全 文 ： 收稿日期：2009-08-13
基金项目：广东省科技计划项目（2007B030702005）
作者简介：程力惠（1968-），女，内蒙古人，副教授，硕士，从事天然药物研究。

核桃楸树皮总黄酮提取方法及工艺研究
程力惠，潘育方，卢丽霞
(广东药学院，广东 广州 510627)

摘 要：对核桃楸树皮总黄酮提取方法及相关影响因素进行探讨。以总黄酮含量为指标，分别考察常规提取
法、超声波提取法、回流提取法、索氏提取法对提取率的影响，以及溶剂的种类、浓度与温度对提取率的影
响。结果表明，超声波提取法的总黄酮提取率最高；使用 60%乙醇在 60℃时的总黄酮提取率最高。
关键词：核桃楸树皮；总黄酮；提取方法
Doi: 10.3969/j.issn.1009-7791.2009.04.012
中图分类号：Q949.95; R284.2 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2009)04-0041-03

Study on Extraction Method and Technology of Total Flavonoids in Juglans
mandshurica Cortex
CHENG Li-hui, PAN Yu-fang, LU Li-xia
(Guangdong College of Pharmacy, Guangzhou 510627, Guangdong China)

Abstract: The method and influencing factors of total flavonoids extraction in Juglandis
Mandshuricae Cortex were studied systematically. Taking the total flavonoids content as index, the
effect of extraction method including routine extraction, ultrasonic extraction, reflux extraction and
Soxhlet extraction and kind of solvent, concentration and temperature on extraction rate were
investigated. The results showed that the best extraction method was ultrasonic extraction. The
extraction rate was the highest when the concentration of ethanol was 60% and the temperature was
60℃.
Key words: Juglans mandshurica Cortex; total flavonoids; extraction method

核桃楸(Juglans mandshurica)为胡桃科胡桃属落叶乔木，是东北阔叶红松林的重要用材树种，也是
我国珍贵的药源植物。核桃楸具有抗菌、消炎、抗癌等作用，特别是抗肿瘤作用尤为显著，其树皮及
未成熟果实或果皮可供药用，树皮又名楸树皮(Cortex Juglandis Mandshuricae)。大量研究证实，楸树皮
主要含黄酮类、萘醌类及其衍生物、二芳基庚酸类化合物和大量鞣质。对萘醌及其衍生物已有详细报
道，但对其酚酸类和黄酮类成分的研究较少。黄酮类化合物在生理学、医学和营养学上都有较高的应
用价值，具广泛的生理和药理活性，包括抗病毒、抗癌、抗氧化、抗炎、抗衰老等。由于核桃楸长期
以来过度采伐，致使天然林资源接近濒危，如何更合理地开发核桃楸这一珍贵资源，改进提取方法是
当今研究的热点[1]。本文以核桃楸树皮总黄酮得率为指标，分别探讨常规提取法、索氏提取法、超声
波提取法、回流提取法对总黄酮提取率的影响，以及溶剂种类、浓度与温度对提取率的影响，以期优
选出核桃楸树皮黄酮类成分最佳提取工艺条件。
1 材料与仪器
1.1 材料
1.1.1 原料 核桃楸树皮药材产自黑龙江省农业大学林场。

