全 文 ：黄瓜子脂肪油化学成分的研究
吴晓毅，巢志茂* ，王淳，谭志高，孙文
(中国中医科学院 中药研究所，北京 100700)
［摘要］ 目的:对黄瓜子的脂肪油进行化学成分的研究。方法:石油醚加热回流提取脂肪油。氢氧化钾-甲醇溶液进行
皂化反应，乙酸乙酯萃取得到不皂化物质，采用多种色谱法进行分离，根据理化性质和波谱数据的解析进行结构鉴定。皂化
获得的脂肪酸部分进行甲酯化后，采用气相色谱法分析，以峰面积归一化法测定脂肪酸的组成及其相对含量。结果:从不皂
化部分分离得到 6 个化合物:24-乙基胆甾-7，22，25-三烯醇(1) ，24-乙基胆甾-7，25-二烯醇(2) ，燕麦甾醇(3) ，菠菜甾醇(4) ，栝
楼仁二醇(5) ，异栝楼仁二醇(6) ;脂肪油中鉴定了 9 种脂肪酸:肉豆蔻酸(7，0. 12%) ，棕榈酸(8，12. 04%) ，棕榈油酸(9，
0. 09%) ，十七碳酸(10，0. 06%) ，硬脂酸(11，5. 64%) ，油酸(12，6. 95%) ，亚油酸(13，74. 40%) ，花生酸(14，0. 19%) ，α-亚麻
酸(15，0. 51%)。结论:化合物 5，6，9，10，14，15 系黄瓜中首次报道。
［关键词］ 黄瓜;不皂化物质;脂肪酸;栝楼仁二醇;亚油酸
［稿件编号］ 20120618006
［基金项目］ 国家质量监督检验检疫总局公益性行业科研专项
(201210209)
［通信作者］ * 巢志茂，研究员，Tel: (010)64014411-2869，Fax:
(010)64013996，E-mail:chaozhimao@ yahoo. com. cn
［作者简介］ 吴晓毅，硕士研究生，E-mail:wuxiaoyi0000@ 126. com
黄瓜子，为葫芦科黄瓜属植物黄瓜 Cucumis sati-
vus的干燥成熟种子。具续筋接骨，祛风，消痰之功
效，可用于治疗骨折筋伤，风湿痹痛，老年痰喘［1］。
现代药理研究表明，黄瓜子提取物在 10 g·kg － 1
的剂量下，对右侧小腿中段横行闭合骨折模型的
蛋鸡，可提高血钙、磷离子的浓度，促进钙、磷向
骨折端转移，对骨折的愈合有促进作用［2］。黄瓜
子粉以 1. 25 mg·g － 1的剂量对小鼠连续灌胃 28
d，可通过降低血清尿素氮和血乳酸含量、增加肝
糖原含量，增强小鼠的抗疲劳作用［3］。通过测定
胶原蛋白-肾上腺素诱导的血栓模型小鼠的出血
时间和凝血时间，表明黄瓜子的水煎煮液具有活
血作用，脂溶性的乙酸乙酯层提取物是黄瓜子活
血的主要活性部位［4］。随着黄瓜子药用价值的
相继报道，国内外学者对其化学成分的研究也逐
渐展开，已涉及无机元素［5］，挥发性成分［6］，挥发
油［7］，以及甾醇类成分的报道［8］。本研究开展了
对黄瓜子脂肪油化学成分的研究，通过多种色谱
法对脂肪油中的不皂化部分进行了分离纯化和
结构鉴定，通过气相色谱法分析了脂肪油中的脂
肪酸组成和含量。
1 仪器和材料
X-6 型显微熔点测定仪(温度计未校正) ;
BRUKER AVANCEⅡ 400 MHz 型核磁共振仪，TMS
为内标;岛津 FIRT-8400S型傅立叶变换红外分光光
度计;岛津 GC-14C 型气相色谱仪;Agilent 1200S 高
效液相色谱仪;岛津 GC-MS QP2010 型气质联用仪;
Agilent 1200S (G1361A prep pump，G2260A prep
ALS，G1315D DAD，G1364B prep FC)制备型高效液
相色谱仪;色谱用硅胶(试剂级，160 ～ 200 目) ，薄层
色谱硅胶 H(化学纯)均为青岛海洋化工厂分厂生
产;硅胶板 GF254(试剂级)为青岛海洋化工厂分厂
生产;高效薄层色谱板(HP-TLC silica gel 60)为
Merck公司生产;广泛 pH 试纸为北京化工厂生产;
制备 HPLC 所用色谱级甲醇为 Merck 公司生产，水
为娃哈哈纯净水;其他所用试剂均为分析纯。
黄瓜子于 2011 年 2 月购于河北安国药材市场。
该种子种植后，叶、花、藤、果实等植物器官与《中国
植物志》葫芦科黄瓜属植物黄瓜 C. sativus 对照一
致［9］，由中国中医科学院中药研究所，巢志茂研究
员鉴定为黄瓜的干燥成熟种子。种子呈梭型，长
7 ～ 10mm，宽 3 ～ 4 mm，无特异性香味，种皮浅黄白
色，种仁白色，富油性。
2 提取分离
将 4. 4 kg黄瓜子，粉碎后过 60 目筛，加入 14. 4
L石油醚加热回流提取 2 h，重复提取 3 次，浓缩获
得深金黄色、澄清透明的脂肪油 1. 16 kg(得率
26%)。取 1. 13 kg脂肪油加入 10. 0 L 5%氢氧化钾
