致糖尿病模型成功,
并在实验期高血糖持续。于药后 7天、药后 14天、药后 20
天葫芦巴低、中、高剂量组大鼠血糖开始下降,与模型组比
较,分别为 P < 0. 05和 P < 0. 01, 有显著性差异。结果提
示,葫芦巴具有降血糖药理作用。见表 1。
表 1 葫芦巴对糖尿病模型大鼠血糖的作用 ( mm o l /L, €x ? s )
组 别 剂量
( g /kg)
动物数
(只 )
给药前
(给 STZ后 4天 ) 药后 7天 药后 14天 药后 20天
正 常 对 照 组 - 10 5. 63 ? 2. 11 5. 88 ? 2. 12 6. 12 ? 2. 04 6. 18 ? 2. 18
模 型 对 照 组 - 10 12. 59 ? 3. 78* 14. 67 ? 4. 31* 12. 77 ? 3. 88* 11. 91 ? 3. 76*
葫芦巴低剂量组 2. 1 10 14. 20 ? 4. 59* 13. 45 ? 3. 39 11. 22 ? 3. 63 9. 21 ? 2. 50##
葫芦巴中剂量组 4. 2 10 13. 61 ? 4. 15* 12. 32 ? 3. 74 9. 53 ? 3. 32## 8. 61 ? 3. 91##
葫芦巴高剂量组 8. 4 10 15. 49 ? 4. 29* 13. 53 ? 2. 26 8. 99 ? 2. 76## 8. 87 ? 2. 61##
G liclaz ide 组 0. 03 10 14. 07 ? 4. 51* 9. 53 ? 3. 22## 7. 53 ? 3. 09## 7. 72 ? 2. 52##
注:与正常组比较, * P < 0. 01;与模型组比较, ## P < 0. 01, # P < 0. 05。
3. 2 葫芦巴对糖尿病模型大鼠血脂的影响 STZ模型组
大鼠血清 TG、HDL - C、TC明显升高, 与正常对照组比较,
为 P < 0. 01, 有显著性差异。中、高剂量葫芦巴治疗后大鼠
血清 TG、TC明显降低, 血清 HDL -C明显升高。与模型组
比较,分别为 P < 0. 05和 P < 0. 01, 有显著性差异。结果
提示,葫芦巴具明显改善高血糖大鼠的血脂代谢的作用。
见表 2。
表 2 葫芦巴对糖尿病模型大鼠血脂的影响 ( mm o l /L, €x ? s )
组 别 剂量
( g /kg)
动物数
(只 )
甘油三酯
( TG )
高密度脂蛋白
( HDL -C )
总胆固醇
( TC )
正 常 对 照 组 - 10 1. 65 ? 0. 51 1. 93 ? 0. 64 2. 61 ? 0. 82
模 型 对 照 组 - 10 2. 66 ? 0. 54* 3. 85 ? 0. 55* 4. 05 ? 0. 65*
葫芦巴低剂量组 2. 1 10 2. 14 ? 0. 35# 4. 01 ? 0. 47 3. 85 ? 0. 77
葫芦巴中剂量组 4. 2 10 2. 05 ? 0. 35# 4. 26 ? 0. 54# 3. 49 ? 0. 58#
葫芦巴高剂量组 8. 4 10 1. 89 ? 0. 42## 4. 78 ? 0. 65## 3. 01 ? 0. 65##
G liclaz ide 组 0. 03 10 1. 72 ? 0. 59## 4. 84 ? 0. 68## 2. 87 ? 0. 64##
注:与正常组比较, * P < 0. 01;与模型组比较, ## P < 0. 01, # P < 0. 05。
表 3 葫芦巴对糖尿病模型大鼠 SOD
NO含量的影响的影响 ( €x ? s )
组 别 剂量
( g /kg )
动物数
(只 )
血清 SOD
(U /mL)
血清 NO
( Lmo l /L)
正 常 对 照 组 - 10 366. 5 ? 20. 41 49. 3 ? 2. 64
模 型 对 照 组 - 10 267. 4 ? 18. 54* 28. 5 ? 3. 54*
葫芦巴低剂量组 2. 1 10 294. 5 ? 21. 37# 35. 7 ? 4. 48#
葫芦巴中剂量组 4. 2 10 322. 0 ? 25. 15## 38. 6 ? 4. 54##
葫芦巴高剂量组 8. 4 10 348. 9 ? 21. 61## 37. 8 ? 3. 66##
G licla zide 组 0. 03 10 327. 2 ? 20. 19## 36. 4 ? 2. 68##
注:与正常组比较, * P < 0. 01; 与模型组比较, # # P < 0. 01, # P <
0. 05。
3. 3 葫芦巴对糖尿病模型大鼠 SOD NO含量的影响 STZ
模型组大鼠血清 SOD、NO含量明显降低, 与正常对照组比
较,为 P < 0. 01,有显著性差异。高、中、低剂量葫芦巴治疗
后大鼠血清 SOD、NO含量明显升高。与模型组比较, 分别
为 P < 0. 05或 P < 0. 01, 有显著性差异。结果提示, 葫芦
巴具有明显改善高血糖大鼠的 SOD和 NO水平作用。见表
3。
4 讨 论
葫芦巴主要含有半乳甘露聚糖等多糖物质、蛋白质、芹
