全 文 ：实 验 研 究
五种广枣总黄酮提取液抗人红细胞氧化作用的研究
内蒙古包头医学院(014010)　张莹辉　刘美艳　覃建民
提　要:目的:探索广枣中活性成分的最佳提取工艺。方法:用 TBA法测定 5 种广枣提取液对人红细胞液中 MDA 含量的影响。
结果:与对照组相比 , 50%乙醇洗脱液组MDA含量下降显著(P<0.05), 70%乙醇洗脱液组 MDA含量下降非常显著(P <0.01)。
结论:乙醇提取 D4020 树脂分离 70%乙醇洗脱浓缩为广枣总黄酮的最佳提取工艺。
关键词:广枣总黄酮;抗氧化作用;红细胞
中图分类号:R291.2　文献标识码:B　文章编号:1006—6810(2003)05—0033—01
　　广枣是漆树科植物的成熟果实 , 为蒙药常用药材 , 已被
《中国药典》收载。广枣总黄酮(TFFA)是从广枣中分离出的
活性成分 ,具有抗心律失常〔1〕、抗心肌过氧化损伤〔2〕、抑制红
细胞氧化损伤〔3〕的功效。主治气滞血瘀 , 胸胁作痛 , 心悸气
短 ,心神不安等症。为了解不同洗脱浓缩液中广枣的活性成
分是否相同 ,本实验用人红细胞为研究对象 , 测定了不同浓缩
液对红细胞的脂质过氧化产物 MDA 含量的影响。以期为广
枣总黄酮的提取工艺提供实验依据。
1　材料与方法
1.1　材料:5 种广枣提取液由某医药研究所提供;血样由包
头血站提供;721 分光光度计 , 上海第三分析仪器厂生产;硫
代巴比妥酸(TBA),上海医药公司生产;药品均为分析纯。
1.2　方法:健康成年人(18 ～ 40 岁)8 人 , 男女各半。取其肘
静脉血 ,肝素抗凝 ,离心除去血浆 ,用 pH=7.4 的磷酸盐缓冲
液(PBS)冼 3 次 , 配成 1%红细胞悬液。取 1%红细胞悬液
3ml ,加入TFFC 浓缩液0.5ml ,混匀 , 分别于加入TFFC24h 、48h 、
72h后离心(4000r/ min), 取上清液用 TBA法测定 MDA 含量;
对照组不加入 TFFC ,于用药组相同时间测定 MDA含量。
2　结　果
表 1　5种广枣提取液对血红细胞悬液中 MDA 含量的影响
组别 组代码 n 用药时间(h)
24 48 72
对照组 O 8 5.30±0.74 5.44±0.71 5.62±0.81
蒸馏水淋洗液 A 8 5.07±0.82 5.02±0.41 4.98±0.28
10%乙醇淋洗液 B 8 4.90±0.37 4.76±0.32 4.61±0.46
30%乙醇淋洗液 C 8 4.75±0.51 4.34±0.53 4.21±0.49
50%乙醇淋洗液 D 8 4.19±0.42＊ 4.02±0.34＊ 3.97±0.27＊＊
70%乙醇淋洗液 E 8 4.02±0.21＊ 3.98±0.42＊＊ 3.91±0.45＊＊
　　与对照组相比 ,行 t检验:＊P<0.05　＊＊P<0.01
与对照组相比 , 50%乙醇淋洗液用药 24h 和 48h 后 MDA
含量降低显著(P<0.05), 72h 后 MDA含量降低非常显著(P
<0.01);70%乙醇淋洗液用药 24h 后 MDA 含量降低显著(P
<0.05), 48h 和 72h 后MDA 含量降低非常显著(P <0.01);蒸
馏水淋洗液 、10%乙醇淋洗液和 30%乙醇淋洗液MDA 含量虽
有降低 , 但无统计学意义。
3　讨　论
广枣的果实中主要含黄酮类 、鞣质 、二萜内脂类 、多糖等
成分。黄酮类从成分上分析主要是黄酮甙和游离黄酮〔4〕。黄
酮类物质是自由基清除剂 , 又是过渡金属离子螯合剂。 TFFC
作为广枣中主要的有效成分 , 其抗氧化作用己为人们所关注 ,
但用何种提取工艺将广枣中的活性成分提取分离出来是医药
工作者一直在研究和探索的课题。本实验测定了 5种乙醇提
取 D4020 树脂分离不同洗脱液的广枣提取液对人血红细胞悬
液中MDA含量。与对照组相比较 , D 组用药 24h 和 48h 后 ,
MDA含量降低显著(P <0.05), 72h 后 MDA含量降低非常显
著(P<0.01);E 组用药 24h 后 MDA 含量降低显著(P <0.
05), 72h 后含量降低非常显著(P <0.01)。由于MDA是体内
自由基的代谢产物 ,MDA 的含量越低 , 说明药物抗氧化损伤 ,
保护红细胞的作用越强。因此 , 本实验提示乙醇提取 D4020
树脂分离 70%乙醇淋洗浓缩为广枣总黄酮的最佳提取分离
工艺。
参考文献
〔1〕徐继辉 , 杨玉梅 ,覃建民.蒙药广枣总黄酮对大鼠离体心脏
的抗心律失常作用〔J〕.中国民族医药杂志.2001 , 7(2):25
～ 26.
〔2〕乌日娜 , 张昕厚 ,张维兰.广枣总黄酮对阿霉素引起大鼠心
肌过氧化损伤的保护作用〔J〕.中草药.2001 , 32(6):527 ～
529.
〔3〕乌日娜 , 李大力 ,娜仁花.广枣总黄酮对红细胞氧化损伤的
抑制作用〔J〕.时珍国医国药杂志.2002 , 13(11):653～ 654.
〔4〕中国医学科学院药物研究所编.中草药有效成分的研究
〔M〕.北京:人民卫生出版社.1972.
2003 年 4月 3 日收稿
332003年 12月增刊 　　　　　　　　　　　　　　中国民族医药杂志　　　　　 　　　　　　　　
DOI :10.16041/j.cnki.cn15-1175.2003.s1.035