2009,38(4):41-43.
Subtropical Plant Science
第 38 卷

﹒42﹒
1.1.2 试剂 芦丁(含量91.7%，中国药品生物制品检定所)，NaNO2、Al(NO3)3、NaOH、乙醇、甲醇均
为分析纯，水为重蒸馏水。
1.2 仪器
日立UV2001紫外分光光度仪，旋转蒸发仪（型号RE－52AA，上海雅荣生化仪器有限公司），Kudos
超声仪(型号sk5200H)，索式提取器。
2 实验方法
2.1 总黄酮含量测定方法
2.1.1 标准溶液配制 称取20.0 mg芦丁标准品，置于50 ml容量瓶中，加入适量95%乙醇，超声溶解，
并稀释至刻度得芦丁标准溶液。
2.1.2 标准曲线制备 分别吸取芦丁标准溶液0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0 ml，置于25 ml容量瓶
中；加入1 ml 5% NaNO2溶液，摇匀，放置6 min；再加1 ml 10% Al(NO3)3溶液，摇匀，放置6 min；最
后加入10 ml 5% NaOH溶液，用95%乙醇定容，摇匀，放置15 min。以不加芦丁标准溶液为空白对照，
在500 nm处测定各溶液的吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线，标准回归曲线方
程：A=10.912X+0.0203(R=0.9991)。该方法专属性良好，符合测定要求。
2.1.3 测定波长的选择 取标准溶液1.0 ml，按标准曲线制备的方法操作，用UV2001 紫外分光光度计
测定，总黄酮反应产物在500 nm波长处有最大吸收，与文献报道[2]一致。故选择500 nm为测定波长。
2.1.4 样品溶液的制备 准确称取核桃楸粉末 5 g，加入 100 ml 60%乙醇溶液，同时放入超声清洗机中
超声 20 min。过滤弃滤渣，用滤液补足损失的相应体积，摇匀。从中吸取 1 ml 至 25 ml 容量瓶中，加
5% NaNO2 溶液 1 ml，摇匀，放置 6min，再加 1 ml 10% Al(NO3)3 溶液，摇匀，放置 6 min；再加 10 ml
5% NaOH 溶液，加 95%乙醇定容至 25 ml，摇匀，放置 15 min 后测定吸光值。
2.1.5 精密度实验 取样品重复测定5次，求得RSD 为1. 31%。
2.1.6 稳定性实验 取标准溶液1.0 ml，按标准曲线制备方法操作，在15、20、25、30、40、50 min测
定吸收度，求得RSD为0.25%。
2.1.7 加样回收率实验 称取同一批核桃楸，精密称定3份，分别加入芦丁对照品，按样品制备法制备，
并照标准曲线制备方法测定，RSD为0.25%。
2.2 提取方法的选择[3]
采用四种提取方法。第一种常规提取法，60%乙醇与样品比例为 15∶1(ml∶g，下同)，在 60 ℃时
振荡浸提 3 次，每次 30 min；第二种超声波提取法，60%乙醇与样品比例为 15∶1，在 60 ℃时超声 3
次，每次 30 min；第三种回流提取法，60%乙醇与样品比例为 15∶1，在 60 ℃时回流 3 次，每次 30 min；
第四种索氏提取法，60%乙醇与样品比为 15∶1，水浴加热提取至溶液颜色变淡。
2.3 溶剂筛选 采用超声法，分别以甲醇和乙醇为提取溶剂，考察溶剂对总黄酮提取率的影响
2.4 溶剂适宜浓度的确定 采用超声法，分别以 45%、60%、75%、90%甲醇和乙醇为提取溶剂，考察
溶剂浓度对总黄酮提取率的影响。
3 结果与分析
3.1 不同提取方法对总黄酮提取率的影响
四种提取法得到核桃楸样品总黄酮含量如图 1 所示。
由图 1 可以看出，在其他条件相同的情况下，超声波提取
法得到的总黄酮提取率高于常规、回流和索式提取法，其
中索氏提取法最低。
3.2 溶剂对总黄酮提取率的影响
采用超声波提取法考察不同溶剂的影响，实验结果如
图 1 不同提取方法对总黄酮提取率的影响
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
5.0
常规 超声 回流 索式
总
黄
酮
提
取
率
(％
)
第 4 期 程力惠,等：核桃楸树皮总黄酮提取方法及工艺研究

﹒43﹒
图 2。从图 2 可见，乙醇提取效果优于甲醇。其中，乙醇浓度为 60%时，总黄酮提取率最高。
3.3 提取温度对总黄酮提取率的影响
采用超声波提取法考察。实验结果见图 3。从图中可见，60 ℃时总黄酮提取率最高。
4 结 语
超声提取法由于直接作用于分子内部，提取效率高，故此法总黄酮提取率高于其他方法。
温度较高(60 ℃)，提取效果好。但温度过高，可使其中的活性成分破坏，杂质的溶出量增加，同
时易造成溶剂的损失。
参考文献：
[1] 胡旭姣,等. 山核桃提取物体外抗肿瘤作用研究[J]. 中华中医药学刊, 2007,25(2): 369-370.
[2] 王宇杰,等. 金钱草总黄酮提取工艺研究[J].中草药, 2006,37(9): 1 3 48-1 350.
[3] 孙墨珑,等. 胡桃楸总黄酮及胡桃醌含量的测定[J]. 林产化学与工业, 2006,26(2): 93-95.



《亚热带植物科学》期刊综合评价指标数据
根据中国学术期刊（光盘版）电子杂志社、中国科学文献计量评价研究中心、清华大学图书馆联
合出版的《中国学术期刊综合引证报告》（2005～2009），本刊最近 5 年各项指标数据如下表。
《亚热带植物科学》最近 5 年期刊综合评价各项指标

年份 总被引 频次
影响
因子
5 年影响
因子
即年
指标
他引
总引比
被引
期刊数
被引
半衰期 载文量
基金
论文比
Web 即年
下载率
2004 169 0.350 0.356 0.010 0.95 / 4.1 96 0.48 21.90
2005 244 0.350 0.410 0.000 0.96 140 4.8 98 0.44 21.30
2006 385 0.486 0.564 0.043 0.97 186 4.9 93 0.49 49.80
2007 436 0.472 0.634 0.043 0.99 210 4.9 93 0.59 32.8
2008 459 0.462 0.606 - 0.98 218 5.34 88 0.77 -
图 2 溶剂及其浓度对总黄酮提取率的影响
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
5.0
45 60 75 90
溶剂浓度(%)
总
黄
酮
提
取
率
(%
)
乙醇
甲醇
图 3 提取温度对总黄酮提取率的影响
4.0
4.1
4.2
4.3
4.4
4.5
4.6
50 60 70 80
温度(℃)
总
黄
酮
提
取
率
(%
)