菜香脂等成分,此外, 它还含葫芦巴碱、游离氨基酸、甾体皂
苷、香豆素与黄酮类物质。几年前西方药理学家发现, 葫芦
1006
收稿日期: 2006 - 12 - 03
作者简介:张宗学 ( 1964 - ) ,男,辽宁锦州人,主治医师, 2004级博
士研究生,研究方向:创伤愈合。
巴所含的葫芦巴苷具有出色的降血糖作用, 提示其有望开
发成为新型抗糖尿病保健食品新原料。国外所做动物实验
表明,将含有葫芦巴苷的提取物粉末喂饲糖尿病动物模型
小鼠以及健康小鼠, 可显著降低两者的血糖并可相应降低
血脂。1型与 2型糖尿病人以及健康志愿受试者服食葫芦
巴粉末胶囊后同样可观察到葫芦巴的抑制血糖上升的作
用 [1 ]。
1型糖尿病 ( IDDM )是一种自身免疫性疾病, 国内外研
究多采用生物合成的免疫耐受剂、免疫佐剂和免疫抑制剂
等方法抑制胰岛 B细胞的自身免疫反应, 而在中草药领域
研究防治 1型糖尿病的药物较少。链佐霉素具有致糖尿病
活性,原理是该化合物对胰腺 B细胞具有特效的毒性作
用,可模拟人类的 1型糖尿病模型, 已经成为许多研究者在
糖尿病研究中使用的有价值的工具 [3 - 4 ]。研究结果表明,
IDDM模型建立,给药第 7天开始葫芦巴即显示出明显地
治疗 STZ诱导的大鼠 IDDM作用, 20天后葫芦巴治疗组 TG
和 TC均有明显的降低,而 HDL - C升高, 说明本品对 1型
糖尿病大鼠脂代谢紊乱有明显的调节作用。 SOD是催化超
氧阴离子自由基分解的酶, 其活性与超氧阴离子自由基清
除能力有关。治疗组和正常组超氧化物歧化酶 ( SOD )活力
明显高于模型组。给药组 SOD活力明显提高, 有利于超氧
阴离子自由基的清除,增强机体的抗氧化能力,促进疾病的
恢复。提示葫芦巴具有清除自由基的作用。NO是体内新
发现的一种小分子物质, 它是 L -精氨酸在一氧化氮合酶
( NOS)的催化下生成。在糖尿病的发病机理研究中, 注意
到在糖尿病发病 NO的变化, 如 NO与神经传导速度相关
性, NO参与糖尿病神经病变的病理过程等。文献报道, 1
型糖尿病时 NO水平升高, 可能是与免疫刺激诱生型 NOS
表达所致,无变化或有升有降 [5 -6 ], 糖尿病时血 NO水平下
降,是由于糖尿病时氧含量增加, 引起 NO合成下降所致,
本次实验采用一次性腹腔注射 STZ, 符合复制 1型糖尿病
模型的条件。本实验结果, 糖尿病模型组 NO含量明显低
于正常组和治疗组。本实验研究发现葫芦巴对 IDDM 保护
作用, 为寻找治疗 IDDM的中药研究打下基础,其降糖机制
与葫芦巴的有效作用成分还有待进一步深入研究。
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第 25卷 第 5期
2 0 0 7年 5月
中 华 中 医 药 学 刊
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Vo.l 25 No. 5
M ay 2 0 0 7
中华中医药
1007
学刊
愈创营养油对大鼠皮肤缺损创面
愈合过程中 VGEFmRNA表达的影响
张宗学 1, 2, 指导:刘学政3,蔡玉文 1
( 1. 辽宁中医药大学, 辽宁 沈阳 110032; 2.锦州市中心医院,辽宁 锦州 121000;
3.辽宁医学院, 辽宁 锦州 121000)
摘 要:目的:从分子水平观察愈创营养油对大鼠缺损创面的修复机理。方法: 45只背部造成开放性皮缺损
创面的大鼠,随机区组分为空白对照组 ( A组 )外敷生理盐水、VEGF的明胶海绵 ( B组 )外敷组外敷、愈创营养油
组 ( C组 )涂抹愈创营养油。观察创面愈合时间、毛细血管截面面数密度 ( NA )及造模后第 3、7、14天用 RT -PCR
的方法检测 VEGFmRNA。结果:愈创营养油组愈合时间最短, 优于其他各组, 与模型组相比有非常显著性差异
( P < 0. 01), 且愈创营养油组 7天毛细血管截面面数密度对照组相比有非常显著性差异 ( P < 0 01),在 3天和 7
天 VEGFmRNA的表达各组间均有显著性差异, 以愈创营养油组表达最好, 而 14天各组间则没有差异。结论: C
组最好,它的作用机制可能是愈创营养油应用后产生的 VEGF能明显促进上皮生长、创面愈合。
关键词:愈创营养油;大鼠; VGEFmRNA; 愈合;实验研究
中图分类号: R -33 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2007) 05 -1007 - 03
Effec t o f Yuchuang Nourished O il in Fu ll- th ickness
Sk inW ounds ofRats in the Express ion of VGEFmRNA
ZHANG Zong-xue1, 2, adviso r: LIU Xue-zheng3, CA IYu-wen1
( 1. Liaoning Univesity of TCM , Shenyang 110032, L iaoning, China; 2. CenterH ospital of
1007