全 文 :·中药及天然药物·
鲜地黄与干地黄中梓醇 、糖类成分含量的比较
李计萍 ,马华 ,王跃生 ,郝近大 (中国中医研究院中药研究所 ,北京 100700)
摘要:目的 对地黄的干品和鲜品进行梓醇 、糖类成分含量的成分比较研究。方法 用高效液相色谱法和紫外分光光度法进
行含量测定。结果 地黄中梓醇含量 、还原糖和多糖的含量均为鲜品高于干品。结论 地黄的干品和鲜品在化学成分含量
方面有明显的区别。
关键词:鲜 、干地黄;梓醇;糖类;含量测定
中图分类号:TQ460.7+2 文献标识码:A 文章编号:1001-2494(2001)05-0300-03
Comparison of contents of catalpol and sugars in fresh and dried Rehmannia glutinosa
LI Ji-ping ,MA Hua ,WANG Yue-sheng ,HAO Jin-da (Institute of Chinese Materia Medica , Chinese Academy of Traditional Chinese
Medicine , Beijing 100700 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To compare the contents of catalpol , reducing sugar and polysaccharide between fresh and dried Rehmannia
glutinosa.METHODS HPLC method for catalpol and spectrometric method for reducing sugar and polysaccharide were used.RESULTS
The contents of catalpol , reducing sugar and polysaccharide in fresh Rehmannia glutinosa were about one more time higher than that in dried
one.CONCLUSION The differences of contents of three components betweent fresh and dried Rehmannia glutinosa was significant.
KEY WORDS:fresh and dried Rehmannia glutinosa;catalpol;sugar;quantitative determination
基金项目:国家自然科学基金资助项目(39570875)
地黄为玄参科植物地黄 Rehmannia glutinosa Li-
bosch.的新鲜或干燥根茎和块根 。鲜地黄性味甘 、
苦 、大寒。鲜地黄之功效长于清热 ,凉血 ,开胃 ,生
津。常用于温病伤阴 ,大热烦渴 ,吐血 ,咳血等多种
血症及消渴 、便秘等 。干地黄性味甘 、苦 、凉 ,具有凉
血 ,止血之功效 。对鲜地黄和干地黄功效主治之不
同及对鲜地黄之临床特殊功效 ,历代医学均有论述 ,
且早已被临床证实。我们从化学成分角度对鲜 、干
地黄进行比较研究。对于地黄中化学成分的研究国
内外学者进行了大量的工作 ,化学成分主要有环烯
醚萜类和糖类 ,其中环烯醚萜苷梓醇在地黄中含量
较高 ,为地黄中的主要有效成分之一。鲜 、干地黄中
还原糖 、多糖的含量测定作者还未见报道 ,但地黄中
梓醇 、单糖及熟地中还原糖的含量测定有文献报
道[ 1 ~ 3] 。所以我们以梓醇 、还原糖 、多糖的含量来进
行鲜 、干地黄比较实验研究。
1 材 料
鲜地黄为玄参科植物地黄 Rehmannia glutinosa
Libosch.的新鲜块根(中国中医研究院中药所谢宗万
研究员鉴定),中国医学科学院药用植物研究所栽
培;干地黄为同批鲜地黄切片自然晾干而成(自制);
梓醇对照品(中国药品生物制品检定所中药室)。
2 方法与结果
2.1 仪器与试剂
岛津 LC-3A色谱仪 ,Varian9050紫外可见检测