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甲醇溶液，加热回流 3 h。获得的黄白色皂状物以
1. 6 L蒸馏水溶解，用乙酸乙酯萃取 4 次。乙酸乙酯
层以蒸馏水洗涤至 pH 试纸检测呈中性后，加入适
量无水硫酸钠脱水，得不皂化物 122 g(得率
2. 8%)。该不皂化物经硅胶柱色谱分离，石油醚-乙
酸乙酯(19 ∶ 1 ～ 0 ∶ 1)梯度洗脱，石油醚-乙酸乙酯
(5∶ 1 ～ 3∶ 1)洗脱部位得白色针状晶体 130 mg，石油
醚-乙酸乙酯(2:1)洗脱部位得化合物 5(75 mg) ，石
油醚-乙酸乙酯(1∶ 1)洗脱部位得化合物 6(8 mg)。
白色针状晶体溶于 20 mL 甲醇中，滤过，用制备
HPLC色谱法进行分离。高效液相色谱柱为 Mighty-
sil RP-18 GP(20 mm × 250 mm，5 μm) ，柱温 30 ℃，
检测波长 210 nm，流动相为甲醇，流速 10 mL·
min －1，按出峰时间的先后获得化合物 1(20. 5 min，
35 mg) ，2(24. 0 min，5 mg) ，3(25. 5 min，3 mg) ，4
(27. 5 min，27 mg)。
3 结构鉴定
化合物 1 白色针晶(甲醇) ，mp 160 ～ 162 ℃。
EI-MS m/z 410(M +·)。1 H-NMR(CDCl3，400 MHz)
δ:3. 60(1H，m，H-3) ，5. 16(1H，br s，H-7) ，0. 55
(3H，s，H-18) ，0. 80(3H，s，H-19) ，1. 02(3H，d，J =
6. 4 Hz，H-21) ，5. 22(2H，m，H-22，23) ，1. 65(3H，s，
H-26) ，4. 70(2H，s，H-27) ，0. 84(3H，t，J = 7. 3 Hz，
H-29) ;13 C-NMR(CDCl3，100 MHz)δ:71. 1(C-3) ，
117. 5(C-7) ，139. 5(C-8) ，137. 0(C-22) ，130. 2(C-
23) ，148. 6(C-25) ，109. 5(C-27)。以上数据与文献
［8，11-12］对照一致，鉴定为 24-乙基胆甾-7，22，25-
三烯醇(24-ethylcholesta-7，22，25-trienol)。
化合物 2 白色针晶(甲醇) ;mp 166 ～ 167 ℃;
EI-MS m/z 412(M +·)。1 H-NMR(CDCl3，400 MHz)
δ:3. 59(1H，m，H-3) ，5. 16(1H，br s，H-7) ，0. 53
(3H，s，H-18) ，0. 80(3H，s，H-19) ，0. 91(3H，d，J =
6. 4 Hz，H-21) ，1. 57(3H，s，H-26) ，4. 64，4. 73(2H，
s，H-27) ，0. 81(3H，t，J = 7. 8 Hz，H-29) ;13 C-NMR
(CDCl3，100 MHz)δ:71. 1(C-3) ，117. 5(C-7) ，139. 7
(C-8) ，147. 6(C-25) ，111. 3(C-27)。以上数据与文
献［8，11］对照一致，鉴定为 24-乙基胆甾-7，25-二烯
醇(24-ethylcholesta-7，25-dienol)。
化合物 3 白色针晶(甲醇) ;mp 169 ～ 171 ℃;
EI-MS m/z 412(M +·)。1 H-NMR(CDCl3，400 MHz)
δ:3. 60(1H，m，H-3) ，5. 16(1H，br s，H-7) ，0. 54
(3H，s，H-18) ，0. 80(3H，s，H-19) ，0. 95(3H，d，J =
6. 4 Hz，H-21) ，0. 98(6H，d，J = 7. 2 Hz，H-26，27) ，
5. 11(1H，m，H-28) ，1. 58(3H，d，J = 6. 5 Hz，H-29)。
以上数据文献［8］对照一致，鉴定为燕麦甾醇(aven-
asterol)。
化合物 4 白色针晶(甲醇) ;mp 169 ～ 171 ℃;
EI-MS m/z 412(M +·)。1 H-NMR(CDCl3，400 MHz)
δ:3. 60(1H，m，H-3) ，5. 18(1H，s，H-7) ，0. 55(3H，
s，H-18) ，0. 79(3H，s，H-19) ，1. 03(3H，d，J = 6. 4
Hz，H-21) ，5. 05(1H，d，J = 7. 5 Hz，H-22) ，5. 15
(1H，d，J = 7. 5 Hz，H-23) ，0. 80(3H，d，J = 6. 2 Hz，
H-26) ，0. 85(3H，d，J = 6. 2 Hz，H-27) ，0. 80(3H，m，
