全 文 ：·制剂与质量·
广金钱草中总黄酮提取工艺研究
王晓林 ,钟方丽 ,李敦猛 ,祝　波
(吉林化工学院制药与应用化学系 ,吉林吉林 132022)
　　摘要　目的:用正交实验法优选广金钱草中总黄酮的提取工艺。方法:以 50 g原药材的总黄酮提取量为评价
指标 , 选择提取用水倍量(倍)、提取时间(h)、提取次数(次)、醇沉浓度(%)为考察因素 , 采用正交实验法 L9(34)
确定广金钱草中总黄酮的最佳工艺 ,采用分光光度法对干浸膏中总黄酮的含量进行了测定 , 检测波长 272 nm。结
果:最佳提取工艺条件为提取所用水量为 15倍 , 提取次数为 3次 ,回流提取时间为 1.5 h, 醇沉浓度为 50%, 芦丁在
4.36 ～ 21.8μg/ml浓度范围之内呈良好的线性关系。平均回收率为 98.92%, RSD为 1.85%。结论:总黄酮正交提
取工艺的研究 , 结果比较可靠 , 含量测定方法简便 、准确 , 可用于广金钱草干浸膏中总黄酮的含量测定。
关键词　广金钱草;总黄酮;正交实验
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2008)06-0900-03
StudyonExtractionProcessofTotalFlavonoidsinHerbaDesmodiStyracifoli
WANGXiao-lin, ZHONGFang-li, LIDun-meng, ZHUBo
(DepartmentofPharmacyandAppliedChemistry, JilinInstituteofChemicalTechnology, Jilin132022, China)
Abstract　Objective:TostudytheoptimumextractionprocessoftotalflavonoidsinHerbaDesmodiiStyracifoli.Methods:Using
theextractionyieldoftotalflavonoidsastheassessmentindex, someimportantfactorsintheexperimentalorthogonaldesign, suchas
volumeofextractionwater, extractingtimeandtimes, alcoholconcentrationwerestudied.Thetotalflavonoidscontentextractedfrom
HerbaDesmodiStyracifoliwasdeterminedbySpectrophotometricmethodat272nmwavelength.Results:Theoptimumethanolextrac-
tingprocessconditionswereasfollows:adding15foldofwaterextractingthreetimes, heatingfor1.5hours, theuseofalcoholconcen-
trationof50%.Rutinstandardsampleshowedagoodlinearrelationshipattherangeof4.36 ～ 21.8 μg/mlandtheaveragerecovery
was98.92%, andRSDwas1.85%.Conclusion:TheoptimumextractionprocessoftotalflavonoidsinHerbaDesmodiStyracifoliiis
reliableandthismethodiseasyandaccuratesothatitcanbeusedfortheextractionoftotalflavonoidsinHerbaDesmodiStyracifoli.
Keywords　HerbaDesmodiStyracifolii;Totalflavonoids;Orthogonaldesign
作者简介:王晓林(1969-),男,硕士 ,讲师 ,主要从事药物的研制与开发;Tel:0432-3083059, E-mail:wangxiaolin69@eyou.com。
　　广金钱草(HerbaDesmodiStyracifoli)为豆科植