器 ,CTO-色谱柱恒温箱 ,R-112记录仪 ,C-E1B数
据处理机。岛津 UV-300可见-紫外分光光度计 。
苯酚试剂的制备:取苯酚200 g ,加铝片 0.2 g和
碳酸氢钠0.1 g 。蒸馏 ,收集 182℃馏分 。称取 10 g ,
加水 150 mL 混匀 ,使之溶解 ,即可。将其置棕色量
瓶内 ,放冰箱中备用。甲醇 、乙醇 、浓硫酸为分析纯:
乙腈为优级纯 ,水为超纯水 。
2.2 梓醇的含量测定[ 1]
2.2.1 色谱条件 色谱柱 YWG-C18 ,10 μm , 25 cm
×4.6 mm 。流动相:0.6%乙腈-水。流速:1.0 mL·
min-1 ,测定波长 210 nm。柱温 40℃。
2.2.2 样品及对照品溶液的制备及测定 将鲜地
黄切成 2 ~ 4 mm小块 ,干地黄粉碎过 40目筛 ,分别
精密称定(鲜地黄 2.00 g ,干地黄 0.50 g)加甲醇 25
mL ,称重 ,超声处理 20 min ,放冷 ,补重 ,过滤 。取续
滤液作为供试品溶液 。精密称定梓醇对照品 2.87
·300· Chin Pharm J , 2001 May , Vol.36 No.5 中国药学杂志 2001年 5月第 36卷第 5期
mg置 10 mL量瓶中 ,加流动相溶解并稀释至刻度 ,
摇匀作为对照品溶液 。分别精密吸取对照品溶液 3
μL ,供试品溶液 6 μL ,注入液相色谱仪测定 。结果
见表 1。
表 1 地黄鲜品和干品中梓醇的含量(%).n =3
Tab 1 Content of catalpol in fresh and dried Rehmannia glutinosa
(%).n=3
批号 干品 鲜品
980323 4.21 0.790(9.48)
971120 4.46 0.651(7.81)
注:()表示以干品计算
Note:()percentage calculated from theweight deducting water
从梓醇含量看 ,按干品计算 ,鲜品比干品含量高
近一倍。
2.2.3 梓醇提取条件考察 ①提取溶媒选择:用不
同溶媒 ,同一地黄样品以相同方法进行提取。液相
测定结果:甲醇 , 10%乙醇 , 20%乙醇 , 50%乙醇 ,
70%乙醇 , 95%乙醇 , 水为提取溶剂 。其中甲醇 ,
20%乙醇 ,50%乙醇含量相差不大。方便起见 ,用甲
醇为溶媒 。②提取方法的选择:同一地黄样品 ,分别
以回流 1 h ,超声 1 h ,浸1 h的方法处理样品。测定
结果梓醇含量分别为:5.11%,5.29%, 5.21%,3 种
方法没有明显区别 ,方便起见 ,用超声处理。 ③提取
时间选择:同一样品 , 超声处理 , 10 , 20 , 30 , 40 , 60
min。梓醇含量分别为:5.31%, 5.44%, 5.35%,
5.61%,5.26%。没有明显差异。故确定为以甲醇
为溶剂 ,超声处理 20 min。
2.2.4 方法学的考察 ①线性关系:精密称定梓醇
对照品 2.87 mg 置 10 mL 量瓶中 ,加流动相溶液溶
解并稀释至刻度 , 摇匀备用。精密注入 1.0 , 3.0 ,
5.0 ,7.0 ,9.0μL 对照品溶液 ,进行测定。以峰面积
值为纵坐标 ,梓醇含量为横坐标计算回归方程为 Y
=1828.2+102105.9X , 相关系数 r=0.9999。梓醇
在0.29 ~ 2.6 μg 之间有良好的线性 。②回收率测
定:精密称定干地黄 0.5 g 4份 ,加入一定量梓醇对
照品 ,按样品溶液制备方法制备样品并测定 ,结果平
均回收率为98.40%, RSD=2.0%。
2.3 还原糖和多糖的含量测定[ 3 ~ 4]
2.3.1 标准曲线的制备 精密称定 105℃干燥至恒
重的标准葡萄糖 10.0 mg ,置 50 mL 量瓶中 ,加水适
量使溶解并稀释至刻度摇匀(液Ⅰ)。精吸液 Ⅰ0.5 ,
1.0 ,2.0 ,3.0 ,4.0 ,5.0 , 6.0 mL 于 25 mL 量瓶中 ,用
水分别稀释至刻度(液Ⅱ)。
精密吸取液 Ⅱ各 2.0 mL 分别置于 10 mL 具塞
试管中 ,各加苯酚试液 1.0 mL ,摇匀 。迅速滴加浓