J = 7. 1 Hz，H-29) ;13 C-NMR(CDCl3，100 MHz)δ:
71. 1(C-3) ，117. 5(C-7) ，139. 6(C-8) ，138. 1(C-
22) ，129. 5(C-23)。以上数据文献［8，11］对照一
致，鉴定为菠菜甾醇(spinasterol)。
化合物 5 白色絮状晶体(乙酸乙酯) ;mp
201 ～ 203 ℃;TLC 喷洒 5%磷钼酸乙醇溶液显紫红
色;EI-MS m/z 440(M +·)。1 H-NMR(CDCl3，400
MHz)δ:3. 48(1H，br s，H-3) ，5. 50(1H，br s，H-7) ，
5. 28(1H，br s，H-11) ，0. 97(3H，s，H-23) ，0. 96
(3H，s，H-24) ，0. 94(3H，s，H-25) ，0. 95(3H，s，H-
26) ，0. 88(3H，s，H-27) ，1. 11(3H，s，H-28) ，3. 25，
3. 55(2H，d，J = 10. 5 Hz，H-29) ，0. 98(3H，s，H-
30) ;13 C-NMR(CDCl3，100 MHz)δ:118. 1(C-7) ，
144. 4(C-8) ，142. 2(C-9) ，114. 1(C-11)。以上数据
与文献［13-14］对照一致，且与栝楼仁二醇对照品薄
层色 谱 鉴 别 结 果 一 致，鉴 定 为 栝 楼 仁 二 醇
(karounidiol)。
化合物 6 白色针晶(甲醇) ;mp 168 ～ 170 ℃;
EI-MS m/z 440(M +·)。1 H-NMR(CDCl3，400 MHz)
δ:3. 46(1H，d，H-3) ，5. 70(1H，dd，J = 9. 7，3. 1 Hz，
H-6) ，6. 05(1H，dd，J = 9. 7，3. 1 Hz，H-7) ，0. 98
(3H，s，H-23) ，1. 01(3H，s，H-24) ，0. 75(3H，s，H-
25) ，1. 18(3H，s，H-26) ，1. 01(3H，s，H-27) ，1. 17
(3H，s，H-28) ，3. 26，3. 33(2H，dd，J = 10. 3，5. 7 Hz，
H-29) ，1. 01(3H，s，H-30)。以上数据与文献［13-
14］ 对 照 一 致，鉴 定 为 异 栝 楼 仁 二 醇
(isokarounidiol)。
4 脂肪油中脂肪酸成分的分析
取脂肪油 0. 5 g，加入 2%氢氧化钠甲醇溶液 8
mL，回流 5 ～ 10 min 至油滴消失。加入三氟化硼甲
醇溶液 9 mL 回流 2 min，加入正庚烷 6 mL 回流 1
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min，加入饱和氯化钠溶液使其分层，吸取上层溶液，
加入少量无水硫酸钠脱水，滤过，得到脂肪酸的甲酯
化样品。
气相色谱条件 Agilent DB-23 毛细管色谱柱
(0. 25 mm × 60 m，0. 25 μm，交联键合固定相，含
50%氰丙基) ;FID 检测器，温度 280 ℃;程序升温，
初始温度 130 ℃，持续 1 min，以 6. 5 ℃·min －1的速
率升至 170 ℃，以 2. 75 ℃·min －1的速率升至 215
℃，保持 12 min，以 4 ℃·min －1的速率升至 230 ℃，
保持 50 min;载气 N2;进样器温度 270 ℃，分流比
50∶ 1，进样体积 1. 0 μL。通过与 37 种脂肪酸甲酯
标准混合溶液气相色谱图分析对比，鉴定 9 种脂肪
酸，按峰面积归一化法测定相对含量，结果见表 1。
表 1 黄瓜子脂肪油的组成脂肪酸的相对质量分数
Table 1 The relative content of fatty acids in fatty oil from the
seeds of Cucumis sativus
No. 脂肪酸甲酯 简式 保留时间 /min 相对质量分数 /%
1 肉豆蔻酸甲酯 C14∶ 0 35. 07 0. 12
2 棕榈酸甲酯 C16∶ 0 36. 70 12. 04
3 棕榈油酸甲酯 C16∶ 1n7c 41. 73 0. 09
4 十七酸甲酯 C17∶ 0 42. 34 0. 06
5 硬脂酸甲酯 C18∶ 0 45. 30 5. 64
6 油酸甲酯 C18∶ 1n9c 47. 51 6. 95
7 亚油酸甲酯 C18∶ 2n6c 51. 18 74. 40
8 花生酸甲酯 C20∶ 0 52. 33 0. 19
9 α-亚麻酸甲酯 C18∶ 3n3c 55. 97 0. 51
5 结果与讨论
栝楼仁二醇和异栝楼仁二醇是首次从栝楼 Tri-