物广金钱草 Desmodiumstyracifolium(Osb.)Merr.的
干燥地上部分 ,盛产于广西 、广东 、福建等地 , 其性
味甘 、淡 、凉 ,具有清热利湿 、通淋排石的功效 〔1〕 ,用
于尿路感染 、泌尿系结石 、胆囊结石 、肾炎浮肿等 。
广金钱草主含生物碱 、黄酮苷 、酚类 、鞣质和木犀素
等 , 从中分到的黄酮主要为黄酮碳苷化合物夏佛塔
苷 (Schftoside)、异牡荆素 (Isovitexin)、异荭草素
(Isoorientin)、6-C-木糖-8-C-葡萄糖洋芹素(Vicenin-
1)、6-C-葡萄糖-8-C-木糖洋芹素(Vicenin-3)等 〔2, 3〕。
为提高广金钱草提取工艺的科学性 , 进一步利用和
研究广金钱草 ,特以主要成分总黄酮为考察指标 ,采
用正交实验优选其提取工艺条件的最佳条件。
1 　仪器与试药
752N型三用紫外分析仪;METTLERAE240电
子天平 ;KQ-400DB超声波清洗器;芦丁对照品(中
国药品生物制品检定所 ,批号:0080-9705);广金钱
草购于安徽省亳州市华申药业有限公司;所用试剂
均为分析纯。
2　方法与结果
2.1　因素及水平考察　根据广金钱草总黄酮的理
化性质 ,选择提取次数 、提取用水量 、提取时间和醇
沉时的醇浓度 4个因素 ,每个因素选择 3个水平。
因素水平见表 1。
　表 1 　因素水平表
水平因素 A提取次数
B提取用水量(倍)
C提取时间(h)
D醇沉时的醇浓度(%)
1 1 9 1.0 50
2 2 12 1.5 65
3 3 15 2.0 75
2.2　提取方法　取广金钱草 50 g,按 L9(34)正交
表设计方案进行实验 ,加水煎煮 ,合并煎液 ,滤过 ,滤
液浓缩至 50ml,冷至室温 ,加 95%的乙醇至规定的
含醇量 ,充分搅拌 ,静置 24 h,过滤 ,蒸出乙醇 ,浓缩
·900· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 31卷第 6期 2008年 6月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2008.06.039
成稠膏 ,基本蒸干后放入 60℃的电热鼓风干燥箱中
干燥。以测定的干浸膏中总黄酮的含量为指标 。结
果见表 2。
　表 2 　L9(34)正交实验结果
试验号 A B C D 干浸膏收率(%)
总黄酮的含量(%)
1 1 1 1 1 6.0 12.53
2 1 2 2 2 6.4 12.82
3 1 3 3 3 7.4 12.68
4 2 1 2 3 9.2 12.83
5 2 2 3 1 9.0 13.17
6 2 3 1 2 9.4 13.25
7 3 1 3 2 9.2 13.80
8 3 2 1 3 8.8 13.92
9 3 3 2 1 10.2 14.21
K1j 0.67 0.82 0.85 1.03
K2j 0.87 0.87 1.01 0.88
K3j 1.19 1.04 0.86 0.82
Qj 0.41 0.08 0.05 0.06
MAX 1.19 1.04 1.01 1.03
极差 0.52 0.22 0.16 0.20
优水平 A3 B3 C2 D1
　　结合对正交实验数据的分析可得出提取工艺为
A3B3C2D1 ,即提取所用水倍数为 15倍量 ,提取次数
为 3次 ,回流提取时间为 1.5 h,所用醇沉浓度为
50%。各因素对提取率影响的大小依次为提取次
数 、提取所用水倍数 、所用醇沉浓度 、回流提取时间 。
2.3 　工艺验证性试验　为考察上述优选提取工艺
的稳定性 ,按该工艺条件进行重复试验 3次 ,测定广
金钱草干浸膏的平均得率为 11.87%,干浸膏中总
黄酮的平均含量为 13.73%, RSD为 1.16%。表明
本实验制定的工艺路线稳定可靠。
2.4 　广金钱草干浸膏中总黄酮含量的测定
2.4.1　对照品溶液的制备:精密称取在 120℃干
燥至恒重的芦丁对照品 10.9 mg,置 50ml的容量瓶
中 ,加 50%的乙醇适量 ,超声使溶解 ,定容至刻度 ,
即得。
2.4.2　样品溶液的制备:取广金钱草干浸膏粗粉
约 0.3 g,精密称定 , 置 50 ml容量瓶中 , 精密加入