硫酸5.0 mL ,迅速摇匀 。放置 5 min后 ,于沸水浴中
加热15 min ,取出 。迅速冷却至室温 。另取 2 mL蒸
馏水 ,同法操作 ,作为空白对照 。按分光光度法 ,在
490 nm 波长处测定吸光度 ,绘制标准曲线 ,计算回
归方程:Y =0.0425+0.6836X , r =0.9994 。
2.3.2 还原糖样品液的制备 精密称定地黄适量
(鲜地黄 5 g ,干地黄 1 g)置于圆底烧瓶中。加 80%
乙醇80 mL ,回流2 h ,趁热过滤于150 mL 量瓶中 ,药
渣用 80%热乙醇洗涤数次 ,滤液并入 150 mL 量瓶
中 ,放冷 ,用 80%乙醇稀释至刻度备用(液Ⅲ)。
从液 Ⅲ中精密吸取 10 mL 于烧杯中 ,水浴蒸干 ,
加入 100 mL 蒸馏水于电炉上加热至沸使之完全溶
解 。再加入 0.5 g活性炭 ,同时加热 5 ~ 10 min ,趁热
过滤于 250 mL 量瓶中。放冷 ,以蒸馏水稀释至刻
度 ,备用(液Ⅳ)。
2.3.3 多糖样品液的制备 将“2.3.2”项下 80%乙
醇回流的药渣及过滤滤纸置于圆底烧瓶中加蒸馏水
80 mL ,回流 2 h ,趁热过滤 ,用热蒸馏水反复洗涤于
150mL 量瓶中。放冷 ,用蒸馏水稀释至刻度 ,摇匀
备用(液Ⅴ)。精密吸取液Ⅴ10mL 于50mL量瓶中 ,
用蒸馏水稀释至刻度 ,摇匀备用(液Ⅵ)。
2.3.4 样品的测定 精密吸取液Ⅳ0.3 ~ 0.5 mL ,
液 Ⅵ 2 mL ,置 10 mL具塞试管中 ,加蒸馏水至 2 mL ,
按标准曲线项下“加苯酚1.0 mL……在 490 nm 波长
处测定吸光度” 。同时精密吸取葡萄糖标准溶液 2 ,
4 mL ,同法操作 ,测定吸光度 。按两点法计算样品中
还原糖 、多糖的含量。我们对两批干 、鲜地黄中还原
糖和多糖进行了测定 ,结果见表 2。
表 2 干 、鲜地黄中还原糖和多糖的含量(%).n =3
Tab 2 Content of reducing sugar and polysaccaride in fresh and
dried Rehmannia glutinosa(%).n=3
批号 还原糖干 鲜
多糖
干 鲜
980323 14.03 2.27(27.23) 3.13 0.75(9.02)
971120 28.73 3.90(46.79) 5.05 0.82(9.86)
注:()表示以干品计算
Note:()percentage calculated from the weight deducting water
从测量结果看 ,还原糖和多糖的含量都是鲜品
比干品高。
2.4 讨 论
从 3种成分含量试验结果表明:鲜地黄中梓醇
含量 、还原糖和多糖的含量高于干地黄 。日本学者
曾先后报道了地黄中所含的梓醇具有利尿和缓泻作
用 ,并发现梓醇对四氧嘧啶所致的实验性糖尿病有
降血糖作用。糖类具有抗肿瘤病等多种药理作用。
据历代本草和医书记载 ,在止血 、清热生精功效上鲜
·301·中国药学杂志 2001年 5月第 36卷第 5期 Chin Pharm J , 2001 May , Vol.36 No.5
地黄胜于干地黄;鲜地黄具清热凉血及养阴作用 ,用
于治疗热甚伤阴 、精亏便秘 ,可通利二便 ,并用于消
渴症等的治疗[ 5] 。提示可能与梓醇 、糖类成分有关 。
但是还需进一步研究 。
参考文献
[ 1] 罗燕燕 ,张绍青 ,索建政 ,等.高效液相色谱法测定地黄中梓醇
的含量[ J] .中国药学杂志 , 1994 , 29(1):38.
[ 2] 边宝林 ,杨健 ,王宏洁 ,等.地黄及其炮制品中总糖及几种主要
糖的含量测定[ J] .中国中药杂志 , 1995 , 20(8):469.
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探讨[ J] .中医药学报 , 1989,(1):39.
[ 4] 李满飞 ,徐国钧 ,平田正义 , 等.中药石斛类多糖的含量测定
[ J] .中草药 , 1990 ,21(10):10.
[ 5] 江苏新医学院编.中药大辞典(下册)[M] .上海:上海人民出
版社 , 1997:2568.