chosanthes kirilowii的成熟种子中分离获得的新的五
环三萜类化学成分［15-16］。栝楼仁二醇 2 μmol 的剂
量可抑制对苯二甲酸(每鼠 1 μg)与 7，12-二甲基苯
并蒽(每鼠 50 μg)联合用药诱导的小鼠耳部肿胀炎
症［17］，与黄瓜子用于治疗风湿痹痛有一定的
相关性。
黄瓜子脂肪油中不饱和脂肪酸占 81. 95%，其
中含量最高的亚油酸为人体必须的不饱和脂肪酸。
不饱和脂肪酸具有抗血栓、抗炎、调节免疫系统的生
物活性［18］，亚油酸具有抗动脉粥样硬化及调节免疫
系统的作用［19］，与黄瓜子治疗风湿痹痛、老年痰喘
的临床疗效及活血、抗血栓的药理作用有一定的
关系。
栝楼仁二醇，异栝楼仁二醇，棕榈油酸，十七碳
酸，花生酸和 α-亚麻酸等 6 个化合物系黄瓜中首次
报道的化学成分。
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Chemical constituents contained in fatty oil from
seeds of Cucumis sativus
WU Xiao-yi，CHAO Zhi-mao* ，WANG Chun，TAN Zhi-gao，SUN Wen
(Institute of Chinese Materia Medica，China Academy of Chinese Medical Sciences，Beijing 100700，China)
［Abstract］ Objective:To study the chemical constituents contained in the seeds of Cucumis sativus. Method:The fatty oil
was extracted by heating and refluxing with petroleum ether. Potassium hydroxide-methanol solution was used for saponification. An un-
saponifiable matter was extracted by EtOAc and separated with various chromatographic methods. Its structure was identified on the ba-
sis of their physicochemical properties and spectral data. The fatty acid fraction was methyl-esterified and determined by GC. The com-
position and relative content of fatty acid were determined with normalization method of peak area. Result:24-ethylcholesta-7，22，25-
trienol(1) ，24-ethylcholesta-7，25-dienol(2) ，avenasterol(3) ，spinasterol(4) ，karounidiol(5)and isokarounidiol(6)were separated and
identified from the unsaponifiable matter. Myristic acid(7，0. 12%) ，palmitic acid(8，12. 04%) ，palmitoleic acid(9，0. 09%) ，hepta-
decanoic acid(10，0. 06%) ，stearic acid(11，5. 64%) ，oleic acid(12，6. 95%) ，linoleic acid(13，74. 40%) ，arachidic acid(14，
0. 19%) ，and α-linolenic acid(15，0. 51%)were identified from the fatty acids part. Conclusion:Compounds 5，6，9，10，14，and 15
were first reported in C. sativus.
［Key words］ Cucumis sativus;unsaponifiable matter;fatty acid;karounidiol;linoleic acid
doi:10． 4268 /cjcmm20122120
［责任编辑 孔晶晶］
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