50%的乙醇 ,超声处理 15 min,取出 ,放冷 ,摇匀 ,滤
过 。精密吸取续滤液 10 ml,加 50%的乙醇定容至
50 ml,摇匀 ,即得 。
2.4.3　测定法:精密量取样品溶液 2.0 ml,置 50
ml容量瓶中 ,加入 AlCl3溶液(0.1 mol/L)1.00 ml,
醋酸-醋酸钠缓冲液(pH=5.5)1.00 ml,以水稀释至
刻度 ,摇匀 ,以试剂作空白 ,在 272 nm处测吸光度 ,
从标准曲线上读出供试品溶液中无水芦丁的重量
(mg),即产品中总黄酮的质量 。
2.4.4　检测波长的选择:取芦丁对照品溶液 、供试
品溶液及空白溶液 2.0ml,置 50 ml容量瓶中 ,加入
AlCl3溶液(0.1mol/L)1.00ml,醋酸-醋酸钠缓冲液
(pH=5.5)1.00 ml,以水稀释至刻度 ,摇匀 ,照分光
光度法在 200 ～ 500 nm之间进行扫描 ,芦丁对照品
和供试品的最大吸收波长均为 272 nm,所以选 272
nm为测定波长 。
2.4.5 　线性关系考察:精密量取对照品溶液 0、
1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml于 50 ml容量瓶中 ,加入
AlCl3溶液(0.1mol/L)1.00ml,醋酸-醋酸钠缓冲液
(pH=5.5)1.00 ml,以水稀释至刻度 ,摇匀 ,以试剂
作空白 ,在 272 nm波长处测吸光度 ,以浓度为横坐
标 ,吸收度为纵坐标 ,进行线性回归 ,结果回归方程
为 y=49.358x-0.0064, r=0.9999。表明芦丁在
4.36 ～ 21.8 μg/ml范围内呈良好的线性关系。
2.4.6　稳定性试验:取供试品溶液 ,每间隔一定时
间 ,即在 0、15、30、60、120、150、180 min按 2.4.3项
下方法测定吸收值 ,结果 RSD=2.93%。表明供试
品的吸收值 180 min内基本稳定。
2.4.7 　精密度试验:取对照品溶液按 2.4.3项下
方法 ,连续 5次测定其吸收度 ,结果 RSD=0.73%。
2.4.8 　重复性试验:取同一批号的样品 5份 ,按
2.4.2项下方法制备和 2.4.3项下方法测定 ,结果
RSD=2.16%。
2.4.9 　回收率试验:精密称取已知含量的样品五
份(含量 13.17%),精密加入芦丁对照品约 15 mg,
按 2.4.2项下方法制备和 2.4.3项下方法测定 ,计
算回收率 , 结果平均回收率为 98.92%, RSD为
1.85%。
3　讨　论
3.1　本实验通过正交试验法对广金钱草的提取工
艺条件进行了优化 ,并按最佳工艺进行了验证实验 ,
结果证明用该工艺提取广金钱草总黄酮工艺简单 、
提取率高 、操作控制容易 、稳定性好 ,为广金钱草工
业生产提供了合理依据 。
3.2 　本实验以芦丁为标准品 , 以 NaNO2 -Al
(NO3)3 -NaOH和 AlCl3 -HAc-NaAc显色法测定广金
钱草干浸膏中总黄酮的含量〔4〕。 NaNO2-Al(NO3)3 -
NaOH显色法在 510 nm下测定 ,尽管操作简便 ,但
在强碱性条件下进行测定时 ,许多物质会在 510 nm
左右产生吸收 ,专属性不强 ,显色稳定性较差 ,并且 ,
广金钱草干浸膏中总黄酮在 510 nm处没有最大吸
收。而 AlCl3 -HAc-NaAc显色法在酸性条件下测定 ,
·901·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 31卷第 6期 2008年 6月
显色稳定性较好 ,芦丁对照品和供试品的最大吸收
波长均为 272 nm。所以较之 NaNO2 -Al(NO3)3-
NaOH显色法 , AlCl3 -HAc-NaAc显色法具有更好的
专属性 ,更高的准确度 ,更稳定的测定条件 ,并且此
法易于操作 。
参 考 文 献
[ 1] 王植柔 .广金钱草化学成分的研究 .广西医科大学学
报 , 1998, 15(3):10.
[ 2] 高瑞英 .广金钱草化学成分的分离与鉴定 .中药材 ,
2001, 24(10):724.
[ 3] 苏亚伦 , 王玉兰 ,杨峻山 .广金钱草黄酮类化学成分的
研究 .中草药 , 1993, 24(7):343.