(收稿日期:2000-07-29)
观赏獐牙菜中新 酮的化学研究
肖怀1 ,陆阳1 ,陈泽乃1 ,刘光明2 ,钱金木伏2(1.上海第二医科大学化学教研室 ,上海 200025;2.大理医学院药学系 ,云南大理 671000)
摘要:目的 研究我国民族药观赏獐牙菜(Swertia decora Franch)的化学成分。方法 用常规的硅胶柱层析和薄层色谱法进行
分离 ,根据化合物的理化性质及一维 、二维波谱解析鉴定其结构。结果 从观赏獐牙菜脂溶性部分得到 6 个化合物 , 分别鉴定
为1-羟基-4 , 5 , 6 , 7-四甲氧基 酮(swertiadecoraxanthone-Ⅰ)(Ⅰ);1 , 3 , 8-三羟基-2 , 5-二甲氧基 酮(Ⅱ);1 , 8-二羟基-3 , 7-二甲氧
基 酮(methy lswertianin , Ⅲ);1-羟基-3 , 7 , 8-三氧甲基 酮(decussatin , Ⅳ);1 , 7 , 8-三羟基-3-甲氧基 酮(swertianin , Ⅴ)及二十四
烷酸(tetracosanoic acid Ⅵ )。结论 化合物Ⅱ为新化合物 , 定名为观赏獐牙菜 酮-Ⅱ(swertiadecoraxanthone-Ⅱ), 其他均为首次
从该植物中分离到。
关键词:观赏獐牙菜;龙胆科; 酮;观赏獐牙菜 酮-Ⅱ
中图分类号:R931.6 文献标识码:A 文章编号:1001-2494(2001)05-0302-04
Chemical studies on new xanthone from Swertia decora
XIAO Huai1 ,LU Yang1 ,CHEN Ze-nai1 ,LIU Guang-ming2 ,QIAN Jin-fu2(1.Department of Chemistry , Shanghai Second Medical U-
niversity , Shanghai 200025 , China;2.Department of Pharmacy , Dali Medical College , Dali , Yunnan 671000 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To study the chemical constituents of Swertia decora Franch , a traditional herb medication in China.METHODS
The constituents were separated and purified by using column chromatography with silica gel.Their structures were identified on the basis of
spectral analysis and chemical reactions.RESULTS Six compounds were isolated from the CHCl3 part of the extracts.Their structures were
determined as 1-hydroxy-4 , 5 , 6 , 7-tetramethoxyxanthone(swertiadecoraxanthone-Ⅰ)(Ⅰ), 1 , 3 , 8-trihydroxy-2 , 5-dimethoxyxanthone(Ⅱ), 1 , 8-
dihydroxy-3 , 7-dimethoxy xanthone (methylswertianin , Ⅲ), 1-hydroxy-3 , 7 , 8-trimethoxyxanthone (decussatin , Ⅳ), 1 , 7 , 8-trihydroxy-3-
methoxyxanthone(swertianin , Ⅴ) and tetracosanoic acid(Ⅵ), respectively.CONCLUSION Ⅱ named as swertiadecoraxanthone-Ⅱ was a
new compound and the others were found from this plant for the first time.
KEY WORDS:Swertia decora;gentianaceae;xanthone;swertiadecoraxanthone-Ⅱ
龙胆科(Gentianaceae)獐牙菜属(Swertia L.)植
物多具有清肝利胆 、清热除湿的功效 ,民间广泛用于
治疗黄疸型肝炎 、胆囊炎 、腹痛等[ 1] 。观赏獐牙菜
(S .decora Franch)主要分布于我国云南及四川南
部 ,作为我国特有的民族药 ,常用于治疗肝炎等疾
病 ,俗称“肝炎草”。作者迄今还未见国内外对该植
物研究的报道。我们首次对该植物进行化学研究 ,
从其脂溶性部位分离得到 酮 、三萜 、单萜内酯 、脂
肪酸等类化合物 。我们曾报道[ 2]分离到一个新 酮
类化合物 ,鉴定为 1-羟基-4 , 5 , 6 , 7-四甲氧基 酮
(Ⅰ),并定名为观赏獐牙菜 酮-Ⅰ(swertiadecorax-
anthone-Ⅰ)。本文报道另一新化合物(Ⅱ)及 3个
酮(Ⅲ-Ⅴ)和一个长链脂肪酸(Ⅵ)的分离鉴定 。
1 仪器与材料
熔点用WPS-1A数字熔点仪及 X4型显微熔点
测定仪测定 ,温度计未校正。红外光谱用 Nicolet公
司Magna FTIR-750红外光谱仪测定 ,KBr压片 。紫
外光谱用岛津 UV -2100 紫外可见分光光度计测
定 。核磁共振谱用 Bruker DRX 300 , 400型核磁共振
仪测定。质谱用 HP 5989A 质谱仪测定 。柱层析硅
·302· Chin Pharm J , 2001 May , Vol.36 No.5 中国药学杂志 2001年 5月第 36卷第 5期