[ 4] 黄泉秀 .比色法测定黄蜀葵花中黄酮类化合物的含
量 .中药材 , 1990, 13 (12):36-37.
(2007-11-01收稿)
均匀设计优化复方天麻滴丸的成型工艺
李　江 ,耿　娟 ,甘　媛 ,邱德文
(贵阳中医学院 ,贵州贵阳 550002)
　　摘要　目的:优选复方天麻滴丸最佳成型工艺。方法:针对影响滴丸制备因素考察料温 、基质种类 、滴距 、药物
与基质配比等影响因素 ,并以丸重相对标准偏差 、圆整度为测评指标 , 最终确定最佳成型工艺条件。 结果:药物与
基质的配比为 3∶7,料温:80℃,滴距:1 cm, 基质种类 PEG4000∶PEG6000=1∶1;该成型工艺可靠 ,重现性良好。结
论:采用均匀设计法优选复方天麻滴丸的成型工艺可行。
关键词　复方天麻滴丸;均匀设计;成型工艺
中图分类号:R286.02　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2008)06-0902-03
ResearchonOptimizationofFormingTechniquesforCompound
TalGastrodiaTuberDropPilsbyUniformDesignMethod
LIJiang, GENGJuan, GANYuan, QIUDe-wen
(GuiyangColegeofTraditionalChineseMedicine, Guiyang550002, China)
Abstract　Objective:ToselectthebestfromingtechniquesforCompoundTalGastrodiaTuberdroppils.Methods:Accordingto
thefactorsthatafectthequalityofdroppill, weselectedfourfactorsastemperatureofdropsolution, thevarietyofmatrix, theratiobe-
tweendrugandmatrix, thedroppingdistance, andthenweselectedtheRSDofweightofdrippingpillsandtheroundnessasindexex-
amination.Results:Theoptimumtechniquesasfollows:theratiobetweendrugandmatrixwas3∶7, thetemperatureofdrugsolutionwas
80℃, thedroppingdistancewas1 cm, thecompositionofmatrixwasPEG4000∶PEG6000=1∶1.Themethodadoptedwassteadyand
feasible.Conclusion:It′sfeasibletoseektheoptimumtechniquesmakingCompoundTalGastrodiaTuberdroppillsbyuniformdesign
method.
Keywords　CompoundTalGastrodiaTuberdroppils;Uniformdesignmethod;Formingtechniques
基金项目:贵州省中医药管理局基金支助项目(200306)作者简介:李江(1973-),男 ,副教授 ,博士 ,从事中药复方及苗药研究;Tel:0851-5937181, E-mail:lijiang2005zy@ 126.com。
　　天麻为兰科天麻属植物天麻 (Gastrodiaelata
Blume.)的干燥根茎 ,具有平肝息风 、通络止痛的功
效 ,主要用于头痛眩晕 、肢体麻木 、小儿惊风 、癫痫抽
搐 、破伤风 ,是名贵中药材 ,也是贵州省特色道地药
材 。复方天麻滴丸处方源于我院全国老中医药专家
邱德文教授的经验方 ,本处方以天麻为君配伍川芎
等药以达平肝通络止痛之功 ,对偏头痛 ,眩晕等有显
著疗效 ,为达到迅速缓解及治疗头痛的目的 ,笔者采
用固体分散法将原处方经有效提取后制备成速效剂
型 ———滴丸剂。
文献研究表明滴丸成型的影响因素除药物本身
外 ,基质组成及其用量 、药液温度 、滴口内外径 、冷却
液温度和黏度 、滴距 、滴速等均影响滴丸外观和质
量〔1〕。笔者在自行设计滴丸装置上 ,重点考察了药
物与基质配比(含药量)、基质种类与比例 、料温(药
物与基质加热混匀后滴制时的温度)及滴距四个影
响因素 ,以丸重相对标准偏差 、圆整度为测评指标 ,
采用均匀设计法对滴丸成型工艺进行优选 ,确定最
佳成型工艺条件。
1　仪器和材料
·902· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 31卷第 6期 2008